目的研究羌活治疗阿尔茨海默病(AD)的活性成分及其潜在的作用机制,并建立一个能同时测定羌活中5个成分含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,为阐明其药效物质基础及分子机制的实验研究提供基础。方法通过中药系统药理学数据库与...目的研究羌活治疗阿尔茨海默病(AD)的活性成分及其潜在的作用机制,并建立一个能同时测定羌活中5个成分含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,为阐明其药效物质基础及分子机制的实验研究提供基础。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库获取羌活活性成分和作用靶点,GeneCards、人类在线孟德尔遗传(OMIM)及美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库预测AD相关靶点。利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病可视化网络,借助STRING数据库在线平台构建蛋白互作网络,进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用Maestro软件对主要活性成分与关键靶点进行分子对接来验证网络药理学结果。运用HPLC-MS/MS法同时测定紫花前胡苷、佛手柑内酯、香叶木素、羌活醇、异欧前胡素5个成分的含量,采用XTerra MS C_(18)柱(100mm×2.1mm,3.5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL,电喷雾离子源,多反应监测正离子模式。结果网络药理学共获取13个羌活活性成分及36个抗AD靶点;基因富集分析显示,GO功能条目165个、通路89条(P<0.05)。分子对接结果表明,羌活的主要活性成分与关键靶点视黄酸X受体结合活性最好。紫花前胡苷、佛手柑内酯、香叶木素、羌活醇、异欧前胡素在浓度为69.74~8472.85、8.51~1033.89、0.35~37.00、15.42~1873.27、58.85~7150.49 ng/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.9900)。结论初步探究了羌活多成分多靶点多通路抗AD的潜在作用机;建立的HPLC-MS/MS法操作简便可靠、专属性强、重复性好,可用于羌活的质量控制。本研究将为羌活抗AD的药效物质基础研究、作用机制研究、相关制剂的质量控制提供依据。展开更多
文摘目的研究羌活治疗阿尔茨海默病(AD)的活性成分及其潜在的作用机制,并建立一个能同时测定羌活中5个成分含量的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法,为阐明其药效物质基础及分子机制的实验研究提供基础。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)数据库获取羌活活性成分和作用靶点,GeneCards、人类在线孟德尔遗传(OMIM)及美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库预测AD相关靶点。利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-疾病可视化网络,借助STRING数据库在线平台构建蛋白互作网络,进行GO功能和KEGG通路富集分析,使用Maestro软件对主要活性成分与关键靶点进行分子对接来验证网络药理学结果。运用HPLC-MS/MS法同时测定紫花前胡苷、佛手柑内酯、香叶木素、羌活醇、异欧前胡素5个成分的含量,采用XTerra MS C_(18)柱(100mm×2.1mm,3.5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL,电喷雾离子源,多反应监测正离子模式。结果网络药理学共获取13个羌活活性成分及36个抗AD靶点;基因富集分析显示,GO功能条目165个、通路89条(P<0.05)。分子对接结果表明,羌活的主要活性成分与关键靶点视黄酸X受体结合活性最好。紫花前胡苷、佛手柑内酯、香叶木素、羌活醇、异欧前胡素在浓度为69.74~8472.85、8.51~1033.89、0.35~37.00、15.42~1873.27、58.85~7150.49 ng/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r>0.9900)。结论初步探究了羌活多成分多靶点多通路抗AD的潜在作用机;建立的HPLC-MS/MS法操作简便可靠、专属性强、重复性好,可用于羌活的质量控制。本研究将为羌活抗AD的药效物质基础研究、作用机制研究、相关制剂的质量控制提供依据。
