黑尾近红鱼白个体繁殖力的研究 被引量：42

1

作者 薛正楷 何学福 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期90-94,共5页

研究了长江上游泸州地区 64尾黑尾近红鱼白的个体繁殖力变动及其与雌亲体多项形态学指标的关系 .结果表明 :黑尾近红鱼白的个体绝对繁殖力 (F)平均为 3 572 6 81 ( 4 541～ 1 1 4 3 56)粒 ;个体相对繁殖力 (F/l)平均为 1 60 4 0 3 ( 2 ... 研究了长江上游泸州地区 64尾黑尾近红鱼白的个体繁殖力变动及其与雌亲体多项形态学指标的关系 .结果表明 :黑尾近红鱼白的个体绝对繁殖力 (F)平均为 3 572 6 81 ( 4 541～ 1 1 4 3 56)粒 ;个体相对繁殖力 (F/l)平均为 1 60 4 0 3 ( 2 73 55～ 4 462 61 )粒 /cm ,F/mo 平均为 2 77 2 8( 4 2 76～ 60 1 4 2 )粒 /g .个体绝对繁殖力 (F)、个体相对繁殖力 (F/l)与体长 (l)、净体质量 (mo)、年龄 (t)、成熟系数 (M)均呈显著线性正相关 ;相对繁殖力(F/mo)除与成熟系数 (M)成直线正相关外 ,与其它形态指标相关不显著 ;个体繁殖力随丰满度 (K) 展开更多

关键词 黑尾近红BA 个体繁殖力 形态学指标 长江 泸州 绝对繁殖力 相对繁殖力 净体质量 成熟系数

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CYP3A29稳定表达HepG_2细胞株的建立及其硝苯地平代谢活性鉴定 被引量：6

2

作者 薛正楷 魏泓 +1 位作者 商海涛 叶彬 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期640-644,649,共6页

目的建立稳定表达Bama小型猪CYP3A29的HepG2细胞株。方法通过总RNA提取、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A29的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体PMD18-T上得到重组质粒pMD-3A29;以测序正确的重组质粒pMD-3A29为模板,采用PCR扩增CYP3A29基因... 目的建立稳定表达Bama小型猪CYP3A29的HepG2细胞株。方法通过总RNA提取、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A29的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体PMD18-T上得到重组质粒pMD-3A29;以测序正确的重组质粒pMD-3A29为模板,采用PCR扩增CYP3A29基因并在其3′添加组氨酸标签,扩增产物经BamHI/XhoI双酶切,将带有组氨酸标签的CYP3A29基因定向克隆至pcDNA3.1(+)中,并测序验证;将测序正确的CYP3A29基因通过脂质体转染至HepG2细胞,G418筛选10代,经RT-PCR及Western-blot分析及探针药物硝苯地平对重组细胞进行活性鉴定。结果与HepG2相比,HepG2-CYP3A29细胞株具有极显著的硝苯地平氧化活性。结论成功建立了稳定表达CYP3A29的HepG2细胞株,可用于相关药物代谢研究。 展开更多

关键词 巴马小型猪 CYP3A29同工酶 HEPG2 逆转录酶PCR WESTERN-BLOT 硝苯地平

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黑尾近红鲌的年龄和生长研究 被引量：28

3

作者 薛正楷 何学福 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期712-717,共6页

研究了长江上游泸州地区濑溪河黑尾近红鱼白种群的年龄 (用t表示 )和生长 ,结果表明 :濑溪河黑尾近红鱼白种群年轮形成期在 4— 6月 ,6月是其高峰期 ;其生长特点属于均匀生长类型 ;体长 (用l表示 )与鳞径 (用R表示 )呈线性关系 ;体长与... 研究了长江上游泸州地区濑溪河黑尾近红鱼白种群的年龄 (用t表示 )和生长 ,结果表明 :濑溪河黑尾近红鱼白种群年轮形成期在 4— 6月 ,6月是其高峰期 ;其生长特点属于均匀生长类型 ;体长 (用l表示 )与鳞径 (用R表示 )呈线性关系 ;体长与体质量 (用m表示 )相关式为 :m =0 0 0 75 3 2 70 1(r=0 9932 ) ;体长和体质量实测值回归得VonBertalanffy生长方程各参数 :l∞ =44 42 6cm　m∞ =15 39 15g　k=0 15 3　t0 =- 0 6 2 4龄 ,体质量生长拐点年龄tr =7 112龄 ,拐点体质量 mr =46 6 85 g .黑尾近红鱼白1～ 2龄生长较快 . 展开更多

关键词 年龄 生长规律 黑尾近红Pai 鲤科 种群年轮 体长 鳞径 质量

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黑尾近红鮊的比例性状、长质量关系和丰满度 被引量：10

4

作者 薛正楷 何学福 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期811-815,共5页

黑尾近红的比例性状在雌雄之间无差异 ;长质量关系和丰满度分析表明 ,雌鱼的体质量增长快于雄鱼 ;同体长个体 ,非繁殖期丰满度高于繁殖期 ;丰满度随体长、年龄的增加而提高 .

关键词 黑尾近红Bo 比例性状 长质量关系 丰满度 生物学特征 体质量 体长 年龄

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CYP3A22稳定表达HepG_2细胞株的建立及其探针药物代谢活性鉴定 被引量：1

5

作者 薛正楷 魏泓 +2 位作者 商海涛 杨根庆 叶彬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第16期1552-1555,共4页

目的建立稳定表达Bama小型猪细胞色素CYP3A22的HepG2细胞株。方法通过从Bama小型猪肝组织中提取tRNA、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A22的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体pMD18-T上得到重组质粒pMD-3A22;以测序确定的重组质粒pMD-3A22为... 目的建立稳定表达Bama小型猪细胞色素CYP3A22的HepG2细胞株。方法通过从Bama小型猪肝组织中提取tRNA、经RT-PCR得到Bama小型猪CYP3A22的基因,并将此基因克隆至亚克隆载体pMD18-T上得到重组质粒pMD-3A22;以测序确定的重组质粒pMD-3A22为模板,采用PCR扩增CYP3A22基因并在其3′添加组氨酸标签,扩增产物经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切,将带有组氨酸标签的CYP3A22基因定向克隆至pcDNA3.1(+)中,测序表明,CYP3A22基因真核表达载体正确构建;将测序正确的CYP3A22基因通过脂质体转染至HepG2细胞,G418筛选10代,RT-PCR及Western blot分析,并用探针药物硝苯地平对重组细胞进行进行活性鉴定。结果与HepG2相比,HepG2-CYP3A22细胞株具有极显著的硝苯地平氧化活性。结论成功建立了稳定表达CYP3A22的HepG2细胞株,可用于相关的药物代谢研究。 展开更多

关键词 Bama小型猪 SUS scrofa CYP3A22 HepG2 RT—PCR Western BLOT 探针药物

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重组肝CYP3A4与CYP3A29细胞微粒体药物代谢动力学比较 被引量：4

6

作者 薛正楷 魏泓 《医药导报》 CAS 2015年第1期15-21,共7页

目的比较巴马小型猪CYP3A29和人CYP3A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体的药物代谢特征,在分子水平为巴马小型猪作为临床前药物代谢实验动物提供科学依据。方法以CYP3A特异性代谢底物硝苯地平、睾酮及其抑制药酮康唑为探针药物,将探针药物... 目的比较巴马小型猪CYP3A29和人CYP3A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体的药物代谢特征,在分子水平为巴马小型猪作为临床前药物代谢实验动物提供科学依据。方法以CYP3A特异性代谢底物硝苯地平、睾酮及其抑制药酮康唑为探针药物,将探针药物与重组CYP3A4、CYP3A29细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,高效液相色谱法检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果巴马小型猪CYP3A29与CYP3A4在硝苯地平和睾酮代谢差异无统计学意义(P>0.05)。酮康唑的抑制活性为:当代谢底物为硝苯地平时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.090,0.132μmol·L-1(P<0.05);当代谢底物为睾酮时,酮康唑对CYP3A29和CYP3A4的半数抑制浓度分别为0.056,0.032μmol·L-1(P<0.05)。结论重组CYP3A29与CYP3A4细胞微粒体对硝苯地平和睾酮活性差异不显著;酮康唑对重组CYP3A29与CYP3A4细胞微粒体硝苯地平和睾酮代谢活性有差异。 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 CYP3A4 CYP3A29 药物代谢动力学

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一株耐高乙醇和低pH己酸产生菌Lysinibacillus fusiformis-pBE_3-ep-SigB的构建 被引量：3

7

作者 薛正楷 杨根庆 +1 位作者 张宿义 倪斌 《中国酿造》 CAS 北大核心 2018年第5期162-168,共7页

以Lysinibacillus fusiformis为出发菌,分别转染Sig A和Sig B突变基因,获得耐高乙醇和低p H胁迫的优良己酸产生菌。以p ET32a(+)-Sig A/Sig B为模板,采用均匀试验优化Sig A/Sig B易错聚合酶链式反应(ep PCR)扩增体系中的Mn^(2+)和Mg^(2+... 以Lysinibacillus fusiformis为出发菌,分别转染Sig A和Sig B突变基因,获得耐高乙醇和低p H胁迫的优良己酸产生菌。以p ET32a(+)-Sig A/Sig B为模板,采用均匀试验优化Sig A/Sig B易错聚合酶链式反应(ep PCR)扩增体系中的Mn^(2+)和Mg^(2+)浓度,通过ep PCR获得ep-Sig A/Sig B突变基因,与载体p BE_3-MCS连接后,构建L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig A/Sig B突变菌体库,将两种菌体库在p H值2~5和乙醇含量2%~12%条件下进行筛选。结果表明,L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株耐受最高乙醇含量为8%左右,最低耐受p H值为2.5左右;当乙醇含量为8%、p H值为3.5时,L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株的己酸产量达到(254.35±39.74)mg/100 m L,显著高于工程菌株L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig A的己酸产量(P<0.01),且为出发菌L.fusiformis己酸产量(93.62±10.33)mg/100 m L的271.68%,表明L.fusiformis-p BE_3-ep-Sig B重组菌株具有较强的抗高乙醇浓度和低p H值胁迫产己酸的能力。 展开更多

关键词 SigA基因 SigB基因 易错PCR 高抗性 产己酸菌

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一株窖泥己酸菌株的多相鉴定及产酸研究 被引量：18

8

作者 薛正楷 薛原 《酿酒科技》 2016年第6期65-71,共7页

采用常规形态、生理生化指标,并结合16s RNA基因序列分析进行多相鉴定方法及气相色谱分析技术,对分离自泸州老窖180年窖池的1株产己酸菌株(K-2)进行分类鉴定和代谢产物分析,结果表明,K-2菌株能利用D-葡萄糖、甘露醇、菊糖、L-阿拉伯糖... 采用常规形态、生理生化指标,并结合16s RNA基因序列分析进行多相鉴定方法及气相色谱分析技术,对分离自泸州老窖180年窖池的1株产己酸菌株(K-2)进行分类鉴定和代谢产物分析,结果表明,K-2菌株能利用D-葡萄糖、甘露醇、菊糖、L-阿拉伯糖、D-蔗糖等多种碳源,具有脲酶、七叶灵和明胶酶水解活性;K-2菌株16s RNA基因序列(1346bp)与Clostridium celerecrescens一致率为99%,Strain K-2 16s RNA基因序列在系统进化树中位于Clostridium属分支,与Clostridium celerecrescens序列相似性最近,本研究将其鉴定为梭菌属(Genus I Clostridium)中的Clostridium celerecrescens菌株,该菌株有高效的产己酸(547.26 mg/100 m L)和丁酸能力(382.45 mg/100 m L)能力,但几乎不产己酸乙酯和丁酸乙酯。此研究为国内外首次报道从浓香型白酒窖池窖泥中分离出Clostridium celerecrescens菌株,且具有高效的产己酸特性。 展开更多

关键词 窖泥 己酸菌 浓香型白酒 多相鉴定

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产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA基因的克隆、表达及生物信息学分析 被引量：1

9

作者 薛正楷 薛原 +2 位作者 杨根庆 张宿义 倪斌 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第8期120-124,共5页

通过克隆产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA全长基因,并对其进行表达和生物信息学分析。结果表明,SigA基因开放阅读框(ORF)有1 128个碱基,编码327个氨基酸,其分子质量为45.275 kDa;生物信息学预测表明,L.fusiformis与Lysinibacill... 通过克隆产己酸菌Lysinibacillus fusiformis SigA全长基因,并对其进行表达和生物信息学分析。结果表明,SigA基因开放阅读框(ORF)有1 128个碱基,编码327个氨基酸,其分子质量为45.275 kDa;生物信息学预测表明,L.fusiformis与Lysinibacillus sphaericus具有较近的亲缘关系,二者序列相似度达97%;该蛋白为亲水性可溶性蛋白,与Bacillus sp.B14905相似度达100%,其二级结构主要由α-螺旋和loop环状构成,α-螺旋和loop环状分别占其二级结构的60.15%和37.79%;预测并优化的三级结构由14个α-螺旋和15个loop构成。 展开更多

关键词 产己酸菌 Lysinibacillus fusiformis SigA基因 生物信息学

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细胞色素P4503A46基因的异源表达及药物代谢活性分析 被引量：1

10

作者 薛正楷 魏弘 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第1期381-385,共5页

为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳... 为了克隆巴马小型猪细胞色素P4503A46基因,建立P4503A46稳定表达肝癌细胞株(Hep G2-P4503A46),并探究其药物代谢活性,通过RT-PCR从肝组织中钓取基因P4503A46,将基因与真核表达载体pc DNA3.1连接并转染Hep G2细胞,经G418筛选10代,获得稳定表达重组细胞株Hep G2-P4503A46,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)探针药物,将探针药物与重组细胞在优化的细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将对照组进行比较分析。结果表明,本研究成功从人Bama小型猪肝组织克隆了P4503A46基因,并通过G418筛选,成功建立了细胞稳定表达株,其硝苯地平代谢活性显著高于阴性对照组(P<0.01);因此,成功克隆、并建立了小型猪P4503A46的稳定表达细胞株(Hep G2-P4503A46),该细胞株具有显著的硝苯地平代谢活性。 展开更多

关键词 基因 克隆 重组细胞株 细胞色素P4503A46 代谢活性

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高效发酵人工窖泥的制备及应用研究 被引量：5

11

作者 薛正楷 赵金松 +1 位作者 张宿义 倪斌 《酿酒科技》 2018年第10期31-37,共7页

采用平板计数、窖泥理化分析法、微生物菌落结构分析法、感官评价及色谱分析法等工具,对8个候选窖泥配方的微生物组成、理化性质及感官特征进行了比较分析,结果表明,8个人工窖泥方案进行中,8号窖泥配方(X8)具有较好的各项指标,为最优窖... 采用平板计数、窖泥理化分析法、微生物菌落结构分析法、感官评价及色谱分析法等工具,对8个候选窖泥配方的微生物组成、理化性质及感官特征进行了比较分析,结果表明,8个人工窖泥方案进行中,8号窖泥配方(X8)具有较好的各项指标,为最优窖泥配方;进一步采用X8窖泥配方制备窖泥,进行夹泥发酵工艺生产试验,以检测其发酵功能,结果表明,试验组与对照组间乙酸乙酯(Sig=0.111>0.05)差异不显著,乳酸乙酯(0.05>Sig=0.022>0.01)在试验组与对照组间差异显著,己酸乙酯(Sig=0.001<0.01)、丁酸乙酯(Sig=0.002<0.01)、总酯(Sig=0.001<0.01)、总酸(Sig=0.009<0.01)差异极显著。 展开更多

关键词 发酵 人工窖泥 L.fusiformis-ep-SigB发酵液 应用

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KPL-1保健酒制备及功能分析 被引量：1

12

作者 薛正楷 郑文武 张宿义 《亚太传统医药》 2014年第20期19-23,共5页

目的:根据中医关于疲劳形成的五脏失调、精气血耗损观点,遵从中医以疏肝解郁、养血安神、补益脾肾为主的调补疗法原则,研制一款抗疲劳中药保健酒。方法:选用人参、鹿茸、熟地、何首乌、淫羊藿、阿胶、枸杞等中药配伍组方,并以白酒作为溶... 目的:根据中医关于疲劳形成的五脏失调、精气血耗损观点,遵从中医以疏肝解郁、养血安神、补益脾肾为主的调补疗法原则,研制一款抗疲劳中药保健酒。方法:选用人参、鹿茸、熟地、何首乌、淫羊藿、阿胶、枸杞等中药配伍组方,并以白酒作为溶媒,采用现代提取工艺,制备抗疲劳保健酒KPL-1(抗疲劳1号),并进行感官检测、理化检测和动物实验。结果:经检测,KPL-1的酒体感官特征及理化特征符合GB/T27588-201l和GB 2757-2012标准;动物生长分析显示实验组体重显著低于空白对照组和阴性对照组(P<0.01),但体长实验结果比较差异无统计学意义(P>0.05);力竭实验显示,实验组游泳时间显著高于对照组(P<0.01)。结论:研究表明KLP-1保健酒具有较强的抗疲劳和减肥作用。 展开更多

关键词 调补疗法 保健酒 功能分析

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CYP3A39基因的克隆、表达及活性研究

13

作者 薛正楷 叶彬 魏泓 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第12期124-128,共5页

为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探... 为研究细胞色素氧化酶CYP3A39的生物学活性,采用RT-PCR方法从巴马小型猪肝组织中克隆CYP3A39基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建重组质粒,转染HepG2细胞,采用G418筛选,以获得稳定表达该基因的细胞株;以CYP3A特异性代谢底物睾酮为探针药物,在体外进行孵育,高效液相色谱仪测定睾酮羟基化产物6β-羟基睾酮(6β-OHT)的产量。结果显示,成功克隆了CYP3A39基因,建立了稳定表达CYP3A39基因的HepG2细胞株,且其具有睾酮代谢活性。 展开更多

关键词 细胞色素氧化酶 CYP3A39 基因克隆 重组细胞 代谢活性

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基于重组HepG_2-P4503A4与HepG_2-P4503A46全细胞体外药物代谢比较研究

14

作者 薛正楷 罗祎 魏泓 《四川动物》 CSCD 北大核心 2014年第2期210-215,共6页

本研究以探针药物硝苯地平（NF）、睾酮（TST）及其抑制剂酮康唑（KCZ）与重组HepG2-P4503A4、HepG2-P4503A46细胞全细胞在优化的重组细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育，通过高效液相色谱仪检测其药物代谢（抑制）动... 本研究以探针药物硝苯地平（NF）、睾酮（TST）及其抑制剂酮康唑（KCZ）与重组HepG2-P4503A4、HepG2-P4503A46细胞全细胞在优化的重组细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育，通过高效液相色谱仪检测其药物代谢（抑制）动力学参数，并将二者进行比较分析。重组HepG2-P4503A46与HepG2-P4503A4细胞的硝苯地平、睾酮的代谢活性无显著差异（P＞0.05）；在0～10 μM的浓度范围内，酮康唑对硝苯地平和睾酮的抑制活性均随酮康唑浓度的增加而增加，且其IC50值均低于1 μM，为nM级，表明酮康唑对二者的硝苯地平代谢具有较强的抑制活性，抑制剂酮康唑对重组HepG2-P4503A46与HepG2-P4503A4细胞的抑制活性差异不显著（P＞0.05）。本研究表明无论是底物代谢或底物抑制活性，重组HepG2-P4503A46细胞均与重组HepG2-P4503A4细胞差异不显著，P4503A46可能为巴马小型猪体内人P4503A4的同源酶。 展开更多

关键词 细胞色素P4503A4 细胞色素P4503A46 全细胞 药物代谢

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重组CYP3A46细胞微粒体体外药物代谢动力学分析

15

作者 薛正楷 魏弘 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期124-129,共6页

通过对巴马小型猪CYP3A46重组细胞微粒体体外药物代谢动力学特征比较分析,为巴马小型猪应用于临床前药理试验提供科学依据。分析重组CYP3A4、CYP3A46细胞微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:CYP3A46的硝苯地平... 通过对巴马小型猪CYP3A46重组细胞微粒体体外药物代谢动力学特征比较分析,为巴马小型猪应用于临床前药理试验提供科学依据。分析重组CYP3A4、CYP3A46细胞微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:CYP3A46的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均比较接近CYP3A4(P>0.05),CYP3A46是否是CYP3A4的同源酶需要进一步研究确定。 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 人CYP3A4 小型猪CYP3A46 药物代谢

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重组细胞色素P4503A4和P4503A22细胞微粒体药物代谢动力学比较研究

16

作者 薛正楷 魏泓 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期102-109,共8页

目的:利用已建立的巴马小型猪细胞色素P4503A22和P4503A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体,分析比较二者的药物代谢动力学特征.方法:以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将探针药物与重组P4503A4,P4... 目的:利用已建立的巴马小型猪细胞色素P4503A22和P4503A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体,分析比较二者的药物代谢动力学特征.方法:以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将探针药物与重组P4503A4,P4503A22细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析.结果:P4503A22的硝苯地平、睾酮的代谢活性均低于P4503A4(p<0.05);酮康唑对P4503A4和P4503A22的硝苯地平代谢具有较强的抑制活性,但酮康唑对P4503A4的抑制活性强于P4503A22(p<0.05).结论:无论是代谢底物或抑制底物活性,重组P4503A22细胞微粒体活性均低于重组P4503A4细胞微粒体活性. 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 细胞色素P4503A4 细胞色素P4503A22 药物代谢

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一株整合型高抗性高效发酵己酸菌的选育研究

17

作者 薛正楷 郑文武 张宿义 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第8期143-150,共8页

该试验采用同源重组技术从产己酸菌-纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)基因组中敲出α-淀粉酶基因、蔗糖磷酸化酶基因,同时敲进SigA和SigB基因,以提高L.fusifoemis的抗性,选育高效发酵己酸菌。结果表明,SigA和SigB双整... 该试验采用同源重组技术从产己酸菌-纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)基因组中敲出α-淀粉酶基因、蔗糖磷酸化酶基因,同时敲进SigA和SigB基因,以提高L.fusifoemis的抗性,选育高效发酵己酸菌。结果表明,SigA和SigB双整合菌株SigA-SigB4在pH 4、乙醇体积分数6%条件下,己酸产量达到360.86 mg/100 mL,比单整合菌株SigB3提高了1.17倍,比非重组出发株L.fusifoemis提高了8.97倍,且经过32代传代后,其高效产己酸效能无显著变化(P>0.05)。 展开更多

关键词 整合型 产己酸菌 选育 发酵

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高酸发酵液的发酵条件优化研究

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作者 薛正楷 《酿酒科技》 2016年第12期24-27,共4页

为了获得浓香型白酒的高己酸和高总酸发酵液,本研究采用均匀实验设计和多因子及互作项回归方法,对高酸发酵液的发酵配方和温度进行优化。结果表明,实验数据与所得回归方程具有显著的拟合度(P<0.01),从数学模型和验证实验得到的最优... 为了获得浓香型白酒的高己酸和高总酸发酵液,本研究采用均匀实验设计和多因子及互作项回归方法,对高酸发酵液的发酵配方和温度进行优化。结果表明,实验数据与所得回归方程具有显著的拟合度(P<0.01),从数学模型和验证实验得到的最优配方及温度组合为:葡萄糖120 g/L、酵母膏19 g/L、MgCl_2 1 g/L、乙酸钠27.5 g/L、K_2HPO_4 1 g/L,28℃。 展开更多

关键词 高酸 发酵液 优化 发酵条件 白酒

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重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究

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作者 薛正楷 魏弘 《亚太传统医药》 2014年第5期9-13,共5页

目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制... 目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将其与重组P4503A4、P4503A39细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,获得药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果:P4503A39和P4503A4体外微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:P4503A39的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均显著低于P4503A4(P<0.05)。结论:重组P4503A39细胞微粒体活性显著低于重组P4503A4细胞微粒体活性。 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 细胞色素P4503A4 细胞色素P4503A39 药物代谢

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纯培养微生物荧光原位杂交技术检测的影响因素探究 被引量：3

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作者 吴冬梅 薛正楷 周荣清 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第3期96-100,共5页

为了研究纯培养微生物荧光原位杂交技术(FISH)检测的影响因素,该实验以大肠杆菌(Escherichia coli)及植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)为研究对象,研究不同种属、不同生长期菌株、菌体预处理方式及杂交条件对基于探针EUB338的FIS... 为了研究纯培养微生物荧光原位杂交技术(FISH)检测的影响因素,该实验以大肠杆菌(Escherichia coli)及植物乳杆菌(Lactobacillus planetarium)为研究对象,研究不同种属、不同生长期菌株、菌体预处理方式及杂交条件对基于探针EUB338的FISH检测结果的影响。结果表明,菌体种类及菌体生长阶段均较明显影响FISH计数的准确性;确定超声分散菌体时间60 s(100 W、每30 s间歇)、溶菌酶处理60 min可较大幅度提高FISH对菌体的检出率;杂交时间和洗脱液中NaCl浓度对FISH检测结果影响小,杂交温度、杂交液中甲酰胺浓度对大肠杆菌影响小而对植物乳杆菌有一定影响。 展开更多

关键词 纯培养微生物 荧光原位杂交技术 检测 预处理 杂交条件

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