姜黄素上调NF-κB诱导急性早幼粒白血病HL-60细胞凋亡 被引量：9

1

作者 胡亮杉 熊文艳 +2 位作者 余莉华 李玉华 郭坤元 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第12期23-25,共3页

目的观察姜黄素诱导人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的作用,并探讨作用机制。方法用台盼蓝计数观察姜黄素对HL-60细胞生长的抑制作用,AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的表达,Western blot... 目的观察姜黄素诱导人急性早幼粒细胞白血病HL-60细胞凋亡的作用,并探讨作用机制。方法用台盼蓝计数观察姜黄素对HL-60细胞生长的抑制作用,AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA的表达,Western blot检测细胞内NF-κB p65蛋白的表达。结果姜黄素对HL-60细胞生长有抑制作用,并诱导细胞凋亡。姜黄素作用前后HL-60细胞中抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl表达无明显变化;促凋亡基因Bax和Bid表达增高;P53基因均不表达;NF-κB mRNA和蛋白表达均增高,并呈剂量依赖性。结论姜黄素能诱导HL-60细胞凋亡和上调促凋亡基因Bax和Bid,这可能与NF-κB表达上调有关。 展开更多

关键词 姜黄素 白血病 早幼粒细胞 急性 凋亡 NF-ΚB

在线阅读 下载PDF 职称材料

白藜芦醇增强TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用 被引量：3

2

作者 胡亮杉 孙茂本 +3 位作者 曾雅丽 李玉华 邓兰 郭坤元 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期217-219,227,共4页

目的：观察白藜芦醇作用前后TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用的变化。方法：流式细胞仪检测KG-1a细胞表面CD34和CD38的表达,二甲氧唑黄（XTT）细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测白藜芦醇作用前后TRAIL对KG-1a细胞增殖的影响,A... 目的：观察白藜芦醇作用前后TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用的变化。方法：流式细胞仪检测KG-1a细胞表面CD34和CD38的表达,二甲氧唑黄（XTT）细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测白藜芦醇作用前后TRAIL对KG-1a细胞增殖的影响,AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡变化。流式细胞仪检测白藜芦醇作用前后KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体表达变化。结果：人髓系白血病KG-1a细胞CD34＋CD38-占（58.67±2.87）%,101 000 ng/ml的TRAIL对KG-1a细胞增殖无明显影响,但对白藜芦醇作用后的KG-1a细胞的增殖有明显抑制作用,白藜芦醇能促进TRAIL诱导KG-1a细胞凋亡,并能上调KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体DR5的表达。结论：白藜芦醇能增强TRAIL对人髓系白血病KG-1a细胞的细胞毒作用,其机制可能与白藜芦醇上调KG-1a细胞表面TRAIL死亡受体DR5的表达有关。 展开更多

关键词 白藜芦醇 TRAIL 人髓系白血病KG-1a细胞 细胞毒作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

白藜芦醇对CD34^+CD38^- KG-1a白血病细胞凋亡的诱导作用 被引量：1

3

作者 胡亮杉 杨华文 +3 位作者 李丽华 张知洪 方晓琳 曹东林 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1650-1653,共4页

目的观察白藜芦醇(RES)诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡的效应,初步探讨其作用机制。方法流式细胞术检测急性髓系白血病KG-1a细胞CD34和CD38的表达。以未加药物为对照,台盼蓝计数检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L)RES... 目的观察白藜芦醇(RES)诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡的效应,初步探讨其作用机制。方法流式细胞术检测急性髓系白血病KG-1a细胞CD34和CD38的表达。以未加药物为对照,台盼蓝计数检测不同浓度(12.5、25.0、50.0、100、200μmol/L)RES对KG-1a细胞和外周血单个核细胞增殖的影响。选择KG-1a细胞抑制率约为50%的RES浓度作为后续实验的干预因素。AnnexinV-FITC/PI染色流式细胞术检测RES诱导KG-1a细胞的凋亡效应,real-time RT-PCR检测RES对KG-1a白血病细胞Bcl家族抗凋亡Bcl-2/Bcl-xl基因和促凋亡基因Bid/Bax表达的影响,分光光度法检测RES对KG-1a细胞Caspase-3活性的影响。结果 KG-1a细胞中CD34+CD38-细胞比例占(90.23±2.57)%。RES能抑制KG-1a白血病细胞生长,呈浓度依赖性。25.0μmol/L RES对KG-1a细胞的抑制率约为50%,而该浓度对正常单个核细胞增殖无抑制作用。25.0μmol/L RES能诱导KG-1a细胞发生早期凋亡(AnnexinV-FITC+PI-)和晚期凋亡(AnnexinV-FITC+PI+)。25.0μmol/L RES作用后的KG-1a细胞,抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl表达下调,促凋亡基因Bid和Bax表达升高,Caspase-3活性增强。结论 RES能调节Bcl-2家族,诱导CD34+CD38-KG-1a白血病细胞凋亡。 展开更多

关键词 白藜芦醇 BCL-2家族 CD34^+ CD38^- 白血病细胞 Caspase-3 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

和厚朴酚诱导人急性髓性白血病KG1a细胞凋亡 被引量：8

4

作者 孙茂本 郭坤元 +5 位作者 胡亮杉 邓兰 李玉华 宋朝阳 贺艳杰 陈君 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期160-164,共5页

目的:探讨和厚朴酚(honokiol,HNK)对人急性髓性白血病KG1a细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:XTT法检测不同质量浓度HNK对KG1a细胞增殖的影响,流式细胞术检测不同质量浓度HNK作用后KG1a细胞的细胞周期及凋亡,RT-PCR法检测KG1a细胞Bcl-... 目的:探讨和厚朴酚(honokiol,HNK)对人急性髓性白血病KG1a细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法:XTT法检测不同质量浓度HNK对KG1a细胞增殖的影响,流式细胞术检测不同质量浓度HNK作用后KG1a细胞的细胞周期及凋亡,RT-PCR法检测KG1a细胞Bcl-2、Bid、Bax、Bak、Bad、P53、NF-κB等凋亡相关基因的表达。结果:HNK(2.5、5、8、10、15、20、40μg/ml)对KG1a细胞的增殖有明显抑制作用,且呈时间和剂量依赖性(P<0.01),其中24、48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为10.23、8.25μg/ml。流式细胞术结果显示,经HNK(5、10μg/ml)处理后,KG1a细胞被阻滞在G0/G1期,早期凋亡率分别为(11.16±1.27)%和(21.46±3.13)%,显著高于对照组的(6.03±1.10)%(P<0.01)。RT-PCR检测结果显示,HNK(10μg/ml)处理后KG1a细胞内促凋亡基因Bax表达显著上调,Bad轻度上调;抗凋亡基因NF-κB表达显著下调。结论:HNK能诱导人急性髓性白血病KG1a细胞凋亡,其机制可能与Bax、Bad基因表达上调及NF-κB基因表达下调有关。 展开更多

关键词 和厚朴酚 急性髓性白血病 凋亡 BAX BAD NF—κB

在线阅读 下载PDF 职称材料

AS_2O_3对CD34^+白血病细胞NKG2D配体表达及NK杀伤活性的影响 被引量：8

5

作者 牛新清 胡亮杉 +3 位作者 郭坤元 宋朝阳 涂三芳 梅家转 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期509-511,517,共4页

目的:观察AS2O3对CD34+早期急性髓系白血病细胞NKG2D配体表达及NK细胞杀伤活性的影响。方法:流式细胞仪检测KG1a细胞表面CD34抗原表达率,MTT法确定AS2O3的基本工作浓度,以不同浓度的AS2O3处理KG1a细胞,流式细胞仪测定处理前后KG1a细胞NK... 目的:观察AS2O3对CD34+早期急性髓系白血病细胞NKG2D配体表达及NK细胞杀伤活性的影响。方法:流式细胞仪检测KG1a细胞表面CD34抗原表达率,MTT法确定AS2O3的基本工作浓度,以不同浓度的AS2O3处理KG1a细胞,流式细胞仪测定处理前后KG1a细胞NKG2D配体的表达情况;MACS法分离5例健康个体的NK细胞,LDH释放法检测NK细胞对AS2O3处理前后KG1a细胞的杀伤活性。结果:10nmol/ml的AS2O3作用KG1a细胞后,能使KG1a细胞表面ULBP1的表达水平显著上调(P<0.05),同时也激发了NK细胞对KG1a细胞的杀伤活性(P<0.05)。结论:AS2O3能上调CD34+白血病细胞表面NKG2D配体的表达水平,诱导NK细胞对其的杀伤活性,启示AS2O3可与NK细胞组成过继性免疫化疗方案,提高急性白血病的疗效。 展开更多

关键词 急性髓系白血病 NK细胞 NKG2D配体 AS2O3 细胞毒性实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

大鼠骨髓间充质干细胞体外培养方法的改进 被引量：8

6

作者 李艳菊 李宁 +2 位作者 胡亮杉 胡海燕 郭坤元 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期71-74,共4页

背景：间充质干细胞在骨髓中的含量很低,需进行体外分离纯化和大量增殖。目的：优化骨髓间充质干细胞取材、纯化、扩增的方法,拟提高骨髓间充质干细胞的获得率和扩增率。设计、实施及地点：以细胞为对象的观察实验,于2007-03/2008-02在... 背景：间充质干细胞在骨髓中的含量很低,需进行体外分离纯化和大量增殖。目的：优化骨髓间充质干细胞取材、纯化、扩增的方法,拟提高骨髓间充质干细胞的获得率和扩增率。设计、实施及地点：以细胞为对象的观察实验,于2007-03/2008-02在南方医科大学珠江医院血液科实验室进行。材料：实验动物为6-8周龄清洁级雄性大鼠,体质量130-150g。方法：采用改进的贴壁法培养骨髓间充质干细胞：保留大鼠肱骨、股骨和胫骨,尽量将骨周边组织剔除干净,从而减少混杂的细胞;冲洗骨髓腔时,选用2.5mL的注射器,可以将紧贴骨髓腔壁的骨髓间充质干细胞吹洗下来,从而提升获得率;细胞换液时未全部倾去旧培养液,保留了1/4-1/5的旧培养液;采用“二传一”的方法将两瓶原代细胞分别消化后合为一瓶,保证传代时对细胞数目的要求,能避免细胞过度老化。主要观察指标：倒置光显微镜和苏木精-伊红染色进行细胞形态学观察,流式细胞术进行细胞周期分析,MTT法和克隆形成实验测定细胞P1和P5生长曲线和克隆形成能力,用流式细胞仪和碱性磷酸酶对培养进行细胞鉴定。结果：分离的骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形。原代培养细胞传代后,细胞增殖速度较快,基本上三四天传代1次,随传代次数的增加细胞形态趋于一致细胞基本为成纤维细胞型。流式细胞术证明G0G1期的细胞约占80%以上。细胞生长曲线测定表明接种后第3天细胞进入指数增生期,至第五天进入平台期,随着传代次数的增加,细胞增殖速度变慢、克隆能力降低。经流式细胞仪检测显示CD44、CD99阳性,CD45阴性,碱性磷酸酶试验为阳性。结论：采用改良的的方法获得了大量遗传性质均一、功能状态良好的骨髓间充质干细胞,并有效地提高了细胞的获得率和扩增率。 展开更多

关键词 骨髓 间充质干细胞 大鼠 细胞培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

苦参碱抑制KG1a细胞生长及提高自然杀伤细胞对其杀伤敏感性的研究 被引量：5

7

作者 王国征 孙明 +4 位作者 周健 胡亮杉 贾振薇 郭坤元 吴秉毅 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期240-243,共4页

目的:观察苦参碱(matrine)对人急性髓系白血病细胞株KG1a的生长抑制作用,及苦参碱作用前后自然杀伤(natural killer,NK)细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。方法:采用CCK-8法和锥虫蓝染色法检测苦参碱对KG1a细胞的生长抑制作用及细胞存活... 目的:观察苦参碱(matrine)对人急性髓系白血病细胞株KG1a的生长抑制作用,及苦参碱作用前后自然杀伤(natural killer,NK)细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。方法:采用CCK-8法和锥虫蓝染色法检测苦参碱对KG1a细胞的生长抑制作用及细胞存活率,FCM检测苦参碱作用前后KG1a细胞周期的变化及表面NK细胞活化性受体(natural-killer group 2,member D,NKG2D)配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2和ULBP3)和人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类分子的表达,乳酸脱氢酶释放法检测苦参碱作用前后NK细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。结果:苦参碱能抑制KG1a细胞的生长,随着药物浓度的升高和作用时间的延长,细胞的生长抑制率逐渐升高、存活率逐渐下降;苦参碱作用后细胞发生G1/S期阻滞;细胞表面NKG2D各配体表达率均明显升高,与作用前相比差异有统计学意义(P<0.05),HLA-Ⅰ类分子表达率无明显变化(P>0.05);当效靶比分别为5:1、10:1和20:1时,苦参碱作用前后NK细胞对KG1a细胞的杀伤敏感性差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:苦参碱可抑制KG1a细胞的生长并改变细胞周期,上调KG1a细胞表面NKG2D各配体的表达率,增强NK细胞对其的杀伤敏感性。 展开更多

关键词 白血病 苦参碱 杀伤细胞 天然 配体 细胞 KG1a

在线阅读 下载PDF 职称材料

粪便隐血试验联合肿瘤标志物检测在结直肠癌中的临床应用价值 被引量：17

8

作者 李泽泳 叶海燕 +2 位作者 陈丹霞 胡亮杉 翁国亦 《中国医学装备》 2020年第7期101-104,共4页

目的:分析粪便隐血试验与肿瘤标志物联合检测在结直肠癌中的应用价值,以提高结直肠癌的早期诊断水平。方法:选取医院收治的120例结直肠癌患者,将其纳入观察组,另选同期入院的50例结肠良性增生患者,将其纳入对照组。以术后病理检测作为... 目的:分析粪便隐血试验与肿瘤标志物联合检测在结直肠癌中的应用价值,以提高结直肠癌的早期诊断水平。方法:选取医院收治的120例结直肠癌患者,将其纳入观察组,另选同期入院的50例结肠良性增生患者,将其纳入对照组。以术后病理检测作为金标准,分析粪便隐血试验、肿瘤标志物检测及联合检测的检出率,比较两组血清中癌胚抗原(CEA)、碳水化合物抗原50(CA50)、CA199以及CA724含量及相关性,分析单项检测与联合检测的灵敏度、特异度。结果:联合检测的检出率明显高于粪便隐血试验和肿瘤标志物单项检测,差异有统计学意义(x^2=9.351,x^2=5.400;P<0.05);血清肿瘤标志物CEA、CA50、CA199和CA724含量比较,观察组均高于对照组,差异有统计学意义(t=32.824,t=30.561,t=39.960,t=42.717;P<0.001);CEA与CA50、CA199和CA724呈正相关(r=0.756,r=0.618,r=0.624;P<0.001);CA50与CA199、CA724呈正相关(r=0.705,r=0.683;P<0.001);CA199与CA724呈正相关(r=0.655,P<0.001)。早期患者(Duke分期Ⅰ期+Ⅱ期)血清肿瘤标志物(CEA、CA50、CA199和CA724)含量均低于晚期患者(Duke分期Ⅲ期+Ⅳ期),差异有统计学意义(t=52.160,t=26.711,t=33.525,t=45.691;P<0.001)。三种检测方法的灵敏度比较,联合检测均高于粪便隐血试验和肿瘤标志物两种单项检测,差异有统计学意义(x^2=9.720,x^2=5.653;P<0.001);特异度比较,差异无显著性。结论:对结直肠癌患者进行粪便隐血试验、肿瘤标志物联合检测,可显著提高检出率,利于早期诊断、早期治疗结直肠癌,具有临床应用价值。 展开更多

关键词 肿瘤标志物 诊断 结直肠癌 粪便隐血试验 病理

在线阅读 下载PDF 职称材料

苦参碱提高白血病KG1a细胞对NK细胞杀伤敏感性及其机制 被引量：4

9

作者 王国征 孙明 +4 位作者 贾振薇 周健 胡亮杉 郭坤元 宋朝阳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期298-301,共4页

目的研究苦参碱(Matrine)作用前后白血病KG1a细胞对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。方法应用CCK-8法检测苦参碱对KG1a细胞50%抑制量IC50值,以此量的苦参碱作用于KG1a细胞,LDH释放法检测作用前后对NK细胞的杀伤敏感性。RT... 目的研究苦参碱(Matrine)作用前后白血病KG1a细胞对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。方法应用CCK-8法检测苦参碱对KG1a细胞50%抑制量IC50值,以此量的苦参碱作用于KG1a细胞,LDH释放法检测作用前后对NK细胞的杀伤敏感性。RT-PCR检测KG1a细胞NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)五种基因的表达,流式细胞仪检测作用前后KG1a细胞表面NKG2D配体和HLA-Ⅰ类分子表达变化。结果苦参碱作用前后在效靶比为5:1、10:1、20:1时对NK细胞杀伤敏感性差异均有统计学意义(P<0.05)。KG1a细胞在mRNA水平五种基因均表达,苦参碱作用前KG1a细胞表面NKG2D各配体几乎不表达,作用后各配体显著升高,与作用前相比差异有统计学意义(P<0.05),HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05)。结论苦参碱能提高KG1a细胞对NK细胞的杀伤敏感性,其机制可能与苦参碱提高KG1a细胞表面NKG2D配体的表达有关。 展开更多

关键词 苦参碱 白血病KG1a细胞 NK细胞 NKG2D配体 细胞毒性实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

同种异体NK细胞对CD34^+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应 被引量：4

10

作者 牛新清 郭坤元 +3 位作者 周健 胡亮杉 涂三芳 佘妙容 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期173-175,共3页

目的探讨同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞KG1a的杀伤活性,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对... 目的探讨同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的细胞毒效应。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,乳酸脱氢酶释放法测定不同效靶比时NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞KG1a的杀伤活性,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞的克隆形成抑制率,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较。结果急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16+CD56+细胞)纯度为(93.2±3.7)%。不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均有杀伤活性,均能抑制其克隆形成。随着效靶比的增高,其杀伤活性和克隆抑制率随之增高(P<0.05)。同一效靶比时,NK细胞对KG1a的杀伤活性和克隆抑制率低于K562(P<0.05)。结论同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞具有细胞毒效应。 展开更多

关键词 NK细胞 CD34 白血病 粒性 急性 细胞毒 克隆抑制

在线阅读 下载PDF 职称材料

2例胎儿15号小额外标记染色体产前遗传学分析 被引量：6

11

作者 吴晓昀 朱燕 +5 位作者 严芳 胡亮杉 李楠 李荣 李亚红 翁国亦 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2019年第5期329-332,共4页

目的:探讨染色体微阵列分析(CMA)诊断15q小额外标记染色体胎儿的临床价值。方法:获得2例高危孕妇的胎儿羊水或脐血细胞及其双亲外周血细胞,通过CMA和G显带染色体核型分析检测胎儿及其父母的染色体结构。结果:胎儿1:羊水细胞G显带核型分... 目的:探讨染色体微阵列分析(CMA)诊断15q小额外标记染色体胎儿的临床价值。方法:获得2例高危孕妇的胎儿羊水或脐血细胞及其双亲外周血细胞,通过CMA和G显带染色体核型分析检测胎儿及其父母的染色体结构。结果:胎儿1:羊水细胞G显带核型分析结果为47,XX,+mar,CMA结果为arr15q11.2(22770421-23288350)×4,其父外周血细胞G显带核型分析结果为47,XY,+mar,母亲外周血染色体核型结果及CMA检测结果未见明显异常。胎儿2:脐血染色体G显带分析结果为47,XX,+mar,CMA结果为arr15q11.2q13.3(22770421-32439524)×4,其父母外周血染色体核型结果及CMA分析结果未见明显异常。结论:通过CMA检测和G显带核型分析结果显示,胎儿1存在15q11.2区域的四拷贝重复变异,经鉴定此携带小额外标记染色体为健康人群多态性。胎儿2存在15q11.2q13.3四拷贝重复小额外标记染色体,确诊为15q11.2q13.3微重复四倍体综合征,出生后可能引起较严重的异常表型。本文对两例15号染色体微重复胎儿进行了产前诊断,明确了胎儿基因型与表型的对应关系,为临床产前诊断和遗传咨询提供可靠的依据。 展开更多

关键词 小额外标记染色体 15q11-q13 染色体微阵列分析 产前诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

双氢青蒿素人对急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的诱导作用 被引量：5

12

作者 陈伟 王玲 +2 位作者 杜苑苑 曹东林 胡亮杉 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期1641-1643,共3页

目的探讨双氢青蒿素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用和机制。方法用二甲氧唑黄细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测双氢青蒿素对HL-60细胞生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内线... 目的探讨双氢青蒿素诱导人急性髓系白血病HL-60细胞凋亡的作用和机制。方法用二甲氧唑黄细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测双氢青蒿素对HL-60细胞生长的抑制作用,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞内线粒体膜电位变化,分光光度法检测细胞Caspase-3活性变化。结果双氢青蒿素对HL-60细胞生长有抑制作用,呈剂量依赖性,并能诱导HL-60细胞凋亡,使线粒体膜去极化,增强Caspase-3活性。结论双氢青蒿素能抑制人急性髓系白血病HL-60细胞生长,并诱导细胞凋亡,可能与线粒体凋亡通路有关。 展开更多

关键词 双氢青蒿素 人急性髓系白血病 线粒体途径 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

三氧化二砷提高多发性骨髓瘤ARH-77细胞对NK细胞杀伤敏感性的研究 被引量：4

13

作者 孙明 胡亮杉 +4 位作者 周健 涂三芳 卢晓珣 牛新青 郭坤元 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期154-157,共4页

目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)前后人多发性骨髓瘤ARH-77对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。方法分别应用CCK-8法和台盼蓝染色法测算ATO对ARH-77细胞株的50%抑制量(IC50)和细胞活性;乳酸脱氢酶释放法检测ATO... 目的研究三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)前后人多发性骨髓瘤ARH-77对NK细胞杀伤细胞敏感性的变化,并初步探讨其机制。方法分别应用CCK-8法和台盼蓝染色法测算ATO对ARH-77细胞株的50%抑制量(IC50)和细胞活性;乳酸脱氢酶释放法检测ATO作用前后ARH-77细胞对NK细胞的杀伤敏感性。流式细胞仪检测ARH-77细胞表面NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2、ULBP3)和HLA-Ⅰ类分子表达以及ATO作用前后的细胞周期变化。结果ATO对ARH-77细胞的IC50为5.0μmol/L。NK细胞杀伤ATO作用前后ARH-77细胞的活性有显著差异(P<0.05)。ATO作用后,ARH-77细胞发生G1/S期阻滞,同时其表面MICA/B、ULBP1、ULBP3表达显著升高,二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。ULBP2和HLA-Ⅰ类分子无明显变化(P>0.05)。结论ATO能提高ARH-77细胞NKG2D配体(MICA/B、ULBP1、ULBP3)表达;从而使其对NK细胞的杀伤敏感性增强。 展开更多

关键词 三氧化二砷 多发性骨髓瘤 NK细胞 NKG2D配体

在线阅读 下载PDF 职称材料

姜黄素对CD34^+CD38^-KG1a细胞增殖和凋亡的影响及其与白消安的协同效应 被引量：4

14

作者 翁光样 杜萌 +1 位作者 胡亮杉 郭坤元 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期405-410,共6页

目的探讨姜黄素对CD34+CD38-KG1a细胞增殖和凋亡的影响以及姜黄素联合白消安对CD34+CD38-KG1a细胞的协同效应。方法流式细胞术检测细胞CD34、CD38表面抗原的表达情况、姜黄素诱导CD34+CD38-KG1a细胞的凋亡情况及其对CD34+CD38-KG1a细胞... 目的探讨姜黄素对CD34+CD38-KG1a细胞增殖和凋亡的影响以及姜黄素联合白消安对CD34+CD38-KG1a细胞的协同效应。方法流式细胞术检测细胞CD34、CD38表面抗原的表达情况、姜黄素诱导CD34+CD38-KG1a细胞的凋亡情况及其对CD34+CD38-KG1a细胞周期的影响。MTT法检测姜黄素对CD34+CD38-KG1a的增殖抑制作用及其与白消安联合作用的效应。甲基纤维素克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。倒置光学显微镜观察细胞凋亡形态。Western blot检测Bcl-2蛋白表达水平。结果 KG1a细胞株中CD34+CD38-KG1a细胞占(98.2±3.2)%。姜黄素对CD34+CD38-KG1a细胞具有增殖抑制作用,呈时间-剂量依赖性,并能降低CD34+CD38-KG1a细胞的克隆形成能力。姜黄素与白消安相互作用系数(CDI)<1。CD34+CD38-KG1a细胞被姜黄素阻滞于G0/G1期,S期细胞明显减少,并能诱导CD34+CD38-KG1a细胞凋亡。凋亡细胞体积变大,细胞结构不清,胞膜边缘粗糙。姜黄素能下调CD34+CD38-KG1a细胞Bcl-2蛋白表达水平。结论姜黄素通过降低细胞克隆形成能力、阻滞细胞于G0/G1期和诱导细胞凋亡,抑制CD34+CD38-KG1a细胞的增殖,姜黄素与白消安具有协同作用。Bcl-2蛋白表达水平下调可能促使姜黄素诱导CD34+CD38-KG1a细胞凋亡。 展开更多

关键词 姜黄素 KG1a 白血病干细胞 协同效应 Bcl-2细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

HBV前C区G1896A和G1899A促进e抗原血清学转换 被引量：4

15

作者 杨华文 朱燕 +5 位作者 姚亚超 李亚红 李楠 曹东林 张智 胡亮杉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期990-993,共4页

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896位点和1899位点突变与e抗原血清转换和疾病进展的相关性。方法:收集HBs Ag阳性持续半年以上且血清HBV-DNA拷贝数>5.0×102IU/m L血清样本共238份,测序法分析HBV前C区1896和1899位点的碱基序... 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)前C区1896位点和1899位点突变与e抗原血清转换和疾病进展的相关性。方法:收集HBs Ag阳性持续半年以上且血清HBV-DNA拷贝数>5.0×102IU/m L血清样本共238份,测序法分析HBV前C区1896和1899位点的碱基序列。同时收集样本的相关临床资料和HBe Ag的表达情况,利用SPSS 20.0,进行Spearman相关性分析和卡方检验。结果:HBV前C区1896和1899位点均可发生突变,由碱基G变成A,且均与e抗原表达密切相关(P<0.05)。G1896A和G1899A均能促进e抗原血清学转换,G1899A的转化率高于G1896A的转化率。G1899A与HBV相关疾病进展相关(相关系数0.280,P<0.05),尤其是HCC的发生。结论:HBV前C区G1896A和G1899A促进HBe Ag血清学转换。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 前C区突变 HBEAG 血清学转换 HCC

在线阅读 下载PDF 职称材料

去甲斑蝥素联合IL-12、IL-15处理增强PBMC对Raja细胞的杀伤效应 被引量：2

16

作者 余莉华 曾雅丽 +4 位作者 胡亮杉 贺艳杰 黄宇贤 宋朝阳 郭坤元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期472-477,共6页

目的:探讨细胞因子IL-2、IL-15激活的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)处理后的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应及其可能机制。方法:锥虫蓝拒染法检测NCTD对Raji细胞和... 目的:探讨细胞因子IL-2、IL-15激活的人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)处理后的人Burkitt淋巴瘤Raji细胞的杀伤效应及其可能机制。方法:锥虫蓝拒染法检测NCTD对Raji细胞和PBMC细胞增殖的影响;LDH释放法检测IL-2、IL-15激活后的PBMC对K562细胞和Raji细胞的杀伤;流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测IL-2、IL-15诱导后PBMC表面NKG2D的表达,以及NCTD作用前后Raji细胞表面NKG2D配体(MICA、MICB、ULBP1、ULBP2、ULBP3)的表达。结果:NCTD抑制Raji细胞的增殖,具有剂量、时间依赖性(P<0.05),但对PBMC增殖无影响(P>0.05)。在效靶比为10∶1、20∶1时,IL-2、IL-15激活的PBMC对K562细胞的杀伤率较未激活的PBMC明显增高[(52.42±3.89)%vs(15.82±5.12)%,(79.55±9.22)%vs(27.67±3.66)%,P<0.05];PBMC对NCTD处理后Raji细胞杀伤率较未经NCTD处理的Raji细胞明显增高[(23.63±6.20)%vs(5.04±1.25)%,(41.80±4.09)%vs(8.59±2.19)%;P<0.05],且IL-2、IL-15激活的PBMC对NCTD处理后Raji细胞的杀伤率较NCTD处理前明显提高[(38.97±2.76)%vs(13.19±3.67)%,(63.09±7.30)%vs(19.89±4.15)%;P<0.05]。激活后PBMC表面NKG2D表达率升高[(44.91±5.85)%vs(25.28±7.69)%,P<0.05]。NCTD作用后Raji细胞表面NKG2D的配体ULBP2表达显著升高[(12.69±3.99)%vs(1.03±0.42)%,P<0.05],而其他配体MICA、MICB、ULBP1、ULBP3的表达无明显变化(P>0.05)。结论:NCTD联合细胞因子IL-2、IL-15处理能增强PBMC对Raji细胞的杀伤效应,其机制与NCTD上调Raji细胞表面ULBP2表达和细胞因子上调PBMC表面NKG2D表达有关。 展开更多

关键词 去甲斑蝥素 IL-2 IL-15 淋巴瘤 RAJI细胞 NKG2D NKG2D配体 ULBP2

在线阅读 下载PDF 职称材料

NK细胞抑制CD34^+早期急性髓系白血病细胞克隆形成 被引量：4

17

作者 牛新清 胡亮杉 +4 位作者 郭坤元 周健 何颖芝 孙明 卢小迅 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期31-33,共3页

目的探讨同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较。结果急性髓系白血病细胞... 目的探讨同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的克隆抑制效应。方法免疫磁珠法分离5例健康个体NK细胞,甲基纤维素克隆形成实验检测NK细胞对KG1a细胞杀伤后的克隆形成,同时与NK杀伤敏感细胞株K562比较。结果急性髓系白血病细胞株KG1a中CD34抗原表达率为(98.0±1.1)%,分选后的NK细胞(CD3-CD16+CD56+细胞)纯度为(93.2±3.7)%。不同效靶比时NK细胞对KG1a细胞均能抑制其克隆形成。随着效靶比的增高,其克隆抑制率随之增高(P<0.05)。同一效靶比时,NK细胞对KG1a的克隆抑制率低于K562,差异有显著性(P<0.05)。结论同种异体NK细胞对CD34+早期急性髓系白血病细胞的克隆形成具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 NK细胞 早期急性髓系白血病细胞 克隆抑制

在线阅读 下载PDF 职称材料

探针荧光定量PCR在肺炎链球菌检测中的应用 被引量：4

18

作者 曹东林 胡亮杉 +3 位作者 林茂锐 王婷 黄基伟 田军章 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期102-104,共3页

目的建立探针荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法。方法针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA,设计合成了特异引物和探针,研究引物和探针的灵敏度和特异性,确定循环阈值(cycle threshold,ct)的临界值(cut-off value)。将荧光定量PCR和细菌培... 目的建立探针荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法。方法针对肺炎链球菌种属特异性基因lytA,设计合成了特异引物和探针,研究引物和探针的灵敏度和特异性,确定循环阈值(cycle threshold,ct)的临界值(cut-off value)。将荧光定量PCR和细菌培养法进行比较,同时检测158份肺炎患者痰液标本加以验证。结果针对LytA基因所设计的引物和探针能灵敏地检出常见致病的血清型肺炎链球菌株,检测灵敏度为每个反应100个基因组DNA拷贝。通过荧光量PCR方法,35株肺炎链球菌中检测结果为阳性有34株,检测结果为阴性的有1株;15株非肺炎链球菌全部为阴性。通过荧光定量PCR方法,158份痰液标本中共检测出34份肺炎链球菌阳性,其中10份培养出相应的病原菌。肺炎链球菌阳性患者的白细胞数量和住院时间均显著高于阴性患者(P<0.05)。肺炎链球菌阳性患者住院时间均显著长于阴性患者(P<0.05)。结论探针荧光定量PCR方法能特异地检测肺炎链球菌,具有很高的灵敏度,能提高临床肺炎链球菌感染患者标本的阳性检出率。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 聚合酶链反应 荧光探针

在线阅读 下载PDF 职称材料

间充质干细胞在衰老大鼠体内归巢的研究 被引量：5

19

作者 李艳菊 胡亮杉 郭坤元 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期823-826,共4页

目的探究间充质干细胞(MSCs)在衰老大鼠体内的归巢。方法采用荧光染料CFSE标记的大鼠MSCs以3×105个尾静脉注射正常大鼠和衰老大鼠,24h后处死大鼠,将脑、心、肝、肺、脾、肾、肠、睾丸和卵巢制作成冰冻切片及细胞悬液涂片,在荧光显... 目的探究间充质干细胞(MSCs)在衰老大鼠体内的归巢。方法采用荧光染料CFSE标记的大鼠MSCs以3×105个尾静脉注射正常大鼠和衰老大鼠,24h后处死大鼠,将脑、心、肝、肺、脾、肾、肠、睾丸和卵巢制作成冰冻切片及细胞悬液涂片,在荧光显微镜下观察并计数。结果同种异体的MSCs能够归巢到衰老大鼠的脑、心、肝、肺、脾、肾、肠、睾丸和卵巢,与正常大鼠的归巢有相同趋势。结论MSCs能够归巢到衰老大鼠的各个器官,这可能与局部血流量和组织器官结构有关。 展开更多

关键词 间充质干细胞 归巢 衰老大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

两种全自动血细胞分析仪的比对分析 被引量：2

20

作者 陈丹霞 胡亮杉 +2 位作者 李泽泳 杨华文 宋少华 《国际检验医学杂志》 CAS 2016年第18期2634-2636,共3页

目的比对迈瑞BC-6900和Sysmex XS-800i全自动血细胞分析仪血液模式的性能。方法采取标本160份,同时在两种血细胞分析仪上检测。按照NCCLS EP9-A2文件要求,根据美国临床实验室修正法规（CLIA′88）标准的1/2对白细胞、红细胞、血红蛋白... 目的比对迈瑞BC-6900和Sysmex XS-800i全自动血细胞分析仪血液模式的性能。方法采取标本160份,同时在两种血细胞分析仪上检测。按照NCCLS EP9-A2文件要求,根据美国临床实验室修正法规（CLIA′88）标准的1/2对白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板4项指标进行比对分析。结果两种血细胞分析仪的白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板差异均无统计学意义（P〉0.05）,相关系数均在0.975~1.000（r2≥0.95）,医学决定水平均在1/2可接受范围内。结论两种血细胞分析仪具有较高相关性,均能运用于临床检验。 展开更多

关键词 全自动血细胞分析仪 血常规 比对分析

在线阅读 下载PDF 职称材料