深穿透地球化学勘查研究进展 被引量：2

1

作者 张博 何军华 窦帅杰 《矿物学报》 CSCD 北大核心 2015年第S1期976-,共1页

近些年,由于矿产资源不断的开发与利用,隐伏矿床的勘查引起了人们的高度重视,随着成矿理论和分析技术的发展,出现了很多新的地球化学勘查方法,并且在隐伏矿床的勘查中发挥着越来越重要的作用。这些方法主要有瑞典Kristiansson与Malmqvis... 近些年,由于矿产资源不断的开发与利用,隐伏矿床的勘查引起了人们的高度重视,随着成矿理论和分析技术的发展,出现了很多新的地球化学勘查方法,并且在隐伏矿床的勘查中发挥着越来越重要的作用。这些方法主要有瑞典Kristiansson与Malmqvist(1984)提出的地球气纳微金属测量法(geogas),美国Clarke等人(1990)提出的酶提取方法,苏联地电地球化学方法(CHIM)(Shmakin, 展开更多

关键词 地球化学勘查 隐伏矿床 成矿理论 矿产资源 深穿透 Clarke 地气法 地球化学详查 隐伏矿体 分析技术

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缺氧环境下miR-7851-3p可能通过抑制Wnt8b表达调控子宫内膜腺上皮细胞增殖

2

作者 王含必 窦帅杰 +3 位作者 刘思邈 张婉玉 刘美芝 邓成艳 《生殖医学杂志》 CAS 2022年第9期1253-1258,共6页

目的探究缺氧环境下影响子宫内膜腺上皮细胞增殖的潜在机制。方法分别在常氧和缺氧条件下(1%氧浓度)培养子宫内膜腺上皮细胞,提取RNA,高通量测序分析两种状态子宫内膜腺上皮细胞微小RNAs(microRNAs,miRNAs)的差异表达,并利用实时荧光定... 目的探究缺氧环境下影响子宫内膜腺上皮细胞增殖的潜在机制。方法分别在常氧和缺氧条件下(1%氧浓度)培养子宫内膜腺上皮细胞,提取RNA,高通量测序分析两种状态子宫内膜腺上皮细胞微小RNAs(microRNAs,miRNAs)的差异表达,并利用实时荧光定量PCR(qPCR)对差异表达的miRNA进行验证;通过Targetscan网站分析差异显著的miRNAs与增殖相关的靶基因,采用Western blot检测Wnt8b蛋白的表达。细胞计数(CCK8)检测正常和缺氧条件下培养子宫内膜腺上皮细胞之间的细胞增殖的情况。结果miRNA高通量测序结果显示缺氧条件下miR-7851-3p、miR-125a-3p和miR-141-5p等16个miRNAs在子宫内膜腺上皮细胞中表达升高,qPCR检测结果显示缺氧环境下子宫内膜腺上皮细胞的miR-7851-3p的表达显著升高(P<0.001)。靶基因预测结果显示Wnt8b是miR-7851-3p潜在靶基因,而在缺氧环境下子宫内膜腺上皮细胞的Wnt8b蛋白表达降低。CCK8检测结果显示缺氧条件下子宫内膜腺上皮细胞增殖能力降低,尤其在培养36 h时差异显著(P<0.001)。结论子宫内膜腺上皮细胞在缺氧环境下miR-7851-3p表达上调,可能通过抑制Wnt8b蛋白的表达而抑制子宫内膜腺上皮细胞的增殖。 展开更多

关键词 子宫内膜腺上皮细胞 微小核糖核酸 信号通路 细胞增殖

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河南三门峡铝土矿地质特征及成因探讨

3

作者 窦帅杰 何军华 +1 位作者 刘卜桢 刘康 《矿物学报》 CSCD 北大核心 2015年第S1期575-,共1页

河南省三门峡铝土矿资源位于河南省著名的洛阳—三门峡铝土矿成矿带之间,区域地层以沉积岩为主,区域岩浆岩活动不甚发育,研究区为一套沉积在奥陶系马家沟组灰岩不整合面之上的铁、铝沉积建造。由于不整合面(古地形)的凸凹不平,导致各处... 河南省三门峡铝土矿资源位于河南省著名的洛阳—三门峡铝土矿成矿带之间,区域地层以沉积岩为主,区域岩浆岩活动不甚发育,研究区为一套沉积在奥陶系马家沟组灰岩不整合面之上的铁、铝沉积建造。由于不整合面(古地形)的凸凹不平,导致各处层位及厚度的差异,加之后期物理风化、剥蚀,甚至造成含矿岩系的地层缺失。研究区内还发现有大型煤矿。河南省三门峡市铝土矿具有非常丰富的优质铝矿,矿层存在于石炭系上统本溪组中部。 展开更多

关键词 铝土矿资源 不整合面 马家沟组 含矿岩系 地质特征 河南三门峡 大型煤矿 石炭系上统 地层缺失 区域地层

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巨噬细胞表型在鼠疫杆菌和牛布鲁氏杆菌联合免疫效果早期评价中的潜在作用 被引量：2

4

作者 窦帅杰 李葛 +5 位作者 张嘉诚 刘艺琼 张艳玲 侯春梅 肖鹤 韩根成 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期37-43,共7页

目的在需要多种疫苗同时免疫的应急情况下,如何快速评价联合免疫的效果是目前迫切需要解决的问题。本研究旨在探究巨噬细胞表型变化在早期快速评价鼠疫杆菌和布氏杆菌联合免疫效果中的潜在作用及其可能的应用价值。方法建立鼠疫杆菌、... 目的在需要多种疫苗同时免疫的应急情况下,如何快速评价联合免疫的效果是目前迫切需要解决的问题。本研究旨在探究巨噬细胞表型变化在早期快速评价鼠疫杆菌和布氏杆菌联合免疫效果中的潜在作用及其可能的应用价值。方法建立鼠疫杆菌、牛布鲁氏杆菌疫苗小鼠免疫模型,分别在免疫早期(4 d)和免疫后期(14 d)检测巨噬细胞表型(M1或M2极化)差异,及CD8+T细胞表型功能的变化,分析早期巨噬细胞免疫表型对后期CD8+T细胞功能的影响。结果在联合免疫早期,鼠疫杆菌及牛布鲁氏杆菌同时免疫情况下巨噬细胞M1方向的极化减弱(包括细胞表面CD16/32表达降低及Detectin-1表达升高,细胞内IL-12表达降低及IL-4表达升高),提示疫苗间的相互干扰。同时,两菌联合接种组CD8+T细胞的活性(包括CD8+CD69+T、CD8+INF-γ+T以及CD8+Granzyme B+T细胞的比例)也减弱,出现与巨噬细胞表型一致的变化趋势。结论联合免疫早期巨噬细胞表型与后期反映抗感染免疫应答能力的CD8+T细胞表型及功能出现一致性变化,提示巨噬细胞表型变化有可能应用于早期快速评价联合免疫的效果。 展开更多

关键词 联合免疫 鼠疫杆菌疫苗 牛布鲁氏杆菌疫苗 抗感染药 巨噬细胞表型 CD8+T细胞

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Tim-3在调控IFI44表达及影响H1N1感染中的作用研究 被引量：1

5

作者 史青竹 蒋兴伟 +8 位作者 窦帅杰 石新慧 王位 李葛 张宇 侯春梅 黎燕 沈倍奋 韩根成 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期329-334,共6页

目的探讨Tim-3信号影响免疫细胞抗感染作用的机制。方法通过基因芯片筛选及体内外验证的方法探讨Tim-3对IFI44(一种抗感染关键效应分子)表达的影响,并结合H1N1感染模型对其意义进行评价。结果在巨噬细胞上敲低Tim-3表达或通过Tim-3融合... 目的探讨Tim-3信号影响免疫细胞抗感染作用的机制。方法通过基因芯片筛选及体内外验证的方法探讨Tim-3对IFI44(一种抗感染关键效应分子)表达的影响,并结合H1N1感染模型对其意义进行评价。结果在巨噬细胞上敲低Tim-3表达或通过Tim-3融合蛋白阻断Tim-3信号,均能显著提高IFI44的表达,而在Tim-3高表达的巨噬细胞中IFI44的表达受到明显抑制。在整体水平上检测Tim-3信号对IFI44表达的影响发现,给予受H1N1病毒感染小鼠腹腔注射s Tim-3蛋白能显著提高小鼠体内IFI44的表达进而降低H1N1病毒载量。结论 Tim-3在抑制抗病毒感染效应分子IFI44表达中发挥关键作用;部分解释了Tim-3调控抗感染免疫的机制,也为防治H1N1等病毒的感染提供了新的思路。 展开更多

关键词 TIM-3 IFI44 H1N1 病毒载量

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瓦庙坡地区铜矿床地质特征及成因类型研究 被引量：2

6

作者 何军华 张博 +1 位作者 窦帅杰 秦烽焰 《矿物学报》 CSCD 北大核心 2015年第S1期580-,共1页

矿区位于西坪向斜之北翼,区内出露地层主要为古元古界银鱼沟群一套中浅变质岩系,次为新太古界登封岩群和中元古界汝阳群和古生界寒武系部分地层,区内褶皱复杂,断裂构造相对简单,岩浆活动频繁,铜、铁矿点较多,成矿条件极为有利。矿区内... 矿区位于西坪向斜之北翼,区内出露地层主要为古元古界银鱼沟群一套中浅变质岩系,次为新太古界登封岩群和中元古界汝阳群和古生界寒武系部分地层,区内褶皱复杂,断裂构造相对简单,岩浆活动频繁,铜、铁矿点较多,成矿条件极为有利。矿区内共发现4条铜矿化带。 展开更多

关键词 铜矿床 汝阳群 银鱼沟群 铜矿化 登封岩群 地质特征 成矿条件 断裂构造 赤山沟组 岩浆活动

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南岭成矿带中锡矿的研究及其意义

7

作者 窦帅杰 刘卜桢 何军华 《世界有色金属》 2017年第7期281-282,共2页

南岭东西成矿带属环太平洋成矿带的组成部分,其地质现象复杂,为南岭地区以及其邻区锡多金属成矿的研究提供了重要的窗口。本文主要从该锡多金属成矿带中的右江(滇桂)亲硫系列锡矿集中区块、江南古陆西南缘(黔桂)亲铁系列锡矿集中区块和... 南岭东西成矿带属环太平洋成矿带的组成部分,其地质现象复杂,为南岭地区以及其邻区锡多金属成矿的研究提供了重要的窗口。本文主要从该锡多金属成矿带中的右江(滇桂)亲硫系列锡矿集中区块、江南古陆西南缘(黔桂)亲铁系列锡矿集中区块和南岭中东段亲氧-亲硫(-亲铁)复合系列锡矿集中区块进行分析研究,从而对南岭东西向锡多金属成矿带中锡矿的成矿特征进行论述。 展开更多

关键词 锡多金属成矿带 亲硫系列锡矿 亲铁系列锡矿 南岭

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济源市瓦庙坡铜矿床成因类型研究 被引量：1

8

作者 何军华 秦烽焰 +2 位作者 窦帅杰 刘卜桢 魏杰 《城市地理》 2017年第7X期95-95,共1页

瓦庙坡地区位于华北地台山西台隆铁山河拱褶断束,该地区铜矿床矿化带具有层控和构控双重特征;矿石质量特征有原生带矿石金属矿物、氧化带矿石金属矿物、脉石矿物;控矿的地质因素有断裂、褶皱、剥离断层,其中剥离断层是是区内重要的控矿... 瓦庙坡地区位于华北地台山西台隆铁山河拱褶断束,该地区铜矿床矿化带具有层控和构控双重特征;矿石质量特征有原生带矿石金属矿物、氧化带矿石金属矿物、脉石矿物;控矿的地质因素有断裂、褶皱、剥离断层,其中剥离断层是是区内重要的控矿构造之一;由瓦庙坡铜矿床的控矿因素,成矿物质来源,成矿机制,分析得到瓦庙坡铜矿具有多因素控矿、多期次热液活动、多种成矿物质来源等特征。 展开更多

关键词 铜矿床 地质特征 成因类型 瓦庙坡地区

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气体地球化学在矿产勘查中的应用 被引量：1

9

作者 邵博琪 窦帅杰 孙万龙 《世界有色金属》 2016年第12期89-90,共2页

利用气体地球化学方法找矿是地球化学找矿的一个新分支,文章就气体地球化学当前的研究现状、烃类组分、非烃类气体CO_2、稀有气体同位素在矿产勘查中的一些应用并结合前人的相关研究成果一一做了简要的概括。

关键词 烃类组分 非烃类气体 稀有气体同位素 矿产勘查

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缺氧环境下子宫内膜腺上皮细胞中微RNA表达谱及细胞凋亡变化 被引量：1

10

作者 王含必 窦帅杰 +3 位作者 刘思邈 张婉玉 刘美芝 邓成艳 《协和医学杂志》 CSCD 2022年第4期626-631,共6页

目的探究缺氧环境下子宫内膜腺上皮细胞(endometrial glandular epithelial cell,EEC)中微RNA(micro-RNA,miRNA)表达谱变化及其对凋亡的影响。方法取对数生长期EEC,接种至六孔板(1×10^(5)个细胞/孔)并随机分为缺氧组和对照组。缺... 目的探究缺氧环境下子宫内膜腺上皮细胞(endometrial glandular epithelial cell,EEC)中微RNA(micro-RNA,miRNA)表达谱变化及其对凋亡的影响。方法取对数生长期EEC,接种至六孔板(1×10^(5)个细胞/孔)并随机分为缺氧组和对照组。缺氧组、对照组分别置于缺氧环境(O_(2)∶N_(2)∶CO_(2)体积比为1∶94∶5)和正常氧环境(O_(2)∶CO_(2)体积比为95∶5)中培养。培养4 h后收集细胞,加入Trizol并提取总RNA。采用高通量测序法测定两组EEC中miRNA表达谱变化,采用实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测miR-7704、miR-7974基因表达水平,采用流式细胞术检测EEC凋亡情况,采用蛋白印迹法(Western blot)检测p53和凋亡相关蛋白表达变化。结果高通量测序对21种常见miRNA表达水平检测后发现,与对照组比较,缺氧组EEC中16种miRNA表达上调,5种miRNA表达下调;其中对照组表达丰度较高的miR-7704和miR-7974在缺氧组表达下降最为显著(P均<0.05)。RT-PCR结果显示,与对照组比较,缺氧组EEC中miR-7704和miR-7974相对表达量分别降低20%、80%。流式细胞术检测结果显示,缺氧组早期凋亡率及晚期凋亡率均高于对照组(P均<0.001)。Western blot检测结果显示,与对照组比较,缺氧组EEC中p53表达升高,抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2表达降低(P均<0.05)。结论缺氧环境可诱导EEC中miRNA表达谱改变,其中以miR-7974表达下调最为显著。p53可能是miR-7974的靶蛋白,缺氧诱发的EEC凋亡可能通过下调miR-7974水平而促进p53表达实现。 展开更多

关键词 子宫内膜腺上皮细胞 缺氧 miR-7704 miR-7974 凋亡

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金矿床勘查模型探讨——以招平断裂带金矿床为例

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作者 秦烽焰 何军华 +2 位作者 魏杰 窦帅杰 袁颖 《城市地理》 2017年第6X期78-78,共1页

中国山东省的胶东地区是我国十分重要的一个金矿富集区,大大小小的金矿区有百余座,其中以招平断裂带上的金成矿带的金矿床最为著名。区内成矿地质条件优越,有多个大型黄金矿床分布其上,金矿资源丰富。

关键词 招平 金矿 断裂带

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贵州贞丰县红旗坡—塘新寨金矿地质特征及成因浅析

12

作者 刘卜桢 窦帅杰 唐卫 《世界有色金属》 2016年第9S期126-,128,共2页

工作区大地构造位置隶属华南褶皱系右江褶皱带册亨—望谟构造变形区,其位于右江褶皱带北缘凸起端(赖子山背斜近北端),与扬子准地台西南缘相毗邻。本区金矿成因为构造热液成矿,属浅成低温热液矿床。本文通过对区域地质背景、矿区地质特... 工作区大地构造位置隶属华南褶皱系右江褶皱带册亨—望谟构造变形区,其位于右江褶皱带北缘凸起端(赖子山背斜近北端),与扬子准地台西南缘相毗邻。本区金矿成因为构造热液成矿,属浅成低温热液矿床。本文通过对区域地质背景、矿区地质特征以及地球化学特征、矿床地质特征进行了分析,并结合前人资料,将塘新寨金矿初步定为卡林型金矿。 展开更多

关键词 卡林型金矿 地质特征 成因浅析 红旗坡塘新寨金矿 贵州

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青海省索拉沟铜多金属矿床成矿流体地质特征

13

作者 刘卜桢 窦帅杰 《矿物学报》 CSCD 北大核心 2015年第S1期597-,共1页

鄂拉山地区是青海省重要的铜金属成矿带之一。该区位于南秦岭印支地槽两端海南三叠纪次级沉积盆地的西缘,是一北北西向的构造—岩浆活动带。西与柴达木地块以瓦洪山—温泉断裂邻接,截切地块边缘的近东西向构造带。区域内出露有中三叠世... 鄂拉山地区是青海省重要的铜金属成矿带之一。该区位于南秦岭印支地槽两端海南三叠纪次级沉积盆地的西缘,是一北北西向的构造—岩浆活动带。西与柴达木地块以瓦洪山—温泉断裂邻接,截切地块边缘的近东西向构造带。区域内出露有中三叠世、晚三叠世及古近纪、新近纪地层。研究区内主要为中三叠统,是一套滨-浅海相含火山物质的碎屑岩沉积建造,其上部为厚度不大。 展开更多

关键词 成矿流体 铜多金属矿床 柴达木地块 中三叠统 东西向构造带 晚三叠世 鄂拉山 沉积盆地 地质特征 南秦岭

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可溶性Tim-3体外增强免疫应答的作用及机制研究 被引量：3

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作者 李葛 王智鼎 +6 位作者 窦帅杰 侯春梅 肖鹤 王仁喜 陈国江 黎燕 韩根成 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期33-37,共5页

目的评价重组人(hTim-3)-Fc融合蛋白在调节免疫应答中的作用及其机制研究。方法分别将重组hTim-3-Fc融合蛋白与人巨噬细胞系U937细胞、T淋巴细胞系Jurkat细胞及正常人外周血细胞共培养,采用ELISA、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白质免疫... 目的评价重组人(hTim-3)-Fc融合蛋白在调节免疫应答中的作用及其机制研究。方法分别将重组hTim-3-Fc融合蛋白与人巨噬细胞系U937细胞、T淋巴细胞系Jurkat细胞及正常人外周血细胞共培养,采用ELISA、实时荧光定量PCR(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western印迹)方法检测免疫相关细胞因子水平的变化,探讨重组hTim-3-Fc融合蛋白对免疫细胞活性的影响并阐明机制。结果重组hTim-3-Fc融合蛋白可显著提高免疫细胞活性,表现为U937中IL-8分泌水平,Jurkat细胞IL-2分泌水平,以及人外周血中IL-2和IFN-γ分泌水平显著升高;在mRNA水平,发现重组hTim-3-Fc融合蛋白能显著提高上述细胞中Ⅰ型干扰素(包括IFN-α2、IFN-β1)的表达。在分子机制方面,重组hTim-3-Fc融合蛋白可增强T细胞(Jurkat)及巨噬细胞(U937)中stat-1的磷酸化水平。结论制备的重组人Tim-3-Fc融合蛋白在体外能显著增强免疫细胞活性,有望成为免疫抑制性疾病新的免疫干预药物。 展开更多

关键词 TIM-3 融合蛋白 细胞因子类 U937细胞 JURKAT细胞 T淋巴细胞

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LPS及TGF-β对巨噬细胞中Tim-3表达的影响及其机制的初步探索 被引量：1

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作者 王位 董忱 +8 位作者 史青竹 侯春梅 石新慧 李葛 窦帅杰 黎燕 沈倍奋 马远方 韩根成 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期387-391,共5页

目的探讨促炎因子脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和抑炎因子转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)对巨噬细胞中T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein3,Tim-3)表达... 目的探讨促炎因子脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和抑炎因子转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)对巨噬细胞中T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein3,Tim-3)表达的影响,并初步探索其影响机制。方法使用LPS和TGF-β分别刺激小鼠源巨噬细胞系RAW264.7、人源巨噬细胞系U937,在基因水平和蛋白水平分别检测巨噬细胞中Tim-3的表达情况,同时观察巨噬细胞中金属蛋白酶ADAM10/17在基因水平的变化。结果 LPS可抑制巨噬细胞中Tim-3在基因和蛋白水平的表达,而TGF-β作用相反。LPS促进巨噬细胞中ADAM10/17在基因水平的表达,TGF-β作用正相反。结论炎症微环境中促炎介质LPS和抑炎介质TGF-β分别抑制和促进巨噬细胞中Tim-3的表达,同时,金属蛋白酶ADAM10/17可能参与LPS、TGF-β对巨噬细胞中Tim-3在蛋白水平表达的调控。 展开更多

关键词 脂多糖类 转化生长因子Β TIM-3 巨噬细胞

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Tim-3对神经小胶质细胞极化的调控作用及机制研究 被引量：1

16

作者 刘艺琼 李葛 +8 位作者 王智鼎 窦帅杰 张嘉诚 张艳玲 李国贤 侯春梅 王仁喜 黎燕 韩根成 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期839-844,共6页

目的探究T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)对小胶质细胞极化的调控作用及机制。方法借助流式细胞术检测神经小胶质细胞BV-2上Tim-3及其配体的表达情况;利用ELISA、实时定量PCR方法检测阻断Tim-3功能对BV-2细胞因子表达的影响... 目的探究T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子-3(Tim-3)对小胶质细胞极化的调控作用及机制。方法借助流式细胞术检测神经小胶质细胞BV-2上Tim-3及其配体的表达情况;利用ELISA、实时定量PCR方法检测阻断Tim-3功能对BV-2细胞因子表达的影响,进而明确Tim-3对小胶质细胞M1/M2极化的调控作用;通过Western印迹阐明Tim-3调控小胶质细胞极化的分子机制。结果 Tim-3及其配体分子半乳糖凝集素-9(Gal-9)表达于BV-2细胞;阻断Tim-3信号显著增强了BV-2细胞M1极化相关的促炎性细胞因子,包括白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、IL-12、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,抑制了M2极化抗炎性细胞因子,如转化生长因子β(TGF-β)和IL-10的表达,提示Tim-3参与了小胶质细胞极化的调控。同时,分子机制研究发现,Tim-3可能通过抑制小胶质细胞中视黄酸诱导基因蛋白Ⅰ(RIG-Ⅰ)和核因子κB (NF-κB)的表达及活化发挥极化调控功能。结论免疫检查点分子Tim-3参与了BV-2细胞的极化调控。该发现为通过Tim-3探索脑损伤及脑功能障碍性疾病的治疗策略提供了新的实验依据。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子-3 小神经胶质细胞 极化 炎性细胞因子 半乳糖凝集素类

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Tim-1抗体在防治埃博拉及马尔堡病毒感染中的作用研究

17

作者 张艳玲 李淑莲 +8 位作者 李葛 窦帅杰 刘艺琼 张嘉诚 李国贤 侯春梅 冯健男 沈倍奋 韩根成 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期935-940,共6页

目的利用假病毒方法评价T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子1 (Tim-1)抗体在防治埃博拉病毒(EBOV)和马尔堡病毒(MARV)感染中的可能作用。方法通过转染EBOV及MARV糖蛋白质粒,制备埃博拉及马尔堡假病毒,以HEK-293T细胞为靶细胞,利用假病... 目的利用假病毒方法评价T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子1 (Tim-1)抗体在防治埃博拉病毒(EBOV)和马尔堡病毒(MARV)感染中的可能作用。方法通过转染EBOV及MARV糖蛋白质粒,制备埃博拉及马尔堡假病毒,以HEK-293T细胞为靶细胞,利用假病毒评价抗人Tim-1(h Tim-1)抗体对EBOV及MARV的防治作用。结果成功制备了能感染HEK-293T细胞的埃博拉、马尔堡假病毒,发现Tim-1在HEK-293T细胞上的表达水平影响假病毒感染效率。同时,成功表达了抗h Tim-1抗体,ELISA及FACS实验证实了其结合特异性,发现制备的Tim-1抗体能中和埃博拉、马尔堡假病毒的感染,并显示出与埃博拉及马尔堡假病毒抗体的协同作用。结论制备的Tim-1抗体显示了良好的中和活性,为埃博拉、马尔堡假病毒感染的防治提供了新的手段,认为假病毒是可行的抗体功能评价方法。 展开更多

关键词 人T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子1 马尔堡病毒 埃博拉病毒 假病毒属 293L细胞 HEK-293T细胞

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Tim-3对巨噬细胞葡萄糖转运体1表达的调节机制研究

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作者 张嘉诚 李葛 +3 位作者 窦帅杰 刘艺琼 侯春梅 韩根成 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期517-521,527,共6页

目的探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(T cell immunoglobulin and mucin-domain containing molecule-3,Tim-3)对巨噬细胞葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)的表达及其对细胞功能的影响,并初步探索其影响机制。方法... 目的探讨T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子-3(T cell immunoglobulin and mucin-domain containing molecule-3,Tim-3)对巨噬细胞葡萄糖转运体1(glucose transporter 1,GLUT1)的表达及其对细胞功能的影响,并初步探索其影响机制。方法使用Tim-3 siRNA敲低Raw264. 7细胞系观察GLUT1蛋白的表达,随后使用不同浓度Tim-3融合蛋白、Tim-3激动抗体,阻断和激活小鼠源巨噬细胞系Raw264. 7,在基因和蛋白水平观察GLUT1、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)、Tim-3以及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) 4项指标的变化。结果 Tim-3敲低的Raw264. 7细胞系GLUT1蛋白表达水平明显升高;激活、抑制巨噬细胞Tim-3信号能分别抑制和促进GLUT1、TNF-α的基因和蛋白表达以及GAPDH基因表达,但Tim-3的基因和蛋白水平以及GAPDH蛋白水平并无显著变化。结论 Tim-3负调控巨噬细胞GLUT1表达,进一步影响TNF-α分泌,参与TNF-α转录后调控的GAPDH可能参与其中的调节机制。 展开更多

关键词 TIM-3 巨噬细胞 葡萄糖转运体1 肿瘤坏死因子Α

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Tim-3调控T细胞IL-2表达的机制研究

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作者 李国贤 张军 +6 位作者 窦帅杰 李葛 高扬 唐莉莉 侯春梅 马远方 韩根成 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第6期415-420,共6页

目的探究T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)对白细胞介素-2(IL-2)的调控作用及机制。方法通过酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术(FACS)以及实时定量荧光聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测T细胞活化后,Jurkat高表达Tim-3(Jurkat^Tim-3-high... 目的探究T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3)对白细胞介素-2(IL-2)的调控作用及机制。方法通过酶联免疫吸附实验(ELISA)、流式细胞术(FACS)以及实时定量荧光聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测T细胞活化后,Jurkat高表达Tim-3(Jurkat^Tim-3-high)与低表达Tim-3(Jurkat^Tim-3-low)细胞系中IL-2的基因转录及蛋白表达水平;使用中和性抗人Tim-3抗体阻断Jurkat细胞系中Tim-3功能,ELISA及RT-PCR方法检测IL-2蛋白分泌及转录水平变化;通过Western蛋白免疫印迹法检测Tim-3对IL-2表达调控相关分子[包括蛋白激酶C(PKC)β1及核因子(NF)-κB亚基P65]的磷酸化的影响。结果ELISA、FACS和RT-PCR结果均表明,Tim-3抑制IL-2的表达,使用抗人Tim-3抗体阻断后,IL-2的表达上调;Western印迹结果显示,与Jurkat^Tim-3-low细胞相比,Jurkat^Tim-3-high细胞中蛋白激酶PKCβ1及NF-κB亚基P65的磷酸化受到明显抑制。使用中和性抗人Tim-3抗体阻断后,PKCβ1及P65的磷酸化明显增强。结论Tim-3对IL-2的基因转录及蛋白表达起负性调控作用,并且可能是通过抑制NF-κB(NF-κB/p65)及PKCβ1的磷酸化,从而抑制IL-2的产生。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3 白细胞介素-2 抗体 JURKAT细胞

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Tim-3在单核细胞增生李斯特菌脑膜炎小鼠中的作用研究

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作者 高扬 侯春梅 +6 位作者 李葛 窦帅杰 李国贤 唐莉莉 莫荣亮 郝莹 韩根成 《军事医学》 CAS 2021年第5期330-335,共6页

目的构建李斯特菌脑膜炎小鼠模型,以评价T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(Tim-3)在李斯特菌脑膜炎小鼠中的可能作用。方法体内实验通过延髓池注射李斯特菌的方法构建半数致死量的李斯特菌脑膜炎小鼠模型,应用Tim-3敲除(knock out,KO... 目的构建李斯特菌脑膜炎小鼠模型,以评价T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3(Tim-3)在李斯特菌脑膜炎小鼠中的可能作用。方法体内实验通过延髓池注射李斯特菌的方法构建半数致死量的李斯特菌脑膜炎小鼠模型,应用Tim-3敲除(knock out,KO)模式小鼠和Tim-3抗体评价Tim-3对李斯特菌脑膜炎的作用。体外实验通过小胶质细胞BV2与Tim-3抗体共培养,检测阻断Tim-3对BV2细胞因子表达的影响。结果成功构建了半数致死剂量的脑膜炎小鼠模型,与对照组相比,KO小鼠及应用Tim-3抗体小鼠临床评分较高。小胶质细胞阻断Tim-3后,肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平升高。结论敲除及阻断Tim-3引起小鼠李斯特菌脑膜炎病情加重。 展开更多

关键词 T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子3 细菌性脑膜炎 单核细胞增生李斯特菌 小鼠 模型 动物

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