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枸杞多糖对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞中NLRP3炎症小体/细胞焦亡信号通路的影响 被引量：2
1
作者 梁念孩 杜丽君 +4 位作者 马燕 夏会东 窦凯凯 姚青 摆茹 《宁夏医科大学学报》 2023年第7期649-654,共6页
目的 观察枸杞多糖(LBP)对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体/细胞焦亡信号通路的影响。方法 将体外培养的ARPE-19细胞,随机分为5组,即正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、高... 目的 观察枸杞多糖(LBP)对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体/细胞焦亡信号通路的影响。方法 将体外培养的ARPE-19细胞,随机分为5组,即正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、高糖组(55.5 mmol·L^(-1)葡萄糖)、LBP低浓度组(55.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+100μg·mL^(-1)LBP)、LBP中浓度组(55.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+200μg·mL^(-1)LBP)和LBP高浓度组(55.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+400μg·mL^(-1)LBP)。采用免疫荧光观察各组细胞中NLRP3蛋白的表达,Western blot检测炎症小体NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和其下游细胞焦亡蛋白消皮素D(GSDMD)的相对表达量,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(interleukm,IL)-1β和IL-18的表达水平。结果 免疫荧光结果显示,NLRP3蛋白主要在视网膜色素上皮细胞胞质中表达,且与正常组相比,高糖组NLRP3蛋白的表达水平升高(P<0.05);而与高糖组相比,LBP中、高浓度组NLRP3蛋白的表达水平降低(P<0.01)。Western blot结果显示,与正常组相比,高糖组细胞中NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD蛋白的相对表达量升高(P均<0.05);与高糖组相比,LBP中、高浓度组中NLRP3、Caspase-1、ASC、GSDMD蛋白的相对表达量降低(P均<0.05)。ELISA结果显示,与正常组相比,高糖组细胞中IL-1β和IL-18表达水平均升高(P均<0.05);与高糖组相比,LBP中、高浓度组中IL-1β、IL-18表达水平均降低(P均<0.05)。结论 LBP可通过抑制NLRP3炎症小体/细胞焦亡信号通路的激活,从而对高糖环境下的人视网膜色素上皮细胞产生保护作用。 展开更多
关键词 枸杞多糖 人视网膜色素上皮细胞 NLRP3炎症小体 细胞焦亡 白细胞介素
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高效液相色谱法测定调味茶饮料中甜味剂和防腐剂 被引量：3
2
作者 渠惠琳 窦凯凯 +2 位作者 祁国烨 刘云凤 王彭涛 《湖北农业科学》 2020年第1期139-141,155,共4页
建立测定调味茶饮料中常用的2种甜味剂(糖精钠、阿斯巴甜)和3种防腐剂(苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸)的高效液相色谱分析方法。使用Diamonsil C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.02 mol/L醋酸铵水溶液(含0.4 mmol/L甲酸)为流动相进... 建立测定调味茶饮料中常用的2种甜味剂(糖精钠、阿斯巴甜)和3种防腐剂(苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸)的高效液相色谱分析方法。使用Diamonsil C18柱(5μm,250 mm×4.6 mm),以甲醇-0.02 mol/L醋酸铵水溶液(含0.4 mmol/L甲酸)为流动相进行梯度洗脱,样品在50℃下超声提取30 min后用紫外可见可变波长检测器检测。结果表明,5种目标物质在20 min内基线分离,标准曲线的相关系数r>0.999,平均回收率为83.0%~108.0%,日内精密度RSD<3.6%,日间精密度RSD<4.4%。该方法可用于多种调味茶饮料中这5种目标物质的分析。 展开更多
关键词 调味茶饮料 高效液相色谱法 甜味剂 防腐剂
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磷脂酰肌醇3激酶β(PI3Kβ)和PI3Kδ在KIT突变介导的细胞转化中起不同作用 被引量：1
3
作者 张少婷 朱光荣 +5 位作者 石君 杨继辉 蒋宗英 张良颖 窦凯凯 孙建民 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期39-46,共8页
目的探究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的不同亚型在三型酪氨酸激酶受体KIT突变介导的信号传递及细胞增殖中的作用。方法在BaF3细胞中稳定表达野生型KIT及胃肠间质瘤中常见的KIT突变V560D、 W557K558del,分别用PI3Kα、 PI3Kβ、 PI3Kδ亚型特... 目的探究磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的不同亚型在三型酪氨酸激酶受体KIT突变介导的信号传递及细胞增殖中的作用。方法在BaF3细胞中稳定表达野生型KIT及胃肠间质瘤中常见的KIT突变V560D、 W557K558del,分别用PI3Kα、 PI3Kβ、 PI3Kδ亚型特异性抑制剂或者广谱PI3K抑制剂处理细胞,免疫沉淀法和Western blot法检测KIT及其下游信号活化情况。胃肠间质瘤GIST-T1细胞采用相同药物及浓度处理,免疫共沉淀和Western blot法检测KIT及其下游信号的活化情况,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。结果与对照组相比,在表达野生型KIT及其突变体的BaF3细胞中, PI3Kδ亚型特异性抑制剂对KIT及其下游信号分子蛋白激酶B(AKT)和胞外信号调节激酶(ERK)活化的抑制作用最强,其次为PI3Kα和PI3Kβ亚型特异性抑制剂。在GIST-T1细胞中, PI3Kβ亚型特异性抑制剂对KIT及其下游信号活化的抑制作用最强,其次为PI3Kδ和PI3Kα亚型特异性抑制剂。结论在BaF3细胞中, PI3Kδ亚型在KIT活化及其下游信号传递中起主要作用,而在GIST-T1细胞中, PI3Kβ亚型在KIT活化及其下游信号传递中起主要作用,这些结果表明不同PI3K亚型在KIT突变介导的细胞转化中起不同作用,且在不同的细胞中其作用也有不同。 展开更多
关键词 胃肠间质瘤(GIST) 三型酪氨酸激酶受体 KIT 磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)
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对规则切割灰度文字图像的计算机拼接算法
4
作者 梁帅帅 陶炜 +4 位作者 朱继贞 王鑫 董远鹏 高亮堂 窦凯凯 《计算机光盘软件与应用》 2014年第15期218-218,220,共2页
本文针对规则切割的汉字碎纸片的拼接复原,通过读取碎纸片的灰度值,进行二值化处理,建立规则切割的汉字碎纸片的拼接复原模型,对二值图像矩阵与对应的列矩阵、边缘矩阵的处理,结合人工干预,获得正确的图片顺序,结果表明,拼接复原相似度... 本文针对规则切割的汉字碎纸片的拼接复原,通过读取碎纸片的灰度值,进行二值化处理,建立规则切割的汉字碎纸片的拼接复原模型,对二值图像矩阵与对应的列矩阵、边缘矩阵的处理,结合人工干预,获得正确的图片顺序,结果表明,拼接复原相似度很高。 展开更多
关键词 拼接复原 二值化处理 MATLAB 边缘矩阵
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