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抑制Fyn可激活Nrf2信号通路减轻大鼠脑出血后氧化应激损伤 被引量：9
1
作者 张莉 王露 +6 位作者 肖涵 甘荟 陈辉 郑淑月 翟瑄 赵敬 梁平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2035-2042,共8页
目的探讨抑制酪氨酸激酶Fyn(tyrosine kinase Fyn)对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后氧化应激的影响及其潜在机制。方法 96只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、阴性对照组(ICH+Si-NC... 目的探讨抑制酪氨酸激酶Fyn(tyrosine kinase Fyn)对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后氧化应激的影响及其潜在机制。方法 96只雄性SD大鼠采用随机数字表法分为4组:假手术组(Sham组)、脑出血组(ICH组)、阴性对照组(ICH+Si-NC组)和Fyn敲低组(ICH+Si-Fyn组)。基底节注入50μL自体血建立ICH模型,侧脑室注射小干扰片段抑制Fyn的表达,ICH后24 h进行病死率统计、尼氏染色、神经功能评分、血脑屏障通透性检测,ELASA检测ICH大鼠血肿周围脑组织的SOD、GSH、GSH-PX、MDA、H2O2含量,Western blot检测脑组织中Fyn、核因子E2相关因子2(factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及Nrf2下游血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)和醌氧化还原酶1(quinine oxidoreductase 1, NQO1)的表达。结果与Sham组相比,ICH组脑组织中Fyn的表达增高(P<0.05),大鼠病死率增高、神经元变性坏死增多、改良Garcia评分减低、平衡木实验评分增加(P<0.05),血脑屏障通透性降低;脑组织SOD、GSH、GSH-PX活力减少(P<0.05),而MDA、H2O2含量增加(P<0.05);脑组织中Nrf2、HO-1、NQO1的表达增高(P<0.05)。ICH组与ICH+Si-NC组无明显差异。与ICH+Si-NC组相比,siRNA-Fyn可有效抑制Fyn的表达,ICH+Si-Fyn组大鼠病死率降低、神经元变性坏死减少、神经功能评分改善(P<0.05),血脑屏障通透性降低;脑组织血肿周围SOD、GSH、GSH-PX活力增加(P<0.05),而MDA、 H2O2含量减低(P<0.05);脑组织中Nrf2、HO-1、NQO1的表达增加(P<0.05)。结论抑制Fyn可减轻大鼠脑出血后氧化应激损伤,其机制可能与激活Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 脑出血 FYN 核因子E2相关因子2 氧化应激 HO-1
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RGS2抑制大鼠脑出血后炎症反应的实验研究 被引量：3
2
作者 甘荟 陈辉 +4 位作者 张莉 肖涵 王露 蒋宁 梁平 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期588-591,共4页
目的:探讨 G 蛋白信号调节因子 2(regulators of G-protein signalling,RGS2)抑制大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)继发的炎症反应。方法:69 只大鼠分为假手术组、ICH 组、阴性对照慢病毒+ICH 组、RGS2 过表达慢病毒+ICH 组和... 目的:探讨 G 蛋白信号调节因子 2(regulators of G-protein signalling,RGS2)抑制大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)继发的炎症反应。方法:69 只大鼠分为假手术组、ICH 组、阴性对照慢病毒+ICH 组、RGS2 过表达慢病毒+ICH 组和时间窗组,前 4 组各组 12 只 SD 大鼠,时间窗组下设 normal、ICH6h、ICH12h、ICH24h、ICH48h、ICH72h 和 ICH7d,每小组各 3 只 SD 大鼠。基底节注射 VⅡ型胶原酶,建立大鼠 ICH 模型,对大鼠 ICH 后 3 d 进行神经功能评分,干湿法检测脑含水量,采用 Westernblot 和 ELISA 法测定血肿周围脑组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor,TNF-α)和白介素-1β(interleukin-1,IL-1β)的含量,免疫荧光染色方法检测病灶周边髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)表达情况。结果:①RGS2 在 ICH 后表达量从(0.5792±0.019 8)开始升高,并且在术后 12 h 达到峰值(0.809 3±0.076 2),然后降低,术后 7 d 恢复正常(0.600 0±0.083 0)。②与ICH组脑含水量(0.804 7±0.003 4)和神经功能评分(11.570 0±2.070 0)相比,RGS2 过表达慢病毒+ICH 组在 ICH 术后 3 d 脑水肿明显减轻(0.794 0±0.001 5),神经功能评分明显改善(7.429 0±0.976 0)。③RGS2 过表达慢病毒+ICH 组术后 3 d 血肿周边 TNF-α和 IL-1β的表达(1.407±0.055、0.762±0.046)明显低于 ICH 组(1.743±0.179、0.917±0.085),RGS2 过表达慢病毒+ICH 组 TNF-α和 IL-1β的 A 值(32.92±1.13、32.84±1.08)低于 ICH 组 A 值(40.38±0.99、39.29±1.39)。④RGS2 过表达慢病毒+ICH 组大鼠病灶周边 MPO 的表达明显低于 ICH 组和阴性对照慢病毒+ICH 组。结论:RGS2 抑制大鼠脑出血后血肿周边区TNF-α、IL-1β和 MPO 表达,能减轻脑水肿,改善神经功能,抑制脑出血后的炎症反应。 展开更多
关键词 脑出血 G 蛋白信号调节因子 2 炎症反应
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HIF-2α通过抑制炎症反应减轻大鼠脑出血损伤 被引量：4
3
作者 陈辉 甘荟 +4 位作者 肖涵 张莉 王璐 蒋宁 翟瑄 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期65-70,共6页
目的:探讨缺氧诱导因子2α(hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α)在脑出血损伤后(intracerebral hemorrhage,ICH)的作用,并明确其是否参与调控脑出血后的炎症反应。方法:健康雄性SD大鼠95只,其中35只随机分配用于以下时间点分析:Sham... 目的:探讨缺氧诱导因子2α(hypoxia-inducible factor 2α,HIF-2α)在脑出血损伤后(intracerebral hemorrhage,ICH)的作用,并明确其是否参与调控脑出血后的炎症反应。方法:健康雄性SD大鼠95只,其中35只随机分配用于以下时间点分析:Sham、12 h、24 h、48 h、3 d、5 d和7 d,每组5只;另外60只随机分为Sham组(假手术组,注射等量生理盐水)、ICH组(脑出血模型组组,胶原酶诱导的脑出血模型)、Vehicle组(空载体组组,建模前注射空载慢病毒载体)和Oe-HIF-2α组(HIF-2α过表达组,建模前注射HIF-2α过表达慢病毒载体)用于脑含水量检测、神经功能评分、免疫印记分析和免疫荧光检测。通过脑含水量和Garcia神经功能评分评估脑损伤的严重程度;免疫印迹检测HIF-2α及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-18(interleukin 18,IL-18)和白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)的表达水平,免疫荧光检测病灶周边髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的表达。结果:HIF-2α表达在ICH后24 h(0.555 4±0.070 2,P=0.000)开始上调并于3 d(2.368 4±0.346 6,P=0.000)达到峰值,随后降低;与ICH组相比较,Oe-HIF-2α组脑3 d时含水量明显降低(0.793 5±0.002 5,P=0.000),神经功能明显改善(14.700 0±0.674 9,P=0.000);与ICH组相比,Oe-HIF-2α组TNF-α(1.350 4±0.191 5,P=0.000)、IL-1β(1.158 4±0.070 8,P=0.000)、IL-18(0.784 2±0.073 9,P=0.000)等炎性介质在3 d时表达明显降低;Oe-HIF-2α组(3.500 0±0.534 5)病灶周边区域MPO表达明显低于ICH组(5.125 0±0.991 0,P=0.002)。结论:脑出血后,HIF-2α表达上调并且通过抑制TNF-α、IL-1β、IL-18等炎症因子的表达,抑制炎症反应减轻大鼠脑出血损伤。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子2α 炎症 神经保护 脑出血
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柚皮素可抑制磷酸化蛋白激酶C-δ改善大鼠脑出血后炎症损伤 被引量：4
4
作者 肖涵 张莉 +6 位作者 王露 陈辉 甘荟 郑淑月 简丹 赵敬 翟瑄 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期981-988,共8页
目的探讨柚皮素(naringenin,NGN)对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后炎症损伤的影响及其可能的分子机制。方法将SD大鼠采用随机数表法分为假手术组、ICH模型组、ICH+DMSO+PEG400组、ICH+NGN低剂量组(10 mg/kg)、ICH+NGN中剂... 目的探讨柚皮素(naringenin,NGN)对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后炎症损伤的影响及其可能的分子机制。方法将SD大鼠采用随机数表法分为假手术组、ICH模型组、ICH+DMSO+PEG400组、ICH+NGN低剂量组(10 mg/kg)、ICH+NGN中剂量组(20 mg/kg)、ICH+NGN高剂量组(40 mg/kg)、ICH+DMSO组、ICH+PKC-δ激活剂Phorbol 12-myristate 13-acetate(PMA)组、ICH+PMA+NGN组。建立SD大鼠自体血ICH模型,腹腔注射NGN给药,ICH术后24 h观察大鼠神经功能评分、脑含水量,行HE染色,Western blot检测假手术组、ICH模型组、ICH+DMSO+PEG400组和ICH+NGN中剂量组大鼠脑组织蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)-δ磷酸化以及炎症因子表达情况。侧脑室注射PMA促进大鼠PKC-δ磷酸化并建立ICH模型,Western blot检测大鼠脑组织炎症因子的表达情况。结果与ICH组及溶剂对照组相比,NGN改善了大鼠ICH后神经功能评分(P<0.05),降低了脑含水量(P<0.05),减少了神经元变性死亡,并降低了PKC-δ的磷酸化以及NF-κB、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6等炎症因子的表达(P<0.01)。PMA增加了大鼠ICH后PKC-δ的相对磷酸化水平以及NF-κB、IL-1β、IL-6的相对表达(P<0.01),并可逆转NGN降低大鼠ICH后炎症因子表达的效应(P<0.01)。结论NGN可改善大鼠脑出血后炎症损伤,其机制可能与抑制PKC-δ的磷酸化有关。 展开更多
关键词 柚皮素 脑出血 蛋白激酶C-δ 炎症
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PTPN22在大鼠脑出血后炎症损伤中的作用研究 被引量：6
5
作者 王露 张莉 +6 位作者 肖涵 甘荟 陈辉 蒋宁 翟瑄 赵敬 李映良 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第24期2409-2416,共8页
目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶,非受体型22(protein tyrosine phosphatase non-receptor type 22,PTPN22)在大鼠脑出血后炎症反应中的作用及其机制。方法采用自体血注入脑内建立大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)模型,36只SD大鼠随... 目的探讨蛋白酪氨酸磷酸酶,非受体型22(protein tyrosine phosphatase non-receptor type 22,PTPN22)在大鼠脑出血后炎症反应中的作用及其机制。方法采用自体血注入脑内建立大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)模型,36只SD大鼠随机分为假手术组,ICH3、6、12、24、48 h组(n=6),Western blot筛选大鼠脑出血后PTPN22表达的时间窗。72只大鼠随机分为假手术组、ICH组、ICH+NC组、ICH+PTPN22干扰组(n=18)。ICH24 h后,对各组大鼠进行神经功能评分(mNSS),脑含水量测定,Western blot检测大鼠脑出血后血肿周围NLRP3,成熟的白介素-1β(cleaved-IL-1β),成熟的白介素-18(cleaved-IL-18)以及激活的半胱天冬酶-1(cleaved-caspase-1)的表达,HE和Nissl染色观察大鼠脑组织形态学改变,免疫荧光染色检测血肿周围髓过氧化物酶(MPO)的表达。结果大鼠脑出血后12hPTPN22的表达开始升高,24 h达到峰值,48 h开始降低。差异具有统计学意义(P<0.05);与ICH+NC组相比,ICH+PTPN22干扰组神经功能评分降低,脑含水量减少,差异具有统计学意义(P<0.05);HE和Nissl染色结果可见,ICH+PTPN22干扰组脑组织损伤程度与ICH+NC组相比明显减轻;ICH+PTPN22干扰组大鼠脑出血后血肿周围NLRP3、cleaved-IL-1β、cleaved-IL-18以及cleaved-caspase-1的表达与ICH+NC组相比明显降低(P<0.05);ICH+PTPN22干扰组MPO细胞与ICH+NC组相比明显减少。结论干扰PTPN22可通过抑制NLRP3炎性体的激活从而减轻大鼠脑出血后的炎症损伤。 展开更多
关键词 脑出血 PTPN22 NLRP3 cleaved-IL-1β cleaved-IL-18 cleaved-caspase-1 炎症损伤
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