信息产业技术创新战略联盟成员选择 被引量：1

1

作者 王虹 王瑞欢 张忠德 《西安邮电大学学报》 2013年第6期112-116,共5页

为了使信息产业技术创新战略联盟成员选择方法既简单又科学实用,在比较目前战略联盟成员选择方法基础上,通过分析高校资源和信誉两个维度10个指标,设计了战略联盟选择高校的新方法,并以某地7所高校为备选对象作了例证分析。选择方法既... 为了使信息产业技术创新战略联盟成员选择方法既简单又科学实用,在比较目前战略联盟成员选择方法基础上,通过分析高校资源和信誉两个维度10个指标,设计了战略联盟选择高校的新方法,并以某地7所高校为备选对象作了例证分析。选择方法既屏蔽了传统战略联盟成员选择方法的随意性,又简化了因子分析等学术性方法的复杂性。 展开更多

关键词 信息产业 技术创新战略联盟 盟员选择方法 评估指标

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中国互联网行业模仿创新的经验与启示 被引量：4

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作者 王瑞欢 张忠德 《西安邮电学院学报》 2012年第6期96-100,共5页

为推动中国互联网行业的持续健康发展,通过对中国互联网行业模仿创新的实证分析,得出互联网行业模仿创新的成功经验主要表现在通过模仿快速进入并实现盈利;结合本地用户习惯,注重用户体验;进行本土化创新等几个方面,互联网行业发展应注... 为推动中国互联网行业的持续健康发展,通过对中国互联网行业模仿创新的实证分析,得出互联网行业模仿创新的成功经验主要表现在通过模仿快速进入并实现盈利;结合本地用户习惯,注重用户体验;进行本土化创新等几个方面,互联网行业发展应注重模仿基础上的本土化创新、正确选择创新模式至关重要等。 展开更多

关键词 模仿创新 中国互联网行业 电子商务

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肺结核患儿胃液样本结核分枝杆菌培养阳性率提高方法的探讨 被引量：2

3

作者 李桂莲 方敏 +11 位作者 姜靖伟 王瑞欢 钱程宇 于晋杰 曹滨 许达 赵秀芹 李马超 刘海灿 孙琳 朱渝 万康林 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2023年第1期31-37,共7页

目的:建立提高肺结核患儿胃液样本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)培养阳性率的方法,同时,探讨培养液的pH值对MTB抗原-胶体金检测试剂正确判读结果的影响和磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)对结核样本前处理... 目的:建立提高肺结核患儿胃液样本结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)培养阳性率的方法,同时,探讨培养液的pH值对MTB抗原-胶体金检测试剂正确判读结果的影响和磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)对结核样本前处理液pH值的调节作用。方法:将70份疑似肺结核患儿胃液样本同时用两步培养法、传统培养法和Xpert Ultra进行检测。两步培养法为先将胃液样本直接接种到罗氏培养基上,约20~30 d后收集可疑MTB菌落再行常规的碱处理-中和离心法处理进行分离培养(传统培养法)。比较传统培养法和两步法阳性检出率的差异;以样本的Xpert Ultra检测结果作为菌载量标准,分析两步法在不同菌载量样本中的阳性检出率差异。同时,配制系列pH值梯度的溶液,确定MTB抗原-胶体金检测试剂获得最佳显示结果的最适pH值范围;用系列体积的PBS缓冲液(pH=6.8)中和3%或4%NaOH与等体积样本的混合液,确定pH值至7~9时所需的体积稀释倍数。结果:传统培养法阳性检出率为26.5%(18/68),两步法阳性检出率为23.1%(15/65),未发现两种方法的阳性检出率差异有统计学意义(χ^(2)=0.125,P>0.05)。两步法在传统培养法的基础上将阳性检出率从26.5%(18/68)提高到32.4%(22/68)。两步法在菌载量低级及以上分级样本中的阳性检出比例(44.0%,11/25)明显高于菌载量极低级及以下标本的阳性检出比例(11.8%,4/34),差异有统计学意义(χ^(2)=7.896,P=0.005)。本研究所选用的MTB抗原-胶体金检测试剂最适pH值范围为6~9。胃液模拟样本经3%或4%的NaOH处理后,调节pH值至7~9时需用PBS缓冲液(pH=6.8)稀释至少10或14倍,而痰液模拟样本经3%或4%的NaOH处理后,调节pH值至7~9时需用PBS缓冲液(pH=6.8)稀释至少12或16倍。结论:分离培养两步法的阳性检出率未优于传统培养法,可作为传统培养法的补充,推荐对难以确诊的高度可疑肺结核患儿使用该方法进行检测。此外,本研究确定了MTB抗原-胶体金检测试剂使用的最适pH值范围及用PBS缓冲液(pH=6.8)调节NaOH-样本混合液pH值需要的稀释比例,可为规范MTB的分离培养提供科学依据。 展开更多

关键词 儿童 结核 肺 胃液 诊断技术和方法

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SiO_(2)改性BaSO_(4)制备及对PVC力学性能的影响 被引量：1

4

作者 杨强 樊国栋 +4 位作者 谢贤菲 王瑞欢 屈佳 龚伟 崔孝炜 《非金属矿》 CSCD 北大核心 2021年第4期30-33,共4页

基于溶胶-凝胶法,合成SiO_(2)改性BaSO_(4)复合材料,利用傅里叶红外光谱(FT-IR)仪、X射线衍射(XRD)仪、扫描电镜(SEM)和粒度分析仪等对其结构与性能进行表征,分析改性BaSO_(4)复合材料的粒径分布、沉降时间和活化度,并将其添加在PVC中,... 基于溶胶-凝胶法,合成SiO_(2)改性BaSO_(4)复合材料,利用傅里叶红外光谱(FT-IR)仪、X射线衍射(XRD)仪、扫描电镜(SEM)和粒度分析仪等对其结构与性能进行表征,分析改性BaSO_(4)复合材料的粒径分布、沉降时间和活化度,并将其添加在PVC中,进一步研究改性BaSO_(4)对PVC基材力学性能的影响。结果表明,SiO_(2)复合量为1.4~1.6 mol时,改性BaSO_(4)复合材料的粒径分布较窄且均匀,与未改性样品相比,当SiO_(2)复合量为1.4 mol时,其沉降时间和活化度达到最大值27.8 h和81.8%,分别提高25.5 h和48.5百分点。改性BaSO_(4)有助于提高PVC基材力学性能,当添加量为10%时,改性BaSO_(4)/PVC复合材料综合力学性能最佳,撕裂强度可达156.78 MPa。 展开更多

关键词 BaSO_(4) PVC 撕裂强度 改性

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探针导向重组酶介导等温扩增法检测MTB rpoB基因突变的应用价值

5

作者 李鑫娜 申辛欣 +9 位作者 王瑞白 段素霞 张瑞卿 王瑞欢 白雪丁 凡国豪 王金荣 高源 陈子巍 马学军 《中国防痨杂志》 CAS CSCD 2020年第5期481-488,共8页

目的建立可快速检测MTB rpoB基因516位点突变的探针导向重组酶介导等温扩增法(probedirected recombinase amplification,PDRA)。方法设计4条探针[1条野生型探针(P-W)及3条突变型探针(P-GGC、P-GTC、P-TAC)]和1条共同的下游引物,分别构... 目的建立可快速检测MTB rpoB基因516位点突变的探针导向重组酶介导等温扩增法(probedirected recombinase amplification,PDRA)。方法设计4条探针[1条野生型探针(P-W)及3条突变型探针(P-GGC、P-GTC、P-TAC)]和1条共同的下游引物,分别构建TB-516-W、TB-516-GGC、TB-516-GTC和TB-516-TAC4种检测体系,在39℃条件下恒温扩增40 min。通过阳性阈值时间判定MTB rpoB基因516位点是否发生突变及其突变类型;通过同一探针检测对应的重组质粒确定该检测体系的敏感度;通过不同探针检测某一种重组质粒,根据阳性阈值时间确定该检测体系的特异度。应用建立的PDRA方法检测6株利福平耐药MTB菌株和35份MTB培养阳性的痰标本,并与一代测序结果进行比较。结果 4种检测体系检测对应重组质粒的敏感度为1000拷贝/μl。4种检测体系的特异度良好,探针与靶序列完全匹配时,阳性阈值时间早;探针与靶序列不完全匹配时,阳性阈值时间晚,具有稳定的阳性阈值时间差值,体系TB-516 W,TB-516-GGC,TB-516-GTC和TB-516-TAC的阳性阈值时间差值分别为7.0、5.8、10.0、7.0 min。PDRA检测6株MTB利福平耐药菌株和35份MTB培养阳性痰标本的结果与测序结果一致。结论本研究初步建立了可应用于MTB利福平耐药rpoB基因516位点突变检测的PDRA方法,该方法检测敏感度高,特异度好,具有一定的实验室应用价值。 展开更多

关键词 核酸扩增技术 重组酶 结核分枝杆菌 基因

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结核分枝杆菌及结核疫苗新作用方式的研究

6

作者 王瑞欢 李马超 +2 位作者 李桂莲 刘海灿 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期797-804,共8页

结核病主要是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,是严重威胁人类健康的重大公共卫生问题。目前,卡介苗仍是唯一被批准应用于人体的预防性疫苗,其对婴幼儿具有较好的保护效果,但对成年人的保护作用存在巨大争议。巨噬细胞和树突状细胞吞噬... 结核病主要是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,是严重威胁人类健康的重大公共卫生问题。目前,卡介苗仍是唯一被批准应用于人体的预防性疫苗,其对婴幼儿具有较好的保护效果,但对成年人的保护作用存在巨大争议。巨噬细胞和树突状细胞吞噬结核分枝杆菌之后,启动适应性免疫应答,活化的效应性CD4(+)和CD8(+)T细胞通过释放细胞因子和细胞毒作用发挥免疫效应。然而,结核分枝杆菌可通过抑制吞噬溶酶体形成、改变代谢途径、抑制抗原提呈等作用发生免疫逃逸,使其在宿主体内长期存在。近年来,随着多组学的发展,针对结核分枝杆菌感染免疫机制的研究有了一定的进展,但通过接种疫苗对结核病进行防控的结果依然不尽人意。本文重点探讨了结核分枝杆菌和宿主之间的免疫反应以及逃逸机制,并概述了结核疫苗的研发情况,有助于我们利用结核菌感染的免疫学知识对结核病疫苗进行快速高效的研发。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 免疫机制 免疫逃逸 疫苗

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基于深度学习的磁环表面缺陷检测算法

7

作者 罗菁 王瑞欢 《人工智能与机器人研究》 2020年第3期194-200,共7页

在磁环的生产制造过程中,常常由于生产环境、制造工艺等因素,难免会使磁环表面出现各种类型的缺陷。针对传统人工检测低效、耗时、检测精度低的缺点,本文提出了一种基于YOLOv3的磁环表面缺陷检测方法。实验结果表明,YOLOv3的平均识别精... 在磁环的生产制造过程中,常常由于生产环境、制造工艺等因素,难免会使磁环表面出现各种类型的缺陷。针对传统人工检测低效、耗时、检测精度低的缺点,本文提出了一种基于YOLOv3的磁环表面缺陷检测方法。实验结果表明,YOLOv3的平均识别精度达到了96.19%,单张图片检测速度达到了24.46 ms,该方法在磁环缺陷检测上有一定的先进性和有效性。 展开更多

关键词 缺陷检测 深度学习 磁环 YOLOv3

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结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白免疫小鼠效果初步评价 被引量：2

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作者 栾秀丽 范雪亭 +9 位作者 王瑞欢 李马超 于晋杰 钱程宇 曹斌 赵秀芹 刘志广 刘海灿 李桂莲 万康林 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期589-596,共8页

目的融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpo... 目的融合表达和纯化结核分枝杆菌(MTB)CFP10-ESAT6(CE),初步评价免疫效果。方法构建pET32a(+)-CE重组质粒,E.coli BL21(DE3)中融合表达,Ni-NTA层析纯化。用CE加铝佐剂,50μg CE/只/次,分3次免疫BALB/c小鼠。ELISA测定血清IgG抗体;ELISpot与Luminex检测细胞因子,进行MTB体外生长抑制试验。卡介苗(BCG)为阳性对照。结果CE免疫小鼠,能诱导产生高效价的IgG、IgG1和IgG2a,且IgG1(t=19.1,P<0.0001)和IgG2a(t=8.7,P<0.0001)抗体水平均高于BCG组。CE组与BCG组诱导产生的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)数量差异无统计学意义(t=0.4,P>0.05),但诱导分泌IL-4的SFC数量高于BCG组(t=8.0,P<0.0001)。CE组诱导分泌GM-CSF(t=8.4,P<0.05)、IL-6(t=8.3,P<0.05)、IL-10(t=2.5,P<0.05)和IL-4(t=7.0,P<0.05)均高于BCG组,而CE组诱导分泌IFN-γ(t=1.4,P>0.05)、TNF-α(t=1.8,P>0.05)、IL-2(t=2.0,P>0.05)、IL-12(t=0.9,P>0.05)和IL-17(t=1.3,P>0.05)均与BCG组相似,差异无统计学意义。CE组小鼠脾细胞的MTB体外生长抑制结果与BCG组相似(t=0.8,P>0.05)。结论CE免疫小鼠可诱导较强的Th1与Th2混合型免疫反应,且有较强的体外抑制MTB生长的能力,表明CE具有良好的结核疫苗研制应用价值。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 培养滤液蛋白10 早期分泌抗原靶6 重组融合蛋白CE 疫苗

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俄乌冲突后俄北极经济开发“东方化”调整探析 被引量：1

9

作者 王瑞欢 吕慧铭 《海洋经济》 2023年第1期71-78,共8页

俄罗斯作为2021-2023年北极理事会轮值主席国,计划利用主席国有利契机,为其北极开发工作拓展国际合作平台,但2022年2月爆发的俄乌冲突却对北极地区带来了一系列的外溢效应,并迫使俄罗斯对其北极开发工作做出“东方化”调整。本文通过梳... 俄罗斯作为2021-2023年北极理事会轮值主席国,计划利用主席国有利契机,为其北极开发工作拓展国际合作平台,但2022年2月爆发的俄乌冲突却对北极地区带来了一系列的外溢效应,并迫使俄罗斯对其北极开发工作做出“东方化”调整。本文通过梳理俄罗斯出任北极理事会轮值主席国前夕发布的一系列新北极政策,分析冲突爆发后俄政府因西方制裁而对其油气开发、航道建设等北极开发工作做出的“向东看”战略调整,结合俄罗斯北极开发与治理需求,提出在该新形势下深化中俄北极合作的相关建议。 展开更多

关键词 俄罗斯 新北极政策 俄乌冲突 中俄北极合作

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催化裂化催化剂总碳含量的测定影响因素

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作者 王瑞欢 《化工管理》 2020年第15期43-44,共2页

催化裂化装置催化剂的总碳含量的测定,执行GB/T223.86,选用红外碳含量测定仪。文章列举分析中常见的"试剂、引弧、氧气、样品、器具"共五类准确性影响因素,分析各个影响因素对分析数据的影响、解决方法,达到提高分析准确性的... 催化裂化装置催化剂的总碳含量的测定,执行GB/T223.86,选用红外碳含量测定仪。文章列举分析中常见的"试剂、引弧、氧气、样品、器具"共五类准确性影响因素,分析各个影响因素对分析数据的影响、解决方法,达到提高分析准确性的目的。 展开更多

关键词 总碳含量 试剂 氧气 后控 样品 器具

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催化裂化催化剂微反活性测定仪异常数据分析

11

作者 王瑞欢 《化工管理》 2020年第14期39-40,共2页

催化裂化催化剂的微反活性试验,出现异常数据的原因很多。文章分析、归纳了"样品代表性、进料油重、反应器、液收系统、色谱分析"等五类常见原因,提出相应的解决方法,能够达到提高分析准确性的目的。

关键词 样品代表性 进料油重 反应器 液收系统 色谱分析

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微量水分的测定

12

作者 王瑞欢 《化工管理》 2014年第24期115-115,共1页

本文总结了4种微量水分的方法,主要从基本原理、适用范围、如何提高分析准确性以及原理应用等方面介绍了这四种方法。并对各种方法中准确性影响因素做了进一步分析。

关键词 微量水分 准确性 应用

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影响运动黏度测定的因素

13

作者 庞敏 王瑞欢 《石化技术》 CAS 2020年第5期146-146,102,共2页

本文分析了设备材料对石油产品运动黏度测定的影响,具体如温度是否恒定、电子秒表是否准确、黏度计系数是否合适对石油产品运动黏度测定的影响;人员操作对石油产品运动黏度测定的影响,具体如黏度计是否洁净、样品是否经过过滤、毛细管... 本文分析了设备材料对石油产品运动黏度测定的影响,具体如温度是否恒定、电子秒表是否准确、黏度计系数是否合适对石油产品运动黏度测定的影响;人员操作对石油产品运动黏度测定的影响,具体如黏度计是否洁净、样品是否经过过滤、毛细管黏度计摆放的位置、恒温时间、试样量等对石油产品运动黏度测定的影响。 展开更多

关键词 运动黏度 石油产品 影响因素

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3型腺病毒免提取核酸重组酶介导的等温扩增实时荧光检测方法的建立及应用 被引量：5

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作者 王瑞欢 张益 +10 位作者 向星宇 湛志飞 李鑫娜 申辛欣 朱贞 张瑞卿 白雪丁 段青霞 凡国豪 张红 马学军 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2019年第6期653-657,共5页

目的 建立3型腺病毒(human adenovirus 3,HAdV-3)免提取核酸的重组酶介导的等温扩增(recmbinase acid amplification,RAA)实时荧光检测方法。方法 根据HAdV-3基因保守序列分别设计1对引物和1条探针,通过对免提核酸的条件摸索和优化,建立... 目的 建立3型腺病毒(human adenovirus 3,HAdV-3)免提取核酸的重组酶介导的等温扩增(recmbinase acid amplification,RAA)实时荧光检测方法。方法 根据HAdV-3基因保守序列分别设计1对引物和1条探针,通过对免提核酸的条件摸索和优化,建立1种免提取核酸,重组酶介导的等温扩增实时荧光检测方法;通过对培养的毒株进行系列稀释,免提取核酸分析该方法的灵敏度;通过检测其他呼吸道病毒的原始样本,评价该方法的特异性;并检测HAdV-3临床样本,与传统的提核酸实时荧光定量PCR方法进行比较。结果 本研究建立的免提取核酸实时荧光RAA方法对10倍系列稀释的HAdV-3毒株进行检测,和实时荧光定量PCR方法相比,灵敏度相当,对应的最低浓度稀释样本的Ct值为36.87,对常见其他型别的呼吸道病毒检测无交叉反应。两种方法对56例HAdV-3阳性临床样本同时检测,结果完全一致。结论 本文首次报道了免提取核酸的实时荧光RAA检测HAdV-3的方法,该方法具有较高的灵敏度和特异性,适合应用于临床实验室及基层单位快速检测HAdV-3。 展开更多

关键词 腺病毒3型 免提取核酸 重组酶介导的等温扩增 检测

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人腺病毒分子生物学分型检测方法的研究进展 被引量：9

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作者 王瑞欢 陈丽丽 +1 位作者 马学军 张红 《实用预防医学》 CAS 2021年第3期382-384,F0003,共4页

人腺病毒(human adenovirus,HAdV)是引起呼吸道感染的常见病原体,不同型别的组织嗜性不同,由其感染所引起疾病的严重程度也不同。该病毒的感染所致疾病仅靠临床表现很难确定病毒的类型,因此,HAdV的分型鉴定对其所引起疾病的诊断与治疗... 人腺病毒(human adenovirus,HAdV)是引起呼吸道感染的常见病原体,不同型别的组织嗜性不同,由其感染所引起疾病的严重程度也不同。该病毒的感染所致疾病仅靠临床表现很难确定病毒的类型,因此,HAdV的分型鉴定对其所引起疾病的诊断与治疗具有较大的帮助,本文综述了用于该病毒分型检测的分子生物学手段,具有一定的临床意义。 展开更多

关键词 人腺病毒 分子生物学 分型

原文传递

新疆维吾尔自治区南疆地区结核分枝杆菌ESX-4分泌系统基因突变特征分析

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作者 杨淑柳 向煜 +11 位作者 王泉 武娅宁 肖开提·米吉提 王瑞欢 高晓平 赵秀芹 李马超 王冕 万康林 李桂莲 刘海灿 袁秀琴 《疾病监测》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期597-602,共6页

目的比较不同家系及耐药性结核分枝杆菌临床分离株ESX-4分泌系统7个毒力基因突变的差异,探讨临床菌株中ESX-4基因的多态性特征。方法纳入新疆维吾尔自治区南疆地区807株结核分枝杆菌临床株,进行全基因组测序。利用TBprofiler软件及C++... 目的比较不同家系及耐药性结核分枝杆菌临床分离株ESX-4分泌系统7个毒力基因突变的差异,探讨临床菌株中ESX-4基因的多态性特征。方法纳入新疆维吾尔自治区南疆地区807株结核分枝杆菌临床株,进行全基因组测序。利用TBprofiler软件及C++脚本程序检测不同临床菌株ESX-4基因的突变、家系和药物敏感性结果。对数据进行描述性分析、χ^(2)检验及logistics回归分析。结果在807株结核分枝杆菌中共发现119个单核苷酸多态性位点和12种不同的插入/缺失。非同义突变率排在前3位的基因是Rv3446c(43.12%)、esxU(40.02%)以及eccC4和eccD4基因(均为23.30%)。家系中Lineage 2(L2)占62.70%(506/807),L3占19.46%(157/807),L4占17.84%(144/807);敏感株占39.41%(318/807),耐药株占60.59%(489/807);利福平耐药占34.08%(275/807),异烟肼耐药占28.50%(230/807),喹诺酮类耐药占12.14%(98/807)。L3家系中eccC4和esxT基因的突变率均显著高于L2或L4家系。多因素logistics回归模型分析发现:L2家系和异烟肼耐药是esxU和Rv3446c基因发生突变的危险因素[均比值比(OR)>1,均P<0.001];多耐药则是Rv3446c突变的又一危险因素[OR=1.94,95%置信区间(CI):1.12~3.37]。结论本研究发现了结核分枝杆菌ESX-4分泌系统中与L2、L3家系及耐药性相关的基因突变,为进一步研究结核分枝杆菌的传播、耐药和致病机制提供基础科学依据。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 ESX-4分泌系统 毒力基因 突变 基因多态性

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两步PCR介导的Red重组技术快速敲除鼠疫耶尔森菌sRNA及染色体大片段 被引量：4

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作者 王仁霞 刘荣娇 +4 位作者 李子微 王瑞欢 杨瑞馥 韩延平 邓仲良 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1126-1137,共12页

【目的】利用Red同源重组系统,通过二步PCR法建立一种适合鼠疫耶尔森菌s RNA和大片段染色体基因敲除的方法。【方法】第一步PCR先扩增出目的基因的上、下游同源臂(600–1000 bp)及卡那抗性盒,再以上、下游同源臂及卡那抗性盒等摩尔混合... 【目的】利用Red同源重组系统,通过二步PCR法建立一种适合鼠疫耶尔森菌s RNA和大片段染色体基因敲除的方法。【方法】第一步PCR先扩增出目的基因的上、下游同源臂(600–1000 bp)及卡那抗性盒,再以上、下游同源臂及卡那抗性盒等摩尔混合物为模板,通过融合PCR获得含上下游同源臂及卡那抗性盒的线性突变盒,再将此突变盒的PCR产物电转到含有pKD46质粒的鼠疫201菌株,在阿拉伯糖的诱导下,p KD46质粒表达Red重组酶,促使卡那抗性盒替换目的基因,最后对获得的重组克隆进行PCR鉴定。【结果】本研究通过两步PCR法构建600–1000 bp的同源臂,提高了同源重组效率,并将鼠疫菌sRNA RyhB1(108 bp)和RyhB2(106 bp)和染色体大片段47-2(10.4 kb)、47-3(21.6 kb)、47-3a(9.2 kb)及47-3b(6.1 kb)成功敲除。【结论】基于Red重组系统构建的二步法突变技术,是一种简单、高效的精确修饰鼠疫菌s RNA及大片段染色体的方法,适合于鼠疫菌全基因组的基因敲除,为鼠疫菌基因表达与调控、致病和毒力等研究提供有力的工具。 展开更多

关键词 鼠疫耶尔森菌 RED重组系统 SRNA 大片段染色体 基因敲除

原文传递

结核分枝杆菌多组分蛋白候选疫苗EPDPA015f和EPDPA015m的免疫作用初步评价

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作者 王瑞欢 范雪亭 +8 位作者 钱程宇 曹滨 于晋杰 李马超 李桂莲 赵秀芹 栾秀丽 刘海灿 万康林 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期294-303,共10页

目的初步评价新型结核融合型多组分蛋白候选疫苗EPDPA015f和混合型多组分蛋白候选疫苗EPDPA015m的免疫原性和有效性, 为研制结核疫苗提供新的抗原组合。方法将构建和表达的EPDPA015f和EPDPA015m蛋白与铝佐剂混合, 采用皮下多点的方式对... 目的初步评价新型结核融合型多组分蛋白候选疫苗EPDPA015f和混合型多组分蛋白候选疫苗EPDPA015m的免疫原性和有效性, 为研制结核疫苗提供新的抗原组合。方法将构建和表达的EPDPA015f和EPDPA015m蛋白与铝佐剂混合, 采用皮下多点的方式对6周龄BALB/c小鼠进行3次免疫, 间隔为10 d, 每次50 μg/只。末次免疫10 d后采集血液和脾脏样本。采用酶联免疫吸附试验、多重微球技术、酶联免疫斑点法检测血清抗体滴度、细胞因子分泌水平;采用体外结核分枝杆菌生长抑制试验检测小鼠脾细胞体外抑制结核分枝杆菌生长的能力。多组间比较采用单因素方差分析, 两组间比较采用t检验。结果 EPDPA015f和EPDPA015m均可诱导产生多种高水平的细胞因子和较高滴度的IgG抗体。与佐剂组相比, EPDPA015f组诱导产生Th1(IL-2、TNF-α、IFN-γ)、Th2(IL-4、IL-6、IL-10)、Th17(IL-17)型细胞因子及其他促炎细胞因子(GM-CSF、IL-12)的差异有统计学意义(P均<0.05);EPDPA015f组诱导产生的IgG抗体滴度高达1∶4×10^(6)。体外结核分枝杆菌生长抑制试验结果显示, PBS组、佐剂组、EPDPA015f组和EPDPA015m组的菌落数(lgCFU)分别为3.46±0.11、3.51±0.06、2.98±0.09和3.19±0.08;其中EPDPA015f组的菌落数最少, 与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.001和P<0.01)。结论 EPDPA015f引起较为全面且高水平的细胞免疫和体液免疫应答, 并表现出较优的体外分枝杆菌抑制能力, 具有作为预防型疫苗或加强型疫苗的潜力。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 多组分蛋白 T细胞表位 疫苗 免疫学评价

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2017年5月至12月河北省儿童病毒性脑炎病原学研究 被引量：10

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作者 樊涛 韩彦洁 +11 位作者 张瑞卿 于盼辉 赵莉 齐菊菊 李鑫娜 王瑞欢 孙一硕 赵剑 胡川泽 王佶 孙素真 马学军 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期275-279,共5页

目的了解河北省儿童病毒性炎病原学特点。方法随机收集2017年5月2017年12月河北省儿童医院神经内科住院诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液样本399例,采用结合自动化工作站的实时荧光定量PCR方法和Sanger测序方法检测脑脊液中的病毒核酸。运... 目的了解河北省儿童病毒性炎病原学特点。方法随机收集2017年5月2017年12月河北省儿童医院神经内科住院诊断为病毒性脑炎患儿的脑脊液样本399例,采用结合自动化工作站的实时荧光定量PCR方法和Sanger测序方法检测脑脊液中的病毒核酸。运用SPSS21. 0统计分析软件结合临床资料进行分析。不同月份EV引起的脑炎的感染率比较,采用行x列表卡方检验法进行分析。不同病毒引起的脑炎患者的MRI和脑电图阳性率比较采用Fisher确切概率检验法进行分析。不同病毒合并感染阳性率的比较采用Fisher确切概率进行分析。结果399例样本中80例阳性,检出阳性率20.05%,包括肠道病毒(Entervirus, EV ) 22例,甲型流感病毒(Influenza A virus, FluA )4 例,腮腺炎病毒(Mumps virus, MuV )3 例,单纯疱疹 1 型(Herpes simplex virus 1,HSV1)2 例,单纯疱疹 2 型(Herpes simplex virus 2, HSV2) 1 例,EB 病毒(Epstein - Barr virus, EBV ) 4 例,巨细胞病毒(Cytomegalovirus, CMV) 7 例,带状疱疹病毒(Varicella-zoster Virus, VZV) 7 例,腺病毒(Adenovirus,AdV)8例,人疱疹病毒6型(Human herpesvirus 6,HHV6)14例。阳性样本中8例为合并感染,分别为EV 合并 HHV6 3 例,EV 合并乙性脑炎病毒(Japanese encephalitis virus, JEV, HHV2 合并 AdV 1 例,FluA合并HHV6 1例,MuV合并HHV6 1例,HSV1合并VZV 1例。河北省儿童EV病毒性脑炎高发于5月、6月(P = 0.016)。 HHV6病毒脑炎较非HHV6病毒脑炎易合并感染(P = 0.016);不同病毒引起的脑炎患者的MRI和脑电图阳性率均无统计学差异(P>0.05)。结论 EV是河北省儿童病毒性脑炎最常见的病原。FluA引起的脑炎在临床不容被忽视。 展开更多

关键词 病毒性脑炎 病原谱 自动化工作站 实时荧光定量PCR

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有机氯(微库仑法)测定的准确性影响因素 被引量：2

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作者 王瑞欢 庞敏 《中国石油和化工标准与质量》 2020年第4期62-63,共2页

测定石油产品中总氯的含量,大多采用微库仑法,本文列举分析中常见的"样品代表性、燃烧管、脱水瓶、电解池、检测器积分参数"共五类准确性影响因素,通过对比试验,分析各个影响因素对分析数据的影响、解决方法,达到提高分析准... 测定石油产品中总氯的含量,大多采用微库仑法,本文列举分析中常见的"样品代表性、燃烧管、脱水瓶、电解池、检测器积分参数"共五类准确性影响因素,通过对比试验,分析各个影响因素对分析数据的影响、解决方法,达到提高分析准确性的目的。 展开更多

关键词 有机氯 样品代表性 燃烧管 电解池 脱水瓶 积分参数

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