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抗蓝舌病病毒VP6和VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:3
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作者 魏鹏 孙恩成 +8 位作者 刘霓红 杨涛 徐青元 秦永丽 赵晶 冯瑜菲 王文世 张翠云 吴东来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期412-414,共3页
为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型BTV(BTV1)免疫BALB/c鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTV1的MAb的杂交瘤细胞株(2B10、3D4和4H8)。利用表... 为制备针对蓝舌病病毒(BTV)的单克隆抗体(MAb),本研究利用血清型1型BTV(BTV1)免疫BALB/c鼠,将其脾淋巴细胞与SP2/0进行融合,并用BTV1包被ELISA板,通过间接ELISA方法筛选出3株稳定分泌抗BTV1的MAb的杂交瘤细胞株(2B10、3D4和4H8)。利用表达BTV1主要蛋白的真核表达重组质粒转染BHK-21后,对所制备的杂交瘤细胞株上清进行间接免疫荧光(IFA)以及western blot鉴定,结果显示:2B10和4H8与VP7蛋白反应,而3D4与VP6蛋白反应。同时,IFA鉴定结果进一步表明,3株MAb与24个血清型的BTV均可以发生反应。本研究制备的MAb为建立BTV免疫学检测方法和相关病毒蛋白的功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 蓝舌病病毒 单克隆抗体 VP6蛋白 VP7蛋白
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表达西尼罗病毒E蛋白重组腺病毒的构建及鉴定 被引量:1
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作者 张翠云 赵晶 +7 位作者 陈韬 孙恩成 刘霓红 杨涛 徐青元 王文世 魏鹏 吴东来 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期267-270,共4页
为构建表达西尼罗病毒(WNV)E蛋白的重组腺病毒,本实验将WNV的E基因克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,经PmeⅠ酶切线性化后电转化于含有人5型缺陷腺病毒的骨架的BJ5183感受态大肠杆菌中进行同源重组,构建重组质粒pAd-WNV-E;将其经Pac... 为构建表达西尼罗病毒(WNV)E蛋白的重组腺病毒,本实验将WNV的E基因克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,经PmeⅠ酶切线性化后电转化于含有人5型缺陷腺病毒的骨架的BJ5183感受态大肠杆菌中进行同源重组,构建重组质粒pAd-WNV-E;将其经PacⅠ酶切线性化后通过脂质体介导转染于人胚肾细胞Ad-293细胞,制备重组腺病毒rAd-WNV-E;经western blot以及间接免疫荧光鉴定表明WNV E蛋白在Ad-293细胞中获得有效表达。病毒滴度测定试验结果显示,该重组腺病毒与野毒型腺病毒复制能力相近。该重组腺病毒的构建为进一步研制表达WNV E蛋白的重组腺病毒的疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 西尼罗病毒 E蛋白 重组腺病毒
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洛那法尼对动物源丁型肝炎病毒作用的初步研究
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作者 李球棣 丁奕博 +1 位作者 郭虹波 王文世 《动物医学进展》 北大核心 2024年第5期56-60,共5页
研究洛那法尼(Lonafarnib,LNF)对动物源丁型肝炎病毒(Hepatitis D virus,HDV)的影响,将完善对动物源HDV的认识,为进一步探讨其潜在致病性和传播特点奠定基础。利用点突变的方法对人源HDV复制模型进行改造来模拟动物源HDV的关键结构特征... 研究洛那法尼(Lonafarnib,LNF)对动物源丁型肝炎病毒(Hepatitis D virus,HDV)的影响,将完善对动物源HDV的认识,为进一步探讨其潜在致病性和传播特点奠定基础。利用点突变的方法对人源HDV复制模型进行改造来模拟动物源HDV的关键结构特征,利用转染、抗生素筛选的方法构建模拟的动物源HDV复制细胞模型,蛋白质免疫印迹法和间接免疫荧光法检测人源HDV复制模型改造后的HDV复制与蛋白表达情况,实时荧光定量PCR检测LNF对动物源HDV复制的影响。结果表明,改造后的HDV复制模型仍能在体外高效复制,可用于模拟动物源HDV的关键特征。与未处理组相比,LNF处理人源HDV复制模型后导致了HDV RNA的积累,而LNF对改造后的HDV样病毒的复制水平无显著影响。通过上述研究发现人源HDV与动物源HDV在病毒的生命周期和药物的作用效果方面均存在较大差异。 展开更多
关键词 丁型肝炎病毒 动物源丁型肝炎病毒 洛那法尼 病毒复制
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二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003抗戊型肝炎病毒的研究
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作者 刘丹 张继凯 +2 位作者 丁晓慧 郭虹波 王文世 《动物医学进展》 北大核心 2024年第2期70-74,共5页
研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣... 研究二氢乳清酸脱氢酶抑制剂ASLAN003对戊型肝炎病毒(HEV)复制的影响,为抗HEV治疗提供新型候选药物。用带有高斯荧光素酶的HEV复制子模型研究ASLAN003是否具有抗HEV作用,实时荧光定量PCR和间接免疫荧光检测ASLAN003对HEV RNA复制以及衣壳蛋白表达的抑制作用,细胞毒性试验和间接免疫荧光计算ASLAN003的半数毒性浓度(CC_(50))和半数抑制浓度(IC_(50))。结果表明,ASLAN003在0.2~50μmol/L浓度范围内能显著抑制HEV复制子在HEK 293T和Huh7细胞内的复制;ASLAN003在1μmol/L浓度能有效抑制HEV RNA复制,使其下降50%;在0.4μmol/L的浓度能够显著抑制衣壳蛋白ORF2的表达。通过对ASLAN003的细胞毒性和抑制HEV效果进行研究发现,其CC_(50)为294μmol/L,而IC_(50)为0.231μmol/L。说明ASLAN003能够有效抑制HEV复制,提示其可作为潜在抗病毒药物。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 二氢乳清酸脱氢酶抑制剂 病毒复制 抗病毒药物
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加强生态建设实现畜牧业持续发展 被引量:1
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作者 王文世 侯之莹 《当代畜禽养殖业》 2001年第3期9-10,共2页
国家实施西部大开发战略,是一项长期的经济建设方针,是强国富民的重大举措,是实现第三个奋斗目标的英明决策。只有大开发、大建设,才有大发展。畜牧业是我区国民经济的基础产业和优势产业。改革开放以来,我区的畜牧业取得了举世瞩目的... 国家实施西部大开发战略,是一项长期的经济建设方针,是强国富民的重大举措,是实现第三个奋斗目标的英明决策。只有大开发、大建设,才有大发展。畜牧业是我区国民经济的基础产业和优势产业。改革开放以来,我区的畜牧业取得了举世瞩目的伟大成就,但仍处于由传统的畜牧业向现代化畜牧业过渡的初级阶段,没有彻底摆脱靠天养畜的被动局面。 展开更多
关键词 西部大开发 生态环境建设 畜牧业 可持续发展 草原双权一制 以草定畜 依法治牧 牧草种子工程
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草原生态建设是西部大开发的重要项目
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作者 王文世 侯莹 《当代畜禽养殖业》 2000年第10期8-9,共2页
加快生态环境建设,走可持续发展的道路,是西部大开发的重要内容。草原是我区生态的主体,草原生态建设将成为我区实施西部大开发战略的重中之重。草业生产是畜牧业发展的基础,没有草就没有畜,没有草原建没就没有畜牧业的生存与发展。围... 加快生态环境建设,走可持续发展的道路,是西部大开发的重要内容。草原是我区生态的主体,草原生态建设将成为我区实施西部大开发战略的重中之重。草业生产是畜牧业发展的基础,没有草就没有畜,没有草原建没就没有畜牧业的生存与发展。围绕畜牧业产业结构的调整,调整草业结构,加强生态环境保护、建设、改良草场,建设草原,防风固沙,绿化山川,恢复植被,防止水土流失,树立以草为业,以草兴牧,以草富民的新观念,实施增草增畜增收,是内蒙古草原畜牧业发展的必然。 展开更多
关键词 草原建设 生态环境建设 西部大开发 可持续发展 规划 以草定畜 行政执法 种子工程
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颍东区:“六廉”并用 监督“一把手”
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作者 王文世 徐鑫 《江淮》 2008年第7期35-35,共1页
阜阳市颍东区不断创新对一把手的监督措施,近两年来,建立健全了"六廉"并用法,收到了较好的成效。一是记廉。区纪委出台廉政日志制度,规定各乡镇街道一把手和区直单位一把手要把工作笔记与廉政日志相结合,对个人重大事项报告... 阜阳市颍东区不断创新对一把手的监督措施,近两年来,建立健全了"六廉"并用法,收到了较好的成效。一是记廉。区纪委出台廉政日志制度,规定各乡镇街道一把手和区直单位一把手要把工作笔记与廉政日志相结合,对个人重大事项报告情况。 展开更多
关键词 党风廉政建设责任制 廉政档案 领导干部 纪委 单位 测试成绩 东区 个人 日志 问题
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