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SCC-3737℃驯化的稳定性及其在常见病毒培养中的应用
1
作者 巩金鹏 赵颖 +7 位作者 陈雪兰 蔺凌云 姚嘉赟 穆雪姣 周可欣 王丛旭 沈锦玉 潘晓艺 《水产学报》 北大核心 2025年第3期233-242,共10页
【目的】建立能快速增殖且对鳜源常见病毒敏感的鳜鱼细胞系。【方法】利用已建立的鳜脊髓组织细胞系SCC,采用梯度血清逐步驯化的方式,建立一个连续细胞系SCC-37,分析该连续细胞系的来源、支原体污染、生长特性和冻存后细胞活力,评估其... 【目的】建立能快速增殖且对鳜源常见病毒敏感的鳜鱼细胞系。【方法】利用已建立的鳜脊髓组织细胞系SCC,采用梯度血清逐步驯化的方式,建立一个连续细胞系SCC-37,分析该连续细胞系的来源、支原体污染、生长特性和冻存后细胞活力,评估其对传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)、鳜虹彩病毒(SCRaV)和鳜弹状病毒(SCRV)的敏感性。【结果】该细胞系SCC-37已连续培养30代,稳定的生长条件为L-15+10%NBCS、37℃培养;通过鳜28S rRNA基因分析其来源于鳜,支原体检测证实SCC-37无支原体污染;病毒敏感性结果显示,ISKNV、SCRaV和SCRV可在SCC-37中稳定增殖和传代,培养的病毒滴度为103.4~109.6TCID50/mL,电镜观察可见大量病毒颗粒。【结论】新驯化的SCC-37为分离、鉴定和增殖病毒以及疫苗制备提供了重要工具。 展开更多
关键词 鳜 鳜脊髓组织细胞系 37℃驯化 生长特性 敏感性
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精焊焊缝纠偏系统的研制
2
作者 王丛旭 《焊管》 2011年第2期30-32,共3页
分析了目前螺旋埋弧焊管精焊生产线上所用内外焊焊缝激光跟踪系统存在的问题。介绍了精焊焊缝纠偏系统的工作原理和基于PROFIBUS工业总线可编程控制器PLC在内外焊焊缝激光跟踪系统中的应用,给出了系统架构和系统功能。描述了该系统硬件... 分析了目前螺旋埋弧焊管精焊生产线上所用内外焊焊缝激光跟踪系统存在的问题。介绍了精焊焊缝纠偏系统的工作原理和基于PROFIBUS工业总线可编程控制器PLC在内外焊焊缝激光跟踪系统中的应用,给出了系统架构和系统功能。描述了该系统硬件电路的设计和系统控制程序的设计及调试。试运行结果表明,该系统可靠性高,控制功能较为完善,操作方便,保障了精焊内外焊缝激光跟踪系统的正常运行。 展开更多
关键词 螺旋埋弧焊管 焊缝 激光跟踪系统 PLC 纠偏
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体外传代对大口黑鲈蛙虹彩病毒毒株毒力的影响 被引量：1
3
作者 王丛旭 潘晓艺 +5 位作者 周可欣 穆雪娇 姚嘉赟 蔺凌云 赵建华 沈锦玉 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期623-629,共7页
为研究不同代次大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)的病毒特性变化及毒力差异,采用攻毒试验、qPCR、TCID 50及二代测序的方法,对LMBV分离株(LMBV-ZJDSS)F5、F35和F65进行致病性、组织中病毒载量变化、病毒滴度和不同... 为研究不同代次大口黑鲈蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)的病毒特性变化及毒力差异,采用攻毒试验、qPCR、TCID 50及二代测序的方法,对LMBV分离株(LMBV-ZJDSS)F5、F35和F65进行致病性、组织中病毒载量变化、病毒滴度和不同代次病毒基因组测序,在LMBV全基组中筛选出4个毒力基因,并对不同地区毒株的毒力基因进行分析。结果表明:攻毒浓度为108.5 TCID 50/mL时,F5、F35和F65代毒株15 d内引起大口黑鲈(Micropterus salmoides)的死亡率分别为60%、25%和5%;F65代毒株最早产生细胞病变效应(cytopathic effect,CPE);大口黑鲈肝脏、脾脏和肠的病毒载量较高,不同代次毒株在各组织中均有分布,96 h内F65代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势,48 h内F5代毒株在各器官组织的病毒载量呈上升趋势;对F5和F65代毒株的全基因组测序分析显示,E3、TNFR和ICP18基因编码区未发生突变,遗传稳定性较高,ICP46基因编码区有一处氨基酸由天冬氨酸突变为酪氨酸。研究表明,通过病毒的连续传代,病毒致细胞病变的速度加快,病毒对大口黑鲈的致病性减弱,病毒的毒力有所下降,毒力下降的原因可能是编码ICP46蛋白的氨基酸发生突变,且不同地区LMBV毒株毒力基因差异主要集中在TNFR上。 展开更多
关键词 大口黑鲈 大口黑鲈蛙虹彩病毒 体外传代 毒力基因
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超细WC和细WC/Co添加对WC-10Co硬质合金微观结构与力学性能的影响 被引量：6
4
作者 于淞百 蒋豪丽 +4 位作者 闵凡路 张海龙 王丛旭 姚占虎 张建峰 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第7期136-145,共10页
在粒径为0.5μm的超细碳化钨(WC)粉体表面包覆钴(Co)纳米颗粒获得细WC/Co,将细WC/Co、粗WC和Co粉通过球磨混合均匀,压制成型后在1420℃下真空烧结1 h,得到WC-10Co硬质合金。借助扫描电子显微镜、透射电子显微镜、万能试验机等对比研究细... 在粒径为0.5μm的超细碳化钨(WC)粉体表面包覆钴(Co)纳米颗粒获得细WC/Co,将细WC/Co、粗WC和Co粉通过球磨混合均匀,压制成型后在1420℃下真空烧结1 h,得到WC-10Co硬质合金。借助扫描电子显微镜、透射电子显微镜、万能试验机等对比研究细WC/Co和超细WC对WC-10Co硬质合金微观形貌和力学性能的影响。结果表明:相比于超细WC,细WC/Co促进合金的致密化,并形成双晶结构。添加细WC/Co和超细WC制备的硬质合金的平均晶粒度分别为2.18μm和3.57μm。细WC/Co的添加会降低晶粒生长速度并抑制细晶完全溶解,而粗晶通过缺陷辅助生长及溶解-析出生长机制生长为表面阶梯状的缺角三棱柱形;硬质合金的硬度和断裂韧度得到提升,二者分别为1131HV 30和22.1 MPa·m^(1/2),而在1131HV 30同等硬度下,其断裂韧度比线性拟合的断裂韧度高27.7%。机理分析认为,超细WC的添加会导致异常晶粒产生,不利于性能;而细WC/Co的添加能够同时形成双晶结构和均匀的钴相分布结构,降低晶粒缺陷,提升综合力学性能。 展开更多
关键词 WC-10CO硬质合金 细WC/Co添加 超细WC添加 微观结构 力学性能
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基于SecA基因的鰤鱼诺卡氏菌qPCR检测方法的建立及进化分析 被引量：1
5
作者 周可欣 潘晓艺 +6 位作者 蔺凌云 黄雷 穆雪姣 王丛旭 姚嘉赟 劳顺健 沈锦玉 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1553-1560,共8页
为对诺卡氏菌病进行快速早期诊断,建立了鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)TaqMan qPCR检测方法。以鰤鱼诺卡氏菌的管家基因SecA为靶标设计引物和探针,对反应条件进行优化,制作标准曲线,进行灵敏性、重复性和特异性测试,并将建立的方法... 为对诺卡氏菌病进行快速早期诊断,建立了鰤鱼诺卡氏菌(Nocardia seriolae)TaqMan qPCR检测方法。以鰤鱼诺卡氏菌的管家基因SecA为靶标设计引物和探针,对反应条件进行优化,制作标准曲线,进行灵敏性、重复性和特异性测试,并将建立的方法应用于临床样品的检测。结果表明,优化后,引物和探针终浓度分别为0.3和0.1μmol/L,退火延伸温度60℃时,qPCR在9.85×1010—9.85×100copies内呈良好的线性关系,灵敏度最高达9.85 copies;重复性实验结果显示,组间和组内变异系数均小于1%;特异性结果表明,对无乳链球菌、弗氏柠檬酸杆菌和维氏气单胞菌等13种病菌均无扩增曲线;临床对42份大口黑鲈样品进行检测,结果表明,qPCR检出率比普通PCR提高14.24%;对发病大口黑鲈的组织及结节部位检测显示,结节部位菌载量大幅高于非结节部位,最高相差1000倍;SecA基因分析结果显示,SecA基因在传代中和种内高度保守,种间具有一定的离散性,是个很好的用于诺卡氏菌种鉴定的靶基因。研究建立的鰤鱼诺卡氏菌qPCR检测方法灵敏性高、特异性强、重复性好,可用于对鰤鱼诺卡氏菌病的早期诊断和定量检测,为诺卡氏菌病的早诊断早治疗提供了有效手段。 展开更多
关键词 鰤鱼诺卡氏菌 qPCR 诺卡氏菌病 大口黑鲈
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整体硬质合金刀具表面缺陷非破坏检测方法
6
作者 罗文宣 李亚亭 +1 位作者 薄海青 王丛旭 《理化检验（物理分册）》 CAS 2006年第2期78-81,共4页
针对整体硬质合金刀具磨削裂纹等表面缺陷的无损检测,重点分析和讨论了后乳化型荧光渗透探伤法及其在整体硬质合金刀具质量保障技术领域中的应用情况,并确定了刀具的荧光渗透检测工艺流程和工艺参数。最后对整体硬质合金刀具磨削裂纹等... 针对整体硬质合金刀具磨削裂纹等表面缺陷的无损检测,重点分析和讨论了后乳化型荧光渗透探伤法及其在整体硬质合金刀具质量保障技术领域中的应用情况,并确定了刀具的荧光渗透检测工艺流程和工艺参数。最后对整体硬质合金刀具磨削裂纹等表面缺陷的形态分布规律进行了归纳和分析。 展开更多
关键词 硬质合金刀具 磨削裂纹 灵敏度 荧光渗透探伤 亲水性 后乳化 漏检
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烟台地区免费开放城市公园发展现状分析
7
作者 马雁语 张帆 王丛旭 《风景名胜》 2020年第6期0171-0171,0173,共2页
公园是现代城市居民观光休闲和群众文化活动的重要场所,公园免费开放是城市发展、社会进步的必然趋势。烟台作为山东半岛的中心城市,偎依在大海的怀抱,市内公园众多。本文以烟台地区公园为例分析当前城市公园免费开放的现状和问题以及... 公园是现代城市居民观光休闲和群众文化活动的重要场所,公园免费开放是城市发展、社会进步的必然趋势。烟台作为山东半岛的中心城市,偎依在大海的怀抱,市内公园众多。本文以烟台地区公园为例分析当前城市公园免费开放的现状和问题以及对策。 展开更多
关键词 城市公园 烟台 免费开放 现状
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