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血小板lncRNA在肺腺癌早期筛查中的生物标志物初步研究 被引量：1
1
作者 熊博雯 尹兴 +1 位作者 罗怀超 刘鱼 《中国输血杂志》 CAS 2024年第3期283-289,共7页
目的探究血小板长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)早期筛查中作为生物标志物的诊断价值。方法对包含LUAD患者和健康对照者血小板RNA数据的GSE183635和GSE89843数据集做差异分析,将两数据集... 目的探究血小板长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)在肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)早期筛查中作为生物标志物的诊断价值。方法对包含LUAD患者和健康对照者血小板RNA数据的GSE183635和GSE89843数据集做差异分析,将两数据集的差异表达lncRNA(differentially expressed lncRNA,DElncRNA)取交集。通过GEPIA2分析DElncRNA在LUAD组织与正常对照组织中的表达水平。用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测LINC01088在51名健康对照者血小板和54名LUAD患者血小板中的表达水平,并通过受试者工作(receiver operator characteristic,ROC)曲线评价诊断能力。结果GSE183635数据集差异分析得到8个DElncRNAs,GSE89843数据集差异分析得到1265个DElncRNAs,取交集后获得关键DElncRNA LINC01088。GEPIA2分析显示,LINC01088在LUAD组织中的表达水平低于正常肺组织(P<0.05)。qRT-PCR验证了血小板LINC01088在LUAD患者和早期LUAD患者中下调(P均<0.001)。血小板LINC01088对LUAD诊断的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.755,灵敏度为81.1%,特异度为67.9%;对早期LUAD诊断的AUC为0.727,灵敏度为80.0%,特异度为67.9%;血小板LINC01088与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)构成的联合诊断模型对LUAD诊断的AUC为0.807,灵敏度为89.2%,特异度为71.4%;对早期LUAD的AUC为0.770,灵敏度为86.7%,特异度为71.4%。血小板LINC01088与CEA联合诊断模型优于CEA对LUAD及早期LUAD的诊断效能(Z分别=-2.288,-2.34,P均<0.05)。结论LINC01088在LUAD患者的血小板中下调,血小板LINC01088可能是LUAD的早期筛查诊断生物标志物。 展开更多
关键词 肺腺癌 血小板 lncRNA 早期筛查 生物标志物
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不同激活条件下血小板来源的细胞外囊泡的生物学特征分析 被引量：2
2
作者 高阳 刘曹毅 +1 位作者 熊博雯 刘鱼 《中国输血杂志》 CAS 2023年第2期130-136,共7页
目的探究不同激活条件对血小板来源的细胞外囊泡(platelet-derived extracellular vesicles,PEVs)的粒径分布、浓度、蛋白质浓度和含量的影响。方法采集健康志愿者全血经离心分离制备血小板悬液,将其随机均分为6组,其中1组为自身对照,其... 目的探究不同激活条件对血小板来源的细胞外囊泡(platelet-derived extracellular vesicles,PEVs)的粒径分布、浓度、蛋白质浓度和含量的影响。方法采集健康志愿者全血经离心分离制备血小板悬液,将其随机均分为6组,其中1组为自身对照,其余5组分别采用胶原、二磷酸腺苷、凝血酶、钙离子载体、反复冻融法激活血小板,超速离心法提取外泌体和微囊泡,Western-blot法检测血小板来源标志物(CD41)、外泌体阳性标志物(CD9、CD81及TSG101)和阴性标志物(Calnexin),经透射电镜和纳米流式仪分别对PEVs进行形态观察、粒径分布和浓度检测,并检测PEXOs的蛋白质浓度及含量。结果外泌体均表达CD9、CD81、TSG101,不表达Calnexin,外泌体和微囊泡均表达CD41;透射电镜观察外泌体呈双层膜的杯托状结构,而微囊泡表现为较不规则的膜状结构;纳米流式结果显示85%~95%的外泌体<100nm,87%~94%的微囊泡分布在100~300nm。反复冻融组的外泌体和微囊泡浓度(205.67±65.27、102.73±15.48)都高于对照组(4.83±2.79、0.76±0.21)和其他实验组,差异具有统计学意义(P<0.05),钙离子载体组的外泌体和微囊泡浓度(44.42±17.07、11.4±4.81)仅次于反复冻融组,高于对照组及其他3个实验组(P<0.05)。不同激活条件下PEVs在同一粒径分布范围的数量存在差异。反复冻融组PEXOs蛋白质浓度(1.11±0.51)高于对照组(0.32±0.39)、ADP组(0.41±0.31)和凝血酶组(0.38±0.37)(P<0.05),而其蛋白质含量(125.40±58.32)高于对照组(25.53±25.96)和其他3个实验组(ADP组37.21±15.73、凝血酶组36.28±24.18、钙离子载体组47.09±23.29)(P<0.05)。结论血小板的激活条件影响PEVs的生物学特征,不同激活条件诱导的外泌体包裹蛋白质的能力可能和粒径大小密切相关。反复冻融法可以诱导血小板释放高浓度的细胞外囊泡,可能是一种理想的PEVs制备方法。 展开更多
关键词 细胞外囊泡 血小板 外泌体 微囊泡 反复冻融
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