一种适用于昆虫痕量DNA模板制备的方法 被引量：30

1

作者 温硕洋 何晓芳 《昆虫知识》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期276-279,共4页

近年来分子生物学技术在昆虫学各领域中得到了广泛地运用 ,从昆虫样品中有效地获得DNA模板是实验成功的前提。但是由于许多昆虫体形微小 ,许多研究需要取单个个体的样品 ,用传统的酚∶氯仿抽提法难以从痕量样品中获得总DNA ,而某些生物... 近年来分子生物学技术在昆虫学各领域中得到了广泛地运用 ,从昆虫样品中有效地获得DNA模板是实验成功的前提。但是由于许多昆虫体形微小 ,许多研究需要取单个个体的样品 ,用传统的酚∶氯仿抽提法难以从痕量样品中获得总DNA ,而某些生物公司的试剂盒相对而言价格昂贵。该文介绍一种快速简便、广泛适用于不同种类昆虫。 展开更多

关键词 昆虫 痕量DNA模板 制备 PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

三种幼虫外寄生蜂蛋白酶含量与离体培养饲料的关系 被引量：2

2

作者 温硕洋 李理 +3 位作者 谢以权 李艳红 林琼芳 张姗姗 《环境昆虫学报》 CSCD 1996年第A04期6-9,共4页

在离体培养幼虫外寄生蜂过程中，发现不同的蜂对饲料中的蛋白质及游离氨基酸的含量有不同的要求，本文对麦蛾茧蜂（Ｂ．ｈｅｂｅｔｏｒ），矛茧蜂（Ｏ．Ｐｌａｌｉａｔｕｓ），管氏肿腿蜂（Ｓ．ｇｕａｎｉ）的蛋白酶活性，饲料中蛋白质... 在离体培养幼虫外寄生蜂过程中，发现不同的蜂对饲料中的蛋白质及游离氨基酸的含量有不同的要求，本文对麦蛾茧蜂（Ｂ．ｈｅｂｅｔｏｒ），矛茧蜂（Ｏ．Ｐｌａｌｉａｔｕｓ），管氏肿腿蜂（Ｓ．ｇｕａｎｉ）的蛋白酶活性，饲料中蛋白质及游离氨基酸含量进行了测定．实验表明：蛋白酶含量低的蜂，饲料中含高游离氨基酸及低蛋白；蛋白酶含量高的蜂，饲料中含低游离氨基酸及高蛋白。 展开更多

关键词 幼虫外寄生蜂 离体培养饲料 蛋白酶含量 游离氨基酸 蛋白质

在线阅读 下载PDF 职称材料

林氏果蝇的生殖隔离研究 被引量：3

3

作者 温硕洋 彭统序 +1 位作者 谢力 谢以权 《Zoological Research》 CAS CSCD 1997年第1期99-103,共5页

本文对果蝇科的林氏果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌｄｌｉｎｉ）不同种群间交配后的生殖隔离机制进行了研究。这些种群包括源产于我国台湾省的ＴＡＷ３１４６．１，采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５、ＤＨＳ４０１、ＤＨＳ４１０、Ｄ... 本文对果蝇科的林氏果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌｄｌｉｎｉ）不同种群间交配后的生殖隔离机制进行了研究。这些种群包括源产于我国台湾省的ＴＡＷ３１４６．１，采自广东两地区的６个单雌系ＤＨＳ３１５、ＤＨＳ４０１、ＤＨＳ４１０、ＤＨＳ５０１、ＮＫＳ９２１２、ＮＫＳ９２３１，采自缅甸两个地区的４个单雌系ＭＭＹ３２６、ＭＭＹ３０７、ＲＧＮ３和ＲＧＮ２０６。单雌系间用杂交、同胞交和回交等方法，观察子一代发育的情况，以了解物种分化的程度。结果表明：采自我国台湾和广东的各种群间没有生殖隔离；但是我国的各种群与缅甸所有种群均有不同程度的生殖隔离，多数情况是子一代♀虫可育，♂虫不育；缅甸的ＲＧＮ种群与ＭＭＹ种群间有明显的生殖隔离，但所有种群间的生殖隔离均不完全，而且结合我们对它们的ｍｔＤＮＡ的分析结果（另文发表）各种群间的遗传距离远远小于ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ种组中的种间遗传距离，因此被研究的种群分化程度还达不到种间的水平，但可划分为３个单元，即：中国（ＴＡＷ、ＤＨＳ、ＮＫＳ）、缅甸（ＭＭＹ）、缅甸（ＲＧＮ）。 展开更多

关键词 果蝇科 林氏果蝇 生殖隔离

在线阅读 下载PDF 职称材料

林氏果蝇线粒体DNA分析 被引量：2

4

作者 温硕洋 谢力 彭统序 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期225-230,共6页

本文对Tamura（1988）提纯mtDNA的方法进行改进，建立了林氏果蝇Drosophilalini线粒体DNA大量制备的方法；对采自原产地台湾省的单雌品系TAW3146．1的线粒体DNA用10种限制性内切酶进行了酶切，得出了林氏果蝇mtDNA的分子量大小为16．3k... 本文对Tamura（1988）提纯mtDNA的方法进行改进，建立了林氏果蝇Drosophilalini线粒体DNA大量制备的方法；对采自原产地台湾省的单雌品系TAW3146．1的线粒体DNA用10种限制性内切酶进行了酶切，得出了林氏果蝇mtDNA的分子量大小为16．3kb；用双酶切法制作了林氏果蝇线粒体DNA酶切图谱，并与属于同一复合种组的D．kikkawai的酶切图谱进行比较。所用的内切酶有XbaⅠ、AvaⅠ、EcoRⅤ、SeaⅠ、SacⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、PvuⅡ、BamHⅠ、PstⅡ。 展开更多

关键词 果蝇 林氏果蝇 线粒体DNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

寄主因素对白虫小茧蜂产卵的影响 被引量：3

5

作者 温硕洋 谢以权 谢中能 《生物防治通报》 CSCD 1991年第3期105-107,共3页

在实验室观察了白虫小茧蜂的产卵行为,从化学及物理的角度探讨了寄主因素对白虫小茧蜂产卵的影响。这些寄主因素包括寻主利它素、寄主表皮的化学物质,显微结构和柔软性。实验表明:寄主表皮的柔软性是影响该小茧蜂产卵的关键因素。寻主... 在实验室观察了白虫小茧蜂的产卵行为,从化学及物理的角度探讨了寄主因素对白虫小茧蜂产卵的影响。这些寄主因素包括寻主利它素、寄主表皮的化学物质,显微结构和柔软性。实验表明:寄主表皮的柔软性是影响该小茧蜂产卵的关键因素。寻主利它素、寄主表皮的化学物质和结构均对产卵没有影响。 展开更多

关键词 白虫小茧蜂 产卵 寄主 紫胶虫

在线阅读 下载PDF 职称材料

一种适用于昆虫微量DNA模板制备的方法 被引量：2

6

作者 温硕洋 何晓芳 《武夷科学》 2002年第1期69-72,共4页

随着分子生物学在昆虫领域中运用 ,昆虫 DNA的提取是有技术运用的前提 ,具有其重要的地位。但是由于一些昆虫体形较小 ,采用传统的酚 :氯仿抽提法不适用于微量 DNA模板的制备 ,而某些生物公司的试剂合相对而言价格较高。本文介绍一种适... 随着分子生物学在昆虫领域中运用 ,昆虫 DNA的提取是有技术运用的前提 ,具有其重要的地位。但是由于一些昆虫体形较小 ,采用传统的酚 :氯仿抽提法不适用于微量 DNA模板的制备 ,而某些生物公司的试剂合相对而言价格较高。本文介绍一种适用于普通昆虫实验室贮藏及运用的微量 DNA模板制备方法。 展开更多

关键词 微量DNA 模板 制备方法

在线阅读 下载PDF 职称材料

利用RAPD-PCR方法鉴定我国烟粉虱的生物型(英文) 被引量：52

7

作者 邱宝利 任顺祥 +1 位作者 温硕洋 Nasser S.MANDOUR 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期605-608,共4页

收集了国内北京、山东、广东和海南等 14个省市 2 3个地区的蔬菜、园林花卉和杂草上的 2 3个烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)种群 ,根据报道合成了一个随机引物H1 6 ,运用RAPD PCR技术对所收集的烟粉虱种群进行了生物型鉴定。结果表明在... 收集了国内北京、山东、广东和海南等 14个省市 2 3个地区的蔬菜、园林花卉和杂草上的 2 3个烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)种群 ,根据报道合成了一个随机引物H1 6 ,运用RAPD PCR技术对所收集的烟粉虱种群进行了生物型鉴定。结果表明在 2 3个烟粉虱种群中 ,有 17个种群同属于危害严重的“B生物型” ,这些种群主要分布在交通便利的城市或沿海地区 ,而非B生物型则主要分布在交通不便的山区或内陆。 展开更多

关键词 烟粉虱 生物型 鉴定 RAPD—PCR 中国

在线阅读 下载PDF 职称材料

昆虫抗菌肽和抗真菌肽结构与功能的关系及分子设计 被引量：13

8

作者 肖业臣 温硕洋 +2 位作者 黄亚东 杨婉莹 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期659-669,共11页

在对GenBank和EMBL数据库中登录的昆虫抗微生物肽 (antimicrobialpeptide,AMP) ,即昆虫抗菌肽 (antibacterialpeptide)和抗真菌肽 (antifungalpeptide ,AFP)进行归类整理的基础上 ,对天蚕素族 (cecropins)抗菌肽结构与功能的关系及人工... 在对GenBank和EMBL数据库中登录的昆虫抗微生物肽 (antimicrobialpeptide,AMP) ,即昆虫抗菌肽 (antibacterialpeptide)和抗真菌肽 (antifungalpeptide ,AFP)进行归类整理的基础上 ,对天蚕素族 (cecropins)抗菌肽结构与功能的关系及人工改造的分子设计策略 ,特别是对目前新发现的一些昆虫抗真菌肽的已知结构与功能关系的研究进展、存在问题等进行了简要介绍和分析 ,为从事昆虫抗微生物肽的理论研究和发展新型抗生素药物提供了必要的信息。 展开更多

关键词 昆虫 抗菌肽 抗真菌肽 分子设计

在线阅读 下载PDF 职称材料

昆虫抗真菌肽Thanatin-CAD双价基因的合成、克隆及其表达 被引量：8

9

作者 黄亚东 曾锦绣 +4 位作者 温硕洋 王艳 李校坤 钟仰进 曹阳 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第2期162-166,共5页

为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序... 为促进昆虫抗菌肽基因在转基因抗病育种和生物工程制药的应用,通过设计嵌合引物结合分段PCR的方法将抗真菌肽Thanatin基因与Cecropin AD基因(CAD基因)融合拼接为Thanatin-CAD双价基因,采用T-A克隆法将其克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实与预期设计的完全一致;然后再将其亚克隆至表达载体pET-21d中,用IPTG诱导含重组表达质粒的菌株,对表达产物进行生物活性测定,初步结果显示Thanatin-CAD双价基因的融合表达产物对受试细菌无抑菌活性,但对部分病原真菌有较强的抑菌作用。 展开更多

关键词 昆虫抗真菌肽 Thanatin-CAD双价基因 基因合成 基因克隆 融合基因 基因表达 病原真菌 抑菌作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

桔小实蝇抗性品系的微卫星DNA分析 被引量：15

10

作者 潘志萍 曾玲 温硕洋 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期874-877,共4页

用微卫星标记对桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)敏感品系和3个抗性品系(敌百虫抗性品系、高效氯氰菊酯抗性品系和阿维菌素抗性品系)进行了基因组筛查。结果表明,抗性品系显示出微卫星DNA多态性,不同的抗性品系已经产生了不同的遗... 用微卫星标记对桔小实蝇Bactrocera dorsalis(Hendel)敏感品系和3个抗性品系(敌百虫抗性品系、高效氯氰菊酯抗性品系和阿维菌素抗性品系)进行了基因组筛查。结果表明,抗性品系显示出微卫星DNA多态性,不同的抗性品系已经产生了不同的遗传变异。该结果有利于指导控制桔小实蝇抗药性产生以及抗药性的田间监控,同时在抗药性产生的遗传学机制研究方面有一定的意义。 展开更多

关键词 枯小实蝇 敏感品系 抗性品系 微卫星 DNA多态性

在线阅读 下载PDF 职称材料

赤眼蜂属系统进化研究进展 被引量：9

11

作者 何晓芳 温硕洋 庞雄飞 《昆虫知识》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期22-27,共6页

赤眼蜂是一类重要的天敌昆虫,该属包括的种类达180多种,并且广泛地分布于世界各地。通过对形态特征的分析,赤眼蜂属的系统发育研究在不同的研究者中得到不同的分类系统。由于赤眼蜂的个体微小,仅04mm左右,现有的化石记录稀少,并且可用... 赤眼蜂是一类重要的天敌昆虫,该属包括的种类达180多种,并且广泛地分布于世界各地。通过对形态特征的分析,赤眼蜂属的系统发育研究在不同的研究者中得到不同的分类系统。由于赤眼蜂的个体微小,仅04mm左右,现有的化石记录稀少,并且可用作系统发育研究的形态特征很少,导致该类群的系统发育研究仍有许多不清楚的地方。同时,近年来分子生物学的发展为赤眼蜂系统发育研究提供了很好的途径,也取得了一些共识。但仍然未能提出一套精确的、更可靠的分类系统。作者对近年来的赤眼蜂属系统进化研究进行了综述。 展开更多

关键词 赤眼蜂 天敌昆虫 系统进化 类群 系统发育 形态特征 分类系统 化石记录 分子生物学 种类

在线阅读 下载PDF 职称材料

中国3种不同生物型烟粉虱的种群DNA多态性研究(英文) 被引量：11

12

作者 邱宝利 任顺祥 +1 位作者 温硕洋 S.N.MANDOUR 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期29-33,共5页

利用基因组DNA的多态性研究了中国3种不同生物型烟粉虱的种群分化.烟粉虱种群分别采自北京、扬州和广州的不同寄主上,烟粉虱生物型包括B型、本地型(NaC)和一种新的生物型(CV型).对3种生物型烟粉虱的RAPD-PCR结果进行遗传距离聚类分析,... 利用基因组DNA的多态性研究了中国3种不同生物型烟粉虱的种群分化.烟粉虱种群分别采自北京、扬州和广州的不同寄主上,烟粉虱生物型包括B型、本地型(NaC)和一种新的生物型(CV型).对3种生物型烟粉虱的RAPD-PCR结果进行遗传距离聚类分析,结果显示烟粉虱中国本地型和CV型的种群关系比较近缘,二者与B型种群的亲缘关系较远.3个烟粉虱生物型的种群分化属于种内分化,据此推测CV型烟粉虱可能起源于中国或其临近地区. 展开更多

关键词 烟粉虱 种群分化 生物型 单模 DNA多态性

在线阅读 下载PDF 职称材料

黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定 被引量：5

13

作者 段云 邓小娟 +4 位作者 叶明强 杨婉莹 黄亚东 温硕洋 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期747-753,共7页

Drosomycin (Drs)是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性,但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外,在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列,其中同系物Dros... Drosomycin (Drs)是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子。它对细菌无明显的抗性,但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用。此外,在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列,其中同系物Drosomycin-lC(Drs-lC)的抗真菌谱仅次于Drs。将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因(Drs-lC)进行可溶性表达,对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景。本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白(Trx)融合表达载体pThiohis A中,转化宿主菌TOP10 ,进行可溶性表达,并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化。结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达,可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22 %。2种融合蛋白的表达产物经Ni-NTA亲和层析得到纯化。生测结果表明,2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性。 展开更多

关键词 黑腹果蝇 抗真菌肽 原核表达 可溶性表达 抗真菌活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

果蝇的天然免疫 被引量：9

14

作者 段云 温硕洋 +3 位作者 邓小娟 杨婉莹 叶明强 曹阳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期24-27,共4页

果蝇已成为研究昆虫和人类天然免疫的重要模式生物,它主要是通过体液免疫和细胞免疫来抵抗各种病原微生物的侵染。研究表明,果蝇的免疫基因表达主要受两种信号转导途径的调控,即Toll/dif途径和Imd/relish途径。本文主要就果蝇的天然免... 果蝇已成为研究昆虫和人类天然免疫的重要模式生物,它主要是通过体液免疫和细胞免疫来抵抗各种病原微生物的侵染。研究表明,果蝇的免疫基因表达主要受两种信号转导途径的调控,即Toll/dif途径和Imd/relish途径。本文主要就果蝇的天然免疫特征和免疫中的信号转导途径进行了综述。 展开更多

关键词 果蝇 先天免疫 信号转导途径

在线阅读 下载PDF 职称材料

昆虫抗真菌肽Thanatin基因的合成及原核表达 被引量：6

15

作者 黄亚东 王艳 +4 位作者 温硕洋 曾锦绣 曹阳 李校坤 钟仰进 《蚕业科学》 CAS CSCD 2002年第2期104-108,共5页

斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因... 斑腹刺益蝽 (Podisusmaculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的 6种昆虫抗真菌肽之一 ,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性 ,由 2 1个氨基酸残基组成 ,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用。根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因的氨基酸序列 ,推导出cDNA序列 ,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略 ,获得大量完整的Thanatin基因片段 ,通过T A克隆法克隆至pGEM TEasy载体 ,进行测序 ,结果证实合成的Thanatin基因与预期设计的完全一致。然后将其亚克隆至表达载体pET 2 1d中。经IPTG诱导表达后 ,采用RNA DNA点杂交和RT PCR检测具Thanatin基因插段的RNA转录表达活性 ,初步结果显示该融合表达产物对烟曲霉菌 (Aspergillusfumigatus)和绿色木霉菌 (Trichodermariricle) 展开更多

关键词 昆虫抗真菌肽 Tanatin基因 基因表达 斑腹刺益蝽 抑杀作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

褐家鼠线粒体DNA遗传多态性的研究 被引量：11

16

作者 李菁菁 彭统序 +1 位作者 温硕洋 谢以权 《Zoological Research》 CAS CSCD 1999年第4期247-251,共5页

通过碱变性法提取线粒体DNA(mtDNA),用地高辛标记的探针Southern杂交进行限制性酶切多态性(RFLP)分析,研究中国褐家鼠Rattusnorvegicus遗传多态性。采用ApaⅠ、AvaⅠ、BamHⅠ、BclⅠ、BglⅠ、ClaⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、HindⅢ、PvuⅡ、Sc... 通过碱变性法提取线粒体DNA(mtDNA),用地高辛标记的探针Southern杂交进行限制性酶切多态性(RFLP)分析,研究中国褐家鼠Rattusnorvegicus遗传多态性。采用ApaⅠ、AvaⅠ、BamHⅠ、BclⅠ、BglⅠ、ClaⅠ、EcoRⅠ、EcoRⅤ、HindⅢ、PvuⅡ、ScaⅠ和XbaⅠ等12种限制性内切酶分析来自我国8个地区26只褐家鼠的线粒体DNA,共检出20种限制性态型(morph)和11种mtDNA单倍型。其中BamHⅠ、EcoRⅤ、ScaⅠ和BclⅠ等5种限制酶检测到多态性,限制性态型间差异1～2个切点。各单倍型间的遗传距离0002～0014,平均遗传距离00095。根据已发表的资料,计算出我国褐家鼠与实验大鼠之间的遗传距离约00087。结果表明我国褐家鼠在mtDNA水平呈现广泛的种内遗传多态性,个体间、群体内和群体间存在一定的遗传变异,群体内和群体间的遗传分化程度处于相近的水平。 展开更多

关键词 褐家鼠 线粒体DNA RFLP 遗传多态性

在线阅读 下载PDF 职称材料

果蝇抗微生物肽基因的免疫诱导模式 被引量：3

17

作者 邓小娟 杨婉莹 +4 位作者 李怡峰 王文献 温硕洋 夏庆友 曹阳 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期405-415,共11页

果蝇作为一种模式昆虫,为研究昆虫和人类的先天免疫发挥了重要作用。目前对果蝇体内免疫诱导产生的抗微生物肽多基因家族在分子进化、抗菌功能的分子特征和免疫诱导表达的信号传递机制等方面的研究进展,进一步加深了人们对昆虫乃至其他... 果蝇作为一种模式昆虫,为研究昆虫和人类的先天免疫发挥了重要作用。目前对果蝇体内免疫诱导产生的抗微生物肽多基因家族在分子进化、抗菌功能的分子特征和免疫诱导表达的信号传递机制等方面的研究进展,进一步加深了人们对昆虫乃至其他动物和人类先天免疫模式的认识,为研究其他昆虫特别是作为主要农林害虫的鳞翅目昆虫的先天免疫机制发挥了重要作用。本文集中对黑腹果蝇Drosophila melanogaster抗微生物肽及其免疫模式的研究结果和最新进展进行了介绍,其中包括作者近几年的研究结果。 展开更多

关键词 果蝇 抗微生物肽 多基因家族 免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究 被引量：2

18

作者 杨婉莹 温硕洋 +4 位作者 邓小娟 叶明强 夏庆友 曹阳 黄亚东 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期391-398,共8页

【目的】Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSα... 【目的】Drosomycin(Drs)是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外,在黑腹果蝇基因组中,还存在另外6条Drs同系物的基因序列,对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异,研究其分子结构与功能的关系,需要对这些同系物基因进行克隆表达,获得有生物学活性的纯化样品。【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因,并克隆至pET-3C载体上,转化到宿主菌E.coli Origami(DE3)中进行诱导表达,表达产物经阳离子CM SepharoseTM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后,进行抑菌活性检测。【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品,除Drs-lI外,其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。 展开更多

关键词 黑腹果蝇 抗真菌肽 Drosomycin 同系物 表达 蛋白纯化

在线阅读 下载PDF 职称材料

果蝇Drosomycin基因(drs)的克隆鉴定 被引量：2

19

作者 钟仰进 肖业臣 +6 位作者 魏剑波 温硕洋 黄亚东 邓小娟 桑延霞 段云 曹阳 《蚕业科学》 CAS CSCD 2004年第1期85-89,共5页

为了克隆Drosomycin基因用于今后定点诱变修饰和生物技术开发研究 ,根据果蝇Drosomycin基因 (drs)的cDNA序列 ,分别设计Drosomycin基因含和不含信号肽序列的两对特异引物Drs1/Drs2、Dro3/Dro4 ,由黑腹果蝇(DrosophilamelanogasterMeigen... 为了克隆Drosomycin基因用于今后定点诱变修饰和生物技术开发研究 ,根据果蝇Drosomycin基因 (drs)的cDNA序列 ,分别设计Drosomycin基因含和不含信号肽序列的两对特异引物Drs1/Drs2、Dro3/Dro4 ,由黑腹果蝇(DrosophilamelanogasterMeigen)基因组PCR扩增获得目的片段drs和dro ,克隆到表达载体pET 2 1d(+)和pHIL S1之中。经测序表明 ,克隆的drs与文献报道的drs序列仅在 +116位点有 1个碱基的差异 (A/T) ,而克隆的dro序列则与文献报道的dro序列完全相同。 展开更多

关键词 果蝇 Drosomycin基因 昆虫抗真菌肽 信号肽 克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

管氏肿腿蜂离体培养研究 被引量：11

20

作者 李理 温硕洋 +1 位作者 谢以权 李艳红 《昆虫天敌》 CSCD 1994年第1期6-7,共2页

管氏肿腿蜂Scleroderma guani是多种天牛幼虫及蛹的体外寄生蜂,张连芹等(1991)认为利用管氏肿腿蜂防治天牛是一种简单易行、经济有效的防治方法。为进一步开发利用这种天敌昆虫资源,我们对该蜂进行了离体培养的研究。寄生昆虫在生物防... 管氏肿腿蜂Scleroderma guani是多种天牛幼虫及蛹的体外寄生蜂,张连芹等(1991)认为利用管氏肿腿蜂防治天牛是一种简单易行、经济有效的防治方法。为进一步开发利用这种天敌昆虫资源,我们对该蜂进行了离体培养的研究。寄生昆虫在生物防治上的重要作用激起了人们对寄生昆虫人工培养的极大兴趣,国内外对这方面的研究均有不少的报道。在外寄生昆虫方面,Thompson(1975)用全纯饲料成功地将壮腰姬蜂Exeristes roborator从卵培养至成蜂;谢中能等(1989)用实用饲料成功地培养了紫胶白虫茧蜂Bracon greeni和麦蛾茧蜂Bracon hebetor。本文报道用实用饲料培养管氏肿腿蜂的研究结果。 展开更多

关键词 管氏肿腿蜂 寄生蜂 离体培养 天敌

在线阅读 下载PDF 职称材料