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A蛋白酶联法检测苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的研究 被引量:32
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作者 洪霓 刘福昌 +1 位作者 王国平 王小凤 《中国果树》 1992年第1期44-47,共4页
苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方... 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是苹果的两种主要潜隐病毒,严重影响苹果的产量和质量。检测苹果潜隐病毒的传统方法是木本指示植物二重芽接鉴定法,但这种方法耗工费时。由于两种病毒不稳定和在苹果树中含量低,用经典的血清学方法不能直接检测苹果植株粗汁液中的病毒。 展开更多
关键词 苹果 病毒 ELISA 检测 叶斑病毒
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苹果褪绿叶斑病毒生物学及生化特性研究 被引量:18
2
作者 洪霓 王国平 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期77-81,共5页
对从苹果和扁桃上获得2个苹果褪绿叶斑病毒的分离物ACLSV-C和ACLSV-B的主要生物学和生化特性进行了比较。人工接种5科19种草本植物,发现两者均能侵染苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)、... 对从苹果和扁桃上获得2个苹果褪绿叶斑病毒的分离物ACLSV-C和ACLSV-B的主要生物学和生化特性进行了比较。人工接种5科19种草本植物,发现两者均能侵染苋色藜(Chenopodiumamaranticolor)、昆诺藜(Ch.quinoa)和西方烟(Nicotianaocidentalis),产生局部侵染斑和系统褪绿斑。但症状反应存在差异,后者在这3种植物上引起叶片反卷等较强症状反应,还可潜伏侵染笋瓜(Cucurbitamaximacv.ButercupBurgess)。经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,ACLSV-B衣壳蛋白的迁移率较ACLSV-C快。两者的RNA分子量及双链RNA数量无明显差异。根据已报道的核苷酸系列设计合成引物,采用PCR法检测ACLSV分离物,均获得特异性扩增产物。 展开更多
关键词 苹果 褪绿叶斑病毒 生物学 生化特性
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梨病毒脱除技术研究 被引量:22
3
作者 洪霓 王国平 +2 位作者 张尊平 董雅凤 薛光荣 《中国果树》 1995年第4期5-7,24,共4页
1992-1994年。采用恒温热处理、变温热处理、茎尖培养以及热处理与茎尖培养相结合的方法,对13个梨品种进行脱毒试验,获得9个品种共47个无病毒单株。其脱毒率分别为:恒温热处理47.1%,变温热处理64.3%,茎尖... 1992-1994年。采用恒温热处理、变温热处理、茎尖培养以及热处理与茎尖培养相结合的方法,对13个梨品种进行脱毒试验,获得9个品种共47个无病毒单株。其脱毒率分别为:恒温热处理47.1%,变温热处理64.3%,茎尖培养28.6%,茎尖培养与热处理相结合90.9%。 展开更多
关键词 病毒病 脱毒 热处理 茎尖培养
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α-ZAL、GST和17β E_2对去势食饵性大鼠HHCY所致血管内皮损伤的保护作用 被引量:2
4
作者 洪霓 段金虹 +5 位作者 张彦东 吴云清 甄攀攀 蒋东桥 戴顺龄 王雯 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期891-894,共4页
目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵... 目的复制去势(OVX)大鼠高同型半胱氨酸血症(HHCY)模型,比较植物雌激素α-玉米赤霉醇(α-ZAL)、染料木素(GST)和17β雌二醇(17βE2)对血管内皮的保护作用。方法实验分为6组:①正常对照组(Control);②假手术+2.5%蛋氨酸组(Sham);③切除卵巢+2.5%蛋氨酸组(OVX);④OVX+2.5%蛋氨酸+α-ZAL组(OVX+α-ZAL);⑤OVX+2.5%蛋氨酸+GST组(OVX+GST);⑥OVX+2.5%蛋氨酸+17βE2组(OVX+17βE2)。α-ZAL、GST和17βE2分别隔日肌注250μg/0.25ml,共12wk。双抗夹心法测定HCY和ET-1浓度,RT-PCR法检测主动脉组织ET-1 mRNA表达;主动脉作病理制片。结果血浆HCY含量(μmol.L-1):Sham与Con组比较明显升高,P<0.05;OVX组与Sham组相比明显升高,P<0.05;而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。血浆ET-1(ng.L-1)含量:OVX组与Sham组相比较ET-1升高,P<0.01,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.01。主动脉组织ET-1 mRNA的表达:OVX组与Sham组相比较升高,P<0.05,而OVX+α-ZAL、OVX+GST和OVX+17βE2组与OVX组相比均降低,P<0.05,其它各组ET-1 mRNA表达均无变化。病理:OVX组血管内皮明显损伤,Sham组、α-ZAL、GST和17βE2组血管内膜大致正常,内皮细胞基本完整,未见明显的炎性细胞浸润。结论α-ZAL、GST和17βE2均能通过降低HCY含量和减少ET-1分泌、表达而保护血管内皮,三者的内皮保护作用相似。 展开更多
关键词 Α-玉米赤霉醇 染料木素 17Β雌二醇 高同型半胱氨酸血症 内皮素
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苹果褪绿叶斑病毒提纯及抗血清制备技术研究 被引量:17
5
作者 洪霓 王国平 +1 位作者 D.Boscia G.P.Marteli 《中国果树》 1999年第1期15-18,共4页
本试验比较了2种提取缓冲液和3种繁殖寄主对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)提纯效果的影响。以昆诺藜(Chenopodiumquinoa)和苋色藜(C.amaranticolar)作繁殖寄主,经蔗糖密度梯度和硫酸铯平衡密... 本试验比较了2种提取缓冲液和3种繁殖寄主对苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)提纯效果的影响。以昆诺藜(Chenopodiumquinoa)和苋色藜(C.amaranticolar)作繁殖寄主,经蔗糖密度梯度和硫酸铯平衡密度梯度离心,获得了高度纯化的病毒样品。其A260/A280=1.57,产量约为5μg/g叶,病毒粒体呈柔软线状。用提纯病毒免疫大白兔制备出抗该病毒的抗血清。免疫电镜观察,该抗血清对ACLSV粒体具明显的修饰作用。采用双抗体夹心法(DAS-ELISA)和A蛋白酶联法(PAS-ELISA)分别对18个桃树和17个梨树样品进行检测,阳性与阴性样品吸光值差异明显。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑 病毒 提纯 抗血清 检测
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苹果花叶病血清学快速诊断技术研究 被引量:8
6
作者 洪霓 王国平 于济民 《中国果树》 1994年第4期7-8,22,共3页
本试验结果表明,A蛋白夹心酶联法检测苹果花叶病毒,适宜工作浓度第1抗血清为1/103-1/104,第2抗血清为1/103。双抗体夹心法检测该病毒,抗体IgG浓度愈高,阳性样品与阴性样品吸光值之比愈大,当IgG稀释40... 本试验结果表明,A蛋白夹心酶联法检测苹果花叶病毒,适宜工作浓度第1抗血清为1/103-1/104,第2抗血清为1/103。双抗体夹心法检测该病毒,抗体IgG浓度愈高,阳性样品与阴性样品吸光值之比愈大,当IgG稀释400倍时,两者的吸光值无明显差别。取休眠期枝条进行检测,以含0.05%吐温-20的磷酸缓冲盐水(PBST)十2%聚乙烯吡咯烷酮十0.1%卵蛋白作提取缓冲液获得了较好的检测结果,添加铜试剂能明显提高阳性样品吸光值。春季嫩叶的检测效果最佳。 展开更多
关键词 苹果 花叶病毒 检测 血清学
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GLP-1受体激动剂Exenatide改善糖尿病大鼠心血管功能 被引量:1
7
作者 洪霓 赵倩 +4 位作者 刘腾 张辉 刘琦 王云 王雯 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第9期1171-1175,共5页
目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide(Ex)治疗对糖尿病大鼠心血管功能的影响,为其临床应用提供实验依据。方法用单因素四水平不等重复的完全随机实验进行研究,34只Wistar大鼠随机分成4组:对照组(C,n=7),糖尿病组(DM,n=9)... 目的探讨胰高血糖素样肽1(GLP-1)受体激动剂Exenatide(Ex)治疗对糖尿病大鼠心血管功能的影响,为其临床应用提供实验依据。方法用单因素四水平不等重复的完全随机实验进行研究,34只Wistar大鼠随机分成4组:对照组(C,n=7),糖尿病组(DM,n=9),小剂量Ex治疗组(Emin,n=9),大剂量Ex治疗组(Emax,n=9)。检测大鼠空腹血糖水平;使用小动物超声仪观察大鼠左心室射血分数(EF)、左心室短轴缩短率(FS);观察腹主动脉血流速(AF),胸主动脉内膜扫描电镜观察血管内膜损伤。结果 DM组空腹血糖明显升高(P<0.01),Exenatide治疗组空腹血糖较DM组显著降低(P<0.05)。DM组EF、FS较对照明显降低(P<0.01),Exenatide治疗组EF、FS明显升高(P<0.05)。DM组腹主动脉血流速明显降低(P<0.01),血管内膜出现明显损伤;Exenatide治疗组腹主动脉血流速较DM组明显升高(分别P<0.05,P<0.01),血管内膜损伤减轻。结论 Exenatide能够降低糖尿病大鼠血糖水平,并改善糖尿病心脏和血管功能。 展开更多
关键词 EXENATIDE 糖尿病 大鼠 心血管功能
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BN3C抗麻醉大鼠缺血性心律失常的作用 被引量:3
8
作者 洪霓 杨玉梅 温淑荣 《包头医学院学报》 CAS 1997年第1期4-5,共2页
用结扎冠脉的方法造成大鼠缺血性心律失常,以观察BN3C对该模型的影响。结果表明BN3Civ5μg/kg和10μg/kg均可延长心律失常出现时间,降低室性期外收缩数目和室颤的发生率,并呈剂量依赖性。硝苯吡啶iv30μg/kg与BN3Civ10μg/kg的... 用结扎冠脉的方法造成大鼠缺血性心律失常,以观察BN3C对该模型的影响。结果表明BN3Civ5μg/kg和10μg/kg均可延长心律失常出现时间,降低室性期外收缩数目和室颤的发生率,并呈剂量依赖性。硝苯吡啶iv30μg/kg与BN3Civ10μg/kg的作用相似。报示BN3C对结扎冠脉所导致的大鼠缺血性心律失常有明显抑制作用,且强于稍苯吡啶。 展开更多
关键词 BN3C 缺血性 心律失常 药理学
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发状病毒属病毒研究进展 被引量:2
9
作者 洪霓 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期271-276,共6页
发状病毒属 (Trichovirus)是 1993年建立的一个新的病毒属 ,现有成员 4个 ,苹果褪绿叶斑病毒 (A CLSV)为该属典型成员 .近年来 ,该属有关病毒的分子生物学研究取得很大进展 ,已完全或部分揭示了各成员病毒的基因组结构与功能 ,同时这些... 发状病毒属 (Trichovirus)是 1993年建立的一个新的病毒属 ,现有成员 4个 ,苹果褪绿叶斑病毒 (A CLSV)为该属典型成员 .近年来 ,该属有关病毒的分子生物学研究取得很大进展 ,已完全或部分揭示了各成员病毒的基因组结构与功能 ,同时这些研究结果促进了病毒分类的完善 ,并使该属成员组成也发生了较大变化 .本文从分类地位的演变、基因组结构和功能。 展开更多
关键词 发状病毒属 研究进展 分子生物学 基因组结构 病毒分类 基因工程 作物病害
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番茄斑萎病毒的检疫技术 被引量:9
10
作者 洪霓 《植物检疫》 2006年第6期389-392,共4页
番茄斑萎病毒为布尼亚病毒科(Bunyaviridae)番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的代表成员,其寄主范围很广,可引起许多重要的园艺植物和农作物的严重病害,造成严重的经济损失。该病毒病在许多国家的局部地区有发生,为减轻其危害,各国对该病毒... 番茄斑萎病毒为布尼亚病毒科(Bunyaviridae)番茄斑萎病毒属(Tospovirus)的代表成员,其寄主范围很广,可引起许多重要的园艺植物和农作物的严重病害,造成严重的经济损失。该病毒病在许多国家的局部地区有发生,为减轻其危害,各国对该病毒的发生和流行特点及控制措施等进行了较深入的研究,本文概述了该病毒的相关研究进展。 展开更多
关键词 番茄斑萎病毒 蓟马 检疫 检验
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柑橘衰退病毒检测试剂研制及其分子特性研究 被引量:2
11
作者 洪霓 王国平 +2 位作者 王彩霞 张建坤 姜波 《湖北植保》 2009年第F06期49-51,共3页
关键词 柑橘衰退病毒 分子特性 检测试剂 株系分化 砧木种类 virus 柑橘病害 柑橘品种
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意大利落叶果树病毒病研究及防治考察 被引量:1
12
作者 洪霓 《中国果树》 1997年第4期54-55,共2页
意大利落叶果树病毒病研究及防治考察洪霓(中国农业科学院果树研究所,辽宁兴城125100)应意大利国家研究委员会(CNR)正式邀请,作者于1996年9月—1997年3月在意大利地中海作物病毒和病毒病研究中心进行了为期6... 意大利落叶果树病毒病研究及防治考察洪霓(中国农业科学院果树研究所,辽宁兴城125100)应意大利国家研究委员会(CNR)正式邀请,作者于1996年9月—1997年3月在意大利地中海作物病毒和病毒病研究中心进行了为期6个月的果树病毒合作研究,其间对意大... 展开更多
关键词 果树 落叶果树 病毒病 防治 意大利
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我国果树病毒病发生危害,研究现状及防治对策 被引量:1
13
作者 洪霓 《果树实用技术与信息》 1998年第3期3-6,共4页
关键词 果树 病毒病 危害 防治 研究现状
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中国柑橘黄龙病病原16SrDNA序列研究 被引量:32
14
作者 丁芳 洪霓 +2 位作者 钟云 易干军 王国平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期649-654,共6页
运用PCR技术对来自中国7省区不同寄主上的黄龙病病原16SrDNA基因区进行了PCR-RFLP-SSCP分析,采用3种限制性内切酶进行单酶切、双酶切及三酶切反应,对酶切产物进行了单链构象多态性(SSCP)分析。结果表明:来自7省区不同寄主上9个黄龙病病... 运用PCR技术对来自中国7省区不同寄主上的黄龙病病原16SrDNA基因区进行了PCR-RFLP-SSCP分析,采用3种限制性内切酶进行单酶切、双酶切及三酶切反应,对酶切产物进行了单链构象多态性(SSCP)分析。结果表明:来自7省区不同寄主上9个黄龙病病原菌分离物的16SrDNA无可见变异;同时对9个有代表性的分离物16SrDNA进行了克隆测序,序列多重比对结果与PCR-RFLP-SSCP一致,从而在分子水平上证明了中国柑橘黄龙病病原菌的16SrDNA序列高度保守,在不同的地域、寄主内没有发现分子变异,为进一步研究柑橘黄龙病病原菌系统进化奠定了基础。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 病原菌 16S RDNA PCR-RFLP-SSCP 克隆 序列分析
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我国梨腐烂病病原菌的初步鉴定及序列分析 被引量:30
15
作者 周玉霞 程栎菁 +4 位作者 张美鑫 翟立峰 洪霓 王国平 王利平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期140-146,F0004,共8页
【目的】为了对我国梨腐烂病病原菌进行初步鉴定和序列分析,【方法】从我国15个省(市)梨产区采集腐烂病样品并观察其田间危害症状,通过组织分离法分离获得168份梨腐烂病菌分离株,从中选取72份进行单孢纯化,共获得79份梨腐烂病菌纯化... 【目的】为了对我国梨腐烂病病原菌进行初步鉴定和序列分析,【方法】从我国15个省(市)梨产区采集腐烂病样品并观察其田间危害症状,通过组织分离法分离获得168份梨腐烂病菌分离株,从中选取72份进行单孢纯化,共获得79份梨腐烂病菌纯化分离株;观察在PDA、25℃黑暗条件下病原菌菌落形态以及产孢体形态,并对其在梨枝条上产生的分生孢子器徒手切片置显微镜下观察其结构特征和分生孢子形态;采用菌丝块接种法测定梨腐烂病菌在‘翠冠’梨离体枝条上的致病力。对部分菌株rDNA-ITS进行PCR扩增、测序,利用BLAST软件与GenBank数据库进行序列相似性分析,并用MEGA 4.1和邻接法构建系统发育树。【结果】根据梨腐烂病菌各分离株在PDA上的菌落形态特征可分为Ⅰ型和Ⅱ型两种菌落类型,不同梨腐烂病菌分离株在PDA上产生多种类型的产孢体,不同梨腐烂病菌菌株在离体梨树枝条上的致病力存在差异,我国梨腐烂病菌的rDNA-ITS核苷酸序列一致率为99.98%~100%,与苹果腐烂病菌分别聚在同一亚组的两个分支。【结论】我国梨腐烂病病原菌存在不同的菌落类型,其rDNA-ITS核苷酸序列分析显示均为V.mali var.pyri。 展开更多
关键词 梨腐烂病 苹果腐烂病 RDNA-ITS 致病力
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梨腐烂病致病力的室内快速测定方法研究 被引量:25
16
作者 张美鑫 翟立峰 +4 位作者 周玉霞 陈晓忍 贾娜娜 洪霓 王国平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期317-322,F0003,共7页
【目的】为了研究建立我国梨腐烂病致病力室内快速、稳定的测定方法,【方法】以‘丰水梨’的离体枝条、叶片、嫩梢和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种梨腐烂病的强致病力菌株F-AH-3a,在25℃下保湿培养后观测各处理的发病程度,并... 【目的】为了研究建立我国梨腐烂病致病力室内快速、稳定的测定方法,【方法】以‘丰水梨’的离体枝条、叶片、嫩梢和果实为材料,采用不同方法造成伤口后接种梨腐烂病的强致病力菌株F-AH-3a,在25℃下保湿培养后观测各处理的发病程度,并在‘丰水梨’和‘康德梨’上用梨腐烂病致病力已知的菌株对测定方法进行验证。【结果】叶片伤口接种,叶正面的病斑较背面的大,经6针与1和3针刺伤处理产生的病斑大小之间存在显著性差异;嫩梢和果实伤口接种,不同处理产生的病斑大小之间无显著性差异;枝条伤口接种3d后,经打孔、环割、烫打及10针刺伤处理的枝条发病率均为100%,而经3针刺伤、烫伤和芽痕处理的分别为55%、40%和15%。前4种处理病斑的长度显著大于后3种处理。在‘丰水梨’和‘康德梨’品种上,用5个梨腐烂病致病力已知菌株对测定方法进行验证的结果表明,各菌株通过枝条打孔接种后产生的病斑,在其长度之间的差异与菌株致病力已知的强弱相吻合。【结论】采用枝条打孔接种法的测定效果显著、稳定,且操作简单,可用于梨腐烂病菌致病力的室内快速测定。 展开更多
关键词 梨腐烂病 致病力 室内测定 枝条打孔接种
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苹果褪绿叶斑病毒和茎沟病毒的鉴定提纯和酶联法检测 被引量:29
17
作者 王小凤 李秋波 +3 位作者 王荣 洪霓 王国平 刘福昌 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期137-144,共8页
苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定 W-55分离物属于 CLSV,W-29分离物属于 SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观... 苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)和茎沟病毒(SGV)是感染苹果和其它果树的两种重要潜隐病毒。根据生物学特性和血清学反应,确定 W-55分离物属于 CLSV,W-29分离物属于 SGV。采用皂土澄清,PEG 6000沉淀及超离心等步骤,得到部分提纯的病毒。经电镜观察,W-55和W-29病毒颗粒长度分别为800 nm 和650nm。用 CLSV W-55分离物制备的兔抗血清效价为1/3200,用 SGV PV-71(ATCC)分离物制备小鼠腹水抗体效价为1/800,均用间接 ELISA 法测定。对感染 CLSV 和 SGV 的昆诺藜、苹果叶和花瓣检测结果表明,P/N 值具有显著性。本工作为苹果无毒苗木的生产提供了快速、灵敏的病毒检测手段。 展开更多
关键词 茎沟病毒 苹果 褪绿叶斑病毒
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BN3C抗心律失常的作用
18
作者 洪霓 相玉梅 《中国药理学会通讯》 2001年第4期24-26,共3页
关键词 BN3C 抗心律失常 药理学
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我国梨树腐烂病菌致病力分化分析 被引量:13
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作者 张美鑫 翟立峰 +4 位作者 周玉霞 陈晓忍 贾娜娜 洪霓 王国平 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期657-664,共8页
【目的】研究明确我国梨树腐烂病菌致病力的分化状况。【方法】梨离体枝条经打孔法造成伤口后接种梨树腐烂病菌,通过接种在5个梨系统(白梨、沙梨、秋子梨、西洋梨和新疆梨)不同品种上观测和比较不同来源菌株的致病力差异,并根据各菌株... 【目的】研究明确我国梨树腐烂病菌致病力的分化状况。【方法】梨离体枝条经打孔法造成伤口后接种梨树腐烂病菌,通过接种在5个梨系统(白梨、沙梨、秋子梨、西洋梨和新疆梨)不同品种上观测和比较不同来源菌株的致病力差异,并根据各菌株的综合致病力强弱划分为不同类型,分析致病力分化与菌株来源间的相关性。【结果】研究发现来源于我国14省市5个梨系统的91份梨树腐烂病菌株在不同梨品种上的致病力均存在显著性差异,但同一菌株在5个梨品种上的症状反应程度有异。根据各供试菌株在不同梨品种上的综合致病力强弱可将其划分为3个类型,其中强致病力菌株16份,占17.6%;中致病力菌株70份,占76.9%;弱致病力菌株5份,占5.5%。来源于不同地区和梨系统的菌株之间其致病类型的分布比例存在明显的差异,这种差异可能与其梨系统的抗病性相关。【结论】来源于我国不同地区和梨系统的梨树腐烂病菌存在明显的致病力分化,其综合致病力可划分为强、中、弱3个致病类型,以中等致病力菌株为优势群体。 展开更多
关键词 梨树腐烂病菌 菌株 致病力分化
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柑橘衰退病毒多克隆和单克隆抗体的制备及检测效果分析 被引量:7
20
作者 王彩霞 王国平 +3 位作者 洪霓 姜波 刘辉 吴康为 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期629-634,共6页
通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的提纯液,其产量为1mg/100g植物组织.用CTV免疫大耳白兔,获得多克隆抗体,间接ELISA效价为1:25 600.用CTV免疫小鼠,经细胞融合、ELISA筛选和克隆化培养,获得18株能稳... 通过改进提纯方法获得了柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,CTV)的提纯液,其产量为1mg/100g植物组织.用CTV免疫大耳白兔,获得多克隆抗体,间接ELISA效价为1:25 600.用CTV免疫小鼠,经细胞融合、ELISA筛选和克隆化培养,获得18株能稳定分泌抗CTV单克隆抗体的杂交瘤单细胞株.对其中4株单克隆腹水抗体进行分析的结果表明,这些抗体的ELISA效价为1:51 200~1:204 800,其中2G和3H的抗体类型及亚类为IgG2a,1E和4H为IgG2b.用所制备抗体对不同来源柑橘样品的CTV检测结果显示,单克隆和多克隆抗体结合使用,采用三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)可以获得理想的检测效果,其特异性强、灵敏度高.同时发现所分析4株单克隆抗体对不同的CTV分离物鉴别能力存在差异,但有关这些CTV分离物的特性及其血清学关系还需进一步研究. 展开更多
关键词 柑橘衰退病毒 多克隆抗体 单克隆抗体 三抗体夹心ELISA
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