猪囊尾蚴抗原基因TS11的真核表达研究

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作者 沈翼 高荣 +9 位作者 沈斌 武梅 孟民杰 唐漫书 李江凌 郑勇 刘崑 魏竹波 王克非 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第4期6-9,共4页

将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因... 将猪囊尾蚴抗原基因 TS11亚克隆至 VR10 2 0真核表达载体中 ,用菌落原位杂交法筛选重组质粒 ,将其转染 COS7细胞 ,以 Northern Blotting检测插入片段的转录 ;用 EL ISA检查其翻译表达产物。结果表明 :VTS11在真核细胞中能够转录TS11基因的 m RNA;其蛋白表达产物能为兔抗猪囊虫高免血清所识别 ,在转染真核细胞 2 4 h后 ,即可检测到正确表达的猪囊尾蚴抗原蛋白。这些为深入研制猪囊虫的 DNA疫苗奠定了可靠的基础。 展开更多

关键词 猪囊尾蚴 抗原基因 TS11基因 真核表达 蛋白表达产物 人畜共患病

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假俭草过氧化物同工酶的遗传多样性研究 被引量：11

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作者 白史且 沈翼 +7 位作者 高荣 苟文龙 张新全 张新跃 刘世贵 姚明 肖飚 何光武 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期952-956,共5页

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术 ,对四川、重庆、江苏、江西、湖南和福州等地的15个假俭草种质资源叶片的过氧化物酶进行分析 .结果表明 ,过氧化物酶同工酶显示出 7个酶位点 ,其电泳形成 2个区域 ,Rf值分别为 :0 .10 ,0 .5 2 0～ 0... 采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术 ,对四川、重庆、江苏、江西、湖南和福州等地的15个假俭草种质资源叶片的过氧化物酶进行分析 .结果表明 ,过氧化物酶同工酶显示出 7个酶位点 ,其电泳形成 2个区域 ,Rf值分别为 :0 .10 ,0 .5 2 0～ 0 .76 2 ,各材料间的遗传差异较为明显 ,表现出较丰富的同工酶变异 .聚类分析表明 ,15个假俭草材料可聚为两大类 。 展开更多

关键词 遗传多样性 假俭草 过氧化物酶同工酶 种质资源 聚类分析 遗传差异 禾本科

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假俭草遗传多样性的AFLP指纹分析 被引量：22

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作者 白史且 高荣 +5 位作者 沈翼 宁红 张新全 苟文龙 刘明秀 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第10期45-49,共5页

采用AFLP技术对来自我国多个省区的 9份假俭草种质资源进行了DNA指纹图谱分析。从 6 4对引物组合中选出 2对引物组合构建了所研究种质的指纹图谱。 2对引物共扩增出 816条谱带 ,多态性比率超过 6 0 8%。遗传多样性分析表明 ,假俭草资... 采用AFLP技术对来自我国多个省区的 9份假俭草种质资源进行了DNA指纹图谱分析。从 6 4对引物组合中选出 2对引物组合构建了所研究种质的指纹图谱。 2对引物共扩增出 816条谱带 ,多态性比率超过 6 0 8%。遗传多样性分析表明 ,假俭草资源材料间的遗传距离为 0 135～ 0 994。根据以上的AFLP数据进行了聚类分析 ,结果表明假俭草 9个材料分别聚成了四个类型。聚类结果与形态学和同工酶研究结果是一致的 ,表明应用AFLP技术能在DNA分子水平上较好地揭示假俭草的遗传背景和亲缘关系。 展开更多

关键词 遗传多样性 假俭草 DNA指纹图谱分析 AFLP指纹分析

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CpG序列和猪白细胞介素6基因转染表达对猪囊尾蚴基因疫苗免疫影响的研究 被引量：6

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作者 李江凌 高荣 +9 位作者 武梅 孟明杰 龙章富 唐漫书 沈翼 谢鸿观 王丽焕 巫雪艳 殷雪 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第6期26-30,共5页

以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免... 以猪囊尾蚴VTS76抗原基因和质粒VPIL 6、pUCl8 CpG免疫接种小鼠 ,检测了小鼠的体液及细胞免疫反应。结果发现 ,VPIL 6或pUC CpG与VTS76共同免疫小鼠的特异性抗体滴度、IgG含量、淋巴细胞白细胞介素 2诱生活性、脾细胞增殖反应和血液免疫细胞数量显著高于VTS76免疫组和对照组。证明VPIL 6和CpG序列能显著增强动物对DNA疫苗的细胞和体液免疫反应 。 展开更多

关键词 疫苗 免疫 免疫应答 猪白细胞介素-6基因 CPG序列 猪囊尾蚴 抗原基因 免疫增强剂 基因表达

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成华猪γ-干扰素基因分子克隆与序列分析 被引量：9

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作者 李江凌 高荣 +5 位作者 武梅 孟民杰 唐漫书 沈翼 王丽焕 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2003年第5期3-5,共3页

为研究猪γ-干扰素在抗御传染性疾病和肿瘤生物治疗中的免疫增强作用,本实验以ConA刺激成华猪外周血淋巴细胞提取激活淋细胞的mRNA,设计合成特异的引物序列,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增和克隆成华猪IFN-γ基因并进行序列测... 为研究猪γ-干扰素在抗御传染性疾病和肿瘤生物治疗中的免疫增强作用,本实验以ConA刺激成华猪外周血淋巴细胞提取激活淋细胞的mRNA,设计合成特异的引物序列,应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增和克隆成华猪IFN-γ基因并进行序列测定。成华猪IFN-γcDNA约长500bp,从第68位核苷酸开始编码其信号肽,到569位核苷酸为终止子。IFN-γ基因的开放框架(ORF)由498bp构成,编码166个氨基酸。成华猪IFN-γ与猪IFN-γ基因核苷酸间同源性为98％,在261-269存在点突变,在氨基酸水平完全一致。IFN-γ氨基酸与鼠同源性为30％,与人同源性为40％。 展开更多

关键词 成华猪 γ—干扰素基因 分子克隆 序列分析 传染性疾病 肿瘤 生物治疗

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纳米颗粒包裹CpG序列对猪副伤寒疫苗接种小鼠免疫应答的影响 被引量：4

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作者 武梅 石林 +8 位作者 刘世贵 李江凌 吴凯源 王丽焕 沈翼 刘昆 郑勇 张新申 高荣 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第5期975-979,共5页

本实验制备聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为包装分子包裹pUC18-CpG质粒对猪副伤寒疫苗接种小鼠体液IgG和特异抗体滴度、脾脏淋巴细胞增殖和白细胞介素-2诱生活性的影响。实验结果发现:与裸pUC18-CpG... 本实验制备聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为包装分子包裹pUC18-CpG质粒对猪副伤寒疫苗接种小鼠体液IgG和特异抗体滴度、脾脏淋巴细胞增殖和白细胞介素-2诱生活性的影响。实验结果发现:与裸pUC18-CpG质粒接种小鼠比较,阳离子纳米颗粒包裹pUC18-CpG质粒能显著提高免疫小鼠IgG含量和特异抗沙门氏菌抗体滴度,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素-2的诱生活性;同阳离子脂质体作为包装分子的细胞和体液免疫佐剂效应相似或较强。证明阳离子PLG纳米颗粒包装能显著提高裸CpG质粒的免疫增强活性。 展开更多

关键词 小鼠 副伤寒疫苗 CPG序列 阳离子PLG纳米颗粒 免疫应答 纳米颗粒 CPG序列 免疫小鼠 疫苗接种 副伤寒 免疫应答 包裹 淋巴细胞增殖活性 白细胞介素-2

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猪白细胞介素-6基因的原核表达及其活性研究 被引量：5

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作者 唐漫书 高荣 +6 位作者 孟民杰 武梅 李江凌 龙章富 沈翼 沈斌 刘世贵 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期750-754,共5页

用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白... 用DNA重组技术 ,将已克隆的猪IL - 6cDNA片段插入pGEX 1λT质粒 ,转化大肠杆菌 ,以BamHI和PstI酶切鉴定重组子 ,以IPTG诱导融合蛋白表达 ,并作RT PCR及SDS PAGE分析表达情况 ,从聚丙烯酰胺制备凝胶中回收融合蛋白 ,用MTT法测定重组蛋白刺激小鼠脾淋巴母细胞增殖反应的活性 ,并免疫家兔制备高免血清 ,得到高效表达猪IL 6的质粒pGPIL 6 ,RT PCR确证 pGPIL 6在大肠杆菌中能正确转录 ,经SDS PAGE分析表达蛋白分子量为 4 9kD ,融合蛋白具有较高的促小鼠淋巴细胞增殖反应活性 ,以此免疫家兔 ,可制备滴度为 1∶12 80 0 展开更多

关键词 猪 白细胞介素-6基因 原核表达 DNA重组 基因表达 融合蛋白 增殖反应活性

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造纸污泥堆肥对酸性土壤铝污染的影响 被引量：5

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作者 林云琴 王德汉 +2 位作者 林炼锋 沈翼 刘振堃 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期235-240,共6页

通过盆栽试验,研究在砖红壤中施加富含铝盐的造纸污泥堆肥后,土壤-作物体系中的铝毒效应。试验结果表明:盆栽初期,添加造纸污泥堆肥各处理土壤中的总酸溶性铝和总单核铝浓度较CK呈显著上升趋势,并随堆肥用量的增加而增加;随着种植时间推... 通过盆栽试验,研究在砖红壤中施加富含铝盐的造纸污泥堆肥后,土壤-作物体系中的铝毒效应。试验结果表明:盆栽初期,添加造纸污泥堆肥各处理土壤中的总酸溶性铝和总单核铝浓度较CK呈显著上升趋势,并随堆肥用量的增加而增加;随着种植时间推移,各处理(除了CK)总酸溶性铝和总单核铝浓度显著降低,且在盆栽结束时各处理总酸溶性铝浓度均低于原砖红壤中总酸溶性铝浓度;在整个盆栽期间,总单核铝是土壤中活性铝的主要存在形态;添加堆肥的各处理玉米植株的根部和地上部分铝含量均显著小于CK,玉米的生长状况均优于CK,说明在酸性土壤中添加造纸污泥堆肥,能起到很好的肥效作用,且不会对玉米生长形成铝毒效应,其中10%为本试验的最佳配比;另外,土壤理化性质测定结果显示:添加造纸污泥堆肥能有效减缓土壤酸化、增加土壤有机质和有效磷含量,提高土壤质量。 展开更多

关键词 造纸污泥堆肥 砖红壤 铝污染 盆栽 玉米

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CpG序列及阳离子脂质体对猪带绦虫抗原基因免疫应答的影响 被引量：6

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作者 武梅 高荣 +9 位作者 李江凌 孟明杰 龙章富 唐漫书 殷雪 沈翼 王丽焕 巫雪艳 谢鸿观 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2002年第7期39-41,共3页

本实验将猪带绦虫抗原基因VTS76分别与pUC1 8质粒、重组pUC1 8 CpG质粒联合及阳离子脂质体包装后免疫小鼠。结果表明 :pUC1 8和 pUC1 8 CpG能显著提高免疫小鼠总IgG和特异性抗体水平 ,增加小鼠免疫细胞数量 ,增强淋巴细胞增殖活性及白... 本实验将猪带绦虫抗原基因VTS76分别与pUC1 8质粒、重组pUC1 8 CpG质粒联合及阳离子脂质体包装后免疫小鼠。结果表明 :pUC1 8和 pUC1 8 CpG能显著提高免疫小鼠总IgG和特异性抗体水平 ,增加小鼠免疫细胞数量 ,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素 2的诱生活性。其中 ,pUC1 8 CpG的免疫增强效果更显著。阳离子脂质体包裹具有减少质粒用量。 展开更多

关键词 CPG序列 阳离子脂质体 猪带绦虫抗原基因 免疫应答 小鼠

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猪淋巴细胞白细胞介素-6(PIL-6)基因的克隆和序列分析 被引量：5

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作者 孟民杰 高荣 +7 位作者 唐漫书 李江凌 武梅 沈翼 龙章富 王丽焕 沈斌 刘世贵 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期557-560,共4页

将猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 4 8h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 6基因 (PIL 6 ) ,并克隆到pUC18载体测序 .结果发现 ,PIL 6的cDNA长度为 74 1bp ,开放阅读框为 6 36bp ,... 将猪外周血淋巴细胞进行体外培养 ,在ConA的刺激下培养 4 8h后 ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 6基因 (PIL 6 ) ,并克隆到pUC18载体测序 .结果发现 ,PIL 6的cDNA长度为 74 1bp ,开放阅读框为 6 36bp ,编码 2 12个氨基酸 ,分子量2 4kD ,等电点 5 .5 ;其 4 6～ 12 9bp编码PIL 6的信号肽序列 ,130～ 6 81编码PIL 展开更多

关键词 猪 白细胞介素-6 基因克隆 测序 淋巴细胞

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成华猪淋巴细胞白细胞介素-4基因的克隆及序列分析 被引量：4

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作者 武梅 高荣 +9 位作者 李江凌 龙章富 唐漫书 刘昆 郑勇 沈翼 谢鸿观 王丽焕 巫雪艳 刘世贵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期8-11,共4页

将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读... 将猪外周淋巴细胞进行体外培养 ,在伴刀豆球蛋白A(ConA)的刺激下培养 48h ,提取培养的淋巴细胞总RNA ,应用RT PCR扩增猪淋巴细胞白细胞介素 4(IL 4)基因 ,并克隆到pMD T载体测序。测序结果表明 ,IL 4基因的cDNA长度为 413bp ,开放阅读框为 40 2bp ,编码 13 4个氨基酸 ,分子量 15 .0ku ,等电点 8.2 4;与人和小鼠的IL 4基因编码的氨基酸序列的同源性分别为 60 %和 42 %。 展开更多

关键词 成华猪 淋巴细胞 白细胞 介素-4 序列分析 基因克隆

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阳离子PLG纳米颗粒包裹对CpG序列免疫佐剂效应影响的研究 被引量：3

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作者 吕学斌 李江凌 +7 位作者 高荣 武梅 吴凯源 王丽焕 沈翼 刘崑 郑勇 刘世贵 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第4期62-66,共5页

本试验制备了聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为载体包裹CpG分子对小鼠体液和细胞免疫反应的影响。结果发现,阳离子PLG纳米颗粒包裹CpG能显著提高免疫小鼠总IgG,增加小鼠免疫细胞数量,增强淋巴细胞增殖... 本试验制备了聚乙交酯丙交酯(PLG)纳米颗粒,比较了阳离子PLG纳米颗粒和脂质体作为载体包裹CpG分子对小鼠体液和细胞免疫反应的影响。结果发现,阳离子PLG纳米颗粒包裹CpG能显著提高免疫小鼠总IgG,增加小鼠免疫细胞数量,增强淋巴细胞增殖活性及白细胞介素-2的诱生活性。它同阳离子脂质体作为包裹分子的效应相似或较强,能显著提高裸CpG质粒的免疫增强活性。 展开更多

关键词 聚乙交酯丙交酯 小鼠 体液 细胞免疫反应 阳离子PLG纳米颗粒 阳离子脂质体 CPG序列 免疫增强活性 免疫佐剂效应 传染性疾病防治

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小鼠对猪囊虫抗原基因TS76的免疫应答 被引量：3

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作者 孟民杰 高荣 +5 位作者 沈斌 魏竹波 唐漫书 沈翼 王克非 刘世贵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期247-250,共4页

将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法... 将猪囊虫抗原基因 TS76的真核表达型质粒 VTS76单独或与 p UC18联合肌肉免疫注射于 BAL B/ c小鼠 ,以MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞 Con A刺激的增殖反应及 IL - 2的诱生活性 ,EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果发现 ,VTS76免疫小鼠各项细胞和体液免疫应答反应指数均比空白对照组小鼠显著提高 ;联合免疫组小鼠的细胞免疫应答和体液免疫应答反应指数均比 VTS76小鼠提高。由此可见 ,以 VTS76免疫小鼠可诱导其特异性细胞和体液免疫反应 ,而 p UC18又明显提高了 VTS76免疫小鼠的免疫应答水平 。 展开更多

关键词 猪 囊虫病 抗原基因 免疫应答 DNA疫苗 TS76 小鼠

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阳离子脂质体包裹CpG对猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗免疫效应的影响 被引量：3

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作者 龙章富 高荣 +10 位作者 孟民杰 武梅 李江凌 沈翼 巫雪艳 王丽焕 谢鸿观 殷雪 刘昆 郑勇 刘世贵 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2003年第3期15-19,共5页

对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细... 对 3组分别注射猪瘟猪肺疫猪丹毒三联疫苗 (简称三联疫苗 )、CpG +三联疫苗、阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗的小鼠细胞和体液免疫反应进行了比较分析。结果显示 ,阳离子脂质体包裹CpG +三联疫苗免疫小鼠脾细胞增殖反应明显增强 ,白细胞介素 2 (IL 2 )诱生活性和免疫细胞数量、血液IgG含量较仅注射三联疫苗的小鼠显著增加。说明阳离子脂质体包裹CpG能增强小鼠对三联疫苗的体液和细胞免疫应答反应 。 展开更多

关键词 阳离子脂质体 CPG 猪瘟 猪肺疫 猪丹毒 三联疫苗 免疫效应

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猪带绦虫抗原基因TS76的克隆及原核表达 被引量：2

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作者 沈斌 高荣 +11 位作者 孟民杰 沈翼 武梅 李江凌 龙章富 魏竹波 王克非 朱锦 付玉梅 卓麟 何绍江 刘世贵 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期61-65,共5页

目的　测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法　采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同... 目的　测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆 (TS76 )的序列 ,并进行该片段的原核表达研究。方法　采用PCR扩增重组 (噬菌体 (TS76中的TS76cDNA片段 ,亚克隆至 pUC18,得到的重组子用于测序 ,并对测定结果进行分析及同源性比较 ;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX - 1(T中 ,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子 pGTS76 ;制备pGTS76原核表达产物 ,进行浓度梯度SDS -PAGE和Westernblotting分析。 结果　TS76克隆含 5 16对核苷酸 ,编码含 83个氨基酸残基的多肽 ,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有 383bp的同源区域。重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为 34KD ,能与抗猪囊尾蚴兔血清产生很强的免疫反应。结论　分离到一个编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的基因。 展开更多

关键词 猪带绦虫 抗原基因 克隆 原核表达 TS76 核酸疫苗

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猪囊虫TS21抗原DNA接种小鼠的免疫应答 被引量：1

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作者 巫雪艳 高荣 +10 位作者 沈斌 孟民杰 沈翼 李江凌 武梅 唐漫书 郑勇 刘崑 魏竹波 王克非 刘世贵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期18-22,共5页

将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的... 将 4 0只BALB/c小鼠随机分为 2组 ,A组以VR10 2 0免疫作为对照 ,B组以TS2 1抗原基因的真核表达型质粒VTS2 1免疫。用ELISA检测免疫小鼠IgG总量和特异性抗体水平 ,MTT比色法检测小鼠脾淋巴细胞伴刀豆蛋白A(ConA)刺激的增殖反应及IL 2的诱生活性 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 ,VTS2 1免疫小鼠血清的IgG含量和特异性抗体效价显著高于对照组小鼠 ;免疫小鼠脾淋巴细胞ConA刺激增殖反应和IL 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;免疫小鼠的淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。免疫小鼠的细胞和体液免疫反应显著增强 ,表明VTS2 1具有很强的免疫激活作用 。 展开更多

关键词 TS21抗原DNA 小鼠 免疫应答 ELISA检测 MTT比色法 猪带绦虫 囊虫 DNA疫苗

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CpG序列对副伤寒疫苗免疫小鼠应答反应的影响 被引量：1

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作者 吕学斌 李江凌 +7 位作者 高荣 武梅 吴凯源 王丽焕 沈翼 刘崑 郑勇 刘世贵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期34-37,共4页

研究了CpG序列作为分子免疫增强剂 ,对常规副伤寒疫苗免疫小鼠后 ,小鼠体液和细胞免疫反应的变化情况。试验结果显示 ,CpG序列作为免疫增强剂 ,可以使免疫小鼠的总IgG含量、血清特异性抗体效价、淋巴细胞IL 2的诱生活性和脾淋巴细胞的... 研究了CpG序列作为分子免疫增强剂 ,对常规副伤寒疫苗免疫小鼠后 ,小鼠体液和细胞免疫反应的变化情况。试验结果显示 ,CpG序列作为免疫增强剂 ,可以使免疫小鼠的总IgG含量、血清特异性抗体效价、淋巴细胞IL 2的诱生活性和脾淋巴细胞的增殖反应有明显的提高。结果表明 ,CpG序列能显著增强免疫动物对常规疫苗的免疫应答反应水平 。 展开更多

关键词 CPG序列 分子免疫增强剂 猪 副伤寒疫苗 小鼠 免疫应答

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酶联免疫技术检测玉米弯孢菌叶斑病的研究 被引量：2

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作者 王丽焕 宁红 +3 位作者 沈翼 唐漫书 高荣 刘世贵 《植物检疫》 北大核心 2002年第6期328-331,共4页

本文通过提取玉米弯孢菌叶斑病病原菌蛋白质 ,免疫家兔制备抗血清 ,用不等弯孢菌、玉米小斑病菌、玉米圆斑病菌和玉米大斑病菌 (与弯孢菌相似或相近 )蛋白吸附除去抗血清中的交叉反应抗体 ,提高了抗体的特异性。建立了酶联免疫检测玉米... 本文通过提取玉米弯孢菌叶斑病病原菌蛋白质 ,免疫家兔制备抗血清 ,用不等弯孢菌、玉米小斑病菌、玉米圆斑病菌和玉米大斑病菌 (与弯孢菌相似或相近 )蛋白吸附除去抗血清中的交叉反应抗体 ,提高了抗体的特异性。建立了酶联免疫检测玉米弯孢菌叶斑病的技术 ,应用ABC -ELISA和间接ELISA检测玉米弯孢菌叶斑病 ,比较了两种方法的灵敏性和特异性。结果显示ABC -ELISA较间接ELISA检测灵敏度高 2到 5倍。 展开更多

关键词 酶联免疫技术 玉米 弯孢菌 叶斑病

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猪白细胞介素4、6融合基因对小鼠免疫的影响 被引量：1

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作者 李化 谢曌 +10 位作者 高荣 武梅 孟民杰 章欢 程驰 杨毅 刘狄广 王泽洲 王秀英 沈翼 王红宁 《四川动物》 CSCD 北大核心 2006年第1期58-63,共6页

目的:研究猪白细胞介素IL4、IL6融合基因(PIL46)对小鼠免疫应答的反应。方法:以壳聚糖纳米颗粒包裹融合基因(PIL46)的真核表达质粒(VPIL46)接种昆明小鼠,免疫后28日以口服攻毒实验小鼠,观察其体液和细胞免疫水平指标的变化和病变情况。... 目的:研究猪白细胞介素IL4、IL6融合基因(PIL46)对小鼠免疫应答的反应。方法:以壳聚糖纳米颗粒包裹融合基因(PIL46)的真核表达质粒(VPIL46)接种昆明小鼠,免疫后28日以口服攻毒实验小鼠,观察其体液和细胞免疫水平指标的变化和病变情况。实验结果发现:CNP包裹VPIL46接种小鼠体液免疫和细胞免疫指标不同程度地增多,均显著高于对照组(P<0.05);与CNP包裹VPIL4+6免疫效果相近。免疫后28日以口服攻毒实验小鼠,检测结果发现:CNP包裹VPIL46组和CNP包裹VPIL4+6组小鼠的上述免疫指标除中性粒细胞外均显著多于对照小鼠,免疫小鼠无症状和病变,健康存活;而对照小鼠均发病,消化道组织器官呈现明显出血病变。结论:PIL46基因具有显著增强小鼠体液和细胞免疫机能、提高对大肠杆菌感染抵抗力的免疫调节效应,可作为有效的抗感染免疫调节剂。 展开更多

关键词 猪IL4和IL6 融合基因 壳聚糖纳米颗粒 免疫 小鼠

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猪带绦虫TS11抗原基因接种小鼠的免疫应答 被引量：1

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作者 沈斌 高荣 +8 位作者 孟民杰 沈翼 武梅 李江凌 郑勇 刘昆 魏竹波 王克非 刘世贵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第1期3-6,共4页

本实验以猪带绦虫 TS11抗原基因的真核表达型质粒 VTS11肌肉免疫注射 BAL B/ c小鼠 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测小鼠脾淋巴细胞刀豆蛋白 A(Con A)刺激的增殖反应及 IL- 2的诱生活性 ;用 EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性... 本实验以猪带绦虫 TS11抗原基因的真核表达型质粒 VTS11肌肉免疫注射 BAL B/ c小鼠 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测小鼠脾淋巴细胞刀豆蛋白 A(Con A)刺激的增殖反应及 IL- 2的诱生活性 ;用 EL ISA方法检测免疫小鼠 Ig G总量和特异性抗体水平 ,常规法检测外周血免疫细胞数量的动态变化。结果显示 VTS11免疫小鼠血清的特异性抗体滴度和 Ig G含量显著高于空白对照组小鼠 ;免疫小鼠脾脏淋巴细胞 Con A刺激增殖反应和 IL - 2诱生活性均比对照组小鼠显著增强 ;VTS11免疫小鼠的淋巴细胞和巨噬细胞等免疫细胞的数量也显著超过对照组。这表明 VTS11免疫小鼠 ,可诱导其产生特异性的细胞和体液免疫反应 ,VTS11具有很强的免疫激活作用 ,可望成为预防猪囊虫病的一种新型疫苗。 展开更多

关键词 猪带绦虫 TS11抗原基因 小鼠 接种 免疫应答 囊虫病 疫苗

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