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新型冠状病毒及其受体ACE2在犬猫上的研究 被引量：1
1
作者 汪娅媛 田仰清 +3 位作者 严涵 昂艳芬 李艳平 严玉霖 《上海畜牧兽医通讯》 2021年第3期6-9,共4页
新型冠状病毒疫情已被世界卫生组织宣布为国际关注的突发公共卫生事件,国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为"严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)"。SARS-CoV-2是... 新型冠状病毒疫情已被世界卫生组织宣布为国际关注的突发公共卫生事件,国际病毒分类委员会将新型冠状病毒命名为"严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)"。SARS-CoV-2是否感染犬猫等宠物是抗击新冠疫情中的重要公共卫生问题,也是公众关注的热点问题。SARS-CoV-2与严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)有相同的功能性受体[血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)],本文对冠状病毒和ACE2受体以及SARS-CoV-2在犬猫上的研究分别进行探讨,为后续探究SARS-CoV-2在犬猫群体中感染和传播提供参考。 展开更多
关键词 冠状病毒 SARS-CoV-2 ACE2 犬 猫
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犬造血干细胞移植的作用机制及应用研究进展 被引量：1
2
作者 田仰清 汪娅媛 +3 位作者 昂艳芬 严涵 刘鑫 严玉霖 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第2期791-799,共9页
造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)位于造血系统的顶端,是造血系统中唯一具有多能性和自我更新能力的细胞,可以分化为各种功能的血细胞,维持血液系统的建立和动态平衡,是目前研究最为透彻、临床应用最为成熟的成体干细胞。造血... 造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)位于造血系统的顶端,是造血系统中唯一具有多能性和自我更新能力的细胞,可以分化为各种功能的血细胞,维持血液系统的建立和动态平衡,是目前研究最为透彻、临床应用最为成熟的成体干细胞。造血干细胞的这些重要特性,使得基于造血干细胞在治病机制研究和临床应用中的研究取得了很大进展。以造血干细胞为基础的再生医学治疗是目前治疗恶性血液病和遗传病的首选方法,如造血干细胞治疗犬白细胞黏附缺陷综合征、犬遗传性贫血、犬淋巴瘤、犬白细胞减少症、犬X连锁严重联合免疫缺陷病等,但由于白细胞抗原匹配的供体稀缺、可获得的造血干细胞数量有限等原因,无法满足临床需求,因此,如何通过体外培养获得满足临床需要的造血干细胞成为近年来学者们研究的热点问题。作者参照现有研究成果对造血干细胞的来源和体外分离培养、治病机制进行系统的描述,并对造血干细胞移植治疗遗传性溶血性贫血、白细胞黏附缺陷综合征、淋巴瘤、白细胞减少症、X连锁严重联合免疫缺陷病的临床研究进行综述,以期为今后将造血干细胞广泛应用于临床治疗提供参考依据。 展开更多
关键词 犬 造血干细胞 移植 体外扩增 归巢
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血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的表达差异分析
3
作者 昂艳芬 汪娅媛 +3 位作者 严涵 田仰清 张学峰 严玉霖 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期228-233,共6页
【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、... 【目的】分析血管紧张素转换酶2(ACE2)基因在家猫不同组织中的相对表达量及特定组织中的蛋白定位,为后续以ACE2基因为受体的疫病防控提供理论基础。【方法】采用qRT-PCR技术检测ACE2基因在家猫8个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、小肠和肠系膜淋巴结)中的mRNA相对表达水平,并利用免疫组织化学法检测家猫肾脏、胰腺和小肠中ACE2蛋白的组织定位。【结果】ACE2基因在家猫肾脏、胰腺和小肠组织的表达量极显著高于肺脏组织(P<0.01),在心脏、脾脏和肠系膜淋巴结组织的表达量极显著低于肺脏组织(P<0.01);不同性别家猫的ACE2表达量存在一定差异,但不显著;ACE2蛋白在小肠组织中的表达量最高,其次是肾脏,在胰腺的表达量最低。【结论】家猫ACE2基因在各组织中广泛分布且存在一定的表达差异。 展开更多
关键词 血管紧张素转换酶2 家猫 组织 表达
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犬造血干细胞分离、鉴定和培养特性研究
4
作者 严涵 田仰清 +3 位作者 昂艳芬 汪娅媛 张学峰 严玉霖 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2678-2687,共10页
【目的】研究骨髓来源的犬造血干细胞(cannie hematopoietic stem cells,cHSCs)的分离、鉴定和培养特性,建立体外培养最优条件,为临床应用奠定理论基础。【方法】取3月龄犬骨髓,采用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞(mononuclear c... 【目的】研究骨髓来源的犬造血干细胞(cannie hematopoietic stem cells,cHSCs)的分离、鉴定和培养特性,建立体外培养最优条件,为临床应用奠定理论基础。【方法】取3月龄犬骨髓,采用Ficoll密度梯度离心法分离出单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),通过流式细胞仪分选cHSCs并进行体外悬浮培养。用CCK-8法检测cHSCs在不同培养基、不同浓度胎牛血清(FBS)、不同细胞因子、不同cHSCs与cBMSCs接种比例条件下的细胞活性,筛选最优体外培养方案。使用台盼蓝染色计数法统计体外共培养1、7、14、21 d后cHSCs增殖情况。利用流式细胞术和实时荧光定量PCR分别检测P0、P1、P2和P3代cHSCs表面标志物CD34分子阳性百分比以及干性基因性别决定相关基因簇2(SOX2)和八聚体结合蛋白-4(OCT-4)的mRNA表达水平。【结果】成功分离获得cHSCs,不同培养基中细胞活性无显著差异(P>0.05);不同浓度FBS中,5%FBS组cHSCs活性显著低于10%、15%、20%FBS组(P<0.05),10%FBS组cHSCs活性显著低于20%FBS组(P<0.05);不同细胞因子条件下,TPO+FLT-3+SCF+IL-6组cHSCs活性显著高于TPO组和TPO+FLT-3组(P<0.05);不同cHSCs与cBMSCs接种比例条件下,1∶10组cHSCs活性极显著高于1∶5、5∶1和10∶1组(P<0.01),5∶1接种组cHSCs活性极显著高于1∶5和10∶1组(P<0.01)。通过筛选的最优培养方案进行体外共培养,第7天时cHSCs进入对数生长期且达到高峰,其中cHSCs+cBMSCs+细胞因子组细胞数量显著高于cHSCs+细胞因子组(P<0.05)。随着cHSCs传代培养,细胞分化潜能发生了变化,P1、P2、P3代细胞CD34分子阳性百分比、SOX 2基因mRNA表达水平均极显著低于P0代(P<0.01),P1、P2代OCT-4基因mRNA表达水平极显著高于P0代(P<0.01),P1代OCT-4基因mRNA表达水平极显著高于P2代(P<0.01)。【结论】本研究成功从犬骨髓中分离出cHSCs,筛选的cHSCs体外增殖最优培养条件为含10%FBS的IMDM培养基、cHSCs与cBMSCs接种比例为1∶10,同时联合添加TPO+FLT-3+SCF+IL-6细胞因子,P1代cHSCs处于对数生长期且CD34阳性百分比较高,可为今后临床应用提供参考。 展开更多
关键词 犬造血干细胞(cHSCs) 分离 纯化 体外培养
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JNK信号通路对犬骨髓间充质干细胞多能性基因表达的影响
5
作者 田仰清 郭娟 +4 位作者 汪娅媛 严涵 昂艳芬 闫晓霞 严玉霖 《动物医学进展》 北大核心 2022年第7期39-44,共6页
旨在探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)多能性基因的影响。采用密度梯度分选法提取cBMSCs,培养至第3代应用流式细胞术鉴定细胞表面标记物后,将其分为对照组、添加JNK信号通路抑制剂SP 600125的抑制组培... 旨在探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)多能性基因的影响。采用密度梯度分选法提取cBMSCs,培养至第3代应用流式细胞术鉴定细胞表面标记物后,将其分为对照组、添加JNK信号通路抑制剂SP 600125的抑制组培养。采用MTT法检测细胞活性,荧光定量PCR检测JNK信号通路相关基因Ras相关的C3肉瘤毒素底物1(RAC 1)、激活转录因子2(ATF 2)和多能性相关基因多梳蛋白4(CBX 4)、性别决定基因相关转录因子2(Sox 2)的mRNA转录水平。流式细胞术检测培养细胞的结果显示,CD34、CD11a、CD45为阴性,CD44和CD90为强阳性,符合间充质干细胞细胞表面标记物特点。与对照组相比,抑制组细胞存活率升高,JNK信号通路因子RAC 1、ATF 2 mRNA转录水平明显下降,多能性相关基因CBX 4、Sox2的mRNA表达水平明显升高。结果表明通过抑制JNK信号通路有助于cBMSCs多能性基因的表达从而维持cBMSCs的多能性。 展开更多
关键词 犬骨髓间充质干细胞 c-Jun氨基末端激酶信号通路 多能性基因
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异槲皮苷促进犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)的成骨分化及机理 被引量：5
6
作者 汪娅媛 郭娟 +4 位作者 田仰清 严涵 昂艳芬 闫晓霞 严玉霖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期2190-2195,共6页
本研究旨在探讨异槲皮苷对犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)成骨分化的影响及其机制。研究分为对照组和异槲皮苷组,采用MTT法检测细胞活力;茜素红染色检测cBMSCs的钙质沉积情况;荧光定量PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)和特异AT序列结合... 本研究旨在探讨异槲皮苷对犬骨髓间充质干细胞(cBMSCs)成骨分化的影响及其机制。研究分为对照组和异槲皮苷组,采用MTT法检测细胞活力;茜素红染色检测cBMSCs的钙质沉积情况;荧光定量PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)和特异AT序列结合蛋白2(SATB2)的表达;ELISA法检测细胞上清液中ALP含量;荧光定量PCR检测JNK信号通路相关基因SOS1(son of sevenless homolog 1)和激活转录因子2(ATF 2)的表达。结果显示,与对照组相比,添加异槲皮苷可显著促进cBMSCs的增殖,使cBMSCs的矿化面积增大,ALP和SATB2的mRNA水平及细胞上清液中ALP蛋白含量升高,SOS1和ATF2 mRNA水平降低。本研究结果表明,异槲皮苷对cBMSCs的增殖及成骨分化有明显促进作用,且促进cBMSCs成骨分化的机制可能是通过抑制JNK信号通路实现的。 展开更多
关键词 犬间充质干细胞 异槲皮苷 成骨分化
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