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中国南方α地中海贫血基因突变型研究 被引量:65
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作者 段山 李洪义 +4 位作者 陈争 陈素琴 毕雄杰 陈路明 杜传书 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期54-60,共7页
为了进一步完善和建立一套筛查我国α地中海贫血基因突变型的方法 ,研究我国南方两广地区α地中海贫血突变类型及分布情况 ,采用Gap PCR ,nested PCR ,PCR SSCP ,4P ASPCR及序列分析等方法 ,对 35 6例临床初诊为标准型和静止型α地中海... 为了进一步完善和建立一套筛查我国α地中海贫血基因突变型的方法 ,研究我国南方两广地区α地中海贫血突变类型及分布情况 ,采用Gap PCR ,nested PCR ,PCR SSCP ,4P ASPCR及序列分析等方法 ,对 35 6例临床初诊为标准型和静止型α地中海贫血患者和 78例血红蛋白H(HbH)病患者进行基因筛查。结果表明 :35 6例标准型和静止型α地中海贫血患者中发现 SEA αα 2 95人 (82 .87% ) ,αα α α3.71人 (0 .2 8% ) ,αα α α4 .2 3人 (0 .84 % )αα ααCS3人 (0 .84 % ) ,αα ααQS1人 (0 .2 8% )和αα αWestmeadα 2人 (0 .5 6 % ) ,没有发现 α4 .2和 α3.7的纯合子患者 ;78例HbH病患者中 SEA αα- 3.72 9人 (37.2 % ) , SEA αα- 4.2 2 0人 (2 5 .6 % ) , SEA ααCS19人 (2 4 .3% ) , SEA ααQS 2人 (2 .6 % )。在 8例未能确定基因突变类型的HbH患者中 ,2例广西籍HbH患者的α 2基因第 6 5密码子 (第二外显子 )有一同义突变 [CD6 5 (GCC→GCG) ]。它与HbH病表型究竟有无关系 ,抑或是DNA单核苷酸多态位点 (SNPs) ,有待进一步研究证实。在方法学方面 ,本研究进一步完善了以PCR为基础的基因诊断方法 ,建立了一种改进的检出非缺失型点突变的 4P ASPCR方法 ,能准确。 展开更多
关键词 Α地中海贫血 血红蛋白H病 基因诊断 基因突变
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人β地中海贫血IVSⅡ654(C→T)突变基因的克隆和真核表达体系的构建 被引量:1
2
作者 段山 方小武 +2 位作者 陈路明 曾瑞萍 杜传书 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期22-26,共5页
目的 :克隆人 β地中海贫血IVSII654突变基因 ,构建该致病基因的体外真核表达体系。为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法 :抽提 β 654纯合子患者DNA进行PCR扩增 ,将其克隆到pBGT51质粒中 ,然后将人 β珠蛋白基因座控制区 (LCR)及 ... 目的 :克隆人 β地中海贫血IVSII654突变基因 ,构建该致病基因的体外真核表达体系。为该病基因治疗的研究提供理想模型。方法 :抽提 β 654纯合子患者DNA进行PCR扩增 ,将其克隆到pBGT51质粒中 ,然后将人 β珠蛋白基因座控制区 (LCR)及 β654基因亚克隆至真核稳定表达质粒pcDNA3 .1 +中。脂质体转染至小鼠红白血病细胞 (MEL) ,DMSO诱导MEL细胞表达 ,逆转录PCR检测人 β 654基因在MEL中的表达。 结果 :成功构建了几乎真实模拟人体内 β 654基因调控的真核表达系统。 结论 :β 654基因在MEL细胞中的表达情况同人体内 β654基因的表达完全一致 。 展开更多
关键词 Β地中海贫血 真核表达体系 基因疗法 βIVSⅡ654突变基因
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α-地中海贫血的基因检测与诊断 被引量:1
3
作者 段山 李洪义 杜传书 《国外医学(遗传学分册)》 2000年第3期142-145,共4页
α-地中海贫血(α-地贫)是严重危害人类健康的遗传病,其基因背景正不断被揭示,具有遗传异质性。目前检测患者及其携带者的水平正不断提高。随着DNA分析技术的不断发展,α-地贫的基因诊断方法日臻完善。本文就α-地贫的基因... α-地中海贫血(α-地贫)是严重危害人类健康的遗传病,其基因背景正不断被揭示,具有遗传异质性。目前检测患者及其携带者的水平正不断提高。随着DNA分析技术的不断发展,α-地贫的基因诊断方法日臻完善。本文就α-地贫的基因检测诊断的gap-PCR,M-PCR,PCR-ASO,ARMS,ACRS,DGGE,RDB,PCR-SSCP等方法进展作一综述。 展开更多
关键词 Α-地中海贫血 基因突变 基因诊断 聚合酶链反应
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二种抗有丝分裂化合物诱发小鼠联会复合体损伤的研究 被引量:7
4
作者 周汝敏 汪旭 +2 位作者 曹能 段山 孙春晓 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期9-12,共4页
以抗有丝分裂化全物秋水仙素和对苯二酚处理雄性小鼠,分析了减数分裂的前期细胞联会复合体出现的各类损伤。二种化合物在减数分裂前期都诱发各种特殊倾向性的联会复合体损伤(如联会复合体断裂、联会异常等现象)。联会复合体分析,可... 以抗有丝分裂化全物秋水仙素和对苯二酚处理雄性小鼠,分析了减数分裂的前期细胞联会复合体出现的各类损伤。二种化合物在减数分裂前期都诱发各种特殊倾向性的联会复合体损伤(如联会复合体断裂、联会异常等现象)。联会复合体分析,可以作为监测减数分裂过程中同源染色体联会异常所引起的染色体异常分离和染色体结构损伤的手段。 展开更多
关键词 秋水仙素 对苯二酚 联合复合体损伤
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嵌合性RNA/DNA寡核苷酸位点特异性修复基因损伤——一种新的单基因病治疗途径
5
作者 段山 《国外医学(遗传学分册)》 2002年第5期266-270,共5页
近年来 ,无论是在 RNA或是 DNA水平 ,基因治疗的有关技术方法的研究发展迅速 ,但仍有许多缺陷。最近 ,一种新的用于准确修复基因组 DNA中单个碱基突变或缺失的方法正日趋完善 ,该方法利用同源重组原理 ,使用一段含有 DNA和RNA残基的嵌... 近年来 ,无论是在 RNA或是 DNA水平 ,基因治疗的有关技术方法的研究发展迅速 ,但仍有许多缺陷。最近 ,一种新的用于准确修复基因组 DNA中单个碱基突变或缺失的方法正日趋完善 ,该方法利用同源重组原理 ,使用一段含有 DNA和RNA残基的嵌合寡核苷酸直接修复基因损伤 ,能够在 DNA水平直接转换基因组中的碱基 ,以达到永久性修复遗传性损伤的目的且克服了一些目前存在的缺陷。 展开更多
关键词 嵌合性 RNA/DNA寡核苷酸 基因治疗 同源重组 单基因病 治疗
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内异症子宫内膜ER、PR基因表达的研究 被引量:5
6
作者 李洪义 郑辉 +1 位作者 段山 王自能 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期529-532,共4页
目的 :探讨子宫内膜异位症 (内异症 )子宫内膜雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)基因表达在内异症发病中的作用。方法 :利用大鼠内异症动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,检测子宫内膜ER和PRmRNAs的表达情况。结果 :内... 目的 :探讨子宫内膜异位症 (内异症 )子宫内膜雌激素受体 (ER)、孕激素受体 (PR)基因表达在内异症发病中的作用。方法 :利用大鼠内异症动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,检测子宫内膜ER和PRmRNAs的表达情况。结果 :内异症模型组大鼠异位内膜ER、PRmRNAs的表达显著低于在位内膜及对照组正常子宫内膜 (P <0 .0 1) ;而模型组在位内膜ER、PRmRNAs的表达与正常对照组比较差异无显著 (P >0 .0 5 )。内异症模型组异位内膜ER/PRmRNA比值大于在位内膜及正常子宫内膜ER/PRmRNA比值 (P <0 .0 1)。结论 :内异症大鼠异位内膜ERmRNA表达的相对增高在内异症的发生与发展中起着一定的作用。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜雌激素受体 孕激素受体 基因表达
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一种快速检测HbCS和HbQS点突变的PCR新方法 被引量:2
7
作者 陈素琴 李洪义 +3 位作者 郑辉 段山 胡彬 曾瑞萍 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期615-618,T001,共5页
【目的】建立一种快速的PCR基因诊断方法,用以检测中国人常见的非缺失型α地中海贫血HbCS和HbQS。【方法】根据突变扩增系统(ARMS)的基本原理,自行设计了一套含4条等位特异性引物的PCR反应体系(4P-ASPCR法),分别用以检测中国人常见的HbC... 【目的】建立一种快速的PCR基因诊断方法,用以检测中国人常见的非缺失型α地中海贫血HbCS和HbQS。【方法】根据突变扩增系统(ARMS)的基本原理,自行设计了一套含4条等位特异性引物的PCR反应体系(4P-ASPCR法),分别用以检测中国人常见的HbCS和HbQS的点突变类型。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法和DNA序列分析对检测结果进行验证。【结果】该方法检测到的HbCS突变、HbQS突变,与PCR-酶解法和DNA序列分析得出的结果一致。【结论】该新型PCR法检测HbCS和HbQS点突变快速、准确,适于推广应用,该设计思路亦可用于检测其它点突变。 展开更多
关键词 快速检测 HbCS HbQS 突变 PCR 分子诊断 Α地中海贫血
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HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞的旁观者效应及其机制研究 被引量:4
8
作者 王继兵 葛坚 +2 位作者 段山 刘炳乾 郑建樑 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2006年第3期281-284,共4页
目的观察HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的旁观者效应并研究其作用机制。方法将转HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合,加入5μg/m l更昔洛韦作用5 d,MTT法检测对HTFs的杀伤作用;染料传输法观... 目的观察HSV-tk/GCV系统对人Tenon囊成纤维细胞(HTFs)的旁观者效应并研究其作用机制。方法将转HSV-tk基因HTFs(HTFs-tk)与正常HTFs于两种接种密度下以不同比例混合,加入5μg/m l更昔洛韦作用5 d,MTT法检测对HTFs的杀伤作用;染料传输法观察HTFs细胞间隙连接细胞间通讯(G JIC)的能力;免疫细胞化学检测Cx43分布;RT-PCR及W estern b lot检测Cx43表达。结果旁观者效应随HTFs-tk/HTFs比例增加而增强,高细胞接种密度组明显强于低密度组;染料通过G JIC传输6级以上;Cx43主要分布于HTFs细胞膜并检测到其mRNA与蛋白表达。结论旁观者效应需要细胞间密切接触,Cx43介导G JIC可能是HSV-TK/GCV系统对HTFs产生旁观者效应的主要机制,HTFs表达Cx43可能在结膜伤口愈合反应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 旁观者效应 HSV—tk基因 TENON囊 成纤维细胞
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中国人α珠蛋白基因-α^(3.7)缺失亚型的研究 被引量:2
9
作者 陈素琴 李洪义 +4 位作者 陈争 段山 陈路明 田秋红 杜传书 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期649-651,共3页
- α3.7是中国人常见的缺失型α 地中海贫血 2。根据重组位点的不同, α3.7可分为 -α3.7Ⅰ型、 -α3.7Ⅱ型和 α3.7Ⅲ型,并且亚型的种类和频率具有种族差异性。本研究在中国人群中用PCR基因分析方法检出具有α珠蛋白基因 -α3.7缺失的... - α3.7是中国人常见的缺失型α 地中海贫血 2。根据重组位点的不同, α3.7可分为 -α3.7Ⅰ型、 -α3.7Ⅱ型和 α3.7Ⅲ型,并且亚型的种类和频率具有种族差异性。本研究在中国人群中用PCR基因分析方法检出具有α珠蛋白基因 -α3.7缺失的患者56例,然后用ApalⅠ和BalⅠ限制性内切酶进行分型。结果表明,在这56例具有 -α3.7缺失的患者中,有54例是 -α3.7Ⅰ型,有2例是 -α3.7Ⅱ型,尚未发现 -α3.7Ⅲ型。此结果丰富了我国α地贫基因型谱的资料。 展开更多
关键词 中国人 Α珠蛋白基因 缺失亚型 Α地中海贫血
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昆明松花坝水库水的Blue Rayon抽提物在CHO细胞中的遗传毒性研究 被引量:2
10
作者 汪旭 段山 +1 位作者 宋明泉 陈明红 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1997年第2期126-128,共3页
本文报道了利用BlueRayon抽提浓缩饮用水中多环芳香烃(PAHs),继而测定其遗传毒性的方法。昆明松花坝水库水样抽提物在中国仓鼠卵巢细胞株(CHO)中显著诱发姊妹染色单体互换(P<0.01-0.05)。实验证明昆... 本文报道了利用BlueRayon抽提浓缩饮用水中多环芳香烃(PAHs),继而测定其遗传毒性的方法。昆明松花坝水库水样抽提物在中国仓鼠卵巢细胞株(CHO)中显著诱发姊妹染色单体互换(P<0.01-0.05)。实验证明昆明松花坝水库水含有少量的多环芳香族诱变物质。治理周围环境,减少向水库内排污是提高水质的重要环节。利用BlueRayon抽提水样中多环芳香烃并随之对其进行遗传毒性评估是可靠、快速。 展开更多
关键词 卫生毒理 BLUE RAYON 提取物 CHO细胞 遗传毒性
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二种抗有丝分裂化合物诱发小鼠联会复合体损伤的研究
11
作者 周汝敏 汪旭 +2 位作者 曹能 段山 孙春晓 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1995年第4期249-249,共1页
二种抗有丝分裂化合物诱发小鼠联会复合体损伤的研究周汝敏,汪旭,曹能,段山,孙春晓(云南师范大学生命科学系昆明650092)以抗有丝分裂化合物秋水仙素(1mg/kg)和对苯二酚(10Omg/kg)腹腔处理雄性小鼠,采用... 二种抗有丝分裂化合物诱发小鼠联会复合体损伤的研究周汝敏,汪旭,曹能,段山,孙春晓(云南师范大学生命科学系昆明650092)以抗有丝分裂化合物秋水仙素(1mg/kg)和对苯二酚(10Omg/kg)腹腔处理雄性小鼠,采用精母细胞联会复合体界面铺张法,研究... 展开更多
关键词 抗有丝分裂化合物 小鼠 联合复合体损
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从女性主义解读相亲类真人秀节目《我们约会吧》 被引量:1
12
作者 段山 《湖南大众传媒职业技术学院学报》 2016年第2期35-37,共3页
从女性主义视角出发,相亲类真人秀节目《我们约会吧》呈现出多样的女性形象,却没能超越由男性话语权所规定的审美标准。女性话语权在节目中虽得到一定程度的体现,但实际上仍处于弱势地位。
关键词 女性主义 《我们约会吧》 相亲类真人秀
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蛋白质组学在孤独症谱系障碍研究中的进展 被引量:3
13
作者 欧阳建平 曾卓颖 +2 位作者 洪文旭 段山 曾序春 《中国计划生育学杂志》 2014年第10期715-717,共3页
孤独症谱系障碍又名儿童孤独症或早年孤独样障碍,在我国香港、澳门、台湾等地及日本地区又常称为自闭症,是广泛性发育障碍(PDD)中最为常见的一种疾病。儿童孤独症谱系障碍一般发病在3岁前,以男性居多,男女比例为4-10:1。在西方发达国... 孤独症谱系障碍又名儿童孤独症或早年孤独样障碍,在我国香港、澳门、台湾等地及日本地区又常称为自闭症,是广泛性发育障碍(PDD)中最为常见的一种疾病。儿童孤独症谱系障碍一般发病在3岁前,以男性居多,男女比例为4-10:1。在西方发达国家,孤独症谱系障碍发病率同样呈现显著上升的趋势。在美国,1990年报道孤独症谱系障碍发病率为0.2%-0.7%;2007年的流行病学调查发现,全美3-17岁儿童青少年中, 展开更多
关键词 孤独症谱系障碍 蛋白质组学 儿童孤独症 广泛性发育障碍 西方发达国家 流行病学调查 发病率 自闭症
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VHL综合征基因诊断1例并文献复习 被引量:1
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作者 陈美玲 李莉 +4 位作者 段山 陈煜颖 任萌 严励 杨川 《岭南急诊医学杂志》 2017年第2期201-202,共2页
VHL(Von Hippel-Lindau)综合征是VHL肿瘤抑制基因失活、突变引起的以家族性血管母细胞瘤为特征的常染色体显性遗传性肿瘤综合征,具有较高的外显率及多种表达方式,早期诊断困难。虽有相应临床诊断标准,但基因检测是诊断VHL综合征的金标... VHL(Von Hippel-Lindau)综合征是VHL肿瘤抑制基因失活、突变引起的以家族性血管母细胞瘤为特征的常染色体显性遗传性肿瘤综合征,具有较高的外显率及多种表达方式,早期诊断困难。虽有相应临床诊断标准,但基因检测是诊断VHL综合征的金标准。突变基因检测诊断VHL综合征明显优于基于临床表现的诊断。 展开更多
关键词 综合征 基因检测 突变基因 综合病症 VHL 血管母细胞瘤
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体现信息伦理教育的中小学信息技术教材编写探究 被引量:5
15
作者 段山 严定友 《出版科学》 CSSCI 北大核心 2020年第3期41-46,共6页
目前我国中小学信息技术课程信息伦理教育存在不足,特别是教材编写理念和内容滞后。文章探讨信息伦理在信息技术教育中的地位与作用,分析现行教材信息伦理教育存在的问题,提出教材编写过程中构建信息伦理教育规范的思考,如信息伦理教育... 目前我国中小学信息技术课程信息伦理教育存在不足,特别是教材编写理念和内容滞后。文章探讨信息伦理在信息技术教育中的地位与作用,分析现行教材信息伦理教育存在的问题,提出教材编写过程中构建信息伦理教育规范的思考,如信息伦理教育观念、教育责任主体、教育过程以及现代伦理文化打造等。 展开更多
关键词 中小学信息技术 教材编写与出版 信息伦理教育
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改革开放以来我国中小学教材出版变革略谈 被引量:1
16
作者 段山 《基础教育课程》 北大核心 2018年第21期57-62,共6页
中小学教材作为基础教育的重要载体,肩负着提高全民教育水平的重任,关系党和国家教育方针的落实和教育目标的实现。它的特殊性质和地位决定了其出版始终受国家政策的影响。从1949年到现在,我国中小学教材的出版经历了几次变革,本文则重... 中小学教材作为基础教育的重要载体,肩负着提高全民教育水平的重任,关系党和国家教育方针的落实和教育目标的实现。它的特殊性质和地位决定了其出版始终受国家政策的影响。从1949年到现在,我国中小学教材的出版经历了几次变革,本文则重点探讨改革开放以来的具体变革。 展开更多
关键词 改革开放40年 教材变化 中小学教材 教材出版政策
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文本解读有什么问题?——文本解读中的误区及改进策略 被引量:1
17
作者 段山 《基础教育课程》 北大核心 2018年第6期50-53,共4页
本文针对教师在文本解读中容易产生的“重外显层面,轻内在意蕴”“重多元解读,轻价值取向”“重内容信息,轻表达形式”等问题,提出对应的解决策略,促进教师文本解读能力的提升。
关键词 语文阅读教学 文本解读 误区 对策
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20Y-STR检测试剂盒应用于Y-STR数据库的研究
18
作者 赵凯 苏进娣 段山 《警察技术》 2019年第2期48-51,共4页
目的:建立20个Y-STR基因座的复合扩增体系,进行体系评估,并评价其法医学应用价值;结合Y-STR DNA数据库,在大数据背景下探索Y-STR DNA检测试剂盒的应用。方法:采用五色荧光标记技术,对自行设计的20个YSTR基因座多重扩增引物进行复合扩增... 目的:建立20个Y-STR基因座的复合扩增体系,进行体系评估,并评价其法医学应用价值;结合Y-STR DNA数据库,在大数据背景下探索Y-STR DNA检测试剂盒的应用。方法:采用五色荧光标记技术,对自行设计的20个YSTR基因座多重扩增引物进行复合扩增和毛细管电泳检测,检测其扩增效率,引物间的扩增平衡性以及特异性,结合Y-STR DNA数据库应用对家系亲缘关系排查进行验证研究。结果:研究建立的同时检测20个Y-STR基因座五色荧光检测方法,特异性好,分型结果准确稳定,灵敏度高,实际案例常见生物检材的检验结果良好,与目前已有的试剂盒,例如YFiler的结果一致,能够用于Y-STR DNA数据库建设。结论:20Y-STR基因座复合扩增检测法可以用于中国人群的Y-STR分型筛查,有望应用于法医物证实际检验工作,并有助于我国建立Y-STR DNA数据库,成为公安大数据的良好数据供体。 展开更多
关键词 Y染色体 短串联重复序列 法医遗传学 大数据
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现代企业制度构建视角下的出版企业管理——评《商务印书馆企业制度研究(1897-1949)》
19
作者 段山 严定友 《中国教育学刊》 CSSCI 北大核心 2019年第7期128-128,共1页
随着经济的飞速发展,我国出版企业迎来了机遇与挑战。为实现更好的发展,出版企业需从传统的管理向现代化管理转变,在以市场经济为基础、公司法人制度为主体、公司制度为核心、产权清晰和权责明确为条件的现代企业制度构建视角下,对出版... 随着经济的飞速发展,我国出版企业迎来了机遇与挑战。为实现更好的发展,出版企业需从传统的管理向现代化管理转变,在以市场经济为基础、公司法人制度为主体、公司制度为核心、产权清晰和权责明确为条件的现代企业制度构建视角下,对出版企业管理进行管理理念的创新,以及对管理制度与组织系统进行重新定位。 展开更多
关键词 企业管理 出版企业 制度构建 现代企业 商务印书馆 制度研究 公司法人制度 市场经济
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乳腺浸润性导管癌中lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络的整合分析 被引量:1
20
作者 高建 金亦 +2 位作者 林洁 林圣 段山 《广东医学》 CAS 2022年第7期804-810,共7页
目的构建乳腺浸润性导管癌的特异性ceRNA调控网络。方法收集68例乳腺浸润性导管癌组织以及14例乳腺良性组织,以ANOVA P<0.05且|Fold Change(linear)|>2为基因差异表达筛选标准,采用人类全转录组基因表达谱HTA2.0芯片和miRNA4.0芯... 目的构建乳腺浸润性导管癌的特异性ceRNA调控网络。方法收集68例乳腺浸润性导管癌组织以及14例乳腺良性组织,以ANOVA P<0.05且|Fold Change(linear)|>2为基因差异表达筛选标准,采用人类全转录组基因表达谱HTA2.0芯片和miRNA4.0芯片来检测lncRNAs、mRNAs和miRNAs的表达;利用GDCRNATools包分析三者之间的ceRNA调控关系并用Cytoscape进行可视化;最后采用商业软件IPA分析差异表达的mRNAs参与的生物学功能。结果与乳腺良性组织相比,乳腺浸润性导管癌组织中有513个mRNAs、293个lncRNAs和165个miRNAs存在差异表达;所构建的特异性ceRNA子网络,主要由4个lncRNAs、3个miRNAs和61个mRNAs组成;异常表达的mRNAs在细胞学功能方面主要涉及到肿瘤细胞运动、细胞生长和增殖、细胞周期、侵袭和转移等。结论构建了乳腺浸润性导管癌组织的特异性ceRNA网络,从而为进一步探讨网络中核心分子间的表达调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 乳腺癌 浸润性导管癌 长链非编码RNA MIRNA 竞争性内源RNA
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