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靶向毒素DT-VEGF的构建、表达与活性分析 被引量:2
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作者 柴映爽 程新 +6 位作者 姚立红 陈爱珺 喻宏 严馨蕊 贾润清 黄国锦 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期192-196,共5页
肿瘤的快速生长依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子 (VEGF)是血管发生和形成过程中的主要介质 ,其特异性受体在正常组织和肿瘤组织的表达率存在数个数量级的差异 ,因此可以将毒素分子转运至增生的肿瘤上皮组织中抑制肿瘤血管增生 ... 肿瘤的快速生长依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子 (VEGF)是血管发生和形成过程中的主要介质 ,其特异性受体在正常组织和肿瘤组织的表达率存在数个数量级的差异 ,因此可以将毒素分子转运至增生的肿瘤上皮组织中抑制肿瘤血管增生 ,从而抑制肿瘤的生长。将白喉毒素的前 3 89个氨基酸基因片段与VEGF165通过一短肽相连构建为融合蛋白基因 ,在大肠杆菌中表达 ,获得纯化蛋白。实验证实该融合蛋白对血管内皮细胞有特异性杀伤作用 。 展开更多
关键词 靶向毒素 DT-VEGF 血管内皮生长因子 白喉毒素 融合蛋白 基因 表达 活性 肿瘤
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以VEGF受体为靶向的融合毒素的研究 被引量:1
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作者 柴映爽 张智清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期187-189,共3页
肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素... 肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素构建为融合毒素,特异性定位于肿瘤部位,通过抑制血管的增生达到抑制肿瘤的目的。国外自二十世纪九十年代后期开展这方面研究,国内尚少见此类报道。本文就此类融合毒素的设计及临床研究等方面的进展作一综述。 展开更多
关键词 VEGF受体 靶向毒素 融合 血管内皮生长因子 肿瘤
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抑制肿瘤坏死因子-α的DNA适配子的筛选与鉴定 被引量:5
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作者 郭克泰 严馨蕊 +3 位作者 黄国锦 徐春晓 柴映爽 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期730-733,共4页
应用SELEX技术筛选能与TNF结合的DNA适配子。化学合成随机寡聚DNA库 ,以TNF为靶蛋白 ,经过12轮SELEX筛选 ,将所得产物克隆、测序。根据所测序列化学合成寡聚DNA适配子 ,用生物素_亲和素_辣根过氧化物酶显色系统检测适配子与TNF的结合活... 应用SELEX技术筛选能与TNF结合的DNA适配子。化学合成随机寡聚DNA库 ,以TNF为靶蛋白 ,经过12轮SELEX筛选 ,将所得产物克隆、测序。根据所测序列化学合成寡聚DNA适配子 ,用生物素_亲和素_辣根过氧化物酶显色系统检测适配子与TNF的结合活性 ;用鼠L92 9细胞检测适配子拮抗TNF活性。结果显示 ,所筛选到的寡聚DNA能与TNF_α高亲和力结合 ,并能在细胞培养中拮抗TNF_α的细胞毒活性。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α DNA适配子 筛选 鉴定
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重组人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(sTNFRⅡ)的纯化 被引量:1
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作者 徐春晓 姚立红 +5 位作者 祖东 黄国锦 严馨蕊 柴映爽 陈爱珺 张智清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期357-360,共4页
目的 从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法 菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果 纯化的重组蛋白纯度大于95%,... 目的 从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法 菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果 纯化的重组蛋白纯度大于95%,并且能中和TNF的生物学活性,抑制其对细胞的杀伤作用。结论该工艺能简便有效地纯化出TNF受体蛋白,为进一步深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 重组人肿瘤坏死因子 可溶性受体Ⅱ sTNFRⅡ 纯化 大肠杆菌 生物学活性
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应用酵母双杂交系统筛选与CIKS(151-574)相互作用的蛋白质
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作者 黄国锦 张智清 +6 位作者 姚立红 陈爱珺 徐春晓 朱宏建 柴映爽 严馨蕊 金冬雁 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期190-194,共5页
CIKS(ConnectiontoIKKandSAPK JNK)是最近发现的细胞蛋白 ,能激活IKK和SAPK JNK。应用酵母双杂交系统 ,将CIKS(15 1 5 74)插入载体pAS2 1作为诱铒 ,筛选人HeLa细胞MATCHMAKERcDNA文库 ,以期为阐明NFκB及JNK活性调控的分子机理提供新... CIKS(ConnectiontoIKKandSAPK JNK)是最近发现的细胞蛋白 ,能激活IKK和SAPK JNK。应用酵母双杂交系统 ,将CIKS(15 1 5 74)插入载体pAS2 1作为诱铒 ,筛选人HeLa细胞MATCHMAKERcDNA文库 ,以期为阐明NFκB及JNK活性调控的分子机理提供新的线索。筛选得到 6个阳性AD 文库质粒 ,并用酵母双杂交实验验证了阳性AD 文库质粒与CIKS的相互作用。将阳性AD 文库质粒测序并对测序结果做BLAST分析 ,发现它们分别是RIKENcDNA 473340F0 3,PLAC8,CD2 7BP (Siva 1) ,CDC5L ,SnRNPsmB ,DVL2。CIKS能与这些功能各异的蛋白质相互作用 ,表明CIKS在细胞的多种生理活动中发挥作用。 展开更多
关键词 CDNA文库 蛋白质相互作用 酵母双杂交系统 CIKS 细胞蛋白 载体
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嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究 被引量:2
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作者 徐春晓 姚立红 +3 位作者 黄国锦 柴映爽 陈爱珺 张智清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2004年第1期18-22,共5页
目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 ... 目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 可溶性受体 嵌合蛋白 生物学活性 纯化工艺 sTNFRⅡ-IgG
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上海市七宝镇乡镇企业卫生服务现状研究
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作者 王德耀 柴映爽 +5 位作者 吕中全 于艺 张任 徐祥敏 李达飞 黄德渔 《中国初级卫生保健》 1996年第10期34-36,共3页
对卫生部乡镇企业卫生服务试点区——上海市七宝镇所属115家乡镇企业职工接触职业危害因素、职业防护措施、卫生资源利用以及卫生服务提供等方面进行的综合研究结果表明:试点区乡镇企业在卫生服务方面普遍存在着高需求、低资源和低利用... 对卫生部乡镇企业卫生服务试点区——上海市七宝镇所属115家乡镇企业职工接触职业危害因素、职业防护措施、卫生资源利用以及卫生服务提供等方面进行的综合研究结果表明:试点区乡镇企业在卫生服务方面普遍存在着高需求、低资源和低利用的倾向,亟待引起工业及卫生管理部门的高度重视。 展开更多
关键词 乡镇企业 劳动保护 资源利用 卫生服务
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评定皮肤和眼刺激的实验方法
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作者 Herz.,T 柴映爽 《国外医学(卫生学分册)》 北大核心 1997年第1期7-9,共3页
化学物安全性评价程序中,传统的皮肤、眼刺激试验存在一定局限性,为此需发展合理的方法以替代实验动物局部耐受试验。本文就近10年来这方面的研究进展及其前景作了综述。
关键词 日用商品 安全性评价 皮肤 刺激试验 耐受性
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