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多层面推进生物化学与分子生物学实验双语教学改革 被引量：1
1
作者 谢苗 沙莉 +1 位作者 崔凯 林娅红 《海峡科学》 2019年第12期85-88,共4页
生物化学与分子生物学实验课程开展双语教学,既能有效衔接双语理论课程,又能够培养学生良好的实践动手能力和严谨的科学研究素养。该文从教学环节、教学环境和教学评价三个方面探讨了加强生物化学与分子生物学实验双语课程教学改革,提... 生物化学与分子生物学实验课程开展双语教学,既能有效衔接双语理论课程,又能够培养学生良好的实践动手能力和严谨的科学研究素养。该文从教学环节、教学环境和教学评价三个方面探讨了加强生物化学与分子生物学实验双语课程教学改革,提高和巩固双语教学效果,为学生今后的科研训练奠定良好的基础。 展开更多
关键词 生物化学和分子生物学实验课程 双语教学 实验教学
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DEK真核表达载体的构建及其对p53启动子活性的影响
2
作者 刘婕 闫志风 +3 位作者 张亚楠 林娅红 丁丽华 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期34-36,共3页
目的:构建DEK的pcDNA3-Flag表达载体,研究其对抑癌基因p53启动子活性的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增DEK编码序列,克隆到pcDNA3-Flag载体,构建成pcDNA3-Flag-DEK,转染293T细胞,Western印迹鉴定pcDNA3-Flag载体介导的DEK的表达,... 目的:构建DEK的pcDNA3-Flag表达载体,研究其对抑癌基因p53启动子活性的影响。方法:以乳腺文库为模板,PCR扩增DEK编码序列,克隆到pcDNA3-Flag载体,构建成pcDNA3-Flag-DEK,转染293T细胞,Western印迹鉴定pcDNA3-Flag载体介导的DEK的表达,萤光素酶报告基因活性实验研究DEK对p53启动子活性的影响。结果:双酶切实验证实得到pcDNA3-Flag-DEK阳性克隆;Western印迹实验发现DEK在293T细胞内表达;转录活性实验表明在ZR75-1乳腺癌细胞中,DEK呈剂量依赖性抑制p53启动子的活性。结论:构建了DEK的真核表达载体,并发现此表达载体能在ZR75-1乳腺癌细胞中抑制p53启动子活性。 展开更多
关键词 DEK 萤光素酶报告基因 p53启动子
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敲低GATA1慢病毒表达载体的构建及敲低效果检测
3
作者 张亚楠 刘婕 +3 位作者 林娅红 周蕾 丁丽华 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2013年第5期621-623,共3页
目的:为了探讨与人血细胞相关的GATA1转录因子在实体肿瘤发生发展中的功能,构建GATA1的慢病毒干扰载体,并验证其敲低效果。方法:根据人GATA1的cDNA序列,设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列,将其克隆到慢病毒表达载体上;将重组质粒转染人... 目的:为了探讨与人血细胞相关的GATA1转录因子在实体肿瘤发生发展中的功能,构建GATA1的慢病毒干扰载体,并验证其敲低效果。方法:根据人GATA1的cDNA序列,设计含有小发卡结构的寡核苷酸序列,将其克隆到慢病毒表达载体上;将重组质粒转染人胚肾293T细胞,通过实时定量RT-PCR及Western印迹检测GATA1的表达水平。结果和结论:构建了具有明显干扰效果的GATA1基因的小干扰RNA(siRNA)慢病毒表达载体,能够有效抑制GATA1 mRNA和蛋白水平,为后续的GATA1生物学作用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 GATA1 慢病毒载体 RNA干扰
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血管内皮细胞生长因子启动子突变体萤光素酶报告基因载体的构建
4
作者 张述 刘婕 +4 位作者 刘世翠 林娅红 张亚楠 丁丽华 叶棋浓 《生物技术通讯》 CAS 2013年第1期37-40,共4页
目的:构建含有不同片段血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的启动子的萤光素酶报告基因载体,并定位缺氧诱导因子1α(HIF-1α)结合VEGF启动子的区域。方法:以VEGF全长启动子为模板,PCR扩增VEGF启动子的不同片段,插入萤光素酶报告基因载体pGL... 目的:构建含有不同片段血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的启动子的萤光素酶报告基因载体,并定位缺氧诱导因子1α(HIF-1α)结合VEGF启动子的区域。方法:以VEGF全长启动子为模板,PCR扩增VEGF启动子的不同片段,插入萤光素酶报告基因载体pGL4-basic,确定所扩增的DNA序列后,将其与HIF-1α表达载体共转染293T细胞,定位HIF-1α结合VEGF启动子的区域。结果:测序结果表明扩增的不同片段的VEGF启动子序列正确;萤光素酶活性实验表明,-1128^-728 bp片段是HIF-1α与VEGF相互作用激活VEGF启动子转录活性的区域。结论:克隆了VEGF启动子5'端缺失突变体报告基因表达载体,为调控VEGF表达的转录因子的筛选及功能研究打下了良好基础。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 启动子 萤光素酶报告基因 转录活性
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注重实践能力培养的可编程控制器教学改革研究 被引量：3
5
作者 杨仁弟 陈素 +1 位作者 王东兴 林娅红 《科教文汇》 2020年第16期81-82,共2页
针对可编程控制器(Programmable Logic Controller,PLC)教学中出现的重理论、轻实践问题,对PLC进行实践能力培养方面的教学改革。紧跟PLC技术发展趋势,通过更新教学内容,丰富教学手段,激发学生学习兴趣,提高学习的主观能动性。通过完善... 针对可编程控制器(Programmable Logic Controller,PLC)教学中出现的重理论、轻实践问题,对PLC进行实践能力培养方面的教学改革。紧跟PLC技术发展趋势,通过更新教学内容,丰富教学手段,激发学生学习兴趣,提高学习的主观能动性。通过完善实践教学体系,创造实践机会,锻炼学生的动手能力,启发学生的创新思维,培养学生的实践能力,取得了较好的教学效果。 展开更多
关键词 可编程控制器 教学改革 实践能力培养
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VEGF启动子活性的测定 被引量：2
6
作者 刘婕 林娅红 +2 位作者 张亚楠 丁丽华 叶棋浓 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期184-186,共3页
目的构建含有VEGF基因的不同片段启动子的荧光素酶报告基因载体,并检测VEGF启动子不同片段的活性。方法用PCR扩增出VEGF启动子的不同片段,插入到荧光素酶报告基因载体pGL4-basic中,确定所扩增的DNA序列后,将其转染至293T细胞中,检测其... 目的构建含有VEGF基因的不同片段启动子的荧光素酶报告基因载体,并检测VEGF启动子不同片段的活性。方法用PCR扩增出VEGF启动子的不同片段,插入到荧光素酶报告基因载体pGL4-basic中,确定所扩增的DNA序列后,将其转染至293T细胞中,检测其不同片段的活性。结果测序结果表明,扩增的不同片段的VEGF启动子序列正确;荧光素酶活性实验表明,VEGF启动子+72～-128 bp至+72～-528 bp片段具有较高的活性。结论构建了VEGF启动子5'端缺失不同片段突变体报告基因表达载体,为VEGF转录因子的筛选及功能研究提供了重要基础。 展开更多
关键词 VEGF启动子 荧光素酶报告基因 转录活性
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