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壳聚糖在药物剂型中的应用 被引量：8
1
作者 杨勇博 孙庆申 +2 位作者 车小琼 王璞 翟佳慧 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第41期8131-8134,共4页
壳聚糖来源丰富,具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性、成膜性和极强的可塑性,已经作为高分子材料,广泛用于药物剂型中。利用壳聚糖制备的缓释制剂可以提高药物安全性、有效性及可靠性,可以调整药物释放速率,减少给药次数。壳... 壳聚糖来源丰富,具有良好的生物相容性、生物可降解性、无毒性、成膜性和极强的可塑性,已经作为高分子材料,广泛用于药物剂型中。利用壳聚糖制备的缓释制剂可以提高药物安全性、有效性及可靠性,可以调整药物释放速率,减少给药次数。壳聚糖及其衍生物是很好的靶向制剂载体,已被广泛应用于靶向给药系统的研究,可以有效提高药物在靶点的作用,减少给药量,避免药物在到达靶点前被降解,使药物在其他部位的毒副作用降低。壳聚糖作为药物载体虽然由其独特的优势,但在生产和应用上还有不少问题,目前常用戊二醛作为化学交联剂而制备壳聚糖微球,但是戊二醛对蛋白质等生物活性药物的伤害极大,并且对人体也有害,而用离子交联方法制备的微球极不稳定。因此,目前人们研究的重点在于对壳聚糖进行改性,进一步提高其载药能力。 展开更多
关键词 壳聚糖 缓释制剂 靶向给药系统
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载牛冠状病毒N蛋白壳聚糖微球的免疫效果评价 被引量：5
2
作者 孙庆申 李鑫 +3 位作者 车小琼 常继涛 杨勇博 于力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期882-886,共5页
为了对壳聚糖分子作为佐剂的缓释效果进行免疫学评价,本研究合成了牛冠状病毒DB2毒株N蛋白基因的3'端第487位～1287位碱基,用大肠杆菌对其进行了高效表达,通过SDS-PAGE电泳分离、电洗脱纯化该牛冠状病毒N蛋白(BCVN)。以戊二醛为交联... 为了对壳聚糖分子作为佐剂的缓释效果进行免疫学评价,本研究合成了牛冠状病毒DB2毒株N蛋白基因的3'端第487位～1287位碱基,用大肠杆菌对其进行了高效表达,通过SDS-PAGE电泳分离、电洗脱纯化该牛冠状病毒N蛋白(BCVN)。以戊二醛为交联剂,采用乳化交联的方法制备空白壳聚糖微球。利用吸附法制备载BCVN蛋白的壳聚糖微球,通过肌肉注射途径免疫BALB/c小鼠,用间接ELISA方法检测免疫鼠血清中的抗体水平,由此评价壳聚糖微球对BCVN的缓释作用和佐剂效应。结果表明,壳聚糖微球的形态较好、表面光滑、分散性较好,平均粒径为6.50±1.77μm,电势分布在36mV,吸附BCVN蛋白的壳聚糖微球在体内所产生的免疫效果明显优于唯N蛋白组,说明载BCVN蛋白的壳聚糖微球在体内具有一定的缓释效果,使N蛋白在体内缓慢释放而长时间诱导抗体的产生,该研究结果为以壳聚糖微球作为疫苗佐剂积累了实验数据。 展开更多
关键词 壳聚糖 牛冠状病毒核衣壳蛋白 吸附 动物接种 缓释作用
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壳聚糖微纳米粒制备及其特性的研究 被引量：3
3
作者 孙庆申 车小琼 +3 位作者 杨勇博 翟佳慧 杜江峰 赵凯 《黑龙江大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2009年第2期243-246,共4页
用碱降解法纯化了壳聚糖,并以纯化后的壳聚糖为材料,通过乳化交联法制备微球,分析了壳聚糖的脱乙酰度对微球形态、粒径、分散度的影响。结果表明,随着纯化时间的延长,壳聚糖的脱乙酰度逐渐提高,微球粒径明显小于用未纯化的壳聚糖为原料... 用碱降解法纯化了壳聚糖,并以纯化后的壳聚糖为材料,通过乳化交联法制备微球,分析了壳聚糖的脱乙酰度对微球形态、粒径、分散度的影响。结果表明,随着纯化时间的延长,壳聚糖的脱乙酰度逐渐提高,微球粒径明显小于用未纯化的壳聚糖为原料制备的壳聚糖微球,微球大小更均一,并且分散体系稳定,不易团聚。此外,还通过离子交联法制备粒径均匀、分散体系稳定的300～400nm的壳聚糖粒子,为以后利用壳聚糖包埋药物提供了实验基础。 展开更多
关键词 壳聚糖 脱乙酰作用 微球 纳米粒子 交联
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猪繁殖与呼吸综合征病毒3’-UTR碱基缺失对病毒复制影响的初步研究 被引量：2
4
作者 熊俊垚 赵款 +4 位作者 于芳 杨勇博 田志军 蔡雪辉 安同庆 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期783-788,共6页
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)3’-非编码区(UTR)在病毒复制过程中具有重要作用,本研究经序列比对发现,与经典PRRSV相比,高致病性PRRSV(HP-PRRSV)3’-UTR中第17位碱基G(鸟嘌呤)发生缺失。为进一步探究3’-UTR中该碱基缺失对3’-UTR二... 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)3’-非编码区(UTR)在病毒复制过程中具有重要作用,本研究经序列比对发现,与经典PRRSV相比,高致病性PRRSV(HP-PRRSV)3’-UTR中第17位碱基G(鸟嘌呤)发生缺失。为进一步探究3’-UTR中该碱基缺失对3’-UTR二级结构和PRRSV复制效率的影响,本研究在HP-PRRSV HuN 4感染性克隆株的基础上,将缺失碱基补平,得到突变病毒HuN 4-3’-UTR-(17+G)。复制动力学结果显示突变病毒HuN 4-3’-UTR-(17+G)在48 h和96 h病毒滴度均较亲本病毒HuN 4株显著降低(p<0.05),表明3’-UTR第17位碱基G的缺失增强了HP-PRRSV的复制能力;同时第17位碱基对应的茎环区域的缺失不影响病毒拯救,其还可以作为标记疫苗的分子标签。本研究结果为进一步探究PRRSV复制的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 3’-UTR 复制 缺失
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猪繁殖与呼吸综合征病毒凝胶层析纯化方法的建立与初步应用
5
作者 孙悦 王尚辉 +6 位作者 涂亚斌 杨勇博 王洪峰 夏大松 蔡雪辉 安同庆 孙明霞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期1-6,共6页
为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRS... 为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 凝胶层析技术 纯化 形态学
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NLRP3炎症小体和NF-κB信号通路参与化脓隐秘杆菌感染小鼠肝脏炎症反应的研究
6
作者 李思琪 秦嫘 +3 位作者 孟凡丹 杨勇博 王淑杰 蔡雪辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1054-1060,1079,共8页
为探究化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)在肝脏中诱导炎症小体活化的机制,本研究以2×106 cfu/只腹腔注射化脓隐秘杆菌的小鼠为感染模型,分别于感染后不同时间采集小鼠肝脏组织,分别提取肝细胞RNA和蛋白质,将RNA反转录成cDNA作... 为探究化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)在肝脏中诱导炎症小体活化的机制,本研究以2×106 cfu/只腹腔注射化脓隐秘杆菌的小鼠为感染模型,分别于感染后不同时间采集小鼠肝脏组织,分别提取肝细胞RNA和蛋白质,将RNA反转录成cDNA作为模板,利用荧光定量PCR检测小鼠肝脏组织中NLRP-3、ASC、IL-18、IL-1β和TNF-αm RNA的转录水平,同时通过western blot检测小鼠肝细胞中炎症小体信号通路蛋白NLRP-3、AIM2、ASC、Caspase-1、NLRP-1和细胞焦亡信号通路相关蛋白GSDMD-C、IL-18和IL-1β的表达。结果显示,与对照组相比,感染化脓隐秘杆菌后1 d、2 d和7 d的小鼠肝组织内炎症小体信号通路蛋白基因及促炎细胞因子基因的转录水平均显著升高(P<0.05);western blot检测感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞蛋白,结果显示,与对照组相比,小鼠肝细胞内除NLRP-1的表达无差异外,其他炎症小体信号通路相关蛋白及促炎细胞因子表达量均显著或极显著升高(P<0.05,P<0.01)。上述结果证实化脓隐秘杆菌可诱导肝细胞中NLRP-3/ASC和AIM2/ASC炎症小体复合物的激活,继而促进Caspase-1的成熟与GSDMD的切割,引起肝细胞焦亡,导致大量促炎细胞因子释放。本研究进一步通过western blot检测化脓隐秘杆菌感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞中NF-κB信号通路中p65和磷酸化p65蛋白(p-p65)的表达水平,结果显示,与对照组相比,p-p65蛋白的表达量显著升高(P<0.05),表明NF-κB信号通路被激活。同时,本研究也对化脓隐秘杆菌感染小鼠后1 d、2 d、4 d和7 d采集的肝脏组织进行病理学观察,结果显示,与对照组织相比,肝细胞均发生变性及坏死。本研究证实在化脓隐秘杆菌感染的小鼠肝细胞内炎症小体和NF-κB信号通路参与了感染期间的炎症反应,为化脓隐秘杆菌引起肝脏炎症反应发生的机制研究提供参考依据。 展开更多
关键词 化脓隐秘杆菌 炎症小体 细胞焦亡 炎症反应
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浅谈幼儿绘画教学
7
作者 杨勇博 《青年与社会（下）》 2018年第12期112-112,共1页
在全面推行素质教育的今天,美术教育受到学校、家长、社会的高度重视,也成了学校实施素质教育的重要平台。幼儿园也不例外,美术教师要根据幼儿的心理特点,创新绘画教学手段,激发幼儿学习美术的兴趣,不断提高幼儿美术教育水平。
关键词 幼儿教育 绘画教学 能力培养
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