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禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体制备及抗原表位的鉴定
1
作者 陈桂娥 容芳 +3 位作者 苟鑫 孙荣航 李作生 陈瑞爱 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期23-28,共6页
为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴... 为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴定,将目的蛋白截短成4段,初步鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,共筛选出4株单克隆细胞,其抗体亚类皆为IgG1型,其中3A1抗体效价为1∶64000,3B2为1∶256000,5F1为1∶128000,5G2为1∶8000;4株单克隆抗体识别的抗原表位在1-60 aa之间。研究结果为进一步建立ALV相关免疫学检测方法提供了重要的材料。 展开更多
关键词 禽白血病病毒 P27蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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应用DNA疫苗制备猪瘟病毒单克隆抗体的研究 被引量：13
2
作者 李作生 余兴龙 +5 位作者 李敏 马刚 马丛林 李红卫 涂长春 殷震 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期76-77,共2页
关键词 DNA疫苗 CSFV E2基因 单克隆抗体 猪瘟病毒 制备
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LKB1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：5
3
作者 李作生 王国臣 +2 位作者 陈志全 郑贸根 侯静朴 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期20-21,共2页
目的探讨LKB1蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况及临床意义。方法应用免疫组化方法检测76例非小细胞肺癌中LKB1蛋白的表达情况。结果 LKB1蛋白在肺癌组织及癌旁正常肺组织中均有表达,LKB1在正常肺组织的阳性表达率显著高于癌组织(90.78%vs... 目的探讨LKB1蛋白在非小细胞肺癌中的表达情况及临床意义。方法应用免疫组化方法检测76例非小细胞肺癌中LKB1蛋白的表达情况。结果 LKB1蛋白在肺癌组织及癌旁正常肺组织中均有表达,LKB1在正常肺组织的阳性表达率显著高于癌组织(90.78%vs 65.79%,P<0.01)。LKB1蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达无显著性差异。LKB1蛋白在高分化肿瘤中的表达阳性率明显高于中-低分化肿瘤(81.82%vs53.49%,P<0.05)。LKB1蛋白在无淋巴结转移组的阳性表达率明显高于淋巴结转移阳性组(89.29%vs 52.08%,P<0.01)。结论 LKB1蛋白的低表达与肺癌的发生有关,并且影响肿瘤的分化及淋巴结转移,可能影响肺癌的预后。 展开更多
关键词 LKB1蛋白 肺癌 基因 肿瘤
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非小细胞肺癌中LKB1和VEGFR_2的表达及临床意义 被引量：3
4
作者 李作生 王国臣 +2 位作者 陈志全 郑贸根 侯静朴 《天津医药》 CAS 北大核心 2012年第7期645-647,共3页
目的:探讨LKB1和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)在非小细胞肺癌中的表达情况及临床意义。方法:选取不同临床分型及进展程度的非小细胞肺癌78例,分别取材自癌组织及癌周围正常组织,应用免疫组化方法检测并分析组织中LKB1和VEGFR2的表达... 目的:探讨LKB1和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR2)在非小细胞肺癌中的表达情况及临床意义。方法:选取不同临床分型及进展程度的非小细胞肺癌78例,分别取材自癌组织及癌周围正常组织,应用免疫组化方法检测并分析组织中LKB1和VEGFR2的表达情况。结果:LKB1蛋白和VEGFR2在肺癌组织及癌旁正常肺组织中均有表达。在正常肺组织LKB1高于肺癌组织,VEGFR2低于肺癌组织;在肺癌组织LKB1在高分化组织和无淋巴转移组高于中、低分化和有淋巴转移组,而VEGFR2高分化组和无淋巴转移组低于中、低分化组,亦低于有淋巴转移组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:LKB1蛋白和VEGFR2在非小细胞肺癌中的表达呈相反趋势,LKB1的低表达、VEGFR2的高表达可能与非小细胞肺癌的肿瘤细胞分化及淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子受体2 癌 非小细胞肺 细胞分化 淋巴转移 LKB1蛋白
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p21和p27基因多态性与非小细胞肺癌的相关性研究 被引量：3
5
作者 李作生 马玉泉 +3 位作者 李保庆 张云杰 张月峰 李勇 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第14期1046-1049,共4页
目的:探讨p21和p27基因多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)遗传易感性的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,分析202例NSCLC患者和265名健康对照人群p21基因3′非翻译区(3′UTR)和p27基因第109密码子多态性... 目的:探讨p21和p27基因多态性与非小细胞肺癌(NSCLC)遗传易感性的关系。方法:应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,分析202例NSCLC患者和265名健康对照人群p21基因3′非翻译区(3′UTR)和p27基因第109密码子多态性位点的基因型。结果:p21基因3′UTR突变型(C/T+T/T)频率在病例组(72.8%)显著高于对照组(63.8%),χ2=4.24,P=0.039。携带C/T和T/T基因型可显著增加这一人群NSCLC发病风险(经性别、年龄校正的OR=1.54,95%CI为1.03～2.30)。分层分析发现,p21基因突变型(C/T+T/T)频率在不吸烟病例组(81.6%)和≥50岁病例组(73.1%)均显著高于对照组,携带C/T和T/T基因型可显著增高不吸烟者和≥50岁人群的NSCLC发病风险(经性别、年龄校正的OR分别为2.78和1.72,95%CI分别为1.38～5.63和1.09～2.71)。p27基因型总体分布和分层分析在病例组和对照组差异无统计学意义。结论:p21基因3′UTR多态性可能与NSCLC的发病风险有关。p27基因多态性与NSCLC遗传易感性无关。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 多态性 单核苷酸 疾病遗传易感性
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p21和p27基因多态性与女性肺癌的关联研究 被引量：4
6
作者 李作生 李保庆 王国臣 《河北医药》 CAS 2010年第3期272-275,共4页
目的探讨p21和p27基因多态性与女性非小细胞肺癌(NSCLC)遗传易感性的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,分析110例女性NSCLC患者和124例女性健康对照人群p21基因3'非翻译区(3'UTR)和p27基因第... 目的探讨p21和p27基因多态性与女性非小细胞肺癌(NSCLC)遗传易感性的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,分析110例女性NSCLC患者和124例女性健康对照人群p21基因3'非翻译区(3'UTR)和p27基因第109密码子多态性位点的基因型。结果p21基因突变型(C/T+T/T)频率在病例组(76.4%)显著高于对照组(56.5%)[(χ2=10.27,P=0.001)。携带T等位基因(C/T和T/T基因型)能显著增加这一人群NSCLC发病风险(经年龄校正的OR=2.60,95%CI(1.46,4.61)]。根据吸烟状况和年龄分层分析发现,p21基因突变型(C/T+T/T)频率在不吸烟病例组(86.0%)和≥50岁病例组(76.6%)均显著高于对照组(P<0.01),携带C/T和T/T基因型可显著增高不吸烟者和50岁以上人群的NSCLC发病风险[经年龄校正的OR分别为4.95和2.68,95%CI分别为(2.36,10.40)和(1.41,5.08)]。p27等位基因和基因型总体分布在2组差异无统计学意义(P>0.05),分层分析也未显示出结果有差异性。对淋巴结转移的研究显示p21和p27基因多态性与NSCLC患者的淋巴结转移无关。结论p21基因3'UTR多态性与该女性人群NSCLC发病风险有关,C/T、T/T基因型可能增加NSCLC发病风险,尤其对于不吸烟个体及50岁以上者其可能是NSCLC的发病危险因素。p27基因多态性与该女性人群NSCLC遗传易感性无关。p21和p27基因多态性与NSCLC患者淋巴结转移无关。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 P21 P27 单核苷酸多态性 疾病易感性
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p21和p27基因多态性与肿瘤的相关性 被引量：23
7
作者 李作生 李保庆 《国际遗传学杂志》 CAS 2006年第4期317-320,共4页
做为细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂,p21和p27被认为是候选的抑癌基因,在细胞周期的调控中发挥重要作用。p21和p27基因的突变或多态性可能与人类多种肿瘤的发生发展有关。研究这2个基因的多态性可能有助于判断肿瘤的发病风险、临床特征... 做为细胞周期依赖性蛋白激酶抑制剂,p21和p27被认为是候选的抑癌基因,在细胞周期的调控中发挥重要作用。p21和p27基因的突变或多态性可能与人类多种肿瘤的发生发展有关。研究这2个基因的多态性可能有助于判断肿瘤的发病风险、临床特征以及预后。 展开更多
关键词 P21 P27 基因多态性 肿瘤
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质粒DNA拓扑学结构对基因疫苗生物学特性的影响 被引量：1
8
作者 李作生 余兴龙 +5 位作者 张茂林 乔红伟 程从升 徐兴然 扈荣良 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期250-251,共2页
利用不同拓扑学结构的质粒 ,分别转化 E.coli感受态细胞、转染 SK6 - 6细胞和免疫小鼠 ,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响。结果显示 ,超螺旋占 5 0 %比例的猪瘟病毒 E2基因表达质粒p CDSW转化 E.col... 利用不同拓扑学结构的质粒 ,分别转化 E.coli感受态细胞、转染 SK6 - 6细胞和免疫小鼠 ,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响。结果显示 ,超螺旋占 5 0 %比例的猪瘟病毒 E2基因表达质粒p CDSW转化 E.coli感受态细胞的效率比开环的 p CDSW高 8倍 ,超螺旋比例占 80 %的 p VAXE2 IL- 2质粒比酶切线性化质粒转化率高 2 2倍 ;以荧光蛋白基因为报告基因 ,超螺旋比例占 80 %的荧光蛋白真核表达质粒转染真核细胞的效率是线性化质粒的 12倍 ;以猪瘟病毒主要保护性抗原 E2基因表达质粒 ,分别制备成超螺旋和开环形式占优势的质粒 ,免疫昆明鼠 ,抗体检测结果显示 。 展开更多
关键词 质粒DNA 拓扑学结构 基因疫苗 生物学特性 猪瘟病毒
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小细胞肺癌合并胰腺病变的治疗体会 被引量：2
9
作者 李作生 郑贸根 王国臣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期375-375,394,共2页
2008年3月，我科收治1例小细胞肺癌合并胰腺病变患者，病情复杂，报告如下。
关键词 小细胞肺癌 胰腺癌 胰腺炎
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LKB1蛋白表达在非小细胞肺癌中的预后意义研究 被引量：1
10
作者 李作生 张卫红 +3 位作者 陈志全 郑贸根 侯静朴 王国臣 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期761-763,共3页
目的探讨LKB1蛋白表达情况对非小细胞肺癌(NSCLC)患者的预后意义。方法应用免疫组化方法检测70例非小细胞肺癌患者中LKB1蛋白的表达情况。结果 LKB1蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。LKB1蛋白表达的阳性率... 目的探讨LKB1蛋白表达情况对非小细胞肺癌(NSCLC)患者的预后意义。方法应用免疫组化方法检测70例非小细胞肺癌患者中LKB1蛋白的表达情况。结果 LKB1蛋白在肺鳞癌和腺癌组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。LKB1蛋白表达的阳性率在高分化肺癌(83.87%)、无淋巴结转移的肺癌(88.46%)和Ⅰ～Ⅱ期肺癌(75.00%)中的表达阳性率高于中-低分化肺癌(51.28%)、有淋巴结转移的肺癌(50.00%)和Ⅲ期肺癌(47.06%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LKB1蛋白在非小细胞肺癌中的低表达可能提示肺癌的预后不良。 展开更多
关键词 LKB1蛋白 癌 非小细胞肺 基因 预后
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以双膝关节痛为首发症状的贲门癌1例
11
作者 李作生 李保庆 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2006年第18期1299-1299,共1页
关键词 贲门 肿瘤 关节痛
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食管疾病合并支气管哮喘的围术期处理
12
作者 李作生 李保庆 《河北医药》 CAS 2009年第3期302-303,共2页
关键词 食管疾病 支气管哮喘 手术期间
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猪瘟病毒保护性抗原E2蛋白单抗的制备及其抗原表位的初步分析 被引量：27
13
作者 马刚 李作生 +2 位作者 余兴龙 刘思国 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期121-124,共4页
应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病... 应用大肠杆菌表达的猪瘟病毒主要保护性 E2抗原决定簇蛋白和全长 E2基因构建的 DNA疫苗免疫 BAL B/c小鼠。取免疫小鼠脾细胞与 SP2 /0骨髓瘤细胞进行融合 ,经克隆和间接 EL ISA筛选 ,获得了 A11、B2、E3、H6、D5、D86株稳定分泌抗猪瘟病毒 E2蛋白单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞株。它们的腹水效价在 1∶ 80 0～ 1∶ 2 10 0 0 0之间。抗体类型鉴定结果表明 ,A11、E3、H6、D5和 D8为 Ig M类型 ,B2为 Ig G类型。随后用蛋白 A凝胶层析法和 PEG沉淀法分别纯化了 Ig G和 Ig M单抗。对纯化单抗进行的抗原识别表位研究结果初步表明 ,6株单抗可能识别 3种不同的E2抗原表位。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 McAb 纯化 表位分析 保护性抗原E2 蛋白 单抗
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犬细小病毒VP2基因的比较及分型研究 被引量：25
14
作者 邱薇 范泉水 +6 位作者 李作生 杨美峰 郑颖 尹惠琼 王双印 李江 夏咸柱 《动物医学进展》 CSCD 2005年第5期69-72,共4页
为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,... 为查明我国CPV的流行变异情况及为进一步的免疫研究奠定基础,对我国不同地区分离到的9株细小病毒毒株进行了VP2基因的扩增和序列分析,并与CPV的参考毒株进行了比较分型, 9 株CPV 中有6 株属CPV 2a,3株属CPV 2b,但未分离到CPV 2c变异株,结果表明我国目前仍以CPV 2a流行为主。 展开更多
关键词 VP2基因 犬细小病毒 分型 CPV 免疫研究 序列分析 病毒毒株 参考毒株 变异株 流行 分离
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原核表达的猪瘟病毒E2蛋白抗原多肽的复性和纯化 被引量：13
15
作者 刘伯华 余兴龙 +5 位作者 张茂林 肖昌 徐兴然 吴健敏 李作生 涂长春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期145-148,共4页
对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- P... 对原核中以包涵体形式高效表达的猪瘟病毒 (CSFV) E2蛋白抗原表位区段 (m E2 )进行了变性、复性与纯化研究。包涵体经超声破菌分离 ,然后进行变性溶解和复性 ,复性产物经硫酸铵沉淀浓缩后 ,利用免疫亲和层析进行纯化。纯化产物的 SDS- PAGE分析结果表明 ,其纯度达 97%。酶联免疫试验测定的结果显示 ,与复性前变性蛋白相比 ,纯化蛋白与 CSFV特异的单抗和多克隆阳性血清的反应活性提高了 2～ 16倍。 展开更多
关键词 原核表达 猪瘟病毒 E2蛋白抗原多肽 包涵体 复性 纯化 保护性抗原蛋白
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犬细小病毒病的研究进展 被引量：51
16
作者 宋桂强 龙贵伟 +5 位作者 廖金 聂福平 于福先 邱薇 李作生 范泉水 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第3期98-100,共3页
随着人民生活水平的提高,养犬、猫者日益增多,犬的疾病逐渐被人们所重视,对犬的各种疾病的研究也在不断深入。作者从病原学、流行病学、生物学特性、诊断方法及治疗等角度对犬细小病毒病的病原学研究进行综述。
关键词 犬细小病毒 病原学 流行病学 生物学特性 诊断方法
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细胞因子与猪瘟病毒E_2基因真核双表达载体的构建及其免疫增强作用 被引量：8
17
作者 陈创夫 余兴龙 +4 位作者 马正海 李作生 李红卫 涂长春 殷震 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1406-1410,共5页
构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2、IL 3基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果表明 ,构建了 2种猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2、3的真核表达质粒pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3。将 2种质粒转染BHK 2 1细... 构建了猪瘟病毒E2 基因与IL 2、IL 3基因的双表达真核表达载体 ,观察其表达水平 ,并对其免疫增强效果进行了观察。结果表明 ,构建了 2种猪瘟病毒E2 基因与白细胞介素 2、3的真核表达质粒pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3。将 2种质粒转染BHK 2 1细胞 ,均可在体外表达E2 抗原和有生物活性的IL 2、IL 3两种质粒能诱导产生CSFV的特异性免疫反应。pIRSTIL 2 ,pIRSTIL 3所诱导的免疫应答反应比使用单表达质粒 pIRST强。试验表明 ,细胞因子与目的基因构建的双表达基因疫苗能有效提高基因疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 细胞因子 猪瘟病毒 E2基因 免疫增强作用 双表达载体 猪瘟 基因疫苗 真核表达
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EGFR 19和21外显子突变肺癌患者的临床特征比较和预后分析 被引量：16
18
作者 刘仁旺 刘京豪 +5 位作者 李昕 李颖 赵青春 李作生 刘红雨 陈军 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第11期804-811,共8页
背景与目的近年来,通过对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)等相关信号通路的研究及对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)疗效及安全性的探索,证实了靶向治疗已成为肺癌的重要治... 背景与目的近年来,通过对表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)等相关信号通路的研究及对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)疗效及安全性的探索,证实了靶向治疗已成为肺癌的重要治疗手段之一。然而,在各中心试验中EGFR-TKIs应用于不同EGFR突变亚型患者的效果不尽相同,其原因尚有争议。因此,本研究通过对比EGFR 19和21外显子突变肺癌患者的临床特点和预后分析,以明确不同EGFR突变亚型肺癌患者的临床病理生理特征的差异,并为TKIs应用于EGFR不同突变亚型疗效差异的研究提供理论依据。方法研究对象为EGFR外显子19或21突变阳性肺癌患者共113例。其中47例患者采用Real-time PCR或测序分析EGFR突变状况,余66例患者则是采用x-TAG液相芯片技术进行分析。收集临床资料,同时定期随访,以死亡作为患者终点事件,并应用SPSS 19.0软件进行统计学分析。结果在本研究中,EGFR外显子突变阳性患者共113例。其中,19外显子突变患者56例,平均年龄为(57.02±11.31)岁;21外显子突变患者57例,平均年龄为(62.25±7.76)岁,两组患者在年龄分布上存在明显差异(P<0.05);EGFR外显子突变阳性患者以女性(61.9%)、非吸烟(72.6%)、腺癌(84.1%)多见,但两组患者在性别、吸烟状况、组织类型、分化程度及TNM分期等临床特征方面均无明显差异(P>0.05)。进一步分析发现,19外显子突变患者相对21外显子突变患者多好发于右侧(P<0.05)。对所有具有完整随访资料的91例(80.53%,91/113)患者预后分析发现,两组患者总生存期无统计学差异(中位生存期19外显子组和21外显子组分别为1,051 vs 1,076天,P=0.566)。进一步分析发现,在年龄>61岁、男性、吸烟、IV期肺癌患者中,19外显子突变组患者均表现出相对较好的预后,但均无统计学差异。结论 EGFR 19外显子突变肺癌患者相对21外显子突变肺癌患者年龄较小,且右侧原发较为多见。两者在性别、吸烟状况、组织类型、分期及分化程度上无明显差别。两者总生存时间无差异,但仍然需要进一步研究论证。 展开更多
关键词 肺肿瘤 EGFR 靶向治疗 预后
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猪瘟病毒兔化弱毒(HCLV)疫苗株基因组全长cDNA的克隆与序列分析 被引量：9
19
作者 余兴龙 涂长春 +3 位作者 徐兴然 张茂林 李作生 于师宇 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2003年第5期38-42,共5页
根据猪瘟病毒基因组的序列设计合成了覆盖HCLV基因组全部序列的5对引物,通过RT-PCR从感染家兔脾脏中扩增获得了包含HCLV(bog cholera lapinized virus,HCLV)基因组全序列的5个cDNA片段,并将它们分别克隆至pGEM-T vector中。然后将这5个c... 根据猪瘟病毒基因组的序列设计合成了覆盖HCLV基因组全部序列的5对引物,通过RT-PCR从感染家兔脾脏中扩增获得了包含HCLV(bog cholera lapinized virus,HCLV)基因组全序列的5个cDNA片段,并将它们分别克隆至pGEM-T vector中。然后将这5个cDNA片段按它们在HCLV基因组上的位置从5’端至3’端的顺序依次通过酶切连接,一并克隆到pPoly2载体中得到HCLV基因组全长cDNA的质粒pPOHCLV。序列分析表明,HCLV基因组长度共12310bp,有一个大的ORF,编码一3898个氨基酸的多聚蛋白。其5'-NCR和3’-NCR长度分别是374nt和239nt。与非兔化毒株相比较,HCLV基因组在12133nt处有12个碱基的插入CTTTTTTCTTTT,该序列可能是病毒在适应兔体增殖过程中形成的。基于基因组全序列及其所推导的氨基酸序列的同源性分析表明,毒株的亲缘关系的远近与它们的毒力之间并没有相关性。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 猪瘟兔化弱毒 基因组 疫苗株 HCLV cDNA 全长序列 克隆 同源性
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RNA干扰ABCE1基因后可增加肺癌95-D/NCI-H446细胞的E-钙黏附蛋白表达并减低细胞侵袭力(英文) 被引量：10
20
作者 赵艾君 郑毛根 +5 位作者 王国臣 侯静朴 徐琪 王金凤 李作生 陈志全 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第8期891-896,共6页
研究ABCE1对肺癌(95-D和NCI-H446)细胞的作用.使用RNA干扰技术,抑制ABCE1基因的表达,通过Western blot分析及FACS检测,观察ABCE1基因对E-钙黏附蛋白在95-D/NCI-H446细胞表达的影响;运用transwell侵袭实验,观察M95-D/NCI-H446细胞侵袭力... 研究ABCE1对肺癌(95-D和NCI-H446)细胞的作用.使用RNA干扰技术,抑制ABCE1基因的表达,通过Western blot分析及FACS检测,观察ABCE1基因对E-钙黏附蛋白在95-D/NCI-H446细胞表达的影响;运用transwell侵袭实验,观察M95-D/NCI-H446细胞侵袭力的变化.RNA干扰ABCE1基因后,实验组与对照组相比,在48h后可显著抑制肺癌(95-D和NCI-H446)细胞ABCE1蛋白的表达,同时,伴随E-钙黏附蛋白的高表达,以及细胞侵袭力的降低.ABCE1基因与E-钙黏附蛋白相关,抑制ABCE1基因可增加肺癌95-D/NCI-H446细胞的E-钙黏附蛋白的表达,减低细胞的侵袭力。 展开更多
关键词 RNA干扰 ABCE1基因 E-钙黏附蛋白 细胞侵袭力
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