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猪IGF-1R基因差异表达、5'调控区的克隆及遗传多态性 被引量:4
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作者 李仕新 李加琪 +3 位作者 田允波 陈赞谋 黄运茂 唐军 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期813-818,825,共7页
采用实时荧光定量PCR分析中外猪种各11个组织mRNA的差异表达,为进一步研究该基因差异表达的机制,根据人、鼠类胰岛素生长因子1受体(IGF-1R)基因的5'调控区的保守序列设计引物扩增猪的5'调控区序列,并利用PCR-直接测序方法分析... 采用实时荧光定量PCR分析中外猪种各11个组织mRNA的差异表达,为进一步研究该基因差异表达的机制,根据人、鼠类胰岛素生长因子1受体(IGF-1R)基因的5'调控区的保守序列设计引物扩增猪的5'调控区序列,并利用PCR-直接测序方法分析大花白及长大二元杂猪种的5'调控区的遗传多态性;生物信息学分析5'调控区的CpG岛。结果表明猪IGF1-R的mRNA表达量在中外猪种的心脏中表达量均为最高,其次是肾脏,在肝脏的表达量差异不显著,在长大二元杂猪的心、肺、背肌、大脑、小脑、垂体表达量均极显著高于大花白猪,分别为6.06、52.56、7.70、2.43、3.63和41.38倍,而在胃、脾、肺的表达量极显著低于大花白猪;获得了1 355 bp的IGF1-R 5'调控区序列,测序结果表明该区域在两猪种当中未发现遗传变异;CpG岛预测发现5'调控区存在长度分别是353 bp、603 bp及264 bp的3个CpG岛。 展开更多
关键词 IGF1R 基因表达调控 遗传多态性 CPG岛
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猪APOE基因外显子4的多态性分析 被引量:4
2
作者 李仕新 高萍 +2 位作者 陈赞谋 张豪 李加琪 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期647-650,共4页
生物的寿命受到遗传和环境的影响,利用模式生物对衰老相关基因的研究已取得显著成果。母猪利用年限作为一个复杂的适应性性状,与寿命直接相关。母猪的利用年限缩短会导致母猪群的繁殖寿命缩短。本研究根据比较基因组学和生物信息学,以猪... 生物的寿命受到遗传和环境的影响,利用模式生物对衰老相关基因的研究已取得显著成果。母猪利用年限作为一个复杂的适应性性状,与寿命直接相关。母猪的利用年限缩短会导致母猪群的繁殖寿命缩短。本研究根据比较基因组学和生物信息学,以猪APOE基因作为影响母猪利用年限的重要候选基因,研究了长白和大花白两个猪种的APOE基因外显子4的多态性并对不同基因型及基因频率作统计分析。结果表明:猪APOE基因外显子4的第227位碱基发生了C→T转换,这一变异导致相应蛋白质序列中的氨基酸发生了亮氨酸和脯氨酸替换。该位点基因型:大花白CC型频率为42%,CT型频率为30%,TT型频率为28%,而长白猪CC型为100%。长白母猪与大花白母猪的利用年限差异较大,而猪APOE基因外显子4等位基因频率的差异可能说明了两者之间的利用年限差异的原因。 展开更多
关键词 母猪利用年限 APOE 外显子 单核苷酸多态性
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猪胎儿成纤维细胞APOE基因的差异表达研究 被引量:4
3
作者 李仕新 高萍 +3 位作者 陈赞谋 张豪 王翀 李加琪 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第19期11590-11592,共3页
[目的]研究APOE基因在不同代数的猪胎儿成纤维细胞中的差异表达。[方法]收集正常传代生长的1、10、15、20、25、50代猪胎儿成纤维细胞,分别提取细胞总RNA。采用RT-PCR技术,检测不同代数猪胎儿成纤维细胞中APOE基因的表达。[结果]猪APOE... [目的]研究APOE基因在不同代数的猪胎儿成纤维细胞中的差异表达。[方法]收集正常传代生长的1、10、15、20、25、50代猪胎儿成纤维细胞,分别提取细胞总RNA。采用RT-PCR技术,检测不同代数猪胎儿成纤维细胞中APOE基因的表达。[结果]猪APOE基因在第1代猪胎儿成纤维细胞中表达水平最高,随着细胞代数的增加,表达量逐渐下降,到第50代表达量为最低。[结论]APOE基因在不同代数的猪胎儿成纤维细胞中有选择性表达的趋势。 展开更多
关键词 胎儿成纤维细胞细胞 衰老 APOE 基因表达
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长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性 被引量:6
4
作者 李仕新 陈松玲 +2 位作者 李加琪 张豪 臧莹安 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2012年第2期220-225,共6页
【目的】研究长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性。【方法】采用室温消化法从妊娠30d的长大二元杂母猪胚胎中分离胎儿成纤维细胞,利用MTT法检测第5、10、15、25、35、45、60、70代胎儿成纤维细胞的增殖能力,通过倒置显微镜观察... 【目的】研究长大二元杂交猪胎儿成纤维细胞的生物学特性。【方法】采用室温消化法从妊娠30d的长大二元杂母猪胚胎中分离胎儿成纤维细胞,利用MTT法检测第5、10、15、25、35、45、60、70代胎儿成纤维细胞的增殖能力,通过倒置显微镜观察不同代数的细胞形态,流式细胞仪分析细胞周期变化,DAPI染色观察细胞核染色质的形态以及衰老相关β-葡糖苷酶活性的染色测定等方法来判断细胞的衰老程度。【结果】①采用消化液室温消化法成功分离到猪胎儿成纤维细胞,细胞具有典型的成纤维细胞形态。②猪胎儿成纤维细胞于生长初期1~6d呈对数增长,此后进入平台期。【结论】随着细胞代数的增加,细胞的增殖能力虽有所下降,但仍然呈稳定的增长状态,各代次猪胎儿成纤维细胞生长良好。 展开更多
关键词 猪胎儿成纤维细胞 体外分离培养 生物学特性
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猪载脂蛋白E基因的组织表达谱分析 被引量:4
5
作者 李仕新 高萍 +2 位作者 李加琪 陈赞谋 臧莹安 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期540-543,共4页
载脂蛋白E在胆固醇和其他脂质的代谢中起着至关重要的作用,对猪APOE基因的组织表达谱分析是研究该基因功能的重要基础工作。研究采用RT-PCR的方法对APOE在长白猪的13个组织中的表达进行了研究,结果显示APOE基因主要在肝和脑组织表达,其... 载脂蛋白E在胆固醇和其他脂质的代谢中起着至关重要的作用,对猪APOE基因的组织表达谱分析是研究该基因功能的重要基础工作。研究采用RT-PCR的方法对APOE在长白猪的13个组织中的表达进行了研究,结果显示APOE基因主要在肝和脑组织表达,其他外周组织如脾、肺、肾、大肠、小肠也有不同程度的表达,而在心、胃、背肌和淋巴中几乎不表达。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 组织表达谱
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猪胎儿成纤维细胞SOD1基因差异表达研究 被引量:1
6
作者 李仕新 陈松玲 +4 位作者 高萍 张爱玲 张豪 王翀 李加琪 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期193-197,共5页
在研究模式生物衰老机制的过程中,发现衰老受某些特定基因的调控。为研究细胞内铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD,SOD1)在不同代数的猪胎儿成纤维细胞的差异表达,本试验收集正常传代生长的5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70代的猪... 在研究模式生物衰老机制的过程中,发现衰老受某些特定基因的调控。为研究细胞内铜锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD,SOD1)在不同代数的猪胎儿成纤维细胞的差异表达,本试验收集正常传代生长的5,10,15,20,25,30,35,40,45,50,55,60,65,70代的猪胎儿成纤维细胞,分别提取细胞总RNA;采用RT-PCR技术,检测不同代数猪胎儿成纤维细胞SOD1的表达。结果表明猪SOD1在第5代猪胎儿成纤维细胞中表达水平最高,随着细胞代数的增加,表达量逐渐下降,到第70代表达量为最低。结果将为进一步揭示细胞衰老的分子机制提供有价值的参考,同时为丰富猪的分子生物学提供新素材。 展开更多
关键词 胎儿成纤维细胞 衰老 SOD1 基因表达
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猪肌肉组织中ApoE基因5′调控区甲基化的研究 被引量:1
7
作者 李仕新 李加琪 +2 位作者 田允波 陈赞谋 古飞霞 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第6期19-23,30,共6页
【目的】研究猪肌肉组织中猪载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)基因5′调控区的DNA甲基化状况。【方法】以180日龄长白母猪为试验动物,采集其肌肉组织,提取其DNA,经亚硫酸氢盐修饰后用作PCR反应模板;通过生物信息学预测猪ApoE5′调控区... 【目的】研究猪肌肉组织中猪载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)基因5′调控区的DNA甲基化状况。【方法】以180日龄长白母猪为试验动物,采集其肌肉组织,提取其DNA,经亚硫酸氢盐修饰后用作PCR反应模板;通过生物信息学预测猪ApoE5′调控区潜在的CpG岛,根据预测结果选用甲基化特异性引物对CpG岛进行PCR扩增,对回收、纯化的PCR产物进行克隆和测序,并与GenBank中的ApoE5′调控区序列进行比对,分析CpG岛的甲基化水平。【结果】生物信息学预测发现,猪ApoE基因5′调控区有2个CpG岛,第1个CpG岛有10个CpG位点,第2个CpG岛有12个CpG位点;PCR扩增获得长度分别为233bp的CpG岛1和288bp的CpG岛2序列,这2个CpG岛均存在着9个甲基化CpG位点。【结论】猪ApoE基因5′调控区是CpG位点的富集区域,2个CpG岛存在不同程度的甲基化。 展开更多
关键词 肌肉组织 APOE基因 DNA甲基化 CPG岛
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副猪嗜血杆菌检测技术的研究进展 被引量:2
8
作者 李仕新 黄彩梅 +3 位作者 陈国开 庞木生 李春玲 臧莹安 《中国动物检疫》 CAS 2011年第3期78-80,共3页
副猪嗜血杆菌(Haemophilus Parasuis,HPS)病是近年来严重危害我国养猪业发展的新发细菌性传染病。对副猪嗜血杆菌的病原学、血清学、分子生物学检测技术进行大量研究,已建立了副猪嗜血杆菌的快速分离鉴定方法,但许多重要的领域还有待于... 副猪嗜血杆菌(Haemophilus Parasuis,HPS)病是近年来严重危害我国养猪业发展的新发细菌性传染病。对副猪嗜血杆菌的病原学、血清学、分子生物学检测技术进行大量研究,已建立了副猪嗜血杆菌的快速分离鉴定方法,但许多重要的领域还有待于深入研究。本文对副猪嗜血杆菌病相关检测技术及其研究进展进行综述。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 毒力因子 hhdA基因 hhdB基因
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猪链球菌相关毒力因子研究进展 被引量:2
9
作者 李仕新 李家侨 +3 位作者 李婉雁 庞木生 李春玲 臧莹安 《中国动物检疫》 CAS 2011年第4期77-79,共3页
猪链球菌(Streptococcus suis)病是近年来严重危害我国养猪业发展的细菌性传染病。由于没有国际统一的用于猪链球菌感染的动物模型,即便是同一菌株,其毒力在不同文献中也会存在较大差异。本文对猪链球菌相关致病因子及其研究进展进行综... 猪链球菌(Streptococcus suis)病是近年来严重危害我国养猪业发展的细菌性传染病。由于没有国际统一的用于猪链球菌感染的动物模型,即便是同一菌株,其毒力在不同文献中也会存在较大差异。本文对猪链球菌相关致病因子及其研究进展进行综述,进而对猪链球菌相关毒力因子有新的认识。 展开更多
关键词 猪链球菌 毒力因子 动物模型
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Differential Expression of APOEGene in Porcine Fetal Fibroblast Cells 被引量:1
10
作者 李仕新 高萍 +3 位作者 陈赞谋 张豪 王翀 李加琪 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第6期904-907,共4页
[Objective]The aim was to study the differential expression ofAPOEgene in different generations of porcine fetal fibroblasts cells.[Method]The first,tenth,fifteenth,twentieth,twenty-fifth,fiftieth generations of porci... [Objective]The aim was to study the differential expression ofAPOEgene in different generations of porcine fetal fibroblasts cells.[Method]The first,tenth,fifteenth,twentieth,twenty-fifth,fiftieth generations of porcine fetal fibroblast cells,which were normally grown and passed,were collected before total RNA was extracted respectively.The expression ofAPOEgene in different generations of porcine fetal fibro-blast cells was detected by RT-PCR technique.[Result]The expression level of porcine APOE mRNA in the first generation of porcine fetal fi-broblast cells was the highest,and then it gradually decreased with the increase of cell generations and was the lowest in the fiftieth generation.[Conclusion]The expression ofAPOEgene had the selective trend in different generations of porcine fetal fibroblast cells. 展开更多
关键词 PIG Porcine fetal fibroblast cells SENESCENCE APOE Gene expression
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猪肉质性状基因及其定位的研究进展 被引量:3
11
作者 李仕新 陈赞谋 《猪业科学》 2006年第3期84-86,共3页
猪肉质性状是一综合性状,包括肉色、大理石纹、pH值、系水力、肌肉脂肪含量、滴水损失和品尝鉴定等。遗传因子是影响猪肉质性状的首要因素。本文综述了影响猪肉质性状的主效基因、主要候选基因以及QTL定位的研究进展并对其未来研究前景... 猪肉质性状是一综合性状,包括肉色、大理石纹、pH值、系水力、肌肉脂肪含量、滴水损失和品尝鉴定等。遗传因子是影响猪肉质性状的首要因素。本文综述了影响猪肉质性状的主效基因、主要候选基因以及QTL定位的研究进展并对其未来研究前景进行展望。 展开更多
关键词 肉质性状 主效基因 候选基因 QTL定位
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深圳市生态监测站点高等动物多样性与植物多样性的关系研究 被引量:2
12
作者 李仕新 黄玉源 +7 位作者 唐军 曾嘉凯 余欣繁 杨慧纳 梁鸿 陈慧明 蒋呈曦 杨立君 《绿色科技》 2018年第20期12-18,共7页
采用植被生态学及高等动物生态调查方法,研究了深圳市大鹏新区七娘山东北部、坪山新区田心山的赤坳山地、福田区莲花山东部与东南部、南山区小南山西北部及东部和宝安区羊台山应人石山地等5个生态监测站点的植物群落结构特征、多样性与... 采用植被生态学及高等动物生态调查方法,研究了深圳市大鹏新区七娘山东北部、坪山新区田心山的赤坳山地、福田区莲花山东部与东南部、南山区小南山西北部及东部和宝安区羊台山应人石山地等5个生态监测站点的植物群落结构特征、多样性与高等动物多样性的关系。结果表明:在研究期间,观测到这5个站点的野生高等脊椎动物种类分布为七娘山东北部有33种、莲花山有23种、田心山8种、小南山17种及羊台山10种;发现鸟类的多样性与树种密切相关,而且与各区域的植物多样性有关,即植物多样性高的区域,其高等动物的数量也多;表明不仅是植被的高度指标高的区域,其高等动物的种类数会高,而且高等动物的多样性水平与植物群落的科、属、种的综合丰富度及种类的丰富度指数存在正的相关关系,与植物种类的辛普森指数也存在正的相关关系;而与植被盖度指标的关系不明显。该结果可对了解深圳乃至中国范围内的城市及城郊区域生物多样性的保护及高等动物的分布、动态变化及与植物的关系状况,以及进一步的研究提供理论参考。 展开更多
关键词 深圳 植物 生物多样性 高等动物 鸟类
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宠物克隆及应用前景
13
作者 李仕新 李成梅 臧莹安 《中国动物检疫》 CAS 2012年第3期73-75,共3页
世界上第一只体细胞克隆猫CC于2002年由美国科学家克隆成功。从此开辟了宠物克隆市场,并最终形成了克隆宠物的国际性行业。韩国是世界上唯一成功克隆狗的国家,于2005年利用体细胞核转移技术克隆出世界上第一只克隆狗"斯奴比"... 世界上第一只体细胞克隆猫CC于2002年由美国科学家克隆成功。从此开辟了宠物克隆市场,并最终形成了克隆宠物的国际性行业。韩国是世界上唯一成功克隆狗的国家,于2005年利用体细胞核转移技术克隆出世界上第一只克隆狗"斯奴比",并于2009年开发出用脂肪组织的干细胞克隆狗的新技术。克隆宠物的成功,使宠物主看到了逝去的爱狗、爱猫。也使商家看到了巨大的潜在商业价值。宠物克隆在美国已经被商品化,很多人对于克隆宠物伦理道德问题的关注超过对商业价值的关注。克隆,成为20世纪最重大也是最有争议的科技突破之一。 展开更多
关键词 宠物 动物克隆 伦理道德
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猪脂联素基因启动子克隆及多态性研究 被引量:3
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作者 凌飞 汪亮亮 +2 位作者 杜红丽 李仕新 陈瑶生 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第1期413-415,418,共4页
[目的]为脂联素基因作为脂肪沉积候选基因的研究提供依据。[方法]通过猪BAC文库筛选及primer-walking的测序方法获得脂联素基因的启动子序列,采用PCR-RFLP技术对蓝塘猪、大花白猪、大白猪、长白猪和杜洛克猪5个品种共290头猪的脂联素基... [目的]为脂联素基因作为脂肪沉积候选基因的研究提供依据。[方法]通过猪BAC文库筛选及primer-walking的测序方法获得脂联素基因的启动子序列,采用PCR-RFLP技术对蓝塘猪、大花白猪、大白猪、长白猪和杜洛克猪5个品种共290头猪的脂联素基因启动子区的多态性进行了分析。[结果]脂联素基因的5’侧翼区-1 010 bp(G/A)的SNP位点,本地猪种中GG基因型频率明显高于外来猪种;-394 bp(T/C)的SNP位点,本地猪种基因型分布较为丰富,而在外来猪种中却没有检测到CC基因型,且外来猪中T等位基因频率较高。[结论]脂联素基因上游-1 010 bp(G/A)的SNP位点突变可能会引起该基因转录水平的改变,而-394 bp(T/C)的SNP位点与基因转录水平及与脂肪沉积可能无关。 展开更多
关键词 猪BAC文库 脂联素基因 启动子 SNP
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Study on Cloning and Polymorphism of Porcine Adiponectin Promoter 被引量:2
15
作者 凌飞 汪亮亮 +2 位作者 杜红丽 李仕新 陈瑶生 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第6期53-56,共4页
[ Objective] The aim of this study was to provide a basis for study on adiponectin as a candidate gene for fat deposition. [ Method] The promoter sequence of adiponectin was obtained by porcine BAC library screening a... [ Objective] The aim of this study was to provide a basis for study on adiponectin as a candidate gene for fat deposition. [ Method] The promoter sequence of adiponectin was obtained by porcine BAC library screening and primer-walking method. The polymorphisms of adiponectin promoter from 290 pigs, including 5 breeds of Lantang pig, Large spotted pig, Large white pig, Landrace and Duroc, were analyzed with PCR-RFLP. [ Result] At SNP site of adiponectin 5'-flanking region -1 010 bp (G/A), GG genotype frequency in Chinese indigenous pigs was significantly higher than that in exotic pigs. At SNP site of adiponectin 5'-flanking region -394 bp (T/C), the genotype distribution of Chi- nese indigenous pigs was abundant, while no CC genotype was detected in exotic pigs, and T allele frequency was higher in exotic pigs. [ Conclusion] SNP site mutation of - 1 010 bp (G/A) may lead to changes of the gene transcription level, while SNP site of -394 bp (T/C) properly has no relationship with gene transcription level and fat deposition. 展开更多
关键词 PORCINE BAC library ADIPONECTIN PROMOTER SNP
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链球菌2型对恩诺沙星耐药机制及耐药株毒力变化研究进展 被引量:3
16
作者 臧莹安 李成梅 +3 位作者 李春玲 宋帅 李淼 李仕新 《中国动物检疫》 CAS 2012年第5期69-71,共3页
猪链球菌病(Swine Streptococcosis,SS)是由多种溶血性链球菌引起的急性发热性人兽共患传染病,是近年来严重危害我国养猪业发展的新发细菌性传染病。猪链球菌耐药问题非常突出。本文对链球菌2型对恩诺沙星耐药机制及耐药株毒力变化研究... 猪链球菌病(Swine Streptococcosis,SS)是由多种溶血性链球菌引起的急性发热性人兽共患传染病,是近年来严重危害我国养猪业发展的新发细菌性传染病。猪链球菌耐药问题非常突出。本文对链球菌2型对恩诺沙星耐药机制及耐药株毒力变化研究进展进行综述,重点介绍猪链球菌2型逐渐演变为耐药菌时,其毒力因子和致病性之间的关系。最大限度地降低细菌耐药性与延长抗菌药物的疗效周期是人类所面临的长期挑战。 展开更多
关键词 猪链球菌 耐药株 耐药机制 毒力
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新型液压打桩锤的系统仿真研究 被引量:6
17
作者 刘树道 童伟 +1 位作者 迟永滨 李仕新 《中国工程机械学报》 2003年第1期80-83,共4页
对一种新型液压打桩锤的打桩过程进行了运动学及动力学分析,并在此基础上提出了桩锤在各个打击过程的数学模型.最后对各阶段进行了仿真及分析,仿真研究对改进和优化打桩锤的各个设计参数具有指导意义.
关键词 液压打桩锤 动力学 仿真
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挖掘机反铲装置优化设计的方法与策略 被引量:7
18
作者 迟永滨 李仕新 杜群贵 《太原重型机械学院学报》 2003年第1期6-10,共5页
根据挖掘机反铲工作装置优化设计中存在的问题 ,提出了相应的处理方法和对策。
关键词 挖掘机 反铲装置 优化设计 控制方法 模型
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浅谈如何帮助高一学生渡过物理学习的难关 被引量:2
19
作者 李仕新 《科学大众(智慧教育)》 2013年第7期8-8,共1页
高初中物理教学之间的衔接会出现明显的台阶,造成高一新生的物理学习困难。找准产生台阶的原因,探究克服的方法,根据初中物理学习的特点,逐步改变教法,优化教学内容设计使学生适应高中物理知识对学生的学习方法和思维方法的要求,才能使... 高初中物理教学之间的衔接会出现明显的台阶,造成高一新生的物理学习困难。找准产生台阶的原因,探究克服的方法,根据初中物理学习的特点,逐步改变教法,优化教学内容设计使学生适应高中物理知识对学生的学习方法和思维方法的要求,才能使学生顺利完成初高中物理学习的过渡,提高教学效果。 展开更多
关键词 高中物理教学 衔接
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用物理实验提升学生物理学习力 被引量:1
20
作者 李仕新 《科学大众(智慧教育)》 2014年第4期34-34,共1页
学习力的几大构成要素不是孤立存在的,是相互叠加,互相促进,有机联系的整体,是人们自我学习、自我变革、自我超越、自我发展的螺旋式上升的过程。物理学习力是指学生能够顺利进行物理学习并完成物理学习活动的动力、毅力、能力和创新力... 学习力的几大构成要素不是孤立存在的,是相互叠加,互相促进,有机联系的整体,是人们自我学习、自我变革、自我超越、自我发展的螺旋式上升的过程。物理学习力是指学生能够顺利进行物理学习并完成物理学习活动的动力、毅力、能力和创新力等综合能力。 展开更多
关键词 物理教学 学习力 提升
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