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HIV-1 gag基因p17+24重组抗原表达、纯化及抗原性分析
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作者 陆学东 张银辉 +4 位作者 崔素文 杨来智 曾青卿 刘键 张小艳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期612-614,共3页
目的获得HIV-1型gag基因p17＋2，4重组抗原，分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性。方法采用PCR技术扩增HIV-1gag基因p17＋p24核酸片段，并克隆入pTreHis2A表达质粒，在大肠杆菌BL21（DE3）株中表达。用Ni—NTA金属螯合层析法纯... 目的获得HIV-1型gag基因p17＋2，4重组抗原，分析其免疫原性和探讨开发诊断试剂的可能性。方法采用PCR技术扩增HIV-1gag基因p17＋p24核酸片段，并克隆入pTreHis2A表达质粒，在大肠杆菌BL21（DE3）株中表达。用Ni—NTA金属螯合层析法纯化目的蛋白，并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。结果重组质粒在BL21（DF3）菌株中经IPm诱导表达一个相对分子质量（肘，）约为51×10^3的融合重组蛋白，重组蛋白经HIV-1p17、p24抗原单克隆抗体鉴定，具有抗原特异性。25份HIV阳性血清、180份HIV阴性血清标本初步经l临床验证，具有较高的检出敏感性和特异性。结论成功构建HIV-1型gag基因p17＋24抗原表达载体，表达纯化的p17＋24重组抗原具有较好的抗原性，可用于诊断试剂的开发。 展开更多
关键词 H1V-1 GAG基因 重组抗原
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