基于MALDI-TOF核酸质谱的11种牛源病毒检测方法的建立

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作者 帅江冰 张泽林 +6 位作者 宋士琦 韩笑 曾若雪 陈吴健 郭悠然 郭惠民 张晓峰 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期39-47,共9页

为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤... 为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤病毒(BPyV)等牛源病毒的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)高通量多目标检测技术,本研究根据上述11种病原基因组的高保守区,分别设计多重PCR引物及对应的单碱基延伸探针,采用方阵法优化反应体系后初步建立牛源病毒的MALDI-TOF核酸质谱检测体系。利用该方法以靶标病毒质粒标准品混合物及非靶标病毒核酸为模板进行特异性试验,利用50拷贝/µL、25拷贝/µL、12.5拷贝/µL、6.3拷贝/µL、3.1拷贝/µL、1.6拷贝/µL靶标病毒核酸质粒标准品进行敏感性试验,利用106拷贝/µL、104拷贝/µL、102拷贝/µL靶标病毒核酸重组质粒标准品于同一时间和不同时间进行了稳定性试验。特异性试验结果显示,该方法仅对11种靶标病毒产生阳性信号峰,而与其他病原体无交叉反应,表明该方法特异性较强。敏感性试验结果通过probit模型进行概率回归检测,结果显示每种病毒最低检测限在8.69拷贝/µL~38.04拷贝/µL(99%概率),表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示,体系中每种靶标在高、中、低质粒浓度时的批内及批间重复性试验结果的符合率均达100%,表明该方法的稳定性较高。利用该MALDI-TOF核酸质谱检测体系对血液类生物制品及临床样品进行检测,同时采用各病毒的荧光定量PCR(qPCR)检测,结果显示130份样品中总计检出58份阳性,其中包括43份BPV-3、33份BPV-2、16份BPyV、6份BVDV阳性,总阳性率分别为44.0%、33.1%、25.4%、12.3%和4.6%,与各病毒qPCR结果的符合率均达100%。本研究基于MALDI-TOF核酸质谱技术首次建立了11种牛病毒的多重检测方法,为牛源病毒的快速检测及相关生物制品安全控制提供了一种新的检测技术。 展开更多

关键词 MALDI-TOF核酸质谱 牛血液制品 病毒

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碱性成纤维细胞生长因子复合透明质酸钠凝胶对兔桡骨骨折愈合中细胞增殖的影响

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作者 杨峰 丛恒飞 +6 位作者 方英 曾若雪 谢富强 谢秋玲 汪炬 刘杰森 李志英 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期34-36,共3页

关键词 碱性成纤维细胞生长因子 细胞增殖 骨折愈合 透明质酸钠 桡骨 凝胶 复合 有丝分裂原

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戊型肝炎病毒一步法多重荧光定量PCR分型鉴定技术的建立及应用 被引量：2

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作者 李爱云 帅江冰 +6 位作者 曾若雪 孙涛 鱼海琼 朱道中 朱宇宁 张晓峰 李肖梁 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1020-1025,共6页

为建立鉴别检测戊型肝炎病毒(HEV)各基因型的方法,本研究基于HEV1、HEV3和HEV4的基因组序列,设计一对保守扩增引物和3条型特异性探针,通过体系优化,建立了用于鉴别检测不同型HEV感染的多重荧光定量PCR方法,并以绿色荧光蛋白(EGFP)为内... 为建立鉴别检测戊型肝炎病毒(HEV)各基因型的方法,本研究基于HEV1、HEV3和HEV4的基因组序列,设计一对保守扩增引物和3条型特异性探针,通过体系优化,建立了用于鉴别检测不同型HEV感染的多重荧光定量PCR方法,并以绿色荧光蛋白(EGFP)为内部质控,确保整个诊断流程的准确和有效。特异性试验结果显示该方法仅对HEV扩增为阳性,而对甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、疱疹病毒、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒等核酸扩增均为阴性,特异性好。敏感性试验结果显示,该方法对HEV 1、HEV3和HEV 4的最低检测限均为50个基因组拷贝/反应,敏感性高。分析表明一步法多重荧光定量PCR对不同浓度的HEV 1、HEV3和HEV4重复性试验的变异系数均小于4%,表明该方法具有良好的检测重复性和稳定性。对采集自浙江、安徽、江西、上海和福建省等地区的猪粪便、猪血清和人血清等临床样品进行检测,其结果与传统套式PCR及测序的鉴定结果一致,表明该多重荧光定量PCR对于临床样品的检测具有高准确性,可用于临床HEV隐性感染或早期感染的快速检测。本研究为该病的有效治疗奠定基础。 展开更多

关键词 戊型肝炎病毒 基因型 荧光定量PCR 多重

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浙江省舟山市金塘地区库蠓种群调查研究 被引量：2

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作者 曾若雪 何永强 +2 位作者 莫虹斐 金晨晨 帅江冰 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS 2018年第5期476-478,共3页

目的为了解库蠓活动规律,科学防范库蠓传播疾病,对浙江省舟山市金塘地区库蠓种群基本构成和消长规律开展调查。方法 2016年8月至2017年7月,在港口、隔离场和养殖场周边600 m区域范围内以及运输路线的沿途道路共设置58个监测点,采用灯诱... 目的为了解库蠓活动规律,科学防范库蠓传播疾病,对浙江省舟山市金塘地区库蠓种群基本构成和消长规律开展调查。方法 2016年8月至2017年7月,在港口、隔离场和养殖场周边600 m区域范围内以及运输路线的沿途道路共设置58个监测点,采用灯诱法诱捕库蠓,对捕获蠓类进行种类鉴定和标本制作。结果共灯诱2 378点次,采获库蠓2 180只(雄虫405只),经鉴定包括库蠓属4个亚属15种。主要种群为荒川库蠓(40.00%)、福建库蠓(28.81%)和北京库蠓(23.85%),不同区域库蠓的主要种群组成有所不同。蠓的活动季节在5-10月,夏季出现高峰,其中8-9月最为活跃。结论浙江省舟山市金塘地区库蠓种类丰富,其中荒川库蠓、福建库蠓和北京库蠓为当地主要种群。 展开更多

关键词 蠓科 库蠓属 种群构成

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浙江口岸进境邮寄物检疫现状及对策 被引量：2

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作者 曾若雪 刘筱嘉 +2 位作者 龚志强 童兰英 曹爱玲 《植物检疫》 北大核心 2014年第2期91-93,共3页

随着国际邮寄业务的迅速发展,外来有害生物随邮寄物入侵我国的风险与日俱增,为防止外来有害生物通过邮寄物传入我国,应加强进境邮寄物的检疫监管。本文通过对浙江省进境邮寄物监管工作现状分析,提出了加强邮寄物检疫监管工作的对策。

关键词 外来有害生物 邮寄物 检疫

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猪圆环病毒2型数字微滴PCR检测技术的建立及应用 被引量：4

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作者 吴朦晨 金晨晨 +8 位作者 何永强 曾若雪 陈小金 程昌勇 帅江冰 董志珍 宋厚辉 俞晓平 张晓峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1057-1062,共6页

为建立猪圆环病毒2型(PCV2)的微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)检测方法,本研究针对PCV2ORF1基因设计引物和探针,经各反应条件的优化,确定反应体系中引物和探针终浓度分别为0.7μmol/L和0.25μmol/L,且退火温度为59℃时,ddPCR方法具有... 为建立猪圆环病毒2型(PCV2)的微滴式数字聚合酶链式反应(ddPCR)检测方法,本研究针对PCV2ORF1基因设计引物和探针,经各反应条件的优化,确定反应体系中引物和探针终浓度分别为0.7μmol/L和0.25μmol/L,且退火温度为59℃时,ddPCR方法具有最佳的扩增效率(96%)。特异性试验结果显示,该ddPCR方法除了对PCV2检测结果为阳性外,对PCV1、PCV3和其它常见猪病病原的检测均未见阳性微滴,特异性较强。以10倍倍比稀释的重组质粒标准品pUC57-NA-ORF1为模板,利用建立的PCV2 ddPCR检测技术进行敏感性试验,结果显示,ddPCR的最低检测限达2.93拷贝/μL,比荧光定量PCR(qPCR)高10倍以上,敏感性较高。批内和批间重复性试验结果显示,其变异系数均小于10%,重复性较好。利用建立的PCV2 ddPCR对24份猪组织样品和70份宠物饲料样品进行检测,结果显示,该ddPCR方法对猪淋巴结、脾、肺和肾脏等组织样品的检测结果与qPCR的检测结果一致,均检出10份阳性样品。但ddPCR对饲料样品的检测更为灵敏,共检出PCV2阳性样品14份,其中有5份样品的qPCR检测结果为阴性,表明本研究建立的ddPCR方法敏感性、抗干扰性和可靠性更高。本研究首次建立了PCV2 ddPCR检测方法,为饲料等复杂基质样品中PCV2的检测提供了有力技术手段。 展开更多

关键词 数字微滴PCR 猪圆环病毒2型 最低检测限

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主题出版的“同”与“不同”——基于《中国改革开放全景录·湖北卷》与《中国道路:走向现代化的全新选择》的探讨

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作者 曾若雪 《湖北经济学院学报（人文社会科学版）》 2019年第7期118-120,共3页

本文以2018年湖北人民出版社出版的两本主题出版重点图书《中国改革开放全景录·湖北卷》与《中国道路:走向现代化的全新选择》的出版背景、策划及编辑出版为论述起点,结合更广范围的主题出版图书,以三对“同与不同”来探讨主题出... 本文以2018年湖北人民出版社出版的两本主题出版重点图书《中国改革开放全景录·湖北卷》与《中国道路:走向现代化的全新选择》的出版背景、策划及编辑出版为论述起点,结合更广范围的主题出版图书,以三对“同与不同”来探讨主题出版图书的一些特点、功能及出版该类图书的重点方面。 展开更多

关键词 主题出版 功能 特点 同与不同

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宠物进口食品的种类及检验检疫规程与风险分析 被引量：2

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作者 邬迎辉 曾若雪 +1 位作者 于婧怡 杜爱芳 《浙江畜牧兽医》 2016年第5期13-15,共3页

随着人民生活水平的不断提高,饲养宠物已越来越成为人们生活的一部分,目前国内宠物市场已进入一个高速发展时期。庞大的宠物服务和消费需求不断扩大,城乡居民养猫、养狗数量增加较快,根据资料介绍,目前全国宠物犬数量约为425万只,宠物... 随着人民生活水平的不断提高,饲养宠物已越来越成为人们生活的一部分,目前国内宠物市场已进入一个高速发展时期。庞大的宠物服务和消费需求不断扩大,城乡居民养猫、养狗数量增加较快,根据资料介绍,目前全国宠物犬数量约为425万只,宠物猫数量约为200万只,且每年仍以30%速度在快速增长。 展开更多

关键词 发展时期 饲料添加剂 风险分析 检验检疫监管 生活水平 动植物检疫 消化吸收率 生产企业名称 雀巢 报检

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基于基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱的猪呼吸道病毒多目标鉴定方法的建立和应用 被引量：4

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作者 宋士琦 裘慧 +8 位作者 陈吴健 莫虹斐 金晨晨 曾若雪 王巍 郭惠民 帅江冰 王正亮 张晓峰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2713-2727,共15页

【目的】建立能高效同步鉴定猪伪狂犬病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV-2)和3型(porcine circovirus 3,PCV-3)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)以及猪博卡病毒1型(porcine... 【目的】建立能高效同步鉴定猪伪狂犬病毒(porcine pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV-2)和3型(porcine circovirus 3,PCV-3)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)以及猪博卡病毒1型(porcine bocavirus group 1,PBoV-G1)、2型(porcine bocavirus group 2,PBoV-G2)和3型(porcine bocavirus group 3,PBoV-G3)等呼吸道病毒的核酸基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)高通量多目标检测技术。【方法】根据7种病原体基因的保守序列,分别设计不同病原的引物及对应的单碱基延伸探针,通过引物浓度和反应条件优化,方法特异性、敏感性和稳定性分析,以及临床样本和猪源产制品的检测验证,建立常见猪呼吸道DNA病毒的MALDI-TOF MS多目标检测体系。【结果】质谱分析显示,多目标检测体系的7种靶标产物峰只在特定病毒阳性样品检测时产生,与其他病原体检测无交叉反应,表明该方法对7种靶标病毒检测特异性良好。重复性试验结果分析显示,体系中每种病毒在高、中、低浓度时批内阳性符合率均≥98.0%,批间均≥98.3%,表明该方法具有较高的稳定性。体系中7种病原体每种病毒最低检测限在8.65–26.27拷贝/μL之间,与荧光PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测方法相当。采用MALDI-TOF MS多重检测方法对100份组织、饲料和猪肉样品进行检测应用,检出2种及以上混合感染样品39份,其中5份样本同步检出5种病原体阳性;对8份ASFV-p72假病毒人工污染样品进行验证,均可检出ASFV阳性。将以上样本检测应用结果与荧光PCR方法进行比对验证,2种方法对于不同病原体检测结果的符合率高达94.4%–100%。【结论】本研究建立的基于MALDI-TOF MS的猪呼吸道常见DNA病毒多重检测方法为猪群相关疫病快速监测和鉴别诊断,以及便利化进出口动物检疫等提供了一种新的敏感、特异的高通量多目标检测技术。 展开更多

关键词 猪呼吸道病毒 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 高通量检测

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马克思主义中国化、时代化、大众化与精品出版的结合——《中国道路：走向现代化的全新选择》书评

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作者 曾若雪 《传播力研究》 2019年第30期161-161,共1页

《中国道路:走向现代化的全新选择》(以下简称《中国道路》)以马克思主义唯物史观为指导,以习近平新时代中国特色社会主义思想为指引,科学论证了多元现代化进程,揭示了中国特色社会主义道路的历史使命和光明前景。本文从撰写维度、成书... 《中国道路:走向现代化的全新选择》(以下简称《中国道路》)以马克思主义唯物史观为指导,以习近平新时代中国特色社会主义思想为指引,科学论证了多元现代化进程,揭示了中国特色社会主义道路的历史使命和光明前景。本文从撰写维度、成书价值与社会影响三个方面对这一书籍进行评价,意在推进马克思主义中国化、时代化、大众化与精品出版的结合。 展开更多

关键词 马克思主义中国化 时代化 大众化 精品出版 时代价值 世界意义

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浙江省中华鳖出口现状分析及发展对策 被引量：2

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作者 曹爱玲 童兰英 曾若雪 《水产科技情报》 北大核心 2012年第4期208-210,共3页

介绍了浙江省中华鳖出口产业发展的情况,从中华鳖养殖和出口产业的现状、出口中存在的问题等方面进行了分析,并对中华鳖出口产业的发展提出了对策。

关键词 浙江省 中华鳖 出口产业 现状 对策

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进境疣鼻天鹅检验检疫监管现状与思考

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作者 邬迎辉 曾若雪 +1 位作者 周心怡 于婧怡 《浙江畜牧兽医》 2017年第2期18-19,共2页

随着国内动物旅游主题市场的日益火爆,各类野生动物的需求大幅增长,如疣鼻天鹅等国内稀缺的国家二级重点保护野生动物,更是受到各大野生动物园的追捧。

关键词 疣鼻天鹅 检验检疫监管 鸭科 沼泽地带 旅游主题 养殖情况 雁形目 突起物 动植物检疫 易危

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猪粪便污染特异性分子标记筛选及其PCR检测方法的建立

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作者 樊丽华 帅江冰 +5 位作者 莫虹斐 曾若雪 金晨晨 张晓峰 陈青 何永强 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2085-2091,共7页

肠道微生物群落在与其宿主长期协同进化过程中会形成大量的宿主-肠道微生物互作基因,这些互作基因具有一定的宿主肠道微生物特异性,利用其设计分子标记能有效识别粪便污染源.本研究首次利用竞争性杂交的方法富集猪粪便特异性基因,从中... 肠道微生物群落在与其宿主长期协同进化过程中会形成大量的宿主-肠道微生物互作基因,这些互作基因具有一定的宿主肠道微生物特异性,利用其设计分子标记能有效识别粪便污染源.本研究首次利用竞争性杂交的方法富集猪粪便特异性基因,从中筛选出具有猪粪便特异性的基因片段,以此设计引物并建立相应的PCR检测方法,并对采集样进行应用调查.竞争性杂交富集的猪粪便特异性基因文库以拟杆菌群(Bacteroidetes)(43.2%)和梭状杆菌群(Clostridia)(19.5%)相似序列为主,其蛋白功能主要分为3大类:与信息贮存与加工有关(7.6%),与细胞加工及信息传导有关(12.8%)以及与代谢有关(22.0%).进一步针对功能蛋白序列筛选宿主粪便特异性分子标记.分析表明序列3-53-2对应引物可作为猪粪便污染的特异性分子标记,针对其建立的常规PCR方法对粪便DNA的检出限可低至0.01 ng·μL-1,且对实际样品具有较高的应用灵敏性(97%)和特异性.进一步对可能受污染水样进行猪粪便污染特异性检测,结果显示不同地区的阳性检出率高达75%~100%,证明了此方法的有效性,可为研究微生物示踪技术在非点源污染方面的应用提供一定的基础数据. 展开更多

关键词 竞争性杂交 宿主-微生物互作基因 宿主粪便特异性分子标记 常规PCR

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猪急性腹泻综合征冠状病毒微滴数字PCR技术的建立和应用 被引量：4

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作者 陈可欣 曾若雪 +6 位作者 裘慧 金晨晨 陈小金 董志珍 宋厚辉 张晓峰 帅江冰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1385-1394,共10页

猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)是近年来在我国新发现的一种会引起猪严重腹泻的冠状病毒,本文旨在建立一种特异性强、重复性好、灵敏度高的SADS-CoV微滴式数字聚合酶链式反应(Digital d... 猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)是近年来在我国新发现的一种会引起猪严重腹泻的冠状病毒,本文旨在建立一种特异性强、重复性好、灵敏度高的SADS-CoV微滴式数字聚合酶链式反应(Digital droplet PCR,ddPCR)检测方法。采用SADS-CoV的N基因作为本研究的靶基因,根据其基因序列设计特异性引物及探针。通过优化反应体系中的反应条件,分析方法特异性、敏感性和稳定性,并对临床样本和猪源产制品进行检测验证,建立了猪急性腹泻综合征冠状病毒微滴数字PCR体系。本方法确定最佳引物浓度为500 nmol/L,最佳探针浓度为250 nmol/L,且在58℃反应条件下,ddPCR检测结果最优。本方法与其他常见猪源性病毒无交叉反应,特异性强;本方法重复性好,批间与批内变异系数均小于10%。本ddPCR方法在动态范围内最低检测限为3.85拷贝/反应,比荧光定量PCR(qPCR)高10倍以上。采用qPCR和ddPCR分别对90份样品进行检测,ddPCR方法阳性检出率为13.33%(12/90)优于qPCR阳性检出率11.11%(10/90)。本文首次建立了单重SADS-CoV ddPCR检测方法,其有更优的可靠性以及抗干扰性,为定量检测动物组织、饲料、血清和粪便等样品中SADS-CoV提供了新的、稳定的技术手段。 展开更多

关键词 猪急性腹泻综合征冠状病毒 微滴数字PCR 定量检测方法

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六种猪呼吸道RNA病毒MALDI-TOF MS同步检测体系的构建 被引量：1

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作者 张晓峰 宋士琦 +4 位作者 曾若雪 陈吴健 莫虹斐 王正亮 帅江冰 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3653-3666,共14页

【目的】建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)和猪流感病毒(swine influenza viru... 【目的】建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)和猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)多目标检测方法,同时对SIV进行通用型、H1型及H3型分型检测。【方法】本研究根据6种病原体基因的保守序列,设计了6对加标引物及对应的延伸探针并进行单反应试验。通过体系优化引物浓度和反应条件,以及方法特异性、重复性及灵敏度分析,使用MALDI-TOF MS检测方法及荧光定量PCR方法分别对临床样本和猪源产制品进行检测,并对结果进行对比验证。【结果】质谱结果显示,6种产物峰仅在靶标病毒对应的产物位置出现峰值,其他常见猪病病原在质谱图像中均未出现干扰,表明该体系的特异性良好。体系中每种病毒在高、中、低浓度时的批内阳性符合率均为100%,批间符合率均≥96.7%,表明该体系的重复性良好。灵敏度分析结果显示,体系中各病毒最低检测限在6.73–21.25拷贝/μL范围。应用MALDI-TOF MS多重检测方法对124份组织、饲料及猪肉样品进行检测,检出PRRSV阳性样本9份,SIV阳性样本3份(其中SIV-H1阳性样本2份,SIV-H3阳性样本1份)。将以上结果与荧光定量PCR方法分析结果进行对比验证,2种方法对各病原体检测结果的总符合率可达到99.2%–100%。【结论】本研究建立的6种猪呼吸道RNA病毒MALDI-TOF MS同步检测方法为相关疫病监测和快速鉴别,以及便利化进出口动物检疫等提供了一种新的敏感、特异的高通量多目标检测技术。 展开更多

关键词 猪呼吸道病毒 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS) 高通量检测

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江山就是人民 人民就是江山

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作者 耿天维 曾若雪 《党员生活（湖北）》 2021年第14期60-61,共2页

作者从“人民至上”“人民最大”这一核心要点切入,重点阐述了“人民是党执政的最大底气”“民心是最大的政治”“密切联系群众是党的最大政治优势”“造福人民是最大的政绩”“服务人民是最大的幸福”五个方面的内容。在党史学习教育... 作者从“人民至上”“人民最大”这一核心要点切入,重点阐述了“人民是党执政的最大底气”“民心是最大的政治”“密切联系群众是党的最大政治优势”“造福人民是最大的政绩”“服务人民是最大的幸福”五个方面的内容。在党史学习教育动员大会上,习近平总书记强调指出,“我们党的百年历史,就是一部践行党的初心使命的历史,就是一部党与人民心连心、同呼吸、共命运的历史”,“历史充分证明,江山就是人民,人民就是江山,人心向背关系党的生死存亡。赢得人民信任,得到人民支持,党就能够克服任何困难,就能够无往而不胜”。 展开更多

关键词 密切联系群众 党史学习 人心向背 百年历史 人民至上 核心要点 五个方面 江山

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