目的探讨微小核糖核酸-155（miRNA-155）对不稳定性心绞痛（UAP）患者外周血CD4＋T淋巴细胞的调控作用，从而阐明miRNA-155在UAP发病中的作用机制。方法选取住院的UAP患者21例，同时以疑似不典型冠心病症状而冠脉造影正常的住院患者18...目的探讨微小核糖核酸-155（miRNA-155）对不稳定性心绞痛（UAP）患者外周血CD4＋T淋巴细胞的调控作用，从而阐明miRNA-155在UAP发病中的作用机制。方法选取住院的UAP患者21例，同时以疑似不典型冠心病症状而冠脉造影正常的住院患者18例作为对照组。采用实时定量PCR检测外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-155表达水平，酶联免疫法检测血清干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）表达水平。免疫磁珠法分选10例UAP患者外周血CIM＋T淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-155组和miRNA-155抑制物组。对培养的细胞进行干预后，流式细胞术检测辅助性T细胞Th1和Th2数量，实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测IFN-γ受体α（interferon gamma receptor alpha，IFN-γRα）、T细胞表达T盒（T—box expressed in T cells，T—bet）、GATA结合蛋白3（GATA—binding protein3，GATA-3）的mRNA及蛋白表达，酶联免疫法检测细胞培养液上清IFN-γ、IL-4的表达。结果UAP患者外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-155与血清IFN-γ表达较对照组差异具有统计学意义（P〈0．01），且miRNA-155的表达与血清IFN-1呈显著正相关（r=0．842，P〈0．01）。与对照组比较，体外培养CD4＋T淋巴细胞miRNA-155组Th1数量、T—betmRNA及蛋白、培养液上清IFN-^y表达显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，差异具有统计学意义（均P〈0．01）；Th2数量、GATA-3、IFN-γRα的mRNA、GATA-3蛋白表达及培养液上清IL-4无明显改变（均P〉0．05）；miRNA-155抑制物可有效地阻断miRNA-155的上述作用。结论miRNA-155主要通过影响Thl细胞的分化和功能，参与对CIM＋T淋巴细胞的调控，在UAP发病机制中具有重要的作用。展开更多
文摘目的探讨微小核糖核酸-155（miRNA-155）对不稳定性心绞痛（UAP）患者外周血CD4＋T淋巴细胞的调控作用，从而阐明miRNA-155在UAP发病中的作用机制。方法选取住院的UAP患者21例，同时以疑似不典型冠心病症状而冠脉造影正常的住院患者18例作为对照组。采用实时定量PCR检测外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-155表达水平，酶联免疫法检测血清干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）表达水平。免疫磁珠法分选10例UAP患者外周血CIM＋T淋巴细胞，将分离的细胞分为对照组、miRNA-155组和miRNA-155抑制物组。对培养的细胞进行干预后，流式细胞术检测辅助性T细胞Th1和Th2数量，实时定量PCR及蛋白免疫印迹法检测IFN-γ受体α（interferon gamma receptor alpha，IFN-γRα）、T细胞表达T盒（T—box expressed in T cells，T—bet）、GATA结合蛋白3（GATA—binding protein3，GATA-3）的mRNA及蛋白表达，酶联免疫法检测细胞培养液上清IFN-γ、IL-4的表达。结果UAP患者外周血CD4＋T淋巴细胞miRNA-155与血清IFN-γ表达较对照组差异具有统计学意义（P〈0．01），且miRNA-155的表达与血清IFN-1呈显著正相关（r=0．842，P〈0．01）。与对照组比较，体外培养CD4＋T淋巴细胞miRNA-155组Th1数量、T—betmRNA及蛋白、培养液上清IFN-^y表达显著增加，IFN-γRα蛋白表达降低，差异具有统计学意义（均P〈0．01）；Th2数量、GATA-3、IFN-γRα的mRNA、GATA-3蛋白表达及培养液上清IL-4无明显改变（均P〉0．05）；miRNA-155抑制物可有效地阻断miRNA-155的上述作用。结论miRNA-155主要通过影响Thl细胞的分化和功能，参与对CIM＋T淋巴细胞的调控，在UAP发病机制中具有重要的作用。
