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碱性成纤维细胞生长因子真核表达载体的构建及其在内耳基因治疗中的实验研究 被引量:4
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作者 时利 董明敏 +4 位作者 时文杰 胡吟燕 郭维 翟所强 杨伟炎 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期21-23,I002,共4页
目的 观察碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)双顺反子真核表达载体在豚鼠耳蜗中的表达 ,及噪声损伤后对毛细胞的保护作用。方法 利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES) ... 目的 观察碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)双顺反子真核表达载体在豚鼠耳蜗中的表达 ,及噪声损伤后对毛细胞的保护作用。方法 利用脑炎心肌炎病毒的内部核糖体进入位点 (internalribosomeentrysite,IRES) ,构建人bFGF与增强型绿色荧光蛋白 (enhancegreenfluorescenceprotein ,EGFP)基因真核表达载体pIRES bFGF EGFP。采用硬脂胺 (stearylamine ,SA)脂质体介导bFGF基因转染豚鼠内耳 ,噪声暴露即刻通过圆窗向豚鼠耳蜗注入含有bFGF基因作为治疗基因的真核表达载体 ;或在噪声暴露前 7d ,作为保护因子转导转染豚鼠耳蜗。结果 构建的pIRES bFGF EGFP在转染 2 4h后开始表达 ,48h达到最高 ,表达时间可持续 1个月。治疗组在噪声后听性脑干反应平均阈值均低于噪声组 ,在保护组 :pIRES bFGF EGFP对耳蜗毛细胞有明显的保护作用。结论本研究成功地构建了pIRES bFGF EGFP真核共表达载体 ,具有bFGF、EGFP的双重活性 。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 真核表达 载体构建 基因治疗 实验研究 内耳疾病 治疗
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实验性犬侧颅底骨缺损修复材料的研究 被引量:2
2
作者 时利 吴彦桥 +7 位作者 时文杰 邹静 徐铮 修贺明 成继民 尚耀东 彭子成 毕爱芳 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 1997年第2期95-98,共4页
为达到修复颅底骨和硬脑膜缺损的目的,通过手术造成狗侧颅底骨及硬脑膜大面积缺损模型,利用自体阔筋膜或与细胞生长促进因子——骨形成蛋白(bonemorphogenticprotein,BMP)进行修复。观察移植后不同时期... 为达到修复颅底骨和硬脑膜缺损的目的,通过手术造成狗侧颅底骨及硬脑膜大面积缺损模型,利用自体阔筋膜或与细胞生长促进因子——骨形成蛋白(bonemorphogenticprotein,BMP)进行修复。观察移植后不同时期所修复组织的成活及成骨的组织学变化情况。探讨了阔筋膜修复硬脑膜后组织学变化,证实生物膜与骨形成蛋白是一种理想的颅底缺损修复材料,为临床修复硬脑膜、颅底缺损等提供了参考。 展开更多
关键词 颅骨缺损 外科手术 修复 骨形成蛋白
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多肿瘤抑制基因—p16在喉癌中的丢失研究
3
作者 时利 时文杰 王燕楢 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 1999年第1期13-16,I000,共5页
目的:探讨p16基因的缺失与人喉癌的发生、发展的关系。方法:应用RT-PCR及免疫组化方法检测p16。结果:44例喉癌患者中23例存在p16的失活,失活率为52.3%,p16基因的失表达与喉癌的组织学分化程度及临床分... 目的:探讨p16基因的缺失与人喉癌的发生、发展的关系。方法:应用RT-PCR及免疫组化方法检测p16。结果:44例喉癌患者中23例存在p16的失活,失活率为52.3%,p16基因的失表达与喉癌的组织学分化程度及临床分期有密切关系(P<0.05),表明p16基因的变异有可能与人喉癌的发生发展有关,提示检测p16基因的丢失对于判断喉癌的恶性度及估计病情的进展具有重要意义。结论:随着对p16基因的不断了解,将为肿瘤的临床诊断、基因治疗提供新的思路和线索。 展开更多
关键词 喉肿瘤 RT-PCR P16基因 多肿瘤抑制基因
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引导性骨再生一骨诱生蛋白(BMP)应用于颅骨缺损的研究 被引量:1
4
作者 时利 时文杰 +1 位作者 邸斌 赵超英 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 1997年第1期29-32,共4页
缘于手术、外伤、先天异常所致的巨大颅骨缺损不断提出自身的重建问题。尤其是近年来颅底外科发展迅速,颅底手术已不再视为“禁区”。然而巨大颅底肿物切除时常伴大块软组织及颅底骨缺损,尤其前颅底缺损后修复的并发症和病死率直接影... 缘于手术、外伤、先天异常所致的巨大颅骨缺损不断提出自身的重建问题。尤其是近年来颅底外科发展迅速,颅底手术已不再视为“禁区”。然而巨大颅底肿物切除时常伴大块软组织及颅底骨缺损,尤其前颅底缺损后修复的并发症和病死率直接影响颅腔与呼吸道隔离重建的成功。颅底缺损重建中最重要的方面是保证支持好脑组织,封闭颅腔,防止CSF漏和脑疲,防止逆行感染。目前的修复方法主要依靠自体骨及各种皮瓣移植,然而这些方法难度大、于本时间长、并发症高.常不能保证手术成功。最近几年许多合成的骨替代复合物,如多孔羟基磷灰石、复合乳酸多乱状聚合甲基内烯酸树酯在实验和临床应用中得以发展并证明有效。这些物质的优点在于它们具有组织学相容性,并且经济,可大量生产。然而这些材料诱导新骨完全形成需相当年~段时间。 展开更多
关键词 颅骨缺损 骨再生 骨诱生蛋白
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内耳基因转导的研究进展
5
作者 时利 翟所强 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 2001年第4期194-197,共4页
基因治疗是指在体细胞中转入具有治疗价值的新的遗传物质,使其在体内稳定表达,在一段时期内持续提供蛋白药物可达到治疗目的。对于一些日常用药物难以奏效的内耳疾病来说无疑是一种有潜力的治疗方法。由于内耳存在血迷路屏障,使得一... 基因治疗是指在体细胞中转入具有治疗价值的新的遗传物质,使其在体内稳定表达,在一段时期内持续提供蛋白药物可达到治疗目的。对于一些日常用药物难以奏效的内耳疾病来说无疑是一种有潜力的治疗方法。由于内耳存在血迷路屏障,使得一些如生长因子、细胞因子和酶类等大分子难以通过血迷路屏障并输送到靶部位而发挥生物学作用。另外,由于这些蛋白质分子的半衰期短,因而需要重复多次耳蜗内注射及徽泵灌注,技术上的复杂性大大限制了这类分子在内耳中的应用。故基因治疗的关键是建立有效的基因转移方法,以使目的基因得到高效率及长时间的表达。同时还要具备相应的调控手段。 展开更多
关键词 内耳 基因转导 载体 径路
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基于道路拓扑结构约束的未知非结构化场景可通行区域检测方法
6
作者 时利 赵盼 +2 位作者 林玲龙 刘法勇 李涛 《电子测量技术》 北大核心 2024年第16期147-154,共8页
非结构化未知场景缺乏丰富的先验信息,且道路类型多变、没有规则道路边界等严重制约自动驾驶车辆自主导航的平顺性和安全性。本文针对非结构化场景提出一种考虑道路拓扑结构约束的可通行区域检测方法。首先,为满足全局任务规划需求,基... 非结构化未知场景缺乏丰富的先验信息,且道路类型多变、没有规则道路边界等严重制约自动驾驶车辆自主导航的平顺性和安全性。本文针对非结构化场景提出一种考虑道路拓扑结构约束的可通行区域检测方法。首先,为满足全局任务规划需求,基于卫星航拍图像,半自动地提取道路的拓扑结构,构建全局路网,规划全局行驶轨迹;其次,根据全局轨迹和实时定位提取当前的行驶道路方向,作为道路可行使区域自适应生长的强约束条件,保障可通行区域的延伸方向与道路方向一致;最后,提出基于贝叶斯的激光雷达-视觉可通行区域融合方法,提升可通行区域检测的鲁棒性。实验结果表明,所提出的方法能够准确检测出可通行区域,检测失效率仅为0.2‰;在直线情况下,平均占比因子和平均发散因子为87.26%、41.91%;在弯道情况下,平均占比因子和平均发散因子73.62%和64.18%;证明了方法的有效性。 展开更多
关键词 非结构化场景 道路拓扑结构约束 可通行区域 贝叶斯融合 自动驾驶车辆
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毛细胞前体细胞的分离和鉴定 被引量:3
7
作者 时文杰 时利 +1 位作者 翟所强 杨伟炎 《天津医药》 CAS 北大核心 2005年第6期366-368,F003,共4页
目的:证实哺乳类耳蜗大上皮嵴和小上皮嵴分别能转化为内、外毛细胞。方法:采用体外培养wistar大鼠内耳基底膜,进行了大、小上皮嵴的定位和鉴定。结果:基底膜培养中,小上皮嵴细胞都能被毛细胞的早期标志肌球蛋白(myosinVIIa)染色,表明毛... 目的:证实哺乳类耳蜗大上皮嵴和小上皮嵴分别能转化为内、外毛细胞。方法:采用体外培养wistar大鼠内耳基底膜,进行了大、小上皮嵴的定位和鉴定。结果:基底膜培养中,小上皮嵴细胞都能被毛细胞的早期标志肌球蛋白(myosinVIIa)染色,表明毛细胞分化,同时,在培养基中发现一些球囊型结构的细胞,细胞增殖标志(BrdU)、上皮细胞标志(ZO1)免疫组化阳性,表明该球囊不仅具有增殖能力,而且具有上皮特性。结论:建立了新生大鼠耳蜗铺片培养技术,识别和定位毛细胞前体细胞(即小上皮嵴和大上皮嵴区域),证明了小上皮嵴细胞和大上皮嵴细胞都具有转变成为毛细胞的潜能。 展开更多
关键词 前体细胞 鉴定 WISTAR大鼠 分离 外毛细胞 体外培养 肌球蛋白 早期标志 细胞分化 细胞增殖 免疫组化 上皮细胞 增殖能力 培养技术 耳蜗铺片 新生大鼠 哺乳类 基底膜 膜培养 培养基
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腺病毒携带的LacZ基因在豚鼠耳蜗中的表达 被引量:11
8
作者 郭维 胡吟燕 +1 位作者 翟所强 时利 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2001年第1期36-37,T002,共3页
目的 带有LacZ基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后,观察不同时间段LacZ基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响,为内耳基因治疗提供理论依据。方法24只白色豚鼠术前及术后行听性脑干反应(ABR)检查。空白对照组经圆窗注... 目的 带有LacZ基因的腺病毒注入豚鼠耳蜗后,观察不同时间段LacZ基因的表达和分布情况及手术操作对听力的影响,为内耳基因治疗提供理论依据。方法24只白色豚鼠术前及术后行听性脑干反应(ABR)检查。空白对照组经圆窗注入人工外淋巴液,实验组注入带有LacZ基因的腺病毒。分别于2天、1周、2周后取材。耳蜗标本经 半乳糖苷酶(X-Gal)组织化学染色后做石蜡切片和耳蜗铺片。结果 腺病毒注入耳蜗后对听力影响不大。经X-Gal染色后整个耳蜗被染成蓝色。2天组表达产物最高,1周后逐渐降低。表达产物主要分布于柯蒂器的内外毛细胞、螺旋神经节细胞、基底膜下的间皮细胞。对照组均未着色。结论 通过圆窗注入腺病毒对听力没有影响,单一位点的接种就能使因子通过耳蜗液扩散到整个耳蜗。有效的基因转移在耳蜗是可行的,但表达相对短暂。 展开更多
关键词 腺病毒 耳蜗 基因治疗
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微电极阵列芯片技术研究不同发育阶段C57小鼠心肌细胞的电生理特性 被引量:4
9
作者 张玲 孙娟 +1 位作者 时利 侯月梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期836-841,共6页
目的:微电极阵列芯片技术研究不同发育阶段C57小鼠心肌细胞的电生理特性。方法:分离13.5-19.5 d胎鼠和2 d乳鼠的心室肌细胞并培养于微电极阵列(Microelectrode arrays,MEA)电极盘中48 h,通过倒置相差显微镜,透射电镜、扫描电镜观察... 目的:微电极阵列芯片技术研究不同发育阶段C57小鼠心肌细胞的电生理特性。方法:分离13.5-19.5 d胎鼠和2 d乳鼠的心室肌细胞并培养于微电极阵列(Microelectrode arrays,MEA)电极盘中48 h,通过倒置相差显微镜,透射电镜、扫描电镜观察其形态,免疫组化鉴定并用MEA技术研究其电生理特性。并对生后1、7、14、21、28、35、〉60 d的意识清醒未麻醉的小鼠行心电图(Electrocardiogram,ECG)和心率变异性(Heart rate variability,HRV)记录。结果:胎鼠心室肌细胞场电位时程(Field poten-tial duration,FPd)随发育而增加(P〈0.01),乳鼠的突然明显缩短(P〈0.01)。胎鼠心室肌细胞的搏动频率随发育而减慢。出生后小鼠的心律是窦性心律,平均PR、RR、QRS、QT、JT间期随发育逐渐缩短,7 d组比1 d组减少的差异有统计学意义(P〈0.01),而14、21、28、35和〉60 d之间差异无统计学意义。J-S-T段在1 d小鼠明显抬高,7 d组和14 d组逐渐降低,到35 d则基本回到基线。HRV随发育逐渐增加。结论:C57小鼠胎鼠心肌细胞FP电生理特性的变化和生后小鼠ECG间期和形态随发育的变化可能为小鼠心脏随发育的电生理特性提供有用的信息。 展开更多
关键词 微电极阵列 小鼠 发育 电生理特性
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C57胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞分离、培养及鉴定 被引量:1
10
作者 张玲 段明军 +3 位作者 魏琴 陈华 时利 侯月梅 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期3683-3687,共5页
背景:培养的心肌细胞被广泛应用于心肌细胞的生理特性、毒性实验、基因工程、疾病模型和药物筛选等方面的研究。获得纯度较高活性良好的品系小鼠心肌细胞是研究的关键前提。目的:分离和培养C57小鼠胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞。方法... 背景:培养的心肌细胞被广泛应用于心肌细胞的生理特性、毒性实验、基因工程、疾病模型和药物筛选等方面的研究。获得纯度较高活性良好的品系小鼠心肌细胞是研究的关键前提。目的:分离和培养C57小鼠胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞。方法:应用机械切碎心室肌后,胰蛋白酶消化不同发育阶段的C57小鼠心室肌细胞,差速贴壁1h纯化心室肌细胞,锥虫蓝染色判定心肌细胞活力,体外分别培养48~72h后分别行倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,微电极阵列评价细胞电生理指标,免疫组化鉴定。结果与结论:经3~6次消化后,心室组织消化完全,即刻细胞存活率大于85%。倒置显微镜下观察,细胞呈梭形、多角形。12h有少部分细胞搏动,48h细胞交织成网,搏动呈同步性,搏动频率30~90次/min。说明用胰蛋白酶组织消化法可以成功地分离、培养,并获得形态、活力良好的胎鼠、乳鼠及成年C57小鼠心室肌细胞。 展开更多
关键词 心室肌细胞 分离培养 免疫组化 电镜 微电极阵列
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P16(CDKN_2)、RB在喉癌组织中的表达 被引量:1
11
作者 时文杰 时利 王燕(木莤) 《天津医药》 CAS 1998年第6期347-350,共4页
为探讨抑癌基因P16及其相关基因RB在喉癌组织中表达的意义和其相互关系,应用免疫组化分析方法(SP法)对54例喉癌石腊标本中P16、RB蛋白产物进行检测。结果发现:P16、RB的表达缺失率分别为51.8%、16.7%,二者在喉癌中的表达呈负相关关系(... 为探讨抑癌基因P16及其相关基因RB在喉癌组织中表达的意义和其相互关系,应用免疫组化分析方法(SP法)对54例喉癌石腊标本中P16、RB蛋白产物进行检测。结果发现:P16、RB的表达缺失率分别为51.8%、16.7%,二者在喉癌中的表达呈负相关关系(r=-0.3646,P<0.05)。P16蛋白的表达随肿瘤恶性程度的提高而降低。提示:P16蛋白在抑制喉癌的恶性进展中具有重要作用。由P16、RB、CYCLIND_1,及CDK_4、CDK_6构成的调控细胞周期的负反馈通路作为细胞周期G1/S期的一个重要调节点,它的失调是导致肿瘤恶性发展的重要因素。RB可能对P16的表达具有调控作用。 展开更多
关键词 喉肿瘤 肿瘤抑制基因 基因表达 免疫组织化学
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狗硬脑膜与阔筋膜承受拉力比较 被引量:5
12
作者 时文杰 王学敏 时利 《中国中西医结合耳鼻咽喉科杂志》 2004年第5期233-234,共2页
目的 比较狗阔筋膜和硬脑膜所能承受拉力的差异。方法 使用XL-250A型拉力实验机分别测定同期、相同条件下取得的狗阔筋膜和硬脑膜所能承受的最大拉力。结果 两种不同方向的阔筋膜的拉力强度无显著差别,阔筋膜与硬脑膜二者之间的拉力强... 目的 比较狗阔筋膜和硬脑膜所能承受拉力的差异。方法 使用XL-250A型拉力实验机分别测定同期、相同条件下取得的狗阔筋膜和硬脑膜所能承受的最大拉力。结果 两种不同方向的阔筋膜的拉力强度无显著差别,阔筋膜与硬脑膜二者之间的拉力强度差别不显著,然而,二者之间每毫米所承受的拉力差别显著。结论用阔筋膜修复硬脑膜缺损足以支持脑组织。 展开更多
关键词 阔筋膜 硬脑膜缺损 脑组织 同期 拉力 差别 目的 实验机
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描述产业结构演变的三角形法及应用 被引量:2
13
作者 狄佳云 王仲智 +1 位作者 闫敬 时利 《中国城市经济》 2011年第11X期35-36,共2页
在三轴图法的基础上改进提出三角形图法,藉此描述徐州市三次产业结构演变轨迹,对徐州市产业演进过程进行阶段划分,通过验证三角形法的应用效果,显示用于描述区域的产业结构演变的三角形法优于三轴图法。
关键词 三轴图法 三角形法 产业结构 徐州市
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基于LabVIEW的EPS助力特性测试系统的设计 被引量:1
14
作者 时利 黄鹤 +1 位作者 赵林峰 邵文彬 《湖北汽车工业学院学报》 2014年第1期1-4,9,共5页
基于LabVIEW图形化编程语言设计了汽车电动助力转向系统(EPS)的助力特性测试系统,采用信号发生模块模拟车速信号、发动机转速信号以及转向盘操纵力矩信号并注入EPS控制器,实现EPS在LabVIEW环境下模拟整车环境的工作状况;同时,采用信号... 基于LabVIEW图形化编程语言设计了汽车电动助力转向系统(EPS)的助力特性测试系统,采用信号发生模块模拟车速信号、发动机转速信号以及转向盘操纵力矩信号并注入EPS控制器,实现EPS在LabVIEW环境下模拟整车环境的工作状况;同时,采用信号采集模块对助力转矩信号以及助力电流信号进行采集、处理。使用该测试系统对某型号EPS在不同车速工况下的助力特性进行测试,证实了该测试系统的有效性,同时测试结果为EPS控制器的设计以及控制策略的制定提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 EPS 测试系统 助力特性 整车环境 LABVIEW
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碱性成纤维细胞生长因子在内耳的生物学作用 被引量:1
15
作者 程晓华 时利 翟所强 《国外医学(耳鼻咽喉科学分册)》 2003年第4期223-227,共5页
碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是多种细胞的促分裂剂,具有广泛的生理功能。bFGF对耳毒性药物或噪声引起的耳蜗毛细胞损伤具有保护作用,还能促进内耳损伤神经元的修复。本文就bFGF的生化特性及作用机制,在内耳中的分布,以及在内耳发育、... 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是多种细胞的促分裂剂,具有广泛的生理功能。bFGF对耳毒性药物或噪声引起的耳蜗毛细胞损伤具有保护作用,还能促进内耳损伤神经元的修复。本文就bFGF的生化特性及作用机制,在内耳中的分布,以及在内耳发育、毛细胞再生等方面的作用加以综述。 展开更多
关键词 内耳 碱性成纤维细胞生长因子 生物学作用 耳毒性药物 耳蜗毛细胞损伤 保护作用
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小蜡树皮单体化合物—Esculin对MPP^+所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
16
作者 赵大龙 时利 +4 位作者 翟坤光 邹莉波 林生 石建功 朱海波 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2008年第2期112-114,共3页
目的:在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡模型中,研究从小蜡树皮提取的单体化合物Esculin的神经保护作用。方法:应用MTT法检测Esculin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式细胞仪检测Esculin对MPP+诱导的细胞凋亡的影响。此外... 目的:在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡模型中,研究从小蜡树皮提取的单体化合物Esculin的神经保护作用。方法:应用MTT法检测Esculin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式细胞仪检测Esculin对MPP+诱导的细胞凋亡的影响。此外,应用荧光染料DCFH-DA及Rhodamine 123对细胞内活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位(ΔΨm)进行了检测。结果:在经过10-7mol/L,10-6mol/L,10-5及10-4mol/L浓度Esculin处理后,细胞存活率与MPP+处理组相比,有显著性提高。结果显示,Esculin具有显著的抗细胞凋亡作用。同时Esculin可明显改善MPP+引起的ΔΨm下降,并可以逆转MPP+诱导的ROS水平升高。结论:Esculin对MPP+诱导的细胞损伤有明显保护作用,该化合物可以作为治疗退行性神经疾病如帕金森病等的候选化合物。 展开更多
关键词 Esculin 帕金森病 1-甲基4-苯基-吡啶盐 细胞凋亡 活性氧 线粒体
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大鼠耳蜗大上皮嵴的形态学演变
17
作者 汪学勇 胡吟燕 +1 位作者 时利 翟所强 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2005年第1期55-56,i002,共3页
目的 观察不同胚胎期的大鼠和新生大鼠耳蜗大上皮嵴形态上的变化。方法 选取胚胎期 14、16、18、2 0天和出生后当天、2、5、7、10、14天等 10个时间段的大鼠耳蜗 ,分别进行冰冻切片和HE染色。结果 毛细胞的分化成熟是从底回向顶回进... 目的 观察不同胚胎期的大鼠和新生大鼠耳蜗大上皮嵴形态上的变化。方法 选取胚胎期 14、16、18、2 0天和出生后当天、2、5、7、10、14天等 10个时间段的大鼠耳蜗 ,分别进行冰冻切片和HE染色。结果 毛细胞的分化成熟是从底回向顶回进行 ,顶回较底回有 1~ 2天的延迟。大上皮嵴结构重排、细胞减少从腔侧开始 ,出生后 2周左右当毛细胞分化成熟时消失。结论 胚胎期 14天前后是大上皮嵴形态演变的关键时期。大上皮嵴是耳蜗形态不成熟的标志之一。 展开更多
关键词 耳蜗 大上皮嵴 形态学 演变
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阳离子脂质体介导BFGF/GFP基因对药物性耳蜗损害的防治作用(英文)
18
作者 尹金淑 翟所强 +2 位作者 郭维 胡吟燕 时利 《中华耳科学杂志》 CSCD 2003年第4期10-15,共6页
目的 探讨阳离子脂质体(天然碱性脂SA)携带碱性成纤维细胞生长因子/绿色荧光蛋白(bFGF/GFP)基因在豚鼠耳蜗中的表达,以及对庆大霉素所致耳蜗损害的防治作用。方法 将36只豚鼠分为3组,预防组右耳园窗注入SA-bFGF/GFP复合物后次日肌肉注... 目的 探讨阳离子脂质体(天然碱性脂SA)携带碱性成纤维细胞生长因子/绿色荧光蛋白(bFGF/GFP)基因在豚鼠耳蜗中的表达,以及对庆大霉素所致耳蜗损害的防治作用。方法 将36只豚鼠分为3组,预防组右耳园窗注入SA-bFGF/GFP复合物后次日肌肉注射庆大霉素150mg.Kg^(-1).d^(-1)8天,治疗组先用庆大霉素8d后次日右耳给药,对照组单用庆大霉素8d。分别于实验前后及处死前行听觉脑干诱发电位(ABR)测试。荧光显微镜下观察耳蜗GFP的表达;用耳蜗琥珀酸脱氢酶染色铺片,扫描电镜观察毛细胞的缺失情况。结果 荧光显微镜下见双侧耳蜗均有GFP表达。预防和治疗组处死前的双耳ABR阈值与对照组比较差异有显著意义(P<0.01,P<0.05),耳蜗内外毛细胞缺失数与对照组比较差异有显著意义(P<0.01,P<0.05)。结论 SA脂质体介导的bFGF/GFP基因单耳给药双侧耳蜗均有高效表达,并对庆大霉素所致的耳蜗损害有防治作用。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 碱性 耳蜗疾病 庆大霉素类
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SA脂质体介导报告基因转染耳蜗的实验研究 被引量:5
19
作者 时 利 翟所强 +1 位作者 杨伟炎 董明敏 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2002年第2期105-107,I002,共4页
目的 探索直接注射质粒及SA脂质体与质粒复合物在豚鼠耳蜗内表达的情况。方法 以构建的含绿色荧光蛋白基因pEGFP cDNA的重组真核表达质粒为外源基因,与SA脂质体一起转染内耳耳蜗毛细胞;通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果 使... 目的 探索直接注射质粒及SA脂质体与质粒复合物在豚鼠耳蜗内表达的情况。方法 以构建的含绿色荧光蛋白基因pEGFP cDNA的重组真核表达质粒为外源基因,与SA脂质体一起转染内耳耳蜗毛细胞;通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达。结果 使用阳离子脂质体SA的脂质体质粒复合物组转染耳蜗,表达效率高于单纯质粒组,于转染后48h表达出的蛋白量最大。结论 应用脂质体及直接注射法是使外源基因在豚鼠耳蜗内表达的简便、有效途径。 展开更多
关键词 听力障碍/治疗 基因疗法 增强型绿色荧光蛋白质粒pEGFP SA脂质体 耳蜗
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高校图书馆改革刍议
20
作者 时利 《伊犁教育学院学刊(汉文综合版)》 1996年第15期48-48,49,共2页
关键词 高校图书馆 改革 队伍建设 人事制度 管理体制 领导班子
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