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猪流行性腹泻病毒的研究进展
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作者 敖清莹 《国外畜牧学(猪与禽)》 2024年第3期89-92,共4页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的传染病,具有传染性强、致病性高、易传播的特点。主要感染肠道上皮细胞,引起肠道上细胞损伤,从而影响肠道的吸收功... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的传染病,具有传染性强、致病性高、易传播的特点。主要感染肠道上皮细胞,引起肠道上细胞损伤,从而影响肠道的吸收功能,感染后,病猪会出现呕吐、腹泻、食欲下降等症状,严重时可能导致脱水、死亡。本文从猪流行性腹泻流行病学、病毒基因组及结构、临床症状及诊断进展进行综述,旨在为猪流行性腹泻的防控提供参考。 展开更多
关键词 PEDV 流行病学 诊断
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猪伪狂犬病毒贵州分离株gE基因的克隆及遗传信息分析 被引量:1
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作者 敖清莹 曾智勇 +6 位作者 徐国 杨霞 何祥艳 何小莉 张爱琼 咸文 叶百川 《山地农业生物学报》 2018年第2期80-84,共5页
为了解贵州地区猪伪狂犬病毒的分子流行现状,本研究提取实验室分离并保存的PRV GZJS2017株病毒核酸作为PCR扩增模板,并对其进行TA克隆、序列测定和用生物学软件进行遗传信息分析。结果表明:本次分离得到的GZJS2017株gE基因所测长度1740 ... 为了解贵州地区猪伪狂犬病毒的分子流行现状,本研究提取实验室分离并保存的PRV GZJS2017株病毒核酸作为PCR扩增模板,并对其进行TA克隆、序列测定和用生物学软件进行遗传信息分析。结果表明:本次分离得到的GZJS2017株gE基因所测长度1740 bp,GC含量为73.97%,通过系统进化树分析结果显示PRV不同地域毒株之间同源率达98.8%~99.9%,说明该毒株gE基因具有高度的保守性。本研究可为今后深入开展PRV gE基因的功能研究提供一些依据。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病毒 GE基因 克隆 序列分析
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非洲猪瘟病毒p54蛋白在昆虫细胞中的表达及其免疫原性分析
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作者 敖清莹 钟秋萍 +7 位作者 史馨瑾 魏常青 刘英楠 廖欣欣 谢振华 钱莺娟 郑龙三 陈鸿军 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第4期164-169,共6页
非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白由晚期基因E183L编码,是主要的结构蛋白之一。为了获得免疫原性强的p54蛋白,本研究将E183L基因克隆至pFastBac1载体中,取1μg重组质粒转座DH10Bac感受态细菌,经三轮蓝白斑筛选后,获得重组Bacmid-p54。将提取的... 非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白由晚期基因E183L编码,是主要的结构蛋白之一。为了获得免疫原性强的p54蛋白,本研究将E183L基因克隆至pFastBac1载体中,取1μg重组质粒转座DH10Bac感受态细菌,经三轮蓝白斑筛选后,获得重组Bacmid-p54。将提取的Bacmid-p54质粒DNA转染Sf9细胞,出现明显病变后,收获细胞培养上清,在正常Sf9细胞中传三代,获得的杆状病毒命名为rBac-P54。利用SDS-PAGE检测rBac-P54感染后昆虫细胞的蛋白表达情况,并通过间接免疫荧光(IFA)和Western-blot鉴定p54蛋白的免疫原性。结果显示,在感染的Sf9细胞中,p54蛋白能获得高效表达,并可被ASFV阳性血清特异性识别。这表明杆状病毒系统表达的p54蛋白具有良好的免疫原性,为后续开展非洲猪瘟血清学诊断和p54功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p54蛋白 昆虫细胞表达系统 免疫原性
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非洲猪瘟病毒综述 被引量:4
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作者 敖清莹 《中国猪业》 2022年第4期82-86,共5页
非洲猪瘟(Afri can Swine Fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(Afri can Swine Fever Virus,ASFV)引起猪的一种以高热、病程短、内脏器官广泛出血为主要特征的烈性传染病,病死率接近100%。从非洲猪瘟流行病学、病原学、感染机制、临床症状、疫... 非洲猪瘟(Afri can Swine Fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(Afri can Swine Fever Virus,ASFV)引起猪的一种以高热、病程短、内脏器官广泛出血为主要特征的烈性传染病,病死率接近100%。从非洲猪瘟流行病学、病原学、感染机制、临床症状、疫苗研究的进展进行综述,旨在为非洲猪瘟病毒的防控提供参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟 病原学 临床症状 疫苗研究
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非洲猪瘟病毒pS273R蛋白水解酶单克隆抗体制备 被引量:1
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作者 张萌 刘英楠 +7 位作者 谢振华 敖清莹 吕璐 于婉琪 金文杰 秦爱建 扈荣良 陈鸿军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期839-844,共6页
本研究旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示:基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂... 本研究旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)S273R蛋白的特异性单克隆抗体。本研究以原核表达的非洲猪瘟病毒重组S273R蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞。结果显示:基于纯化的S273R蛋白建立的间接ELISA方法对杂交瘤细胞进行筛选和亚克隆,获得了4株可稳定分泌抗ASFV S273R蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过免疫印迹(Western blot)和免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)测定了其免疫特性。4株单克隆抗体亚类均为IgG1型,轻链均为κ链。本研究获得的非洲猪瘟病毒S373R蛋白单克隆抗体可为进一步研究ASFV pS273R的生物学功能及基因缺失毒株的鉴别诊断和疫苗开发提供技术储备。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 S273R蛋白 原核表达 单克隆抗体
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非洲猪瘟病毒p30蛋白在杆状病毒表达系统中的表达与免疫检测
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作者 廖欣欣 钟秋萍 +7 位作者 史馨瑾 魏常青 孙海伟 刘英楠 敖清莹 谢振华 邬静 陈鸿军 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第4期170-175,共6页
p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)免疫原性最强的结构蛋白之一,由CP204L基因编码。本研究利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒真核表达系统将ASFV中CP204L插入p Fast Bac1载体下游,将形成的重组质粒p Fast Bac-p30以转座子的形式插入到DH10Bac中的... p30蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)免疫原性最强的结构蛋白之一,由CP204L基因编码。本研究利用Bac-to-Bac昆虫杆状病毒真核表达系统将ASFV中CP204L插入p Fast Bac1载体下游,将形成的重组质粒p Fast Bac-p30以转座子的形式插入到DH10Bac中的杆状病毒穿梭质粒(Bacmid)中,筛选出重组Bacmid-p30后,将Bacmid-p30转染Sf9细胞,并继续传代3次,获得重组杆状病毒,命名为r Bac-p30。分别通过间接免疫荧光(IFA)和免疫印迹(Western blot)鉴定了ASFV阳性血清可特异性识别Sf9细胞中表达的p30。以此真核表达p30蛋白包被ELISA板,可区分ASFV阴阳性血清。以上结果表明,本研究初步建立了检测ASFV血清抗体的间接ELISA方法,为后续建立非洲猪瘟抗体检测方法和p30亚单位疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 p30蛋白 杆状病毒表达系统
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猪饲料科学使用方法
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作者 敖清莹 《北方牧业》 2023年第10期21-21,共1页
随着社会经济的不断进步和发展,养殖产业发展规模也在当前的环境中逐渐实现扩大。对于猪养殖产业来说,相关养殖人员要想在养殖中不断提升猪的养殖质量,饲料的喂养环节是关键,能对猪的养殖安全质量起着决定性作用,因此,养殖人员要在养殖... 随着社会经济的不断进步和发展,养殖产业发展规模也在当前的环境中逐渐实现扩大。对于猪养殖产业来说,相关养殖人员要想在养殖中不断提升猪的养殖质量,饲料的喂养环节是关键,能对猪的养殖安全质量起着决定性作用,因此,养殖人员要在养殖中强化对饲料的管理,不断优化饲料的喂养技术,提升养殖质量,促进产业发展。在养殖产业规模逐渐实现扩大的发展背景下,猪肉作为市场中较为常见的肉类食品,不仅对产业经济发展起着较为关键的促进作用,其养殖的安全质量也在时刻影响着群众的食品安全。因此,在猪养殖工作中,作为养殖质量的决定性因素,养殖人员要强化其对猪饲料的科学管理和喂养。 展开更多
关键词 产业经济发展 养殖人员 促进作用 食品安全 肉类食品 养殖产业 产业发展规模 猪饲料
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非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白的原核表达及其免疫特性研究 被引量:2
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作者 谢振华 刘英楠 +6 位作者 张萌 敖清莹 吕璐 于婉琪 扈荣良 邬静 陈鸿军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期37-44,共8页
为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type l... 为了制备非洲猪瘟病毒(ASFV)SY18毒株的C-type lectin蛋白多抗,以基因序列优化的真核质粒为模板,扩增EP153R基因,构建原核表达重组质粒pET-32a-EP153R。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,利用IPTG诱导宿主菌表达后,纯化C-type lectin重组蛋白。用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备C-type lectin蛋白多抗,利用Western-blot和间接免疫荧光技术鉴定该抗体的反应性和特异性。结果表明,原核表达重组蛋白C-type lectin经IPTG诱导表达成功,大小约为38 ku,其主要以包涵体形式表达,且能与His标签单抗发生反应,C-type lectin蛋白多抗可特异性识别非洲猪瘟病毒C-type lectin蛋白。本研究为非洲猪瘟血清学检测方法的建立及C-type lectin蛋白生物学功能的探究奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 C-type lectin蛋白 抗体 免疫特性
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