目的探讨细胞因子(TGF-β1、IL-10)与Stro-1+、Stro-1-间充质干细胞(MSC)免疫抑制效应的相关性。方法采用实时定量RT-PCR比较TGF-β1、IL-10在MSC两种细胞亚群中的表达,以磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照。以Pri mer Expre-ssTM软件...目的探讨细胞因子(TGF-β1、IL-10)与Stro-1+、Stro-1-间充质干细胞(MSC)免疫抑制效应的相关性。方法采用实时定量RT-PCR比较TGF-β1、IL-10在MSC两种细胞亚群中的表达,以磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照。以Pri mer Expre-ssTM软件进行引物设计,以Ct表示PCR的相对产量,ΔCt代表靶基因与GAPDH之间的Ct之差,以2-ΔΔCt表示ΔCt(Stro-1+MSC)与ΔCt(Stro-1-MSC)之间的比值;在3种不同条件下[①MSC单独培养;②MSC与混合淋巴反应体系(MLR)直接接触;③MSC通过Transwell与MLR间接接触],用ELISA法检测Stro-1+与Stro-1-细胞培养上清中TGF-β1的表达。结果IL-10在Stro-1+与Stro-1-MSC中均低表达,而TGF-β1在Stro-1-MSC中显著高表达(P<0.05);ELISA结果显示在3种培养条件下,TGF-β1在Stro-1-MSC中的表达均显著高于Stro-1+MSC(P<0.05)。结论Stro-1+MSC较Stro-1-MSC免疫抑制作用更显著,其与TGF-β1和IL-10的表达无关,表明TGF-β1、IL-10在MSC不同亚群免疫抑制效应中不起主要作用。展开更多
文摘目的探讨细胞因子(TGF-β1、IL-10)与Stro-1+、Stro-1-间充质干细胞(MSC)免疫抑制效应的相关性。方法采用实时定量RT-PCR比较TGF-β1、IL-10在MSC两种细胞亚群中的表达,以磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照。以Pri mer Expre-ssTM软件进行引物设计,以Ct表示PCR的相对产量,ΔCt代表靶基因与GAPDH之间的Ct之差,以2-ΔΔCt表示ΔCt(Stro-1+MSC)与ΔCt(Stro-1-MSC)之间的比值;在3种不同条件下[①MSC单独培养;②MSC与混合淋巴反应体系(MLR)直接接触;③MSC通过Transwell与MLR间接接触],用ELISA法检测Stro-1+与Stro-1-细胞培养上清中TGF-β1的表达。结果IL-10在Stro-1+与Stro-1-MSC中均低表达,而TGF-β1在Stro-1-MSC中显著高表达(P<0.05);ELISA结果显示在3种培养条件下,TGF-β1在Stro-1-MSC中的表达均显著高于Stro-1+MSC(P<0.05)。结论Stro-1+MSC较Stro-1-MSC免疫抑制作用更显著,其与TGF-β1和IL-10的表达无关,表明TGF-β1、IL-10在MSC不同亚群免疫抑制效应中不起主要作用。
