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五灵胶囊通过调控TLR4/NF-κB通路防治急性痛风性关节炎作用的研究
1
作者 李楠 周瑞 +6 位作者 唐志书 宋忠兴 马慷 庞夏云 刘妍如 史鑫波 倪健 《西北药学杂志》 CAS 2024年第5期1-9,共9页
目的 探讨五灵胶囊对由单尿酸钠晶体(monosodium urate,MSU)诱导的急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的治疗作用。方法 通过踝关节腔内注射MSU构建AGA大鼠模型。用缚线法、足趾容积测量仪、双足平衡测痛仪检测踝关节周... 目的 探讨五灵胶囊对由单尿酸钠晶体(monosodium urate,MSU)诱导的急性痛风性关节炎(acute gouty arthritis,AGA)大鼠的治疗作用。方法 通过踝关节腔内注射MSU构建AGA大鼠模型。用缚线法、足趾容积测量仪、双足平衡测痛仪检测踝关节周径、足趾容积、双足痛觉;用HE染色观察大鼠右侧踝关节滑膜病理变化;用免疫吸附试验(enzyme-linked immunesorbent assay,ELISA)检测血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;用实时荧光PCR技术分别检测关节滑膜中的炎症因子及TLR4/NF-κB信号通路关键指标的表达情况。结果 与对照组比较,模型组的踝关节周径、足趾容积、对痛觉的敏感程度均显著升高(P<0.05),滑膜组织炎性浸润明显,血清中炎症因子TNF-α、IL-1β的水平均显著升高(P<0.05),滑膜组织中炎症因子及TLR4/NF-κB信号通路中关键指标的表达量均显著升高(P<0.05);与模型组比较,秋水仙碱和五灵胶囊各剂量组均可明显改善由MSU诱导的AGA大鼠踝关节周径、足趾容积及对痛觉的敏感程度(P<0.05),改善滑膜组织炎性浸润,抑制由MSU诱导的AGA大鼠血清中炎症因子的上调(P<0.05),抑制关节滑膜组织中IL-1β、TNF-α、IL-6及TLR4、MyD88、NF-κB、IκBα、NLRP3的表达(P<0.05)。结论 五灵胶囊可能通过减少炎症因子的释放,抑制TLR4/NF-κB信号通路,发挥防治AGA的作用。 展开更多
关键词 急性痛风性关节炎 五灵胶囊 TLR4/NF-κB信号通路
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正源方抗肝纤维化的网络药理学预测分析及实验验证
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作者 庞夏云 任美 +4 位作者 苏洁 周瑞 刘妍如 宋忠兴 唐志书 《中国现代中药》 CAS 2023年第10期2135-2146,共12页
目的:基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制,并进行细胞水平实验验证。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及文献检索获得正源方活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensembl... 目的:基于网络药理学、分子对接技术预测正源方抗肝纤维化的作用机制,并进行细胞水平实验验证。方法:使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及文献检索获得正源方活性成分,通过PubChem、SwissTargetPrediction、Similarity Ensemble Approach数据库筛选活性成分潜在靶点,通过OMIM、GeneCards疾病数据库收集肝纤维化的相关靶点,运用Venny平台获得正源方与肝纤维化交集靶点,利用String数据库建立蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并通过Cytoscape-CytoNCA拓扑分析筛选核心靶点,利用String数据库进行基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,利用Cytoscape软件构建药物-成分-靶点-通路网络,使用AutoDock Vina软件模拟关键候选活性成分与核心基因的结合活性。建立人转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的人肝星状细胞LX2活化模型,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法(WB)检测磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路相关蛋白表达。结果:网络药理学筛选得到正源方活性成分145个及相关靶点1109个,肝纤维化靶点1573个,正源方抗肝纤维化潜在作用靶点415个,拓扑分析得关键靶点61个;PPI网络分析核心靶点为Akt1、血管内皮生长因子A(VEGFA)、白细胞介素-1β(IL-1β)等,GO富集分析得到1753个条目,其功能主要与细胞凋亡、细胞增殖、酶结合等有关;KEGG富集分析得到174个条目,主要涉及癌症通路、PI3K-Akt通路、细胞凋亡通路等;分子对接显示,槲皮素、木犀草素、熊果酸等与Akt1、VEGFA、Jun原癌基因(JUN)等靶点结合活性较强;细胞实验结果表明,不同剂量的正源方给药后,可以显著抑制TGF-β1诱导的LX2细胞的活化,降低磷酸化PI3K(p-PI3K)/PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)/Akt蛋白表达,且具有质量浓度依赖性。结论:正源方可能通过多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制肝星状细胞活化、调控PI3K-Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 正源方 肝纤维化 网络药理学 分子对接 细胞实验 磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路
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珠子参总皂苷对人宫颈癌细胞系HeLa增殖、凋亡及自噬的影响 被引量：3
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作者 庞夏云 周瑞 +5 位作者 宋若彤 李楠 王雨琪 宋忠兴 刘妍如 唐志书 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期3848-3856,共9页
探究珠子参总皂苷对人宫颈癌细胞系HeLa增殖、凋亡和自噬的影响。利用紫外-可见分光光度计检测珠子参总皂苷中皂苷的含量;分别运用CCK-8、DAPI染色法及流式细胞术检测珠子参总皂苷对HeLa细胞活力、细胞核形态变化、细胞周期与凋亡的影响... 探究珠子参总皂苷对人宫颈癌细胞系HeLa增殖、凋亡和自噬的影响。利用紫外-可见分光光度计检测珠子参总皂苷中皂苷的含量;分别运用CCK-8、DAPI染色法及流式细胞术检测珠子参总皂苷对HeLa细胞活力、细胞核形态变化、细胞周期与凋亡的影响;Western blot技术检测HeLa细胞中凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白-9(cleaved caspase-9)、活化的半胱氨酸蛋白酶蛋白-3(cleaved caspase-3),自噬相关蛋白苄氯素1(Beclin-1)和SQSTM1(p62),磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达的影响。研究发现,珠子参总皂苷的得出率、皂苷质量分数分别为6.3%、78.3%;珠子参总皂苷可显著抑制HeLa细胞的增殖(P<0.001),影响HeLa细胞核形态,阻滞HeLa细胞G_(0)/G_(1)期周期,诱导细胞凋亡,且呈现一定的浓度依赖性。进一步发现珠子参总皂苷可上调促凋亡蛋白Bax、cleaved caspase-9和cleaved caspase-3和自噬相关蛋白p62的表达(P<0.05),下调抗凋亡蛋白Bcl-2和自噬相关蛋白Beclin-1的表达(P<0.01),促进p-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK,简称p38)/p38、p-c-Jun氨基末端激酶(JNK)/JNK、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平(P<0.05),对p-ERK/ERK影响不显著。结果表明,珠子参总皂苷可能通过激活PI3K/Akt/mTOR、JNK和p38信号通路,抑制HeLa细胞自噬,促进其细胞凋亡,表明了珠子参可能具有抗宫颈癌的潜在作用。 展开更多
关键词 珠子参总皂苷 HELA细胞 增殖 自噬 凋亡
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川芎不同提取物抗痛风的药效筛选及作用机制研究
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作者 宋若彤 马慷 +6 位作者 庞夏云 李楠 周瑞 许洪波 陈琳 宋忠兴 唐志书 《中国现代中药》 2025年第3期535-545,共11页
目的:筛选并比较川芎不同提取物对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠的作用,初步探讨其作用机制。方法:以乙酸乙酯、甲醇、水为溶剂,采用超声提取法对川芎进行提取,分别得到乙酸乙酯、甲醇、水的总提取物(川芎提取物A),乙酸乙酯提取物(川芎提取... 目的:筛选并比较川芎不同提取物对急性痛风性关节炎(AGA)大鼠的作用,初步探讨其作用机制。方法:以乙酸乙酯、甲醇、水为溶剂,采用超声提取法对川芎进行提取,分别得到乙酸乙酯、甲醇、水的总提取物(川芎提取物A),乙酸乙酯提取物(川芎提取物B),乙酸乙酯提取后的甲醇、水的提取物(川芎提取物C)。将36只雄性SD大鼠随机平均分为对照组、模型组、川芎提取物A组、川芎提取物B组、川芎提取物C组、秋水仙碱组;在大鼠右后踝关节处注射质量浓度为25 mg·mL^(-1)的单钠尿酸盐晶体混悬液0.1 mL,制备AGA大鼠模型;川芎提取物A、B、C组和秋水仙碱组以10 mL·kg^(-1)连续灌胃给药9 d,对照组和模型组灌胃等量纯水。采用线敷法、足趾肿胀仪、双足平衡测痛仪分别检测大鼠踝关节周径、肿胀度及大鼠痛觉的敏感性;苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠踝关节病理变化情况;酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测血清中白细胞介素-1β (IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)和IL-6的水平;蛋白质免疫印迹法(WB)检测Toll样受体4 (TLR4)、核转录因子-κB (NF-κB)、磷酸化的NF-κB (p-NF-κB)、NF-κB抑制因子α (IκBα)、磷酸化的IκBα(p-IκBα)蛋白质的表达情况。结果:与对照组比较,模型组大鼠踝关节周径变大,足趾肿胀明显,痛觉敏感性显著升高,关节滑膜组织炎性浸润明显,血清中的炎症因子TNF-α、IL-1β水平明显升高;与模型组比较,川芎提取物A、B、C组大鼠踝关节周径明显减小,足趾肿胀显著降低,痛觉敏感性显著降低,关节滑膜炎症细胞浸润显著减轻,血清中的炎症因子TNF-α、IL-1β水平明显降低,滑膜组织中TLR4/β-肌动蛋白(β-actin)、p-NF-κB/NF-κB显著下调。其中,川芎提取物B抗炎镇痛作用较为显著。结论:体内药效筛选结果表明,川芎乙酸乙酯提取物可能为川芎抗炎镇痛,从而发挥抗AGA作用的主要活性部位,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 川芎 急性痛风性关节炎 炎症细胞因子 Toll样受体4/核转录因子-κB信号通路
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