地鼠肾原代细胞外源病毒调查 被引量：4

1

作者 应贤平 徐蓓 +5 位作者 钱琴 马东林 屈霞琴 姜文琴 刘连生 陈天培 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1994年第4期165-168,共4页

清洁级、普通级2周龄地鼠，按卫生部颁布的无特异病原体（SPF）级的标准李行病毒抗体检测均为阴性。但8批用清洁级地鼠制备的肾原代细胞中均未发现有血吸附现象，而在普通级，血吸附阳性率高达86％（18／21）。超离浓缩后血凝效价达1：4... 清洁级、普通级2周龄地鼠，按卫生部颁布的无特异病原体（SPF）级的标准李行病毒抗体检测均为阴性。但8批用清洁级地鼠制备的肾原代细胞中均未发现有血吸附现象，而在普通级，血吸附阳性率高达86％（18／21）。超离浓缩后血凝效价达1：4～1：64；负染后用电镜可观察到副流感样病毒颗粒。经血清学检测，该外源病毒与仙台和小鼠肺炎病毒抗原相关，但按常规方法不易在鸡胚和同种地鼠肾细胞上传代。 展开更多

关键词 地鼠 肾原代细胞 外源病毒 生物制品 实验动物

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β-胡萝卜素辅致癌机制体外实验研究 被引量：3

2

作者 应贤平 仲伟鉴 +4 位作者 肖萍 郑志清 董竞武 郑勇英 周祥凤 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2003年第3期164-167,共4页

[目的 ]建立改进的BALB/c 3T3细胞转化试验方法 ,简便、快速检测 β 胡萝卜素通过诱导细胞色素P45 0酶提高苯并 (a)芘、吸烟焦油致癌作用。 [方法 ]每组 12瓶细胞 ,每瓶接种 10 4细胞 ,2 4h后加受试物 ,1周后 2瓶细胞用结晶紫方法测定... [目的 ]建立改进的BALB/c 3T3细胞转化试验方法 ,简便、快速检测 β 胡萝卜素通过诱导细胞色素P45 0酶提高苯并 (a)芘、吸烟焦油致癌作用。 [方法 ]每组 12瓶细胞 ,每瓶接种 10 4细胞 ,2 4h后加受试物 ,1周后 2瓶细胞用结晶紫方法测定细胞毒性 ,其余 10瓶换含 2 %胎牛血清和 1%ITES( 2 0 0 μg/ml胰岛素 ,2 0 0 μg/ml人转铁蛋白 ,12 2 μg/ml氨基乙醇 ,0 0 3 4μg/ml亚硒酸钠 )DMEM /F12转化表达培养液。每周换液 2次 ,第 2 5天甲醇固定 10min ,2 5 %Giemsa染色 5～ 10min ,肉眼计数直径 >2mm转化灶。 [结果 ] 0 5、1μmol/Lβ 胡萝卜素、10 μmol/Lα 萘黄酮、10 μmol/L苯并 (a)芘和 2μg/ml吸烟焦油对细胞相对存活率均大于 90 %。 1μmol/Lβ 胡萝卜素能提高苯并 (a)芘、吸烟焦油的细胞转化率平均每瓶细胞转化灶分别增高 3 2 %和 5 0 0 %。α 萘黄酮可以抑制 β 胡萝卜素增强吸烟焦油和苯并 (a)芘细胞转化作用。[结论 ]β 胡萝卜素增强苯并 (a)芘和吸烟焦油对BALB/c 3T3细胞转化能力 ,可被混合功能氧化酶抑制剂α 萘黄酮阻止 ,提示 β 胡萝卜素辅致癌作用是通过诱导细胞色素P45 展开更多

关键词 Β-胡萝卜素 辅致癌作用 BALB/c-3T3细胞转化试验 检测 吸烟 抗癌

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纳米二氧化钛颗粒毒理学进展 被引量：15

3

作者 应贤平 仲伟鉴 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期334-336,共3页

关键词 纳米颗粒 纳米二氧化钛毒性 纳米毒理学

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淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒核蛋白合成基因的表达及应用 被引量：1

4

作者 应贤平 郁庆明 +10 位作者 吴腾捷 李朝选 程鹏飞 宋虹 赵春女 吴文鹃 陈延 郭盛淇 仲伟鉴 肖萍 郑勇英 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期204-207,共4页

目的 用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）或其他方法重组蛋白抗原， 用于ＬＣＭＶ感染的诊断。方法 采用Ｐｒｏｓｉｓ软Ｓ件对ＬＣＭＶ核蛋白（Ｎｐ）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ＬＣ－ ＭＶ ｓＲ... 目的 用合成基因表达产物取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）或其他方法重组蛋白抗原， 用于ＬＣＭＶ感染的诊断。方法 采用Ｐｒｏｓｉｓ软Ｓ件对ＬＣＭＶ核蛋白（Ｎｐ）全长氨基酸序列进行亲疏水性分析，合成ＬＣ－ ＭＶ ｓＲＮＡ第１８１６－２１７８位核苷酸序列编码的Ｎｐ第３８０～５００位氨基酸基因，克隆在Ｈｉｓ－ｔａｇ ｐＥＴ－２８ａ融合表达，表 达产物经固定化金属配体亲和层析纯化，建立ＥＬＩＳＡ检测试剂。结果 表达产物主要以包涵体形式存在，表达量 达２０％以上。表达产物经Ｎｉ－ＮＴＡ－Ａｇａｒｏｓｅ纯化后纯度达到９０％以上。经检测９３份人血清．有６份病毒抗体阳 性，阳性率为６．５％（６／９３），与全病毒抗原检测结果７．５％（７／９３）相近。结论 用合成基因表达产物取代ＬＣＭＶ抗原 检测病毒抗体，不仅可以消除病毒传播可能，而且特异性强。为ＬＣＭＶ感染诊断及生物材料质量控制提供有效方 法。 展开更多

关键词 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 N蛋白合成基因 重组蛋白 LCMV

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三唑磷慢性暴露对大鼠肝脏基因表达的作用 被引量：1

5

作者 应贤平 仲伟鉴 +2 位作者 马国云 董竞武 姚小妹 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第A03期214-214,共1页

关键词 三唑磷 慢性毒性 基因表达谱 基因芯片

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纳米颗粒对大气环境和人类健康的影响 被引量：6

6

作者 应贤平 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2006年第1期68-70,共3页

纳米颗粒或超细颗粒是指直径<100nm颗粒的统称。纳米尺度颗粒对生物系统影响是巨大的,可以进入机体中枢神经系统和心脏等重要组织。人们用纳米技术研制或生产纳米材料对环境和人类健康的影响值得深入研究。

关键词 纳米颗粒 大气污染 人类健康 纳米材料

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不同等级实验动物病毒学质量抽查结果分析 被引量：7

7

作者 应贤平 钱琴 +1 位作者 屈霞琴 姜文琴 《上海实验动物科学》 2001年第2期88-91,共4页

1995～ 1 999年对抽查的近 2 0家单位的 5 3 1 9只实验动物进行病毒学检测。普通级大鼠 ( 1 79只 )、仓鼠 ( 2 3 3 4)均合格 ;92 7只小鼠中发现 3只淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒( L CMV)抗体阳性、3 0只鼠痘病毒 ( MPV)抗体阳性 ;41 3只豚... 1995～ 1 999年对抽查的近 2 0家单位的 5 3 1 9只实验动物进行病毒学检测。普通级大鼠 ( 1 79只 )、仓鼠 ( 2 3 3 4)均合格 ;92 7只小鼠中发现 3只淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒( L CMV)抗体阳性、3 0只鼠痘病毒 ( MPV)抗体阳性 ;41 3只豚鼠中有 2 1只 L CMV抗体阳性。清洁级大鼠、小鼠和豚鼠中没有一种动物 5年来一直保持合格 ,仙台病毒、鼠肝炎病毒 ( MHV)感染比较普遍。 3 81只 SPF级小鼠仅 1 996年的一次抽查中有 6只小鼠呼肠孤病毒 III型 ( Reo-3 )抗体阳性。 展开更多

关键词 实验动物 病毒学检测 普通级 清洁级 无特定病原体 SPF 质量抽查

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清洁级长爪沙鼠病毒抗体ELISA检测法建立 被引量：7

8

作者 应贤平 钱琴 +2 位作者 刘连生 杨建林 聂金荣 《中国实验动物学杂志》 1995年第1期24-27,共4页

经纯化长爪沙鼠ＩｇＧ免疫家兔后获得的血清用辛酸法纯化抗体，电泳可见只有一条蛋白带。制备得酶标二抗工作浓度为１：２５６００．用间接ＥＬＩＳＡ对开放系统和屏障系统中长爪沙鼠进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）、鼠肝炎... 经纯化长爪沙鼠ＩｇＧ免疫家兔后获得的血清用辛酸法纯化抗体，电泳可见只有一条蛋白带。制备得酶标二抗工作浓度为１：２５６００．用间接ＥＬＩＳＡ对开放系统和屏障系统中长爪沙鼠进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒（ＬＣＭＶ）、鼠肝炎病毒（ＭＨＶ）和仙台病毒抗体的检测，发现其血清病毒抗体阳性率开放系统为６．０％（４／６７）、２２．４％（１５／６７）和１４．９５（１０／６７），屏障系统为１．３％（１／７９）、１．３％（１／７９）和７．６％（６／７９）．如用酶标蛋白Ａ取代酶标抗长爪沙鼠ＩｇＧ抗体进行检测，则无一份血清阳性。结果表明长爪沙鼠可以自然感染ＬＣＭＶ、ＭＨＶ和仙台病毒或其抗原相关的病毒，酶标蛋白Ａ不宜作为酶标二抗用于长爪沙鼠抗体的检测。 展开更多

关键词 清洁级 长爪沙鼠 病毒抗体 ELISA检测法

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实验小鼠痘病毒感染检测分析 被引量：4

9

作者 应贤平 钱琴 +2 位作者 屈霞琴 姜文琴 潘振业 《中国实验动物学杂志》 2000年第2期69-73,共5页

小鼠痘病毒急性感染可导致实验小鼠脱脚病 (鼠痘 )发作 ,临床症状明显 ,发病动物短期内大量死亡。近 10年某地区鼠痘发生次数依次为昆明小鼠 (7次 )、NIH小鼠 (3次 )、ICR小鼠 (2次 )和BABL c小鼠 (1次 )。无明显临床症状慢性持续性感... 小鼠痘病毒急性感染可导致实验小鼠脱脚病 (鼠痘 )发作 ,临床症状明显 ,发病动物短期内大量死亡。近 10年某地区鼠痘发生次数依次为昆明小鼠 (7次 )、NIH小鼠 (3次 )、ICR小鼠 (2次 )和BABL c小鼠 (1次 )。无明显临床症状慢性持续性感染 (隐性感染 ) ,是病毒传播或转化成急性感染主要原因 ,用免疫荧光技术 (IFA)可检测到病毒抗体 ,鸡胚病毒培养意义不大。流行病学调查证实IFA抗体阳性小鼠群体脱脚病发病率显著高于IFA抗体阴性小鼠群体 (P <0 0 0 1)。 展开更多

关键词 实验小鼠 急性感染 抗体阳性 IFA NIH小鼠 发作 慢性 鼠痘病毒 毒感染 临床症状

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地鼠肾原代细胞外源病毒调查 被引量：3

10

作者 应贤平 钱琴 +2 位作者 屈霞琴 刘连生 陈天培 《中国实验动物学杂志》 1994年第1期31-34,共4页

清洁级、普通级２围龄地鼠按卫生部颁布ＳＰＦ级要求进行血清病毒抗体检测结果均为阴性，但所制备肾原代细胞血吸附试验结果有明显差异：清洁级中没有发现有血吸附现象，而普通级血吸附阳性率高达８６％（１８／２１）．超离浓缩后可测... 清洁级、普通级２围龄地鼠按卫生部颁布ＳＰＦ级要求进行血清病毒抗体检测结果均为阴性，但所制备肾原代细胞血吸附试验结果有明显差异：清洁级中没有发现有血吸附现象，而普通级血吸附阳性率高达８６％（１８／２１）．超离浓缩后可测得血凝１：４～１：６４．负染电镜观察到副流感样病毒颗粒。血清学调查，血凝及血吸附抑制试验结果表明与仙台和小鼠肺炎病毒有关，该外源病毒不易按常规方法在鸡胚和同种地鼠肾细胞上传代。 展开更多

关键词 地鼠 肾原代细胞 外源病毒 清洁级 普通级

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金黄仓鼠病毒抗体ELISA检测方法建立及其应用 被引量：3

11

作者 应贤平 钱琴 +2 位作者 屈雅琴 姜文琴 潘振业 《上海实验动物科学》 2000年第1期34-36,共3页

用酶标兔抗仓鼠 Ig G,建立了检测金黄仓鼠淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、仙台毒、呼肠孤病毒 3型和小鼠肺炎病毒感染的 EL ISA方法。本法与酶标 SPA EL ISA法比较 ,金黄仓鼠抗体阳性检出率高一倍且特异性高。

关键词 金黄仓鼠 仓鼠病毒抗体 ELISA检测 生物材料

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致杂志编辑部的一封信 被引量：1

12

作者 应贤平 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第6期538-538,共1页

本刊在2004年第6期上刊载了顾祖维教授整理的"兴奋效应(Hormesis)"的名词解释小资料后,收到了上海市疾病预防控制中心应贤平研究员的来信,对该词的中文译名提出了不同看法。本刊将信转请张玉彬、金泰廙、金锡鹏教授作答。为... 本刊在2004年第6期上刊载了顾祖维教授整理的"兴奋效应(Hormesis)"的名词解释小资料后,收到了上海市疾病预防控制中心应贤平研究员的来信,对该词的中文译名提出了不同看法。本刊将信转请张玉彬、金泰廙、金锡鹏教授作答。为供大家学习和参考,现将二文均刊载如下,以飨读者。 展开更多

关键词 上海市疾病预防控制中心 编辑部 杂志 名词解释 兴奋效应 中文译名 研究员 教授

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回顾SARS教训 控制新出现传染病 被引量：2

13

作者 应贤平 《上海预防医学》 CAS 2007年第9期476-477,共2页

关键词 SARS 传染病 严重急性呼吸道综合征 人感染高致病性禽流感 呼吸道症状 流行特点 传播控制 发病机制

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LCMV重组蛋白抗原应用研究

14

作者 应贤平 程鹏飞 +4 位作者 仲伟鉴 吴腾捷 宋虹 施胜柳 钱琴 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第4期209-212,共4页

目的　用重组蛋白抗原取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 (LCMV)抗原用于实验动物感染LCMV检测。方法　合成LCMVsRNA第 1816～ 2 178位核苷酸序列编码的Np第 380～ 5 0 0位氨基酸基因 ,克隆在Hisx6- GSTpET 2 8a载体中 ,表达产物经固定化金... 目的　用重组蛋白抗原取代淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 (LCMV)抗原用于实验动物感染LCMV检测。方法　合成LCMVsRNA第 1816～ 2 178位核苷酸序列编码的Np第 380～ 5 0 0位氨基酸基因 ,克隆在Hisx6- GSTpET 2 8a载体中 ,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化 ,建立ELISA检测试剂。结果　合成基因表达产物经Ni NTA Agarose纯化后纯度达到 95 %以上。ELISA检测小鼠、地鼠和豚鼠结果与全病毒抗原基本一致 ,而且特异性较强 ,操作简便。结论　用合成基因表达产物取代LCMV抗原检测病毒抗体 ,不仅可以消除病毒传播可能 ,而且特异性强。 展开更多

关键词 抗原 重组蛋白 表达产物 特异性 ET 实验动物 脑膜炎 合成基因 ELISA检测 原基

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甲型肝炎病毒的体外培养及其分子生物学基础 被引量：3

15

作者 应贤平 《国外医学（预防．诊断．治疗用生物制品分册）》 1995年第4期145-148,共4页

甲型肝炎病毒（HAV）不仅可适用于人和非人灵长目动物细胞,还可适应于一些非灵长目动物细胞,病毒复制不同步和+RNA极易装壳耗损是导致病毒低产量的主要原因。野型HAV的细胞适应和减毒实质上是病毒核酸5′非编码区和P2-P3功能区的突变过... 甲型肝炎病毒（HAV）不仅可适用于人和非人灵长目动物细胞,还可适应于一些非灵长目动物细胞,病毒复制不同步和+RNA极易装壳耗损是导致病毒低产量的主要原因。野型HAV的细胞适应和减毒实质上是病毒核酸5′非编码区和P2-P3功能区的突变过程,检查核酸序列可作为疫苗质控的遗传标记。本文对提高甲型肝炎疫苗产量,开拓质控指标具有参考意义。 展开更多

关键词 甲型肝炎病毒 离体培养 培养 分子生物学

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兽用口服狂犬病活疫苗研究与应用概况

16

作者 应贤平 程鹏飞 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1994年第4期44-45,共2页

兽用口服狂犬病活疫苗研究与应用概况应贤平，程鹏飞（卫生部上海生物制品研究所，上海２０００５１）狂犬病是由狂犬病毒侵犯中枢神经系统产生的一种人畜共患烈性传染病￣［１］．抗狂犬病免疫是人类历史上最早研究的抗感染免疫之一。... 兽用口服狂犬病活疫苗研究与应用概况应贤平，程鹏飞（卫生部上海生物制品研究所，上海２０００５１）狂犬病是由狂犬病毒侵犯中枢神经系统产生的一种人畜共患烈性传染病￣［１］．抗狂犬病免疫是人类历史上最早研究的抗感染免疫之一。尽管目前用于人畜的疫苗安全有效，但... 展开更多

关键词 兽药 狂犬病 疫苗

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用免疫印迹技术检测狂犬病特异性抗体 被引量：3

17

作者 应贤平 曾蓉芳 +1 位作者 焦永真 张菁 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1989年第6期5-6,共2页

狂犬疫苗接种是降低狂犬病发病率最根本的措施。目前主要采用检查抗体方法来观察疫苗接种是否有效。经典小鼠中和试验费时、费物。快速荧光聚焦抑制试验(RFFIT)需要一定细胞培养条件,国内难以普及。斑点酶结合技术(DIA)虽然简便、快速,... 狂犬疫苗接种是降低狂犬病发病率最根本的措施。目前主要采用检查抗体方法来观察疫苗接种是否有效。经典小鼠中和试验费时、费物。快速荧光聚焦抑制试验(RFFIT)需要一定细胞培养条件,国内难以普及。斑点酶结合技术(DIA)虽然简便、快速,但不能区分糖蛋白抗体(G蛋白抗体)和核衣壳蛋白抗体(N蛋白抗体),而且非特异性也较强。本文采用免疫印迹技术研制出硝酸纤维试剂膜检查血清抗体,具有快速、简便、特异性强、灵敏度高、能区分G蛋白抗体和N蛋白抗体等特点。 展开更多

关键词 免疫印迹技术 狂犬病 特异性抗体

全文增补中

三羟异黄酮对BALB/c-3T3细胞的转化作用 被引量：7

18

作者 王李伟 仲伟鉴 +2 位作者 应贤平 周永贵 周祥凤 《癌变．畸变．突变》 CAS CSCD 2005年第1期48-51,共4页

背景与目的:研究三羟异黄酮(GEN,Genistein)在体外细胞转化中的作用。材料与方法:用改进的BALB／c-3T3细胞转化方法观察GEN组、B[a]P(10 μmol/L)+GEN组以及MCA(3-甲基胆蒽,0.2 μg／ml)+TPA(豆蔻酸乙酸大戟二萜酯,0.1 μg／ml)+GEN组... 背景与目的:研究三羟异黄酮(GEN,Genistein)在体外细胞转化中的作用。材料与方法:用改进的BALB／c-3T3细胞转化方法观察GEN组、B[a]P(10 μmol/L)+GEN组以及MCA(3-甲基胆蒽,0.2 μg／ml)+TPA(豆蔻酸乙酸大戟二萜酯,0.1 μg／ml)+GEN组中细胞转化的情况,同时测定突变型P53蛋白及PTK(酪氨酸蛋白激酶)的活性。每个组别GEN设4个剂量,分别是10、30、90、270 μmol/L。结果:与对照组相比,GEN≥30 μmol/L剂量组细胞转化率升高,GEN(30 μmol/L)+B[a]P(10μmol/L)细胞转化率高于B[a]P组,发生转化的细胞中突变型P53值升高。然而,在MCA+TPA模式下,30μmol/L以上GEN抑制MCA+TPA诱导的细胞转化,PTK值 随GEN升高而下降。结论:在不同模式下GEN的效应不同。GEN有诱导细胞恶性转化的作用,但在一定条件下又可抑制细胞恶性转化。 展开更多

关键词 三羟异黄酮 P53 PTK 细胞转化

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川芎、桔梗和豆蔻毒性、致突变性试验 被引量：4

19

作者 仲伟鉴 应贤平 +5 位作者 郑卫东 忻佩君 叶于薇 董妙珠 叶红 周祥凤 《卫生毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期267-269,共3页

关键词 川芎 中草药 致突变性试验 兴奋毒性 长期饮用 药组 肝毒性 豆蔻 桔梗 安全食用

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基因芯片检测三唑磷染毒大鼠肝脏基因表达 被引量：3

20

作者 仲伟鉴 应贤平 +2 位作者 马国云 肖萍 董竞武 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2005年第5期395-398,共4页

[目的]研究低剂量暴露于有机磷农药三唑磷的慢性毒性分子机制。[方法]用Affymetrix RT-U34基因芯片技术,分析以含100mg/kg三唑磷的饲料喂养6个月后的大鼠亚慢性毒性试验差异基因表达,同时作其病理检查。[结果] 三唑磷平均摄入剂量为5.21... [目的]研究低剂量暴露于有机磷农药三唑磷的慢性毒性分子机制。[方法]用Affymetrix RT-U34基因芯片技术,分析以含100mg/kg三唑磷的饲料喂养6个月后的大鼠亚慢性毒性试验差异基因表达,同时作其病理检查。[结果] 三唑磷平均摄入剂量为5.21 mg/(kg·d)的100 mg/kg剂量组与对照组相比,有30个基因和表达序列发生2倍以上变化, 涉及代谢酶、免疫、DNA损伤修复、应激和细胞结构成分。诱导I相代谢酶P450IIC13和II相代谢酶GSTA2、SULTLE2和促进DNA修复GADD45A基因表达上调,部分代谢酶、免疫、应激有关基因表达下调。细胞结构基因表达变化支持了病理结果。[结论]三唑磷农药亚慢性毒性可能累及代谢酶、免疫、应激和细胞结构成分等方面的变化。 展开更多

关键词 三唑磷 亚慢性毒性 差异基因表达 基因芯片

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