1例国内罕见的输入性卵形疟的实验室检测 被引量：31

1

作者 师永霞 黄吉城 +5 位作者 苏锦坤 李小波 幸芦琴 郑夔 洪烨 郭波旋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期914-917,920,共5页

目的对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法制备疑似疟疾患者血样的血涂片,吉姆萨染色后进行疟原虫的镜检观察。利用实验室自行研制的疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和实时荧光PCR检测方法,对该血样... 目的对1例输入性疑似疟疾患者的血样进行实验室检测。方法制备疑似疟疾患者血样的血涂片,吉姆萨染色后进行疟原虫的镜检观察。利用实验室自行研制的疟原虫属特异性(通用型)和4种疟原虫种特异性的巢式PCR和实时荧光PCR检测方法,对该血样进行疟疾检测及分型。将PCR扩增片段进行序列测定,并与已知的卵形疟序列进行blast比对分析。结合血样的分子生物学检测结果,重新对镜检结果进行复核。结果血样初次镜检为疟疾阴性。使用疟原虫巢式PCR通用引物对血样的DNA进行PCR检测,扩增出了预期大小约240bp的条带;巢式PCR分型检测表明,血样仅扩增出预期大小约450bp的卵形疟条带,无对应大小的恶性疟、间日疟和三日疟扩增条带产生。疟原虫通用型和卵形疟特异性的荧光PCR检测结果均为典型的S形阳性曲线,卵形疟扩增片段的熔解温度为72.5℃。序列分析表明,扩增片段长度为434bp,blast比对发现去除引物后的393个碱基与GenBank DQ845247等卵形疟的SSU rRNA对应部分的基因序列同源性为100%。重新对血涂片进行镜检复核,结果在薄血膜中发现了卵形疟的环状滋养体,被寄生的红细胞为椭圆形,边缘呈伞矢状。结论使用巢式PCR、实时荧光PCR、序列分析和镜检等方法,证实该例输入性的疑似疟疾患者为卵形疟原虫感染。 展开更多

关键词 输入性卵形疟 镜检 巢式PCR 实时荧光PCR 序列分析

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巢式PCR法在疟疾检测及虫种鉴别中的应用 被引量：20

2

作者 师永霞 黄吉城 +5 位作者 苏锦坤 洪烨 李小波 郑夔 幸芦琴 郭波旋 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期263-266,共4页

根据疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸(SSU rRNA)基因序列设计疟原虫通用型和种特异性的引物,对60份血样进行巢式PCR检测及虫种鉴定,并与血样的吉氏染色镜检结果进行比较。巢式PCR检出40份疟原虫阳性血样,其中22份为恶性疟原虫(Plasmodium ... 根据疟原虫小亚单位核糖体核糖核酸(SSU rRNA)基因序列设计疟原虫通用型和种特异性的引物,对60份血样进行巢式PCR检测及虫种鉴定,并与血样的吉氏染色镜检结果进行比较。巢式PCR检出40份疟原虫阳性血样,其中22份为恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)阳性、13份为间日疟原虫(P.vivax)阳性、3份为恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染、1份为卵形疟原虫阳性(P.ovale)、1份未能分型。与镜检结果一致的血样为46份,占76.7%(46/60),其中恶性疟原虫阳性18份、间日疟原虫阳性11份和阴性17份。将两种检测结果不一致的血样进行扩增片段序列测定和实时荧光PCR分析,检测结果均与巢式PCR结果一致。卵形疟原虫阳性血样扩增片段的序列分析结果显示,该序列与卵形疟原虫SSU rRNA基因序列(GenBank登录号DQ845247)的对应部分同源性为100%,证实该病例为输入性卵形疟原虫感染病例。 展开更多

关键词 疟疾 巢式PCR 小亚单位核糖体核糖核酸

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一例输入性基孔肯雅病的实验室诊断 被引量：5

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作者 洪烨 郑夔 +9 位作者 黄吉城 李小波 相大鹏 郭波旋 李华 宋卫 戴俊 钟玉清 幸芦琴 师永霞 《中华疾病控制杂志》 CAS 2008年第5期502-504,共3页

关键词 虫媒病毒 伊蚊属 逆转录聚合酶链反应

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实时荧光RT-PCR快速检测蚊体内乙型脑炎病毒及福建省基因Ⅰ型乙型脑炎病毒的发现 被引量：8

4

作者 郑夔 黄吉城 +6 位作者 李小波 洪烨 师永霞 幸芦琴 相大鹏 郭波旋 胡龙飞 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第11期2212-2215,共4页

目的:应用实时荧光RT-PCR方法快速检测蚊体内乙型脑炎病毒,并对蚊体内携带的乙型脑炎病毒进行基因分型。方法:从蚊媒监测点采集蚊标本,研磨后提取RNA,用新型的LNA探针实时荧光RT-PCR方法进行高通量快速筛查蚊体携带的乙型脑炎病毒,对核... 目的:应用实时荧光RT-PCR方法快速检测蚊体内乙型脑炎病毒,并对蚊体内携带的乙型脑炎病毒进行基因分型。方法:从蚊媒监测点采集蚊标本,研磨后提取RNA,用新型的LNA探针实时荧光RT-PCR方法进行高通量快速筛查蚊体携带的乙型脑炎病毒,对核酸阳性的标本进一步用乙型脑炎病毒E基因特异引物进行RT-PCR扩增和序列测定,根据所测序列与GenBank中不同地理来源乙型脑炎病毒株E基因核苷酸序列分析的结果进行基因型别的判定。结果:12575只蚊子分成254份,用实时荧光RT-PCR方法从来源于福州的2份三带喙库蚊标本中检出乙型脑炎病毒核酸阳性,经RT-PCR及核苷酸序列测定,得到一段长1500nt的E基因核苷酸序列,序列分析结果显示,其核苷酸同源性最大的是来源于上海(DQ404100)和浙江(EU258742)的毒株,分别是99.1%和99.0%,均属于基因Ⅰ型病毒。结论:实时荧光RT-PCR方法是快速检测蚊体内乙型脑炎病毒的理想方法,此次调查发现的乙型脑炎病毒是以往福建省内未见报道的基因Ⅰ型病毒。 展开更多

关键词 实时荧光RT—PCR LNA探针 乙型脑炎病毒 E基因 基因型

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基孔肯雅病毒的实时荧光RT-PCR检测方法研究 被引量：9

5

作者 黄吉城 郑夔 +6 位作者 李小波 洪烨 师永霞 幸芦琴 相大鹏 郭波旋 钟玉清 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第9期1721-1723,共3页

目的:建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法。方法:人工合成基孔肯雅病毒部分有代表性的序列核酸作为阳性对照模板,设计几组实时荧光PCR引物、探针及反应体系,摸索出最佳反应体系条件。结果:建立的基孔肯雅病毒的实时荧光PCR检测方法... 目的:建立基孔肯雅病毒的荧光定量PCR检测方法。方法:人工合成基孔肯雅病毒部分有代表性的序列核酸作为阳性对照模板,设计几组实时荧光PCR引物、探针及反应体系,摸索出最佳反应体系条件。结果:建立的基孔肯雅病毒的实时荧光PCR检测方法最佳反应体系为:正向引物CH IK-FP终浓度500 nM,反向引物CHIK-RP终浓度1000 nM,探针CHIK-Probe终浓度250 nM;扩增程序为:50℃10 m in,95℃10 min,95℃10 s→62℃30 s 45次循环。结论:该方法灵敏度高、特异性强,适用于基孔肯雅病毒的快速检验。 展开更多

关键词 基孔肯雅病毒 实时荧光PCR 检测

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广东国境口岸中央空调水嗜肺军团菌检测及结果分析 被引量：6

6

作者 李小波 师永霞 +5 位作者 郑夔 洪烨 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 黄吉城 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第12期2602-2604,共3页

目的:为了解广东地区国境口岸中央空调冷凝水中军团菌的阳性率,分析军团菌对出入境旅客健康的潜在危害并为北京奥运会期间国境口岸军团菌防控提供理论依据。方法:通过对2007年度和2008年度广东地区6个国境口岸中央空调冷凝水的采集、处... 目的:为了解广东地区国境口岸中央空调冷凝水中军团菌的阳性率,分析军团菌对出入境旅客健康的潜在危害并为北京奥运会期间国境口岸军团菌防控提供理论依据。方法:通过对2007年度和2008年度广东地区6个国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检测及血清学分型,检验依据为ISO11731:1998。对检测结果进行分析。结果:2007年度从63份样本中检出军团菌7例,检测阳性率为11.1%,其中嗜肺军团菌4例;2008年度从46份样本中检出军团菌3例,检测阳性率为6.5%,全部为嗜肺军团菌。结论:本次军团菌检出率略低于有关文献报道的全国平均检出率,阳性样本中嗜肺军团菌L1型占比率较大(30%);本研究结果有利于分析国境口岸空调通风系统的卫生状况,为口岸卫生控制提供技术指导,有利于北京奥运会和谐、顺利举办。 展开更多

关键词 国境口岸 军团菌 北京奥运会

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一种无RNA纯化步骤TaqMan RT-PCR方法用于快速检测登革病毒 被引量：2

7

作者 郑夔 洪烨 +6 位作者 李小波 黄吉城 师永霞 幸芦琴 相大鹏 郭波旋 胡龙飞 《华南预防医学》 2008年第3期6-9,14,共5页

目的 建立一种简便、快速的登革病毒核酸检测方法。方法 设计合成LNA探针，替代MGB探针，建立一步法TaqManRT—PCR方法，并用已知的登革病毒标准毒株进行方法的优化；用商品化的纯化试剂盒和简单的热释放法获取登革病毒细胞培养液和模... 目的 建立一种简便、快速的登革病毒核酸检测方法。方法 设计合成LNA探针，替代MGB探针，建立一步法TaqManRT—PCR方法，并用已知的登革病毒标准毒株进行方法的优化；用商品化的纯化试剂盒和简单的热释放法获取登革病毒细胞培养液和模拟含登革病毒血清中RNA。以优化的TaqManRT—PCR方法进行检测，比较有或无RNA纯化步骤检测的敏感性和重复性。结果 LNA探针TaqMan RT—PCR有较好的PCR扩增效率（104％）、较广的线性范围（10^0-10^-7样品稀释度）、较高的敏感性（0．003TCID50／反应）和较好的重复性（CV值小于4．53％），新方法检测经简单热释放RNA的细胞培养液和模拟含登革病毒血清中登革病毒也有较高的敏感性（0.03TCID50／反应）和较好的重复性（CV值小于6．36％）。结论 新型LNA探针可替代MGB探针用于TaqMan RT—PCR反应。简便的热释放RNA方法结合高敏感性的TaqMan RT—PCR可满足登革病毒快速检测的需要。 展开更多

关键词 登革病毒 逆转录聚合酶链反应 LNA探针

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黄热病毒与甲型流感病毒及其分型集合检测芯片的初步研制 被引量：1

8

作者 黄吉城 张海燕 +10 位作者 马文丽 郭波旋 商涛 相大鹏 郑夔 师永霞 洪烨 幸芦琴 李小波 胡龙飞 钟玉清 《中国卫生检验杂志》 CAS 2007年第10期1732-1734,共3页

目的:研制黄热病毒与流感病毒及其分型集合检测芯片。方法:设计并合成60mer寡核苷酸(Oligo)探针用于制备检测芯片。提取黄热病、甲型流感病毒核酸,以限制性显示技术进行扩增标记,完成杂交后对芯片进行扫描和数据分析。结果:Oligo探针与... 目的:研制黄热病毒与流感病毒及其分型集合检测芯片。方法:设计并合成60mer寡核苷酸(Oligo)探针用于制备检测芯片。提取黄热病、甲型流感病毒核酸,以限制性显示技术进行扩增标记,完成杂交后对芯片进行扫描和数据分析。结果:Oligo探针与相应的荧光标记样本杂交后,大部分能检测出阳性荧光信号,而空白对照和阴性对照均为阴性信号。结论:寡核苷酸芯片技术可应用于多种病毒的检测及分型,从而为多种病毒感染的早期鉴别诊断提供科学依据。 展开更多

关键词 黄热病毒 甲型流感病毒 检测芯片

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诺如病毒快速检测方法的建立及其在国境卫生检疫中的应用 被引量：1

9

作者 李小波 师永霞 +5 位作者 郑夔 洪烨 相大鹏 幸芦琴 郭波旋 黄吉城 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第11期2303-2304,2329,共3页

目的:建立快速、特异的诺如病毒实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR相结合检测方法,对人感染诺如病毒进行快速检测。方法:根据国外最新流行的诺如病毒核酸序列,设计并合成诺如病毒基因扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件,制定出快速、灵... 目的:建立快速、特异的诺如病毒实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR相结合检测方法,对人感染诺如病毒进行快速检测。方法:根据国外最新流行的诺如病毒核酸序列,设计并合成诺如病毒基因扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件,制定出快速、灵敏检测诺如病毒核酸的实时荧光RT-PCR检测方法及常规RT-PCR检测方法。结果:实验证明,本方法将实时荧光RT-PCR与常规RT-PCR检测方法相结合,能在5 h内快速确认诺如病毒,检测灵敏度达到102拷贝/反应,具有快速、灵敏的特点,且具有较高的特异性和重复性。结论:本实验室利用本方法,首次在广州某国境口岸从外籍发热船员样本中检出5例输入性GGⅡ群诺如病毒。该方法对防止诺如病毒传入我国,保障我国国境卫生安全具有重要意义。 展开更多

关键词 诺如病毒 实时荧光RT—PCR

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一起外轮聚集性诺如病毒感染事件的病原学检验 被引量：6

10

作者 李小波 师永霞 +5 位作者 洪烨 黄吉城 相大鹏 郑夔 幸芦琴 郭波旋 《口岸卫生控制》 2008年第3期27-30,共4页

目的报告一起入境外籍船员聚集性非细菌性食物中毒事件的病原学检验。方法采集该外轮11名船员的样本,应用实时荧光RT-PCR方法对样本进行核酸检验,结果呈阳性的样本应用RT-PCR方法进行验证,PCR产物进行测序并做序列分析。结果从11份样本... 目的报告一起入境外籍船员聚集性非细菌性食物中毒事件的病原学检验。方法采集该外轮11名船员的样本,应用实时荧光RT-PCR方法对样本进行核酸检验,结果呈阳性的样本应用RT-PCR方法进行验证,PCR产物进行测序并做序列分析。结果从11份样本中检出5例诺如病毒GGⅡ-4群阳性。结论引起此次外籍船员腹泻爆发的病原体为GGⅡ-4群诺如病毒。Real-time RT-PCR方法检验诺如病毒快速、准确、特异性强。此次为中国检验检疫机构首次从国境口岸检出诺如病毒。 展开更多

关键词 诺如病毒 实时荧光RT—PCR

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江门市工厂企业与建筑工地集体食堂联合执法检查效果评价 被引量：1

11

作者 幸芦琴 卢关平 梁毅渝 《预防医学论坛》 2005年第4期394-395,共2页

[目的]评价联合执法检查对改善工厂企业与建筑工地集体食堂卫生状况的效果。[方法]对江门市市区121家集体食堂联合执法检查前(2003年4月)和联合执法检查1年后(2004年4月)的卫生状况进行比较。[结果]联合执法检查1年后,食堂基础卫生设施... [目的]评价联合执法检查对改善工厂企业与建筑工地集体食堂卫生状况的效果。[方法]对江门市市区121家集体食堂联合执法检查前(2003年4月)和联合执法检查1年后(2004年4月)的卫生状况进行比较。[结果]联合执法检查1年后,食堂基础卫生设施与食堂卫生许可证持证率变化不明显;从业人员健康证持证率与基本卫生知识知晓率明显提高;有管理机构、有卫生制度、有食品冷藏设施、废弃物加盖者所占比例明显增加,有毒有害物品存放者所占比例明显减少;但发生交叉污染与食物中毒者所占比例减少不明显。[结论]联合执法检查对进一步提高企业与建筑工地集体食堂食品安全卫生意识和自身管理水平起到积极的促进作用,提高了从业人员卫生知识水平,减少了食物中毒的发生。但不能解决基础卫生设施简陋、交叉污染和无证经营问题。 展开更多

关键词 集体食堂 卫生 执法检查

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猴痘病毒实时荧光PCR检测方法的建立 被引量：5

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作者 幸芦琴 李小波 +5 位作者 郑夔 师永霞 黄吉城 相大鹏 洪烨 郭波旋 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第11期2110-2112,共3页

[目的]建立快速、特异的猴痘病毒实时荧光PCR检测方法。[方法]制备猴痘病毒阳性核酸样本,设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件。[结果]本方法对模拟猴痘病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应,具有快速、灵敏、较... [目的]建立快速、特异的猴痘病毒实时荧光PCR检测方法。[方法]制备猴痘病毒阳性核酸样本,设计并合成相应的扩增引物及荧光标记探针,摸索最佳反应条件。[结果]本方法对模拟猴痘病毒样本的检测灵敏度达到102拷贝/反应,具有快速、灵敏、较高的特异性和重复性,可在3h内准确检测出猴痘病毒核酸的能力。[结论]本方法适合国境口岸猴痘病毒快速检测,对防止猴痘病毒传入我国,保障国境卫生安全具有重要意义。 展开更多

关键词 猴痘病毒 实时荧光PCR

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2009—2010年广东国境口岸军团菌检测结果及分析 被引量：5

13

作者 幸芦琴 李小波 +4 位作者 洪烨 苏锦坤 师永霞 郭波旋 黄吉城 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2011年第1期14-16,共3页

目的对广东地区国境口岸中央空调冷凝水进行军团菌检测,调查军团菌各血清型在口岸的分布规律。方法通过对2009—2010年广东地区国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检... 目的对广东地区国境口岸中央空调冷凝水进行军团菌检测,调查军团菌各血清型在口岸的分布规律。方法通过对2009—2010年广东地区国境口岸中央空调冷凝水的采集、处理,利用分离培养、乳胶凝集试验、血清学分型等方法对样本进行军团菌的检测及血清学分型,并对检测结果进行统计分析。结果 2009年共检测口岸中央空调水样16批,检测样本42份,从中检出军团菌12例,阳性率为28.56%,其中嗜肺军团菌11例;2010年1-8月检测样本10批,从48份样本中检出军团菌21例,阳性率为43.75%,全部为嗜肺军团菌。结论 2010年度军团菌检出率明显高于2009年,阳性样本中嗜肺军团菌L1型占比率较大。 展开更多

关键词 国境口岸 军团菌 中央空调 血清型 冷凝水

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广东口岸输入性疟疾流行病学调查与防控策略探讨 被引量：4

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作者 幸芦琴 苏锦坤 +1 位作者 丁国允 师永霞 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2013年第14期2970-2972,共3页

目的了解近年来广东口岸输入性疟疾患者的流行特点,探讨现阶段口岸疟疾防控策略。方法对2006年-2012年广东口岸输入性疟疾患者进行性别、年龄、职业、来源地等流行病学分析,提出更加完善的防控措施。结果2006年-2012年在广东口岸共发现7... 目的了解近年来广东口岸输入性疟疾患者的流行特点,探讨现阶段口岸疟疾防控策略。方法对2006年-2012年广东口岸输入性疟疾患者进行性别、年龄、职业、来源地等流行病学分析,提出更加完善的防控措施。结果2006年-2012年在广东口岸共发现74例输入性疟疾病例,其中恶性疟67例,间日疟6例,卵形疟1例。分析结果表明,夏秋季及年底为口岸疟疾输入高峰,以赴非洲地区男性中青年劳务工人居多。结论全球疟疾疫情形势仍然严峻,亚非两大洲输入性疟疾疫情对我国威胁巨大,检疫、卫生、外事等各地方部门应共同合作,积极采取境内外防疫措施,阻断疫情跨境传播,最终实现全面消灭疟疾的目标。 展开更多

关键词 输入性 疟疾 流行病学 防控策略

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2010—2015年广东口岸出入境人员梅毒监测结果分析 被引量：7

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作者 幸芦琴 陈建东 苏锦坤 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2016年第4期247-249,共3页

目的了解广州口岸出入境人员梅毒的感染状况和流行特点,为国境口岸开展梅毒监测和预防控制提供依据。方法 2010—2015年,同时采用甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）,对广州口岸出入境人员进... 目的了解广州口岸出入境人员梅毒的感染状况和流行特点,为国境口岸开展梅毒监测和预防控制提供依据。方法 2010—2015年,同时采用甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）,对广州口岸出入境人员进行梅毒血清学检测,对结果进行统计学分析。结果采集到152 926名出入境人员的血液样本,其中595份样本检出梅毒抗体阳性,检测阳性率为0.39%。男性样本检测阳性率为0.49%,女性样本检测阳性率为0.21%;抗体阳性人员的年龄主要在20～60岁,占阳性总数的89.59%;检测阳性者以劳务人员为主,占阳性总数的61.18%。结论应加强出入境人员梅毒监测,积极做好预防保健咨询和性病防治宣传教育,防止梅毒传播。 展开更多

关键词 出入境人员 梅毒

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军团菌快速检测方法的建立及其在国境口岸的应用 被引量：1

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作者 幸芦琴 丁国允 +1 位作者 苏锦坤 李小波 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2012年第6期1225-1228,共4页

目的:建立适合口岸出入境大厅及其他公共设施中央空调水的分子生物学检测方法,以实现中央空调水的快速检测,提高检测速度及灵敏度。方法:根据军团菌核酸序列多重比对结果设计并合成实时荧光PCR的引物和探针,分别对军团菌16SrDNA和Mip基... 目的:建立适合口岸出入境大厅及其他公共设施中央空调水的分子生物学检测方法,以实现中央空调水的快速检测,提高检测速度及灵敏度。方法:根据军团菌核酸序列多重比对结果设计并合成实时荧光PCR的引物和探针,分别对军团菌16SrDNA和Mip基因相应片段进行扩增;建立快速、特异的军团菌分子快速检测新方法,并将该方法应用于对口岸中央空调水进行快速检测。结果:本研究以16SrDNA目标序列检测结果判断样本中是否存在军团菌,以Mip目标序列检测样本中是否存在嗜肺军团菌;本研究的方法快速、特异,能在2 h内完成对空调水样的检测。结论:本方法大大提高了军团菌的检测速度,提高了检测灵敏度,非常适合应用于中央空调水的快速检测。 展开更多

关键词 军团菌 检测 口岸

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广东口岸原发性高血压患者基因库建设及应用 被引量：1

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作者 幸芦琴 苏锦坤 +4 位作者 张建明 王冰 陈建东 王向阳 秦慧 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2016年第3期175-179,共5页

目的以原发性高血压患者为研究对象,掌握降压药物代谢相关基因突变情况。方法按照随机抽样法原则,对广东国际旅行卫生保健中心体检发现的高血压患者进行问卷调查,统计分析。提取患者血样DNA建立基因库,利用Taq Man-MGB探针荧光PCR检测... 目的以原发性高血压患者为研究对象,掌握降压药物代谢相关基因突变情况。方法按照随机抽样法原则,对广东国际旅行卫生保健中心体检发现的高血压患者进行问卷调查,统计分析。提取患者血样DNA建立基因库,利用Taq Man-MGB探针荧光PCR检测细胞色素P450酶系CYP家族的3个基因4个位点(CYP2C9基因rs1057910位点,CYP2C19基因rs4244285/rs4986893位点,CYP2D6基因rs10658523位点)的突变情况。结果共采集298份血液样本,5年以上高血压病史患者占58%,患者集中在60岁左右。降压用药仍以钙离子拮抗剂、普利类(ACEI)和沙坦类(ARB)为主。检测到CYP2D6*10纯合突变54例,占18.1%,杂合突变166例,占55.7%;CYP2C9杂合突变24例,占8.1%,未检测到CYP2C9纯合突变;CYP2C19*2纯合突变37例,占12.4%,杂合突变123例,占41.3%;CYP2C19*3杂合突变25例,占8.4%。结论医生可依据个体基因型的差异,指导患者合理用药。 展开更多

关键词 原发性高血压 基因库

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1例输入性基孔肯雅病例的实验室检测

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作者 幸芦琴 洪烨 +2 位作者 李小波 黄吉城 郑夔 《华南预防医学》 2009年第6期65-67,共3页

目的通过系统的实验室检测发现并确认1例输入性基孔肯雅病例。方法根据基孔肯雅病毒基因序列设计引物和荧光标记探针,利用实时荧光RT-PCR和常规RT-PCR检测方法对广东出入境检验检疫局发现的1例入境发热患者的血清样本进行检测,并对RT-PC... 目的通过系统的实验室检测发现并确认1例输入性基孔肯雅病例。方法根据基孔肯雅病毒基因序列设计引物和荧光标记探针,利用实时荧光RT-PCR和常规RT-PCR检测方法对广东出入境检验检疫局发现的1例入境发热患者的血清样本进行检测,并对RT-PCR扩增产物进行核苷酸序列测定。结果通过实时荧光RT-PCR和常规RT-PCR 2种实验方法在该病例标本中检出基孔肯雅病毒核酸;对RT-PCR扩增产物进行序列测定,测出的521个碱基与GeneBank数据库公布的基孔肯雅病毒核酸序列进行比对,结果显示同源性高达99%。结论结合该患者临床症状、实验室检测结果及流行病学调查结果,判断该病例为输入性基孔肯雅病例。 展开更多

关键词 基孔肯雅病 实验室技术和方法

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多种病毒集合检测芯片的研制及其在临床血清标本检测中的初步应用 被引量：7

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作者 黄吉城 郑夔 +7 位作者 王洪敏 夏文英 李小波 师永霞 幸芦琴 洪烨 郭波旋 钟玉清 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期297-300,共4页

目的研制黄热病、西尼罗热、登革热、基孔肯雅热、埃博拉出血热、马尔堡出血热、拉沙热等多种病毒性传染病集合检测基因芯片,并建立一种适用于直接检测核酸含量较低临床血清标本的新型芯片靶基因扩增标记方法。方法设计并筛选出上述病毒... 目的研制黄热病、西尼罗热、登革热、基孔肯雅热、埃博拉出血热、马尔堡出血热、拉沙热等多种病毒性传染病集合检测基因芯片,并建立一种适用于直接检测核酸含量较低临床血清标本的新型芯片靶基因扩增标记方法。方法设计并筛选出上述病毒70mer寡核苷酸特异探针各20条,打印于同一基因芯片上;以phi29 DNA聚合酶结合带标签序列的随机引物进行临床标本中病毒全基因组扩增,再以Cy3荧光染料标记的标签序列引物进行PCR随机扩增标记,标记产物用多种病毒芯片进行杂交检测。结果检测1～4型登革热、基孔肯雅热病例临床血清标本,结果显示该方法准确、特异、敏感;检测西尼罗热、黄热病、埃博拉出血热、马尔堡出血热、拉沙热等病毒核酸的模拟血清标本,同样得到特异的阳性杂交信号,与预期结果一致。结论本研究建立的多种病毒集合检测基因芯片及其靶基因扩增标记方法,可直接应用于血清标本中上述病毒核酸的检测。 展开更多

关键词 病毒 检测 芯片分析技术

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广东国境口岸不同蚊种COI序列分析和分子鉴定方法 被引量：19

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作者 师永霞 相大鹏 +6 位作者 李祖海 洪烨 李小波 幸芦琴 郭波旋 黄吉城 郑夔 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2008年第2期103-107,共5页

〔目的〕建立国境口岸不同蚊种的细胞色素C氧化酶亚基I(COI)分子和氨基酸鉴定方法并分析其系统进化关系。〔方法〕设计1对扩增COI部分编码区的PCR引物,对广州机场、江门和湛江等国境口岸采集的致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、中华按... 〔目的〕建立国境口岸不同蚊种的细胞色素C氧化酶亚基I(COI)分子和氨基酸鉴定方法并分析其系统进化关系。〔方法〕设计1对扩增COI部分编码区的PCR引物,对广州机场、江门和湛江等国境口岸采集的致倦库蚊、三带喙库蚊、白纹伊蚊、中华按蚊、骚扰阿蚊等成蚊和实验室喂养的蚊幼虫进行PCR扩增和序列测定,分析COI核苷酸和氨基酸的系统进化关系。〔结果〕5种蚊种的COI基因扩增片断长度均为415bp,A+T含量为68.77%～70.6%。同源性比较表明,不同蚊种间COI片断碱基变异颠换数都明显高于转化数,核苷酸序列及其编码的氨基酸序列同源性分别为85.1%～93.7%和92.0%～99.3%。COI核苷酸系统进化关系显示,所有蚊虫的COI分子鉴定与其形态学结果吻合,但骚扰阿蚊位于一单独的分支上,其亲缘关系与其它蚊种最远。COI基因编码的氨基酸系统进化与蚊虫形态学亲缘关系一致,库蚊属、伊蚊属、阿蚊属聚类为库蚊亚科,中华按蚊与其它蚊种的亲缘关系最远。〔结论〕建立的COI核苷酸和氨基酸鉴别技术可成功地应用于国境口岸范围内成蚊和幼蚊的属和种的区分,后者更能区分高级分类阶元亚科和正确反映蚊虫的系统发育关系。这可以弥补蚊虫形态特征信息量的不足等传统分类系统的缺点,为广东口岸和其它国境口岸范围内外来的或新发现的蚊种的鉴别提供了分子水平的技术依据。 展开更多

关键词 蚊虫 细胞色素C氧化酶亚基I 聚合酶链式反应 序列分析

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