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乙酰肝素酶通过ERK/MMP⁃9信号通路促进胆囊癌细胞侵袭和迁移 被引量：1
1
作者 常卫才 陈佳伟 +2 位作者 刘子祥 陈正民 周少波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期1620-1626,共7页
目的研究乙酰肝素酶(HPSE)对胆囊癌细胞侵袭迁移以及ERK/MMP⁃9信号通路作用机制。方法在胆囊癌细胞(GBC⁃SD)中采用慢病毒转染的方法双向调节HPSE基因的表达,获得转基因过表达HPSE的胆囊癌细胞株和HPSE极低表达的胆囊癌细胞株,qRT⁃PCR和W... 目的研究乙酰肝素酶(HPSE)对胆囊癌细胞侵袭迁移以及ERK/MMP⁃9信号通路作用机制。方法在胆囊癌细胞(GBC⁃SD)中采用慢病毒转染的方法双向调节HPSE基因的表达,获得转基因过表达HPSE的胆囊癌细胞株和HPSE极低表达的胆囊癌细胞株,qRT⁃PCR和Western blot检测过表达及干扰效果。利用Transwell及细胞划痕实验分别检测转染后阴性对照组、HPSE敲低组及过表达组胆囊癌细胞侵袭及迁移能力。同时,qRT⁃PCR检测HPSE、MMP⁃9 mRNA转录水平,Western blot检测MMP⁃9、HPSE、p⁃ERK、ERK、N⁃cadherin及E⁃cadherin蛋白表达水平。结果HPSE基因过表达组和干扰组胆囊癌细胞株成功构建(P<0.05)。过表达HPSE显著促进胆囊癌细胞的迁移及侵袭,同时MMP⁃9 mRNA和蛋白表达及p⁃ERK、N⁃cadherin蛋白表达均上调,E⁃cadherin表达下调;敲低HPSE表达后情况相反(P<0.05)。另外,过表达HPSE与ERK抑制剂共同处理逆转了HPSE基因过表达对胆囊癌细胞生物学功能的促进作用(P<0.05)。结论乙酰肝素酶通过激活ERK信号通路上调MMP⁃9增强胆囊癌细胞的侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 胆囊癌 乙酰肝素酶 信号通路 侵袭 迁移
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乙酰肝素酶抑制剂OGT2115通过Wnt/β-catenin信号通路促进胆囊癌细胞的凋亡 被引量：1
2
作者 陈佳伟 常卫才 +2 位作者 刘子祥 王郑林 周少波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第19期2414-2418,共5页
目的探讨乙酰肝素酶抑制剂OGT2115、Wnt/β-catenin信号通路在对胆囊癌细胞生物学功能的影响。方法用不同浓度梯度的HPSE抑制剂OGT2115作用于胆囊癌细胞GBC-SD,CCK-8法检测OGT2115对GBC-SD细胞的抑制率,流式细胞术检测GBC-SD的凋亡比例,... 目的探讨乙酰肝素酶抑制剂OGT2115、Wnt/β-catenin信号通路在对胆囊癌细胞生物学功能的影响。方法用不同浓度梯度的HPSE抑制剂OGT2115作用于胆囊癌细胞GBC-SD,CCK-8法检测OGT2115对GBC-SD细胞的抑制率,流式细胞术检测GBC-SD的凋亡比例,ELISA检测OGT2115对细胞上清液HPSE,Fas以及β-catenin活性,将实验分为对照组、OGT2115组和IWR-1+OGT2115组,qRT-PCR和Western blot检测OGT2115对细胞凋亡基因(Caspase-3、Bax、Bcl-2)和Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、c-MYC、CyclinD1、E-cadherin)表达的影响。结果OGT2115可以抑制GBC-SD增殖,且具有浓度依赖性。OGT2115抑制乙酰肝素酶活性,促进细胞凋亡。qRT-PCR和Western blot结果显示,OGT2115促进caspase-3、cleaved-caspase-3、Bax基因表达水平,而Bcl-2、信号通路相关基因β-catenin、c-MYC、Cyclin D1、E-cadherin表达水平下降,且IWR-1抑制该信号通路后,OGT2115对凋亡及信号通路的作用更加明显。结论乙酰肝素酶抑制剂OGT2115抑制GBC-SD细胞的生长与活性,可能通过Wnt/β-catenin通路促进凋亡。 展开更多
关键词 胆囊癌 乙酰肝素酶 肝素酶抑制剂 细胞凋亡 信号通路
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肿瘤坏死因子-α通过Wnt/β-catenin信号通路对胆囊癌细胞增殖的作用 被引量：1
3
作者 王郑林 常卫才 +3 位作者 刘心语 陈佳伟 刘子祥 周少波 《实用临床医药杂志》 2023年第19期40-45,共6页
目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)通过Wnt/β-catenin信号通路对胆囊癌细胞系NOZ的增殖作用,并探讨其相关分子机制。方法 采用CCK-8实验和生长曲线实验测得TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ增殖作用的最佳浓度和时间;采用流式细胞术检测TNF-α... 目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)通过Wnt/β-catenin信号通路对胆囊癌细胞系NOZ的增殖作用,并探讨其相关分子机制。方法 采用CCK-8实验和生长曲线实验测得TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ增殖作用的最佳浓度和时间;采用流式细胞术检测TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ周期的影响;应用Western blot方法检测胆囊癌细胞系NOZ中Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、c-myc、cyclinD1)蛋白的表达;采用平板克隆形成实验测定胆囊癌细胞系NOZ的增殖能力。结果 CCK-8实验法和生长曲线实验测得TNF-α对胆囊癌细胞系NOZ增殖作用的最佳浓度是20 ng/mL,最佳时间是48 h;在TNF-α20 ng/mL作用下,G_(1)期细胞数目减少,S期细胞占比增加,G_(2)期细胞占比减少;TNF-α可促进胆囊癌细胞系NOZ中Wnt/β-catenin信号通路相关基因(β-catenin、c-myc、cyclinD1)蛋白的表达;经TNF-α(20 ng/mL)处理的胆囊癌细胞系NOZ克隆数量大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TNF-α可能通过Wnt/β-catenin信号通路促进胆囊癌细胞系NOZ的增殖,促进胆囊癌发展。 展开更多
关键词 胆囊癌 肿瘤坏死因子-Α 增殖 WNT/Β-CATENIN信号通路 分子机制
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关于“乡村文化行”的寒假社会调查
4
作者 王少毅 周晓聪 常卫才 《科学中国人》 2015年第6Z期159-,共1页
目的:调查、了解当代农村文化面貌,以及农村文化建设进度。方法:实地走访式问卷调查。结果:河北省当代农村文化建设总体程度中等,大部分村民具有基本的文化知识,全体学龄儿童可以按时进入学校就读,学校基础设施中等,村中具有两三个诊所... 目的:调查、了解当代农村文化面貌,以及农村文化建设进度。方法:实地走访式问卷调查。结果:河北省当代农村文化建设总体程度中等,大部分村民具有基本的文化知识,全体学龄儿童可以按时进入学校就读,学校基础设施中等,村中具有两三个诊所,基本满足村民的基础医疗,同时医保普及度较高,大病负担较小,但农村文化娱乐活动较少,娱乐项目单一。结论:农村文化建设目前基本满足村民的日常需求,但文化娱乐活动仍待丰富,农村文化建设为一长久,持续的工程,需要坚持不懈的进行。 展开更多
关键词 农村文化 文化面貌 村中 文化娱乐活动 基础医疗 社会调查 当代农村 日常需求 乡村文化 文化知识
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