高活力碱性蛋白酶产生菌的选育与发酵放大 被引量：7

1

作者 孙同毅 殷向斌 +3 位作者 郝继兴 陈坤 路福平 杜连祥 《辽宁工程技术大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第4期679-682,共4页

为了选育高活力碱性蛋白酶产生菌株。采用复合诱变(紫外照射、NTG、离子注入)方法,结合平板初筛与摇瓶复筛。获得一株高产突变株HAPN-169,其酶活力为3.5×10u/mL。高产菌株HAPN-169根据气液接触中体积传氧系数kLa相同的原则发酵放大... 为了选育高活力碱性蛋白酶产生菌株。采用复合诱变(紫外照射、NTG、离子注入)方法,结合平板初筛与摇瓶复筛。获得一株高产突变株HAPN-169,其酶活力为3.5×10u/mL。高产菌株HAPN-169根据气液接触中体积传氧系数kLa相同的原则发酵放大(7L,30L,200L),其发酵参数为:温度34℃,装液系数0.7,接种量5%,使溶氧维持在20～30%,控制发酵过程pH不低于7.0。在7L发酵罐,发酵时间为54小时,酶活力为3.6×104u/mL;在30L发酵罐,发酵时间为50小时,酶活力为3.86×104u/mL;在200L发酵罐,发酵时间为36小时,酶活力为4.2×104u/mL。发酵液pH在7.5左右时,酶活力在峰值,发酵终点一到,必须马上下罐。该结果对为我国碱性蛋白酶工业发展提供一定的基础。 展开更多

关键词 碱性蛋白酶 离子注入 发酵放大 发酵终点

在线阅读 下载PDF 职称材料

一株产碱性蛋白酶的嗜碱芽孢杆菌的分离和鉴定 被引量：5

2

作者 孙同毅 邵伟光 +4 位作者 高志芹 林维平 路福平 于小勇 王新斌 《现代生物医学进展》 CAS 2008年第7期1256-1258,共3页

从天津塘沽盐碱土壤中分离一株产碱性蛋白酶的嗜碱芽孢杆菌HAP，并对其进行了表型分类和16S rDNA序列分析。结果表明，HAP是一株革兰氏阳性芽孢杆菌，菌体大小（0．7—0．9）μm×（2-3）μm，该菌可利用木糖、葡萄糖、阿拉伯糖、... 从天津塘沽盐碱土壤中分离一株产碱性蛋白酶的嗜碱芽孢杆菌HAP，并对其进行了表型分类和16S rDNA序列分析。结果表明，HAP是一株革兰氏阳性芽孢杆菌，菌体大小（0．7—0．9）μm×（2-3）μm，该菌可利用木糖、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露醇，发酵型糖代谢产酸；可以水解酪素、淀粉，但不能水解酪氨酸；能够利用柠檬酸盐；其酶活力为1．22×10^4U／mL。结合系统发育学分析将HAP鉴定为嗜碱芽孢杆菌（Bacillus alcalophilus）。 展开更多

关键词 嗜碱芽孢杆菌 16S RDNA 分离和鉴定

在线阅读 下载PDF 职称材料

嗜碱性芽孢杆菌PB92碱性蛋白酶分别在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中表达 被引量：5

3

作者 孙同毅 陈坤 +2 位作者 郝继兴 路福平 杜连祥 《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第5期120-123,127,共5页

从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽... 从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,Mapr分别插入到大肠杆菌载体pET-22b(+)和枯草芽孢杆菌载体pWB980中构建成重组分泌型表达载体pET22b(+)-Mapr、pWB980-Mapr。碱性蛋白酶基因分别在大肠杆菌宿主BL21和枯草芽孢杆菌DB104中得到表达。SDS-PAGE分析,重组蛋白酶的分子量为28kD。在大肠杆菌,所得酶活为231U/ml,而在枯草芽孢杆菌,其酶活为1563U/ml。大概是由于碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌折叠成熟机制与大肠杆菌的不同造成的。 展开更多

关键词 嗜碱芽孢杆菌 碱性蛋白酶 大肠杆菌 枯草芽孢杆菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

碱性蛋白酶PB92在枯草芽孢杆菌中高效转化方法的建立及其分泌表达 被引量：1

4

作者 孙同毅 邵建新 +4 位作者 高媛媛 陈丽梅 高志芹 林伟平 路福平 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期534-537,共4页

枯草芽孢杆菌转换效率低一直制约着该菌基因改造技术的应用,本研究比较了化学法和高渗电转化法对枯草芽孢杆菌转化率的影响,发现高渗电转化法的转化效率较高。从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,构建成重组分泌... 枯草芽孢杆菌转换效率低一直制约着该菌基因改造技术的应用,本研究比较了化学法和高渗电转化法对枯草芽孢杆菌转化率的影响,发现高渗电转化法的转化效率较高。从Bacillus alcalophillus PB92中扩增出碱性蛋白酶基因Mapr,构建成重组分泌型表达载体pWB980-Mapr,碱性蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌DB104中得到表达。SDS-PAGE分析,重组蛋白酶的分子量为28000。pWB980-Mapr在枯草芽孢杆菌中表达的酶活为1563 U/ml。 展开更多

关键词 碱性蛋白酶 枯草芽孢杆菌 高渗电转化法

在线阅读 下载PDF 职称材料

高产碱性蛋白酶菌株HAP26选育 被引量：1

5

作者 孙同毅 殷向彬 +2 位作者 李玉 路福平 杜连祥 《氨基酸和生物资源》 CAS 2007年第2期20-22,29,共4页

通过对HAP26复合诱变（NTG＋N^＋离子注入）,选育出一株碱性蛋白酶活力达3.5×10^7U·L^-1的菌株HAP3-26-2。该酶生物合成类型属于半藕联合成型。碱性蛋白酶最适温度为40℃,在pH 7-11的范围内,酶活力比较稳定。

关键词 嗜碱芽孢杆菌 复合诱变 半藕联合成型

在线阅读 下载PDF 职称材料

高活力液体碱性蛋白酶制备工艺研究

6

作者 孙同毅 李军训 +3 位作者 殷向彬 陈坤 路福平 杜连祥 《现代化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期31-33,共3页

为了获得高质量浓缩液体蛋白酶,对提取工艺中不同絮凝剂,不同大小活性炭以及膜过滤条件进行了优化。结果表明0.1%质量分数NaAlO2絮凝剂在pH=8.0时絮凝速度快、效果好;1%中型颗粒活性炭脱色效果明显;聚丙烯膜超滤温度10℃、压力0.05 MPa... 为了获得高质量浓缩液体蛋白酶,对提取工艺中不同絮凝剂,不同大小活性炭以及膜过滤条件进行了优化。结果表明0.1%质量分数NaAlO2絮凝剂在pH=8.0时絮凝速度快、效果好;1%中型颗粒活性炭脱色效果明显;聚丙烯膜超滤温度10℃、压力0.05 MPa时酶的回收率最高。优化后的工艺使液体酶活力提高到3.2×105μ/mL,使初始发酵液浓缩了8.3倍,酶回收率达到83.6%。 展开更多

关键词 液体蛋白酶 制备工艺 絮凝 超滤浓缩

在线阅读 下载PDF 职称材料

医学院校“三全五导”中医药创新人才培养模式探索与实践 被引量：11

7

作者 田桂香 武敬亮 +3 位作者 刘晓影 张波 潘瑞艳 孙同毅 《中国卫生事业管理》 北大核心 2020年第2期125-127,共3页

传统的中医药专业人才培养在中医药品格“点”、中医药思维“线”、中医药创新“核”、中医药临床“面”、中医药回归“场”等方面存在不足。“双一流”建设为中医药发展提供了机遇,本文构建了“三全五导”中医药人才培养模式,加强“全... 传统的中医药专业人才培养在中医药品格“点”、中医药思维“线”、中医药创新“核”、中医药临床“面”、中医药回归“场”等方面存在不足。“双一流”建设为中医药发展提供了机遇,本文构建了“三全五导”中医药人才培养模式,加强“全员参与、全程指导、全面培养”,通过“导引、导学、导研、导践、导业”路径克服医学院校存在的“点、线、面、场、核”问题,培养新时代中医药创新人才。 展开更多

关键词 中医药 创新 人才培养

在线阅读 下载PDF 职称材料

大肠埃希菌trp operon的克隆与表达 被引量：1

8

作者 林维平 刘晓影 +2 位作者 武敬亮 高志芹 孙同毅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期58-60,共3页

色氨酸操纵子所表达酶的高效表达和酶活性的提高,从而构建高产色氨酸菌株。利用PCR的方法从大肠埃希菌基因组中直接克隆色氨酸操纵子,并将其连接到原核表达载体pBV220中,得到重组质粒pBV220-trp operon,转化大肠埃希菌DH5α,温度诱导重... 色氨酸操纵子所表达酶的高效表达和酶活性的提高,从而构建高产色氨酸菌株。利用PCR的方法从大肠埃希菌基因组中直接克隆色氨酸操纵子,并将其连接到原核表达载体pBV220中,得到重组质粒pBV220-trp operon,转化大肠埃希菌DH5α,温度诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE分析并用比色法测定其活性。通过凝胶电泳观察PCR扩增产物大小约为7 kb,SDS-PAGE鉴定目的蛋白得到了高效表达,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性分别比对照提高了3.4倍和2.5倍。成功构建了重组质粒pBV220-trp operon,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的表达量和表达活性在大肠埃希菌中得到了提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定基础。 展开更多

关键词 TRP OPERON 色氨酸 克隆 表达 邻氨基苯甲酸合成酶 色氨酸合成酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于“对分教育”的应用型医药人才培养模式探索与实践 被引量：2

9

作者 武敬亮 田桂香 +5 位作者 潘智芳 孙同毅 刘红英 刘晓影 王国辉 高志芹 《中国高等医学教育》 2019年第2期5-6,共2页

应用型医药人才是医药企业转型和升级的骨干力量。通过剖析我国医药人才培养中的"点""线""面""核""场"等问题,依据"对分教育"理念,从核心素养、知识建构和创新实践三个方... 应用型医药人才是医药企业转型和升级的骨干力量。通过剖析我国医药人才培养中的"点""线""面""核""场"等问题,依据"对分教育"理念,从核心素养、知识建构和创新实践三个方面构建适应我国国情的应用型医药人才培养模式。该模式以"凝聚合力,内化外显,源在基础,贵在创新"为原则,推动医药人才与产业发展融合,实现高水平应用型医药人才培养的目标。 展开更多

关键词 对分教育 应用型医药人才 培养模式

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于OBE理念的微生物学实验教学改革探索

10

作者 林维平 史延华 +2 位作者 侯典海 贾广韬 孙同毅 《中国教育技术装备》 2021年第20期122-123,128,共3页

目前,微生物学实验课程存在教学内容陈旧、教学方法单一、教学评价固化等问题。基于OBE理念,对教学内容进行模块化处理,更新教学方法,创新教学考核评价且实验报告采用小论文形式,激发学生的学习兴趣和积极性,培养学生的实践操作和创新... 目前,微生物学实验课程存在教学内容陈旧、教学方法单一、教学评价固化等问题。基于OBE理念,对教学内容进行模块化处理,更新教学方法,创新教学考核评价且实验报告采用小论文形式,激发学生的学习兴趣和积极性,培养学生的实践操作和创新能力。 展开更多

关键词 OBE 教学改革 微生物学实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗菌肽buforinⅡ结构及其抗菌和抗癌活性研究进展 被引量：1

11

作者 王玉霞 罗禄军 +4 位作者 张赛 黄晓斐 贾广韬 孙同毅 高媛媛 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第3期225-230,共6页

抗生素滥用加速了细菌产生抗生素耐药性,抗菌肽作为对抗抗生素耐药细菌的潜在候选药物备受关注。buforinⅡ作为其中一种潜力分子成为目前的研究热点。buforinⅡ的结构类似于阳离子α螺旋抗菌肽,其“螺旋-脯氨酸铰链-双亲性螺旋”的独特... 抗生素滥用加速了细菌产生抗生素耐药性,抗菌肽作为对抗抗生素耐药细菌的潜在候选药物备受关注。buforinⅡ作为其中一种潜力分子成为目前的研究热点。buforinⅡ的结构类似于阳离子α螺旋抗菌肽,其“螺旋-脯氨酸铰链-双亲性螺旋”的独特结构在抗菌和抗癌等方面起决定性作用。通过截短、替换和拼接等策略对buforinⅡ及其同源肽进行结构改造可获得具有良好抗菌和抗癌作用的衍生肽。同时,对不同物种间buforinⅡ同源肽的对比和分析拓宽了分子改造的思路。本文综述buforinⅡ及其重要衍生肽的结构及其抗菌和抗癌活性等的最新研究进展,为新抗菌肽的挖掘和临床应用提供理论依据。 展开更多

关键词 抗菌肽 buforinⅡ 穿膜机制 抗菌效应 分子改造

在线阅读 下载PDF 职称材料

溶菌酶对热应激肉鸡肠道炎症和氧化应激的影响 被引量：4

12

作者 梅迪 王金龙 +4 位作者 张大伟 张宗国 高媛媛 孙同毅 王政 《饲料工业》 CAS 北大核心 2021年第22期27-31,共5页

为了研究溶菌酶添加饲料对热应激肉鸡肠道健康的影响,采用单因素随机设计试验,将800只1日龄的健康肉鸡随机分为4组(对照组、热应激组、抗生素添加热应激组和溶菌酶添加热应激组),每组10个重复,每个重复20只。在试验第42 d分别检测空肠... 为了研究溶菌酶添加饲料对热应激肉鸡肠道健康的影响,采用单因素随机设计试验,将800只1日龄的健康肉鸡随机分为4组(对照组、热应激组、抗生素添加热应激组和溶菌酶添加热应激组),每组10个重复,每个重复20只。在试验第42 d分别检测空肠黏膜炎症因子和紧密连接蛋白mRNA表达水平、绒毛高度、隐窝深度以及抗氧化状态。结果表明,与热应激组相比,溶菌酶能够显著降低肉鸡肠黏膜中IL-1β、IL-6和iNOS mRNA的表达水平(P<0.05);溶菌酶添加组肉鸡肠黏膜紧密连接相关蛋白Claudin-1、Claudin-5以及ZO-1 mRNA表达水平显著升高(P<0.05);与此同时,溶菌酶添加组肉鸡回肠绒毛高度显著增加(P<0.05),肠绒毛高度/隐窝深度比率明显变大(P<0.05);溶菌酶添加还能改善肉鸡氧化应激状态,肉鸡血清中MDA水平显著降低(P<0.05),SOD、GSH-Px和TAOC活性显著升高(P<0.05)。研究结果表明,添加溶菌酶能够缓解热应激肉鸡的肠道炎症和氧化应激反应,改善肠道形态并提高动物肠道屏障功能。 展开更多

关键词 热应激 溶菌酶 肉鸡 肠道健康 氧化应激

在线阅读 下载PDF 职称材料

传统中药东亚钳蝎基因在毒液腺特征分布的转录组学分析 被引量：1

13

作者 张鸿飞 葛得龙 +7 位作者 黄晓斐 梅迪 郭莉 王艺蓉 李海梅 孙同毅 贾光韬 李文辉 《昆明医科大学学报》 CAS 2021年第5期35-40,共6页

目的研究东亚钳蝎Buthus martensii Karsch转录组信息特征。方法以山东省临沂地区特色东亚钳蝎为研究对象,利用二代高通量测序平台Illumina HiSeq 4000150PE分别对东亚钳蝎的前腹部、后腹部、毒液腺进行转录组测序。利用测定的转录组数... 目的研究东亚钳蝎Buthus martensii Karsch转录组信息特征。方法以山东省临沂地区特色东亚钳蝎为研究对象,利用二代高通量测序平台Illumina HiSeq 4000150PE分别对东亚钳蝎的前腹部、后腹部、毒液腺进行转录组测序。利用测定的转录组数据将毒液腺基因分别与前腹部和后腹部基因集进行比较,然后取两两比较之后的交集进行分析,筛选差异基因集进行GO和KO分析。结果GO功能分类共有60个大项,含有23个生物学途径,13个细胞组分和24个分子功能。富集最显著的前20个KEGG通路中与毒素密切相关的为钙离子信号通路、磷脂酶信号通路。结论通过无参转录组测序,构建了东亚钳蝎转录组序列数据库,为今后东亚钳蝎功能基因的挖掘提供了序列基础并为代谢产物的生物合成提供了数据支撑,为传统中药在临床应用乃至精准医学方面提供了新的思路。 展开更多

关键词 东亚钳蝎 毒液腺 前腹部 后腹部 转录组测序

在线阅读 下载PDF 职称材料

湿料发酵豆粕对蛋鸡产蛋性能的影响 被引量：4

14

作者 王玉霞 梅迪 +5 位作者 张克顺 张大伟 王金龙 高媛媛 孙同毅 王文博 《中国饲料》 北大核心 2021年第15期32-36,共5页

为研究日粮中添加湿料发酵豆粕对鸡蛋质量和蛋鸡粪便消化率的影响,试验选取8000只健康蛋鸡,随机分为2组。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加5%湿料发酵豆粕的日粮,饲养时间为10 d。试验期间测定湿料发酵豆粕中的微生物含量、粪便消化... 为研究日粮中添加湿料发酵豆粕对鸡蛋质量和蛋鸡粪便消化率的影响,试验选取8000只健康蛋鸡,随机分为2组。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂添加5%湿料发酵豆粕的日粮,饲养时间为10 d。试验期间测定湿料发酵豆粕中的微生物含量、粪便消化率和蛋壳灰分。记录鸡蛋性质及形态的变化,通过SEM测定蛋壳微观形态。结果表明:湿料发酵豆粕中的主要微生物包括芽孢菌、乳酸菌及酵母菌。与对照组相比,粪便在上层和中层筛的比重降低,底层筛中比重上升。蛋清韧性增加,蛋壳粗灰分含量提高了4.16%(P<0.05),其中磷含量上升,钙含量降低。SEM结果表明,使用5%的湿料发酵豆粕饲养后蛋壳内部纤维密集,整体结构致密,厚度减少了7%。结果提示,蛋鸡饲料中添加湿料发酵豆粕可提高鸡蛋的性能并改善饲料在蛋鸡体内的消化率。 展开更多

关键词 湿料发酵豆粕 蛋鸡 蛋壳 蛋清 粪便消化率

在线阅读 下载PDF 职称材料

抗氧化肽AOP_1对小鼠皮肤烫伤创面愈合修复的影响 被引量：5

15

作者 秦迪 张慧杰 +5 位作者 杨希营 陈艳通 林维平 李文辉 孙同毅 高媛媛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期225-231,共7页

目的探究抗氧化肽AOP_1促进小鼠皮肤烫伤创面愈合修复的作用及机制。方法选用DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)的变化;通过细胞增殖与迁移实验检测药物毒性及对创面愈合的影响。采用直径1 cm铜柱80℃水浴2min、紧贴小鼠皮肤10 s的方法制备... 目的探究抗氧化肽AOP_1促进小鼠皮肤烫伤创面愈合修复的作用及机制。方法选用DCFH-DA检测细胞内活性氧(ROS)的变化;通过细胞增殖与迁移实验检测药物毒性及对创面愈合的影响。采用直径1 cm铜柱80℃水浴2min、紧贴小鼠皮肤10 s的方法制备烫伤模型,观察烫伤创面愈合情况;并用HE和Masson三色染色观察AOP_1对皮肤烫伤创面愈合修复的作用;检测小鼠全皮组织中MDA含量和SOD活性。结果在细胞水平上,抗氧化肽AOP_1能够明显降低HaCaT和L929细胞内ROS的含量,促进细胞迁移和增殖。与对照组相比,AOP_1组小鼠皮肤创面愈合时间短、愈合率高,结痂面积小,可明显降低烫伤创伤组织中炎症反应及MDA的含量;HE和Masson染色也证实了AOP_1对烫伤创面愈合修复的促进作用。结论具有天然活性的抗氧化肽AOP_1可能通过减轻烫伤引起的氧化应激,促进小鼠皮肤烫伤创面的愈合修复。 展开更多

关键词 抗氧化肽 AOP1 皮肤烫伤 创面修复 氧化应激 炎症反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

光照和pH对血红密孔菌生长及抗氧化活性的影响 被引量：2

16

作者 陈艳通 侯典海 +5 位作者 杨晓 王福悦 赵亚烜 高媛媛 林维平 孙同毅 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期29-34,共6页

探究不同光照和pH对药用真菌血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)生长及抗氧化活性的影响。分别设置了3个不同光照条件组(14d光照、光照黑暗交替和黑暗)和4个pH组(pH3、5、7和9),并在菌种培养的第2、4、6、8、10、12和14天测定其生物量、... 探究不同光照和pH对药用真菌血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus)生长及抗氧化活性的影响。分别设置了3个不同光照条件组(14d光照、光照黑暗交替和黑暗)和4个pH组(pH3、5、7和9),并在菌种培养的第2、4、6、8、10、12和14天测定其生物量、DPPH自由基清除率和总抗氧化能力(T-AOC)。血红密孔菌在14d黑暗环境中有最大生物量和最强T-AOC活性。14d黑暗条件下更利于血红密孔菌的生长,其生物量于第10~14天大量增加,并于第14天达到最高值,为4.49g/L,生物量高出光照及更替条件近1.5倍。T-AOC活性在第12天最高,为25.10U/mL。14d黑暗培养环境下DPPH自由基的清除率也较高。不同pH条件对血红密孔菌培养过程中各项指标影响不同。当pH为5时血红密孔菌生长过程中产生的生物量于第10天最高,为7.12g/L。而DPPH自由基清除率和T-AOC则在pH7时第10天最高,分别为94.99%和64.34U/mL;pH7时次之。说明偏酸环境更能适宜血红密孔菌的生长,而中性及偏碱环境则有利于提高该菌的抗氧化能力。 展开更多

关键词 药用真菌 血红密孔菌 DPPH 自由基清除能力 抗氧化能力

在线阅读 下载PDF 职称材料

枯草杆菌的芽胞在肉鸡肠道中的生活状态和分布 被引量：7

17

作者 孙同毅 张大伟 邵建新 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期334-336,共3页

目的探讨枯草芽胞杆菌的芽胞在肉鸡肠道中的生活状态和分布。方法以20日龄AA肉鸡为研究对象,饲喂枯草芽胞菌剂,分别测定鸡粪中芽胞数量和鸡肠道不同部位的活菌数量。结果饲喂3 h后,鸡粪中开始检测到芽胞的存在,24 h达到最高值,直至饲喂1... 目的探讨枯草芽胞杆菌的芽胞在肉鸡肠道中的生活状态和分布。方法以20日龄AA肉鸡为研究对象,饲喂枯草芽胞菌剂,分别测定鸡粪中芽胞数量和鸡肠道不同部位的活菌数量。结果饲喂3 h后,鸡粪中开始检测到芽胞的存在,24 h达到最高值,直至饲喂120 h后,肠道内的芽胞基本排除。排出芽胞总量为饲喂芽胞总数的3.0倍左右,同时研究还表明:芽胞在实验肉鸡的十二指肠2内开始萌发,并进行了繁殖,在小肠的后端,即小肠3和小肠4,活菌数量达到高峰。结论部分芽胞进入小肠后即可开始萌发,并进行生长繁殖,而且在肠道内有短暂滞留。 展开更多

关键词 枯草杆菌 芽胞 肉鸡 肠道

原文传递

大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株的构建与表达 被引量：3

18

作者 林维平 刘晓影 +2 位作者 武敬亮 高志芹 孙同毅 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第7期711-713,共3页

目的构建大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株,提高邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的产量。方法利用依赖于DpnⅠ酶的PCR方法突变表达载体pET-22b(+)-Trp Operon上的关键位点,PCR扩增Trp OperonM基因,构建pET-22b(+)-Trp OperonM重组表达... 目的构建大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株,提高邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的产量。方法利用依赖于DpnⅠ酶的PCR方法突变表达载体pET-22b(+)-Trp Operon上的关键位点,PCR扩增Trp OperonM基因,构建pET-22b(+)-Trp OperonM重组表达质粒,经酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。制备粗酶液,经比色法测定邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性。结果 PCR扩增产物可见约7000bp的Trp OperonM条带;所构建的重组表达质粒经酶切及测序鉴定正确;邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性比大肠杆菌BL21(DE3)空菌分别提高了4.5倍和5.2倍。结论已成功构建了大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株BL21(DE3)/pET-22b(+)-Trp OperonM,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性均有提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定了基础。 展开更多

关键词 色氨酸 操纵子 突变 邻氨基苯甲酸合成酶 色氨酸合成酶

原文传递

中华大蟾蜍皮肤Cathelicidin家族新型抗菌肽的鉴定及其抗菌活性 被引量：2

19

作者 展波 高媛媛 +3 位作者 林维平 贾广韬 孙同毅 李文辉 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期630-635,共6页

对中华大蟾蜍皮肤转录组进行了测定,通过对得到转录组数据的组装、注释和序列比对得到1个新型Cathelicidin家族前体c DNA。按照Cathelicidin家族抗菌肽的加工方式,推导出该前体可能编码2个成熟的中华大蟾蜍Cathelicidin家族抗菌肽,命名... 对中华大蟾蜍皮肤转录组进行了测定,通过对得到转录组数据的组装、注释和序列比对得到1个新型Cathelicidin家族前体c DNA。按照Cathelicidin家族抗菌肽的加工方式,推导出该前体可能编码2个成熟的中华大蟾蜍Cathelicidin家族抗菌肽,命名为BG-CATH25,BG-CATH29。圆二色散测定了合成BG-CATH25,BG-CATH29的二级结构特征,结果揭示BG-CATH25,BG-CATH29在不同缓冲体系中以无规则卷曲的构象为主。对实验所用4种细菌的抗菌活性研究表明BG-CATH25,BGCATH29对嗜水气单胞菌有较强的抑菌活性,MIC分别为1.25,10 mg·L-1。 展开更多

关键词 中华大蟾蜍 CATHELICIDIN 抗菌肽 转录组 嗜水气单胞菌

原文传递

治疗银屑病的抗体药物研究进展 被引量：5

20

作者 李红霞 孙同毅 王春河 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2021年第3期325-330,共6页

银屑病的发病病因仍有待探究。目前,临床上尚未发现可根除该病的药物。中西医药物医治银屑病的措施较多,但仅对轻度患者有较佳疗效,对中、重度患者疗效不佳且长期用药存在诸多问题。随着科研人员对银屑病发病机制的认识和研究,大量的抗... 银屑病的发病病因仍有待探究。目前,临床上尚未发现可根除该病的药物。中西医药物医治银屑病的措施较多,但仅对轻度患者有较佳疗效,对中、重度患者疗效不佳且长期用药存在诸多问题。随着科研人员对银屑病发病机制的认识和研究,大量的抗体药物开始兴起,其在缓解和治疗中、重度银屑病方面效果较佳,显示出很大的优势。现对银屑病目前的分类、发病因素及抗体药物治疗银屑病的研究进展进行了归纳,以期对银屑病的研究和治疗有所助益。 展开更多

关键词 银屑病 致病因素 病型分类 单克隆抗体 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-17 白细胞介素-12/23 白细胞介素-23 给药剂量

原文传递