基于VMM层内核函数分析的文件访问保护 被引量：1

1

作者 周登元 李清宝 +1 位作者 孔维亮 张贵民 《小型微型计算机系统》 CSCD 北大核心 2017年第6期1209-1215,共7页

文件是操作系统的一部分,也是恶意代码的主要攻击对象,如何有效管控文件的访问行为是保护操作系统安全的关键.针对当前文件保护方法容易被攻击或绕过的问题,提出一种基于VMM层内核函数分析的文件访问保护方法.该方法基于指令替换和仿真... 文件是操作系统的一部分,也是恶意代码的主要攻击对象,如何有效管控文件的访问行为是保护操作系统安全的关键.针对当前文件保护方法容易被攻击或绕过的问题,提出一种基于VMM层内核函数分析的文件访问保护方法.该方法基于指令替换和仿真的思想,在VMM层监控与文件访问相关的关键内核函数,并结合虚拟机自省技术实现对文件访问行为的有效管控,还利用扩展页表增强了保护机制的安全性,降低了内核恶意程序绕过保护机制的可能性,提高了监控方法的安全性.经对比测试与分析,该方法能够监控到文件的访问行为,管控文件的流向,实现对重要文件的有效保护,开启监控系统引入的性能开销仅在Bit Visor的基础上增加了4.5%. 展开更多

关键词 虚拟机监控器 文件访问 内核函数 敏感指令 陷入

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我国猫星状病毒流行情况调查及其分子特性分析

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作者 杜雯欣 李勇璠 +5 位作者 曾悦 颜权辉 李秋燕 曹胜波 周登元 李佳康 《中国动物检疫》 CAS 2024年第12期8-15,共8页

为了解我国猫星状病毒(FeAstV)的流行趋势及遗传进化特点,2023年在我国7大行政片区的16个省级行政区采集了2560份猫临床样品,通过RT-PCR方法对样品进行了FeAstV检测并对主要免疫原性蛋白VP90进行了遗传进化分析。结果显示:FeAstV总检出... 为了解我国猫星状病毒(FeAstV)的流行趋势及遗传进化特点,2023年在我国7大行政片区的16个省级行政区采集了2560份猫临床样品,通过RT-PCR方法对样品进行了FeAstV检测并对主要免疫原性蛋白VP90进行了遗传进化分析。结果显示:FeAstV总检出率为8.01%(205/2560),有6个行政片区存在FeAstV感染(华东片区除外);未成年猫、母猫、群居猫的FeAstV检出率相对较高;测序阳性样品与参考毒株的氨基酸同源性为68.7%~97.7%,分为A、B2个基因群,不同群间VP90蛋白氨基酸同源性较低(68.6%~73.5%);2个基因群FeAstVVP90蛋白的第590~700位氨基酸区域均具有高突变性。结果说明:FeAstV在我国流行范围较广,猫年龄、性别及其饲养环境对FeAstV传播有显著影响,FeAstV持续发生变异且具有一定人兽共感染隐患,需要对其加强监测。 展开更多

关键词 猫星状病毒 ORF2基因 VP90蛋白 遗传进化分析

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基于剪贴板监控的电子文档多级保护 被引量：3

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作者 张擂 李清宝 +1 位作者 贾天江 周登元 《计算机与现代化》 2015年第6期12-18,共7页

电子文档保护是信息防泄漏的重要内容。在对现有电子文档保护技术分析的基础上,提出一种基于剪贴板监控的电子文档多级保护技术。针对传统剪贴板监控在文档保护方面的不足,提出一种可获得文档路径的剪贴板监控策略;根据不同应用对文档... 电子文档保护是信息防泄漏的重要内容。在对现有电子文档保护技术分析的基础上,提出一种基于剪贴板监控的电子文档多级保护技术。针对传统剪贴板监控在文档保护方面的不足,提出一种可获得文档路径的剪贴板监控策略;根据不同应用对文档保护的不同需求,提出一种动态可调的文档分级保护策略;基于剪贴板监控所获得信息完成对文档的实时动态保护,并设计实现相应的原型系统。实验结果表明,所提出的基于剪贴板监控的电子文档保护能够根据文档保护需求防止文档内容通过剪贴板泄露。 展开更多

关键词 剪贴板监控 文档保护 信息防泄漏

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基于VMM的Windows文件系统监控 被引量：1

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作者 张擂 李清宝 +1 位作者 冯培钧 周登元 《计算机应用与软件》 CSCD 2016年第7期299-303,共5页

文件系统监控是文件保护的基础。针对现有文件系统监控容易被恶意软件破坏的问题,提出一种基于VMM的Windows文件系统监控方法。该方法利用硬件虚拟化技术,通过监控系统调用监控文件系统操作,且监控手段对客户系统透明,保证实施的监控安... 文件系统监控是文件保护的基础。针对现有文件系统监控容易被恶意软件破坏的问题,提出一种基于VMM的Windows文件系统监控方法。该方法利用硬件虚拟化技术,通过监控系统调用监控文件系统操作,且监控手段对客户系统透明,保证实施的监控安全可信。最后设计并实现了相应的原型系统,同时对原型系统的监控效果和时间开销进行测试。实验结果表明,原型系统能够监控常见的Windows文件系统操作,并且时间开销在可接受的范围内。 展开更多

关键词 文件系统监控 VMM 文件保护

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大学生社会行为、成就动机与网络成瘾倾向的关系研究——以武汉市5所高校为例 被引量：3

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作者 张啸 彭光芒 +2 位作者 钟华 吴菲菲 周登元 《社会心理科学》 2010年第8期72-77,共6页

运用问卷调查法探讨大学生的社会行为、成就动机与网络成瘾倾向的关系。对299位大学生的调查结果表明:(1)追求成功动机、避免失败动机和社交能力对大学生网络成瘾倾向有直接影响;(2)成就动机还通过社交能力间接影响网络成瘾倾向。

关键词 网络成瘾倾向 社交行为 成就动机 大学生

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基于Intel VT硬件虚拟化的Rootkit技术 被引量：1

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作者 孔维亮 曾光裕 周登元 《信息工程大学学报》 2016年第5期579-585,共7页

Intel VT硬件虚拟化技术使Rootkit可以利用底层优势实现深度隐藏。首先结合木马协同隐藏的思想,提出了基于Intel VT硬件虚拟化的Rootkit(HVRootkit)的协同隐藏模型,并给出形式化描述;然后根据该模型,在深入分析进程切换过程和操作系统... Intel VT硬件虚拟化技术使Rootkit可以利用底层优势实现深度隐藏。首先结合木马协同隐藏的思想,提出了基于Intel VT硬件虚拟化的Rootkit(HVRootkit)的协同隐藏模型,并给出形式化描述;然后根据该模型,在深入分析进程切换过程和操作系统内核数据结构的基础上,设计并实现了HVRootkit原型,该原型能够监控系统进程的切换过程,并通过修改与内核层进程视图和用户层进程视图相关的数据结构,隐藏系统进程。实验表明,HVRootkit原型符合协同隐藏的思想,能够实现对进程的深度隐藏,隐藏性能明显优于传统的内核级Rootkit。 展开更多

关键词 内核级Rootkit 硬件虚拟化 协同隐藏 进程切换 进程视图

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猫杯状病毒单克隆抗体的制备

7

作者 王莹 李佳康 +6 位作者 曾悦 史开拓 韦丽婷 彭佳佳 李秋燕 曹龙龙 周登元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期401-405,共5页

制备猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)的特异性单克隆抗体,为FCV的免疫学诊断方法提供材料。本研究将经蔗糖梯度离心纯化的FCV灭活后免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并对其进行一系列鉴定。结果成功获得1株能... 制备猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)的特异性单克隆抗体,为FCV的免疫学诊断方法提供材料。本研究将经蔗糖梯度离心纯化的FCV灭活后免疫BALB/c小鼠,通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,并对其进行一系列鉴定。结果成功获得1株能够稳定分泌抗体的单克隆细胞株3B11。MAb 3B11抗体类型鉴定其重链属于IgG_(1)、轻链为κ链。MAb 3B11能与FCV-SH192发生特异性反应;小鼠腹水MAb 3B11对5株FCV毒株具有较高的ELISA效价;与5株FCV毒株具有间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot,WB)结合特性。本研究制备的MAb 3B11对FCV具有良好的特异性、免疫反应性及广谱识别性,为FCV诊断方法的优化、流行毒株筛选以及基础研究提供生物原料。 展开更多

关键词 猫杯状病毒 单克隆抗体 特异性 反应性

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主动免疫GnRH疫苗对公犬生殖功能的影响

8

作者 曾悦 葛菲菲 +6 位作者 惠晓晨 王同兆 任婧 史开拓 王莹 周登元 李秋燕 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2023年第21期111-116,135,共7页

为了探究促性腺激素释放激素(GnRH)疫苗对公犬生殖功能的影响,试验将GnRH基因克隆至原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行蛋白鉴定,将... 为了探究促性腺激素释放激素(GnRH)疫苗对公犬生殖功能的影响,试验将GnRH基因克隆至原核表达载体中,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用终浓度为1 mmol/L IPTG诱导蛋白表达,通过SDS-PAGE和Western-blot对表达产物进行蛋白鉴定,将鉴定正确的GnRH蛋白纯化后制备成抗原。选取6只2~4月龄健康公犬随机分成2组,每组3只,其中免疫组每只犬免疫GnRH蛋白1 mg,共免疫3次,每次间隔4周,分别于免疫前和一免、二免、三免后14天采血,通过ELISA检测血清GnRH抗体及睾酮水平,并于最后一次采血结束后制备睾丸组织切片,观察睾丸组织形态。结果表明:3次免疫后免疫组GnRH抗体水平均显著高于对照组(P<0.05),睾酮水平均显著低于对照组(P<0.05),免疫组睾丸相对较小,曲精小管中生精细胞数量较少,管径较细。说明主动免疫GnRH疫苗抑制了公犬的性腺发育和生殖器官的成熟。 展开更多

关键词 主动免疫 促性腺激素释放激素(GnRH) 公犬 生殖功能 去势

原文传递

基于虚拟机监控器的Windows剪贴板操作监控

9

作者 周登元 李清宝 +1 位作者 张擂 孔维亮 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2016年第2期511-515,共5页

针对现有剪贴板操作监控无法抵御内核层攻击,且所采取的单一保护策略无法满足现实需求的问题,提出一种基于虚拟机监控器(VMM)的文档内容剪贴板操作监控技术,并提出基于剪贴板操作监控的电子文档分级保护策略。首先,通过修改影子寄存器... 针对现有剪贴板操作监控无法抵御内核层攻击,且所采取的单一保护策略无法满足现实需求的问题,提出一种基于虚拟机监控器(VMM)的文档内容剪贴板操作监控技术,并提出基于剪贴板操作监控的电子文档分级保护策略。首先,通过修改影子寄存器的方法在VMM层截获并识别系统调用;其次,监控文档打开操作建立进程标识符和文档路径之间的映射表,并在截获到剪贴板操作后通过进程标识符解析文档路径;最后,根据电子文档分级保护策略对剪贴板操作进行过滤。实验结果表明,监控系统给客户机文件系统带来的性能损耗随着文件读写块的增大而减小,当读写块大小达到64 KB以上时,客户机性能损耗在10%以内,对用户影响不大。 展开更多

关键词 虚拟机监控器 剪贴板监控 系统调用 电子文档 分级保护

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猫泛白细胞减少症病毒、猫杯状病毒和猫疱疹病毒1型三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用 被引量：2

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作者 陈林文 冀伟 +5 位作者 曹龙龙 王莹 李秋燕 曹胜波 陈清秀 周登元 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1141-1147,1198,共8页

为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原... 为建立一种能够快速检测猫泛白细胞减少症病毒(FPV)、猫杯状病毒(FCV)和猫疱疹病毒1型(FHV-1)的三重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据FPV VP2基因、FCV ORF2基因和FHV-1 TK基因分别设计引物与探针,采用上述引物经PCR分别扩增上述3种病原的目的基因并克隆至pMD18-T载体中,构建重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1,并均经PCR和测序鉴定。将3种重组质粒标准品稀释到同一浓度1×10^(8)拷贝/μL,按体积比1∶1∶1混合后作为模板,采用方阵法优化各反应条件后,建立了检测上述病原的三重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。以FPV、FCV、FHV-1、猫博卡病毒、猫冠状病毒、猫支原体、猫白血病病毒、猫星状病毒的基因组为模板采用本研究建立的方法检测,评估该方法的特异性,结果显示,该方法仅能检测到FPV、FCV、FHV-1,而其他病原的检测结果均为阴性。选取1×10^(0)拷贝/μL~1×10^(6)拷贝/μL的混合质粒标准品和10^(-0.5) TCID_(50)/mL~10^(5.5) TCID_(50)/mL的混合病毒液分别作为模板,采用本研究建立的方法检测,评估该方法检测重组质粒和病毒的敏感性,结果显示,该方法对重组质粒标准品pMD18-T-FPV、pMD18-T-FCV和pMD18-T-FHV-1的检测限均为1.0×10^(1)拷贝/μL,对3种病毒的检测限均约为10^(0.5) TCID_(50)/mL;以1×10^(7)拷贝/μL、1×10^(5)拷贝/μL、1×10^(3)拷贝/μL质粒标准品混合物作为模板分别进行组内和组间的重复性试验,结果显示,组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均低于3%。利用建立的该三重荧光定量RT-PCR和常规PCR对81份临床样品(77份猫的眼、鼻、咽、肛混合拭子样品和4份组织病料样品)分别检测,结果显示三重荧光定量RT-PCR检测出47份FPV、13份FCV和13份FHV-1阳性样品,而常规PCR分别检测出39份FPV、9份FCV和6份FHV-1阳性样品,该三重荧光定量RT-PCR与FPV、FCV、FHV-1常规PCR的总符合率分别为90.12%、95.06%、92.59%。本研究建立的三重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为FPV、FCV、FHV-1临床样品的快速鉴别检测提供了有力技术支持。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症病毒 猫杯状病毒 猫疱疹病毒1型 三重荧光定量RT-PCR

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2020—2022年华中地区犬副流感病毒检测及其F、HN基因系统发育分析

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作者 惠晓晨 戴佩华 +6 位作者 曹龙龙 叶佳雯 陈林文 汪文渊 周登元 曹胜波 李秋燕 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期181-190,共10页

为探究华中地区犬副流感病毒(CPIV)的流行及遗传进化情况,利用RT-PCR方法对华中地区2020年9月—2022年1月收集的418份病料样品进行了CPIV检测,并利用生物信息学软件对分离的CPIV毒株的F、HN基因进行同源性、氨基酸位点分析及系统发育分... 为探究华中地区犬副流感病毒(CPIV)的流行及遗传进化情况,利用RT-PCR方法对华中地区2020年9月—2022年1月收集的418份病料样品进行了CPIV检测,并利用生物信息学软件对分离的CPIV毒株的F、HN基因进行同源性、氨基酸位点分析及系统发育分析。结果显示:CPIV阳性率为15.8%,扩增获得9株CPIV的F、HN基因的序列,并成功分离培养9株CPIV毒株;同时,将分离株的F、HN基因与19株副流感病毒参考毒株进行序列比对分析,结果表明,F基因核苷酸同源性为95.1%~100%,氨基酸同源性为94.6%~99.8%,HN基因核苷酸同源性为95.9%~99.9%,氨基酸同源性为95.8%~99.6%;CPIV的F及HN基因与参考毒株相比均有部分氨基酸发生了突变;系统发育分析结果显示,本研究获得的8株分离株与美国株CPI-和CPI+处于同一分支上,亲缘关系较近,另一株分离株CS-324与中国株He N0718和韩国株D277位于同一分支上。本研究丰富了华中地区CPIV的流行病学调查资料,并为该病的综合防控提供了理论依据。 展开更多

关键词 犬副流感病毒 F基因 HN基因 遗传进化分析

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猫IL-1β阻断单克隆抗体的筛选与猫源化改造

12

作者 王定一 王阅 +5 位作者 张晨曦 李秋燕 周登元 司有辉 曹胜波 叶静 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期364-372,共9页

为给猫的炎症性疾病治疗提供具有与猫白细胞介素-1β(IL-1β)高亲和力的单克隆抗体,将表达后纯化的重组猫IL-1β蛋白接种小鼠后制备单克隆抗体,经验证单抗对猫IL-1β蛋白的阻断效果并分析其靶向位点后,将小鼠单克隆抗体的轻/重链可变区... 为给猫的炎症性疾病治疗提供具有与猫白细胞介素-1β(IL-1β)高亲和力的单克隆抗体,将表达后纯化的重组猫IL-1β蛋白接种小鼠后制备单克隆抗体,经验证单抗对猫IL-1β蛋白的阻断效果并分析其靶向位点后,将小鼠单克隆抗体的轻/重链可变区基因片段连接到表达猫抗体的真核质粒中,转染真核细胞后检测猫源化改造抗体效果。结果表明,成功扩增了猫IL-1β基因,并成功构建了原核表达质粒pET-30a-IL-1β并表达猫IL-1β重组蛋白;在使用猫IL-1β重组蛋白免疫小鼠以及细胞融合、杂交瘤细胞筛选后,成功得到2株分别能够与猫IL-1β重组蛋白第二、第三结构域反应的小鼠源单克隆抗体C4C、H10E;将单克隆抗体C4C、H10E猫源化基因改造后的重组抗体仍具有阻断效果。本试验研究结果为开发针对猫IL-1β的阻断单克隆抗体药物奠定了基础,也为猫炎症性疾病的治疗提供了一种新的方案。 展开更多

关键词 白介素1Β 单克隆抗体 阻断效果 猫源化抗体改造

原文传递

猫白血病病毒gp70蛋白单克隆抗体的制备及应用

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作者 杜文广 彭佳佳 +6 位作者 曾悦 李佳康 史开拓 周登元 曹胜波 张燕 李秋燕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期74-79,共6页

猫白血病病毒(FeLV)是一种在家猫和野生猫科动物中水平传播的逆转录病毒,可引起淋巴肿瘤、免疫抑制、贫血等疾病,且国内缺乏针对FeLV的诊断试剂及预防或治疗用生物制剂。膜表面糖蛋白gp70是FeLV中和抗体的主要作用靶点,本研究通过构建g... 猫白血病病毒(FeLV)是一种在家猫和野生猫科动物中水平传播的逆转录病毒,可引起淋巴肿瘤、免疫抑制、贫血等疾病,且国内缺乏针对FeLV的诊断试剂及预防或治疗用生物制剂。膜表面糖蛋白gp70是FeLV中和抗体的主要作用靶点,本研究通过构建gp70重组表达载体,表达纯化gp70重组蛋白,并以纯化的gp70蛋白免疫6周龄的BALB/c小鼠,进行单克隆抗体的制备。结果表明,成功构建了pET-32a-gp70重组表达质粒,并应用IPTG诱导表达、包涵体纯化获得了原核表达的gp70重组蛋白;成功制备出3株能稳定分泌针对gp70蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为2H5、3B1、5A8;Western blot检测表明仅有2H5单克隆抗体能与gp70蛋白特异性结合;IFA检测表明2H5单克隆抗体能与真核杆状病毒表达的gp70蛋白发生特异性反应,2H5单抗效价可达1∶2048000。本研究成功制备了针对FeLV gp70蛋白的单克隆抗体,为进一步建立准确快速的FeLV诊断方法及研究预防或治疗用生物制剂奠定基础。 展开更多

关键词 猫白血病病毒(FeLV) gp70蛋白 原核表达 单克隆抗体 杆状病毒表达系统

原文传递

猫TNF-α蛋白的原核表达及阻断活性单克隆抗体的制备

14

作者 王阅 李佳康 +4 位作者 李秋燕 曹胜波 叶静 曹龙龙 周登元 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1667-1673,共7页

为制备针对猫TNF-α的具有阻断活性的单克隆抗体,本研究基于可溶性猫TNF-α(sTNFα)基因成功构建、表达及纯化了重组质粒pET-28a-sTNFα,并进一步对重组蛋白诱导表达的条件进行摸索和优化,鉴定其生物活性;其次将猫TNF-α重组蛋白作为免... 为制备针对猫TNF-α的具有阻断活性的单克隆抗体,本研究基于可溶性猫TNF-α(sTNFα)基因成功构建、表达及纯化了重组质粒pET-28a-sTNFα,并进一步对重组蛋白诱导表达的条件进行摸索和优化,鉴定其生物活性;其次将猫TNF-α重组蛋白作为免疫原进行小鼠免疫、细胞融合、阻断活性杂交瘤细胞的筛选和腹水制备,并对获得的单克隆抗体进行鉴定。结果显示,成功构建了pET-28a-sTNFα质粒并通过大肠杆菌系统表达出具有生物活性的猫TNF-α重组蛋白,相对分子质量为34 kDa,半数细胞活性抑制质量浓度为1.22μg/L;成功筛选出3株具有阻断活性的单克隆抗体(A6-B7-9、H5-E2-94和C8-A10-100),Western blot检测显示3株单抗均能与TNF-α特异性结合,效价可达1∶512000,3株单抗在质量浓度为100 mg/L时,对TNF-α的拮抗效果最强。本研究筛选了猫TNF-α的阻断活性抗体,以期为由猫TNF-α介导的相关疾病的防治提供新型的安全的有效的候选药物。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子-Α 单克隆抗体 阻断活性 重组蛋白表达 猫

原文传递

乙型脑炎病毒NS1蛋白亚单位疫苗制备及其免疫效果评价 被引量：2

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作者 钮俊俊 魏宁 +8 位作者 朱硕 陈涛 杜冰洁 周登元 李秋燕 张路平 叶静 司有辉 曹胜波 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期512-518,525,共8页

为制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)NS1蛋白亚单位疫苗并评价其免疫效果,将JEV NS1基因克隆至杆状病毒表达载体,构建重组杆状病毒。将重组杆状病毒感染High5细胞,收集培养基上清,并用镍柱亲和方法纯化NS1蛋白。将纯化... 为制备乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)NS1蛋白亚单位疫苗并评价其免疫效果,将JEV NS1基因克隆至杆状病毒表达载体,构建重组杆状病毒。将重组杆状病毒感染High5细胞,收集培养基上清,并用镍柱亲和方法纯化NS1蛋白。将纯化的NS1蛋白与弗式佐剂制成亚单位疫苗,并通过小鼠免疫接种和攻毒模型评价该疫苗的免疫效果。结果表明,50,100,200μg/只剂量的亚单位疫苗免疫组的保护率分别为70%,80%,90%;同时,较非疫苗免疫组,NS1亚单位疫苗免疫可以显著降低小鼠脑组织中的病毒载量和炎症因子的表达,减轻小鼠的神经症状和脑部病理损伤。以上结果表明NS1蛋白作为亚单位疫苗具有较好的免疫保护效果,具有开发为JEV新型疫苗的潜力。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 NS1蛋白 亚单位疫苗 杆状病毒表达系统

原文传递

华中地区犬细小病毒流行病学调查及其VP2基因序列分析 被引量：1

16

作者 陈林文 戴佩华 +6 位作者 曹龙龙 叶佳雯 惠晓晨 汪文渊 周登元 曹胜波 李秋燕 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1627-1634,共8页

为了解华中地区犬细小病毒2型(CPV-2)的流行趋势以及变异情况,本研究于2020年9月至2022年1月间采集华中地区的418份疑似感染犬细小病毒的粪便样品,通过PCR方法检测,利用F81细胞进行病毒分离、间接免疫荧光试验,并对分离病毒的VP2基因进... 为了解华中地区犬细小病毒2型(CPV-2)的流行趋势以及变异情况,本研究于2020年9月至2022年1月间采集华中地区的418份疑似感染犬细小病毒的粪便样品,通过PCR方法检测,利用F81细胞进行病毒分离、间接免疫荧光试验,并对分离病毒的VP2基因进行氨基酸序列及其同源性和遗传进化分析。结果显示,358份病料检测出CPV-2,阳性率为85.65%。病料接种F81细胞后,有23份阳性样品出现明显细胞病变,间接免疫荧光试验观察到明显荧光。VP2基因序列分析结果表明,分离毒株中有New-CPV-2a型12株、New-CPV-2b型5株、CPV-2c型6株。核苷酸同源性为97.9%~99.8%,氨基酸同源性为95.9%~100.0%。遗传进化分析结果显示,分离毒株与国内分离株、伊朗、巴西分离株亲缘关系较近,与意大利、日本、阿根廷分离株亲缘关系较远。本研究为华中地区犬细小病毒防控及研制高效疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 犬细小病毒 VP2基因 遗传进化分析

原文传递

华中地区犬瘟热病毒分离鉴定及其H基因遗传进化分析

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作者 叶佳雯 戴佩华 +6 位作者 曹龙龙 陈林文 惠晓晨 汪文渊 李秋燕 曹胜波 周登元 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期207-215,共9页

为了解华中地区犬源CDV所属谱系、流行及遗传变异情况,本试验通过RT-PCR方法对华中地区2020年9月~2022年1月收集的418份犬源病料进行了检测,其中83份样品为CDV阳性,阳性率为19.9%。将阳性样品接种Vero细胞,并通过间接免疫荧光方法鉴定,... 为了解华中地区犬源CDV所属谱系、流行及遗传变异情况,本试验通过RT-PCR方法对华中地区2020年9月~2022年1月收集的418份犬源病料进行了检测,其中83份样品为CDV阳性,阳性率为19.9%。将阳性样品接种Vero细胞,并通过间接免疫荧光方法鉴定,成功获得13株CDV分离株。对13株CDV分离株H基因进行测序,并与32株CDV参考毒株进行同源性分析、遗传进化分析以及H蛋白潜在N糖基化位点预测分析。结果表明,分离到的13株野毒株与参考毒株相比,核苷酸同源性为87.1%~99.8%,氨基酸同源性为82.2%~100%;其中8株分离株在基因型上归属于Asia-1型,5株归属于America-1型;H基因抗原性预测分析表明,分离到的13株野毒株具有6~9个潜在的N糖基化位点。本研究为本土流行性CDV毒株的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 犬瘟热 犬瘟热病毒 H基因 同源性分析 遗传进化分析

原文传递

重组猫干扰素ω2的原核表达及抗病毒效果检测

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作者 陆衍波 魏宁 +3 位作者 曹龙龙 曹胜波 周登元 李秋燕 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期997-1002,共6页

为开发具有高抗病毒活性且经济的猫用干扰素产品,弥补国内猫用干扰素市场的空白,笔者以原核表达的形式生产重组猫干扰素ω2,将猫干扰素ω2成熟肽基因克隆至pET28-SUMO载体,通过质粒在N端携带的水溶性SUMO标签与干扰素的融合表达来实现... 为开发具有高抗病毒活性且经济的猫用干扰素产品,弥补国内猫用干扰素市场的空白,笔者以原核表达的形式生产重组猫干扰素ω2,将猫干扰素ω2成熟肽基因克隆至pET28-SUMO载体,通过质粒在N端携带的水溶性SUMO标签与干扰素的融合表达来实现蛋白在工程菌中的可溶性表达。优化表达体系后的重组猫干扰素ω2产量得到有效提高,重组蛋白产量可高达90 mg/L菌液。抗病毒活性测试结果表明,用该方法生产的猫重组干扰素ω2可显著激活干扰素下游各信号分子的表达,其抗VSV-GFP效价高达1010.23 U/mg,显著高于市面同类产品(P<0.001),同时对猫杯状病毒(FCV)也具有较好的抗病毒功效。本研究提供了一种具有高抗病毒活性的重组猫科动物干扰素ω2,为国内猫干扰素产品提供了更为优质的选择。 展开更多

关键词 猫干扰素ω2 原核表达 抗病毒药物 猫杯状病毒

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