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猪链球菌2型溶血素重组亚单位疫苗的研制 被引量：3
1
作者 吉利伟 蔡伟刚 +3 位作者 刘民星 杨秋实 孔建涛 范红结 《畜牧与兽医》 北大核心 2009年第10期57-59,共3页
根据已报道的猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)重要毒力因子溶血素的基因序列,利用DNAstar软件选择抗原性好的一段基因序列,设计并合成该段序列的1对特异性引物。以四川强毒株ZY05719的基因组为模板,PCR扩增后定向克隆至pET-3... 根据已报道的猪链球菌2型(Streptococcus suistype 2,SS2)重要毒力因子溶血素的基因序列,利用DNAstar软件选择抗原性好的一段基因序列,设计并合成该段序列的1对特异性引物。以四川强毒株ZY05719的基因组为模板,PCR扩增后定向克隆至pET-32 a表达载体中;重组质粒转化至原核系统大肠杆菌B21中,经诱导表达目的蛋白后,利用小鼠进行免疫效果的测定和佐剂筛选,结果使用ISA206佐剂的溶血素(Hly)蛋白亚单位疫苗保护率高。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶血素 克隆 原核表达 免疫效果
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鸡肝原代细胞药物代谢模型的建立与优化 被引量：6
2
作者 刘丽 季辉 +3 位作者 彭麟 阮祥春 吉利伟 江善祥 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期127-133,共7页
[目的]建立成年鸡原代肝细胞的药物代谢模型并对其进行优化。[方法]以改进的二步灌流法分离8~12周龄的雄性黄羽鸡肝细胞,比较在不同细胞基础培养液条件下鸡肝细胞体外培养的情况,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态,利用MTT检测法绘制生长... [目的]建立成年鸡原代肝细胞的药物代谢模型并对其进行优化。[方法]以改进的二步灌流法分离8~12周龄的雄性黄羽鸡肝细胞,比较在不同细胞基础培养液条件下鸡肝细胞体外培养的情况,利用倒置显微镜观察肝细胞的形态,利用MTT检测法绘制生长曲线,测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性,用q PCR和Western blot测定肝细胞中CYP450酶亚型CYP1A4、CYP1A5和CYP3A37 mRNA相对表达水平和3种酶蛋白的表达量。[结果]离体灌流操作简便,获得的细胞存活率高达90%以上;用含0.5 mg·L^-1牛胰岛素、10 g·L^-1双抗（100 U·m L^-1青霉素和链霉素）和体积分数为10%胎牛血清的DMEM基础培养液体外培养鸡肝细胞,贴壁培养时可见到肝细胞较为明显的分化过程,贴壁后呈上皮细胞样生长,多角形,胞浆内容物均匀丰富,细胞核清晰透亮,少数有双核,细胞生长状态良好。生长曲线和LDH活性测定结果显示：培养3~5 d时细胞状态稳定,并且在肝原代细胞培养的8 d内,CYP1A4、CYP1A5和CYP3A37 mRNA相对表达水平和蛋白的表达量没有显著差异。[结论]以改进的二步灌流法分离鸡肝细胞操作简便,分离的鸡肝原代细胞存活率高,用含0.5 mg·L^-1胰岛素、100 U·m L^-1青霉素、100μg·m L^-1链霉素和10%胎牛血清的DMEM基础培养液体外培养鸡肝原代细胞效果最好,培养3~5 d是进行体外药物代谢等试验的最佳时机。 展开更多
关键词 成年鸡 离体灌流 鸡肝细胞 药物代谢模型 优化
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某奶牛养殖场2022年上半年疾病调查与分析 被引量：1
3
作者 宋林卿 吉利伟 +5 位作者 艾俊杰 何薇 冯慧勇 海婷玉 阿力米热 戴小华 《当代畜禽养殖业》 2023年第1期17-19,22,共4页
为了解新疆呼图壁某奶牛养殖场荷斯坦奶牛常见疾病的发病情况,通过实地访谈、查阅奶牛事件信息记录等方法,对2022年上半年呼图壁某奶牛养殖场3463头荷斯坦奶牛进行调查,分析奶牛常见的产科疾病、消化系统疾病、外科疾病和呼吸系统疾病... 为了解新疆呼图壁某奶牛养殖场荷斯坦奶牛常见疾病的发病情况,通过实地访谈、查阅奶牛事件信息记录等方法,对2022年上半年呼图壁某奶牛养殖场3463头荷斯坦奶牛进行调查,分析奶牛常见的产科疾病、消化系统疾病、外科疾病和呼吸系统疾病的发病率,从而探究该奶牛养殖场常见病的发病规律,分析发病原因,为奶牛养殖场制定科学的防治措施提供参考。结果发现:3463头奶牛中患产科疾病、消化系统疾病、外科疾病及呼吸系统疾病的牛分别为497、315、314和100头,发病率分别为14.35%、9.10%、9.07%和2.89%。患病奶牛中产科疾病发病率最高,为40.54%;消化系统疾病和外科疾病发病率相近,分别为25.69%和25.61%;呼吸系统疾病率最低,为8.16%。产科疾病主要有乳房炎、流产、子宫内膜炎和胎衣不下,发病率分别为8.84%、2.08%、1.36%和1.21%;消化系统疾病主要有腹泻、肠炎、前胃弛缓和四胃变位,发病率分别为4.71%、1.50%、1.01%和0.98%;外科疾病主要有蹄病、拉伤和外伤,发病率分别为7.80%、0.35%和0.32%;呼吸系统疾病有感冒和肺炎,发病率分别为1.82%和1.07%。结果表明:2022年上半年该奶牛养殖场以产科疾病最为常见,乳房炎、蹄病、腹泻、流产和感冒的发病率较高。故提示该养殖场今后防治工作重点要以产科类疾病为主,其次是消化系统疾病和外科疾病,呼吸系统疾病虽发病率较低但不能忽视。 展开更多
关键词 新疆 荷斯坦奶牛 疾病 发病规律 病因
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乙醇和丙二醇单用与联用对曲安奈德喷雾溶液透皮性能的影响
4
作者 马巧艳 李荣 +3 位作者 李凤娇 孙茹 戴小华 吉利伟 《药学实践与服务》 CAS 2023年第12期733-736,共4页
目的 对曲安奈德喷雾溶液进行体外透皮试验,考察乙醇和丙二醇单用与联用时对曲安奈德喷雾溶液体外透皮功能的影响。方法 选取新西兰白兔腹部皮肤,用Franz扩散池法对曲安奈德喷雾溶液进行体外透皮试验,用高效液相色谱法(HPLC)测定曲安奈... 目的 对曲安奈德喷雾溶液进行体外透皮试验,考察乙醇和丙二醇单用与联用时对曲安奈德喷雾溶液体外透皮功能的影响。方法 选取新西兰白兔腹部皮肤,用Franz扩散池法对曲安奈德喷雾溶液进行体外透皮试验,用高效液相色谱法(HPLC)测定曲安奈德含量,用单因素方差分析法对各组间的透皮吸收速率进行对比分析。结果 乙醇和丙二醇联用时的透皮吸收速率均显著高于单用时的透皮吸收速率(P<0.05),且乙醇和丙二醇联用时对曲安奈德喷雾溶液的促透作用顺序为10%乙醇+25%丙二醇>10%乙醇+20%丙二醇>15%乙醇+25%丙二醇>15%乙醇+20%丙二醇。结论 10%乙醇和25%丙二醇联用时可使曲安奈德喷雾溶液的透皮功能达到最佳化。 展开更多
关键词 曲安奈德喷雾溶液 体外透皮试验 FRANZ扩散池 高效液相色谱法
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犬血浆中非罗考昔高效液相色谱检测方法的建立
5
作者 王天琪 刘世操 +2 位作者 谢书宇 吉利伟 戴小华 《中兽医医药杂志》 CAS 2023年第2期21-25,共5页
建立测定犬血浆中非罗考昔含量的高效液相色谱方法。以蛋白沉淀法处理血样,流动相为乙腈∶0.025%三氟乙酸(V∶V)=51∶49,检测波长为290 nm,柱温35℃,流速为1 mL/min,进样量为50μL,经ZORBAX Stable Bond-C18(4.6 mm×150.0 mm,5μm... 建立测定犬血浆中非罗考昔含量的高效液相色谱方法。以蛋白沉淀法处理血样,流动相为乙腈∶0.025%三氟乙酸(V∶V)=51∶49,检测波长为290 nm,柱温35℃,流速为1 mL/min,进样量为50μL,经ZORBAX Stable Bond-C18(4.6 mm×150.0 mm,5μm)色谱柱分离,进行色谱分析。结果显示,本方法专属性良好,非罗考昔的血浆浓度在0.05~4.00μg/mL内线性关系良好,检测限为0.025μg/mL,定量限为0.050μg/mL,验证样品的回收率为81.81%~114.26%,批内变异系数在7.74%以下,批间平均变异系数在11.68%以下。本方法简单、准确、快速,可用于犬血浆中非罗考昔的检测分析以及该药物的药动学和相对生物利用度等研究。 展开更多
关键词 非罗考昔 高效液相色谱法 犬血浆
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高效液相色谱-串联质谱法测定牛肉中泰拉霉素代谢物残留量研究 被引量：3
6
作者 杨修镇 陈玲 +4 位作者 尹伶灵 张呈军 牛华星 懂玲玲 吉利伟 《山东畜牧兽医》 2019年第9期1-4,共4页
建立牛肉中泰拉霉素代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法,色谱柱为C18(100mm×2.1mm,1.7μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子检测模式(ESI^+)和多反应监测(MRM)模式测定,基质匹配标准曲... 建立牛肉中泰拉霉素代谢物的高效液相色谱-串联质谱检测方法,色谱柱为C18(100mm×2.1mm,1.7μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源正离子检测模式(ESI^+)和多反应监测(MRM)模式测定,基质匹配标准曲线法定量。结果表明,泰拉霉素代谢物进样浓度在1~100ng/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r^2=0.9999);方法检出限和定量限分别为10μg/kg和30μg/kg;定量限、1/2MRL、MRL和2MRL 4个添加水平下,回收率在70%~110%之间,相对标准偏差小于10%。本方法简便、准确、快速、灵敏,适用于牛肉中泰拉霉素代谢物残留量的检测。 展开更多
关键词 高效液相色谱-串联质谱 牛肉 泰拉霉素代谢物
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盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂质量一致性评价研究 被引量：1
7
作者 赵春蕊 张素卿 +1 位作者 吉利伟 董玲玲 《畜禽业》 2022年第6期27-29,共3页
目的考察盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂仿制药与原研药的质量一致性。方法依据农业部公告第2485号盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂质量标准,对多批仿制药与原研药的各项质量指标及样品稳定性进行全面的比对研究。结果两者各项检测指... 目的考察盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂仿制药与原研药的质量一致性。方法依据农业部公告第2485号盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂质量标准,对多批仿制药与原研药的各项质量指标及样品稳定性进行全面的比对研究。结果两者各项检测指标均无明显差异。结论盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂仿制药质量稳定性好,与原研药质量具有一致性。 展开更多
关键词 盐酸林可霉素硫酸大观霉素预混剂 比对研究 质量一致性
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Caco-2细胞模型及其P-gp转运功能研究 被引量：3
8
作者 刘丽 吉利伟 +3 位作者 季辉 彭麟 阮祥春 江善祥 《畜牧与兽医》 北大核心 2015年第4期86-90,共5页
Caco-2细胞单层模型是研究药物吸收特性的重要工具,而P-糖蛋白(P-gp)对许多药物的药代动力学和药效学具有调控作用。对Caco-2细胞单层模型及P-gp功能进行研究,以便研究药物的体外转运机制。常规培养下,Caco-2细胞以2×105个/m L的... Caco-2细胞单层模型是研究药物吸收特性的重要工具,而P-糖蛋白(P-gp)对许多药物的药代动力学和药效学具有调控作用。对Caco-2细胞单层模型及P-gp功能进行研究,以便研究药物的体外转运机制。常规培养下,Caco-2细胞以2×105个/m L的密度接种400μL于Millicell培养皿中,通过观察细胞形态,绘制生长曲线,测定跨膜电阻值,检测细胞极性和罗丹明转运效率等对构建的细胞模型进行验证。结果:培养21 d后,细胞间形成紧密连接;跨膜电阻值达到恒定值,为(849±17)Ω·cm2;肠腔侧碱性磷酸酶活性显著高于基底侧酶活性,细胞形成极性分化,P-gp底物罗丹明在Caco-2单层细胞的表观通透系数(Papp)比值大于1.5(P(B→A)/P(A→B)>1.5),加入P-gp抑制剂后P(B→A)/P(A→B)小于1.5。研究表明,构建的Caco-2细胞模型结构和生化作用与小肠上皮细胞相似,细胞模型具有完整性、紧密性,细胞发生极性分化形成肠绒毛结构,且P-gp功能良好,可作为研究药物体外转运的模型。 展开更多
关键词 CACO-2细胞模型 P-糖蛋白 体外转运 跨膜电阻 碱性磷酸酶
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蜂王浆水溶蛋白对高糖诱导人脐静脉内皮细胞的保护作用
9
作者 冯彤彤 张慧 +5 位作者 陈坤 段鹏 吉利伟 高金花 张晓峰 郭洪梅 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期392-394,共3页
目的研究蜂王浆水溶蛋白对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制。方法采用CCK-8法检测蜂王浆水溶蛋白对HUVEC细胞增殖活性的影响;酶标法检测蛋白对超氧化物歧化酶(SOD)分泌的影响;酶联免疫吸附法检测蛋白对肿瘤坏死因子... 目的研究蜂王浆水溶蛋白对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制。方法采用CCK-8法检测蜂王浆水溶蛋白对HUVEC细胞增殖活性的影响;酶标法检测蛋白对超氧化物歧化酶(SOD)分泌的影响;酶联免疫吸附法检测蛋白对肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-4(IL-4)分泌的影响;流式细胞术检测蛋白对活性氧分泌的影响;Hoechst-PI双染法检测蛋白对细胞凋亡及坏死的影响。结果高糖损伤的HUVEC经蜂王浆水溶蛋白处理后,细胞的形态明显改善,增殖活性提高,SOD分泌增加,清除活性氧的能力提高,TNF-α、IL-4的分泌减少,细胞凋亡减少,但对细胞坏死率无影响。结论蜂王浆水溶蛋白能抗高糖所致HUVEC的损伤,其机制可能与提高细胞抗氧化能力、减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 蜂王浆水溶蛋白 细胞增殖 超氧化物歧化酶 炎症因子 细胞凋亡 活性氧 细胞坏死
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