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浅谈黄土地区隧洞开挖技术 被引量:2
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作者 张贵忠 付仕保 +1 位作者 刘隹 董安群 《西北水资源与水工程》 1998年第1期56-60,共5页
根据引冯济羊工程隧洞开挖施工实践,浅谈黄土地区隧洞开挖衬砌技术,供类似工程参考。
关键词 黄土地区 隧洞 开挖技术 引水工程
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垃圾处理规划的非量化因素研究 被引量:1
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作者 吴文伟 刘隹 《环境科学研究》 EI CAS CSCD 1996年第4期46-49,共4页
在影响垃圾处理规划诸因素中,存在着许多非量化因素,用Fuzzy set集合理论,对这些非量化因素按其重要程度进行了排序和评价,为确定最优方案提供了科学依据。
关键词 环境卫生 规划 垃圾处理 非量化因素
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APC蛋白功能区域重组质粒的构建及其在结肠癌细胞株HCT-116中的表达
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作者 吕粱 霍继荣 +3 位作者 刘隹 张宏斌 武捷 王捷 《肿瘤研究与临床》 CAS 2009年第5期291-294,共4页
目的构建并鉴定含有APC蛋白不同功能区域的真核细胞表达载体pEGFP—N3-APC1-5,转染人类结直肠癌细胞HCT-116,观察重组质粒在细胞内的表达。方法根据APC基因的功能结构以及APC突变簇集区的特点,设计特异性引物扩增APC基因特异性的功... 目的构建并鉴定含有APC蛋白不同功能区域的真核细胞表达载体pEGFP—N3-APC1-5,转染人类结直肠癌细胞HCT-116,观察重组质粒在细胞内的表达。方法根据APC基因的功能结构以及APC突变簇集区的特点,设计特异性引物扩增APC基因特异性的功能区域片段。将扩增出的5个APC片段克隆到pEGFP—N3载体的N端,经测序分析对重组质粒pEGFP—N3-APC1-5进行鉴定。使用脂质体转染法将重组质粒转染人类结直肠癌细胞HCT-116,通过观察细胞中绿色荧光蛋白的表达情况来检测APC功能区域在细胞内的表达。以RT-PCR法进一步验证重组质粒在细胞中的表达。结果构建5个pEGFP—N3-APC结构区域的重组真核表达载体,重组真核表达载体转染HCT—116细胞后,细胞中均可见绿色荧光蛋白的表达。RT—PCR结果显示,5个重组质粒在HCT—116细胞中均可表达。结论真核细胞表达载体pEGFP—N3-APCI~5的成功构建,为进一步研究其在细胞内的功能,筛选结直肠癌基因治疗的有效且易于基因操作的靶标片段提供了基础。 展开更多
关键词 基因 APC 重组质粒 聚合酶链反应 转染
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