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齐墩果烷型三萜皂苷生物合成及关键细胞色素P450基因研究进展
1
作者 尹雨晴 敖志杰 +4 位作者 周新茹 李旭东 罗斯成 梁海雪 刘湘丹 《中医药导报》 2025年第2期112-119,共8页
齐墩果烷型三萜皂苷是多种药用植物的有效成分,药理作用丰富,市场需求量大。齐墩果烷型三萜皂苷生物合成量少,不足以满足市场需求,异源合成为其提供了新思路。齐墩果烷型三萜皂苷生物合成途径分3个阶段,即积累前体、合成骨架、皂苷合成... 齐墩果烷型三萜皂苷是多种药用植物的有效成分,药理作用丰富,市场需求量大。齐墩果烷型三萜皂苷生物合成量少,不足以满足市场需求,异源合成为其提供了新思路。齐墩果烷型三萜皂苷生物合成途径分3个阶段,即积累前体、合成骨架、皂苷合成。其中细胞色素P450(CYP450)为皂苷合成过程中关键的下游修饰基因,可影响底物转化、中间代谢产物生成、合成速率及产量。综述近年来齐墩果烷型三萜皂苷异源合成及生物合成途径关键CYP450基因的最新研究进展,探讨其研究意义及存在的问题,发现其异源合成存在基因表达调控不明确、代谢途径多样、工业化生产难度大等挑战,未来可通过优化宿主细胞代谢途径,提高目标产物合成效率,以实现齐墩果烷型三萜皂苷的高效生产。 展开更多
关键词 齐墩果烷型三萜皂苷 细胞色素P450 萜类合成关键基因 异源合成 综述
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灰毡毛忍冬bZIP25基因的克隆及其表达模式分析 被引量：2
2
作者 王珊 曾娟 +6 位作者 谢瑜 周日宝 刘湘丹 童巧珍 龙雨青 陈言 刘小丽 《中南药学》 CAS 2024年第2期335-340,共6页
目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧... 目的克隆灰毡毛忍冬bZIP25基因序列全长,并进行生信分析及表达模式分析,以初步探索其在灰毡毛忍冬中的生物学功能。方法通过逆转录PCR技术克隆bZIP25基因的序列全长,采用生物信息学分析方法对bZIP25及其编码的蛋白进行分析。运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定其在茎、叶及七个花期花中的表达水平。结果克隆得到LmbZIP25基因(OR551766),其编码191个氨基酸,具有典型的bZIP家族结构,在bZIP结构域中与其他植物同源性较高。LmbZIP25基因具有组织特异性,在茎中的表达量显著高于花和叶,在七个花期中黄色花蕾期的表达量最高。结论克隆得到LmbZIP25基因全长,分析其在不同器官和不同花期的表达差异,为进一步探索其在灰毡毛忍冬中花发育中的功能奠定了研究基础。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 bZIP25 基因克隆 生物信息学分析 表达模式分析
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灰毡毛忍冬MADS-box基因家族鉴定与CMB1基因克隆 被引量：3
3
作者 付学森 刘紫璇 +4 位作者 王玲 龙雨青 曾娟 周日宝 刘湘丹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2024年第3期383-394,共12页
目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,... 目的鉴定灰毡毛忍冬Lonicera macranthoides MADS-box家族基因并进行生物信息学分析与表达模式验证,克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬MADS-box家族成员CMB1全长。方法基于转录组数据,利用在线工具对灰毡毛忍冬MADS-box进行生物信息学分析,并利用qRT-PCR验证MADS-box基因在不同品种中的表达模式,通过RT-PCR、RACE技术克隆湘蕾型和野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长。结果28个灰毡毛忍冬MADS-box蛋白长度为89~359 aa,碱性蛋白占比85.7%,不稳定蛋白占比96.4%,亲水性蛋白占比96.4%,均定位于细胞核,均为无跨膜结构的非分泌蛋白。转录组显示,与野生型比较,湘蕾型中28个MADS-box基因有17.86%表达下调,MIKCC型基因中有18.75%表达下调。克隆得到在两个品种的灰毡毛忍冬花中高度特异性表达的CMB1基因全长,均包含一个738 bp的ORF,编码245个氨基酸。CMB1基因在两个品种的花中表达量存在显著差异(P<0.01),且与茎、叶相比,在花中高度特异性表达(P<0.01)。结论基于灰毡毛忍冬转录组数据,鉴定了28个MADS-box家族基因,克隆得到湘蕾型与野生型灰毡毛忍冬CMB1基因全长,为进一步研究灰毡毛忍冬花发育、优良表型形成的分子机制提供研究基础与理论依据。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 MADS-box基因家族 表达分析 CMB1基因 基因克隆 表型变异
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灰毡毛忍冬SS基因的克隆及表达分析
4
作者 陈勋 王珊 +3 位作者 龙雨青 曾娟 周日宝 刘湘丹 《安徽农业科学》 CAS 2024年第21期71-77,共7页
[目的]克隆灰毡毛忍冬SS基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。[方法]提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆LmSS基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶... [目的]克隆灰毡毛忍冬SS基因全长序列,并进行生物信息学和表达模式分析。[方法]提取灰毡毛忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆LmSS基因的全长cDNA序列;运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用qRT-PCR测定灰毡毛忍冬茎、叶和不同花期花中该基因的相对表达量。[结果]克隆的LmSS基因开放阅读框(ORF)长度为1245 bp,编码414个氨基酸,属于亲水性蛋白,定位于细胞质中,具有典型的多聚异戊二烯基合成酶活性结构域,与其他植物SS基因具有较高同源性。LmSS基因在灰毡毛忍冬不同花期和器官中表达有组织特异性。[结论]该研究成功地克隆灰毡毛忍冬中的SS基因,为进一步研究该基因的功能奠定基础,同时为探究灰毡毛忍冬皂苷生物合成和调节机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 鲨烯合酶(SS) 基因克隆 生物信息学 表达分析
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百合非药用部位的资源利用现状与展望
5
作者 李晓玲 石雨荷 +6 位作者 侯超文 刘泽湘 龚秀娟 蔡嘉洛 黄莉 刘湘丹 童巧珍 《中国野生植物资源》 CSCD 2024年第10期98-104,116,共8页
百合是一种重要的药食两用植物,也是我国重要的野生资源,在我国具有悠久的栽培和应用历史,因其出色的观赏、食用和药用价值而在世界范围内广泛种植,但长期以来产量巨大的非药用部位,却被当作废料大量丢弃,不仅污染环境,也在一定程度上... 百合是一种重要的药食两用植物,也是我国重要的野生资源,在我国具有悠久的栽培和应用历史,因其出色的观赏、食用和药用价值而在世界范围内广泛种植,但长期以来产量巨大的非药用部位,却被当作废料大量丢弃,不仅污染环境,也在一定程度上造成了资源浪费。研究表明百合非药用部位富含酚酸、黄酮和多糖等化合物,具有抗氧化、抗炎、保肝和降血糖等功效,因此,为促进资源的有效利用和可持续发展,本文就百合茎、叶、花、珠芽的活性成分和资源利用现状等进行综述,旨在为其深入研究、资源产业化开发利用提供参考,同时为中药生态农业的生态功能提升及通过生态功能助力经济功能发展提供思考和借鉴。 展开更多
关键词 百合 非药用部位 活性成分 资源化利用
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不同来源百合药材的质量评价及分析 被引量：11
6
作者 刘湘丹 陈勋 +4 位作者 刘畅宇 裴刚 周日宝 王智 陈乃宏 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第4期480-484,共5页
目的基于水分、浸出物、多糖、Regaloside A含量进行不同来源百合药材质量评价及分析,为多基原百合药材鉴别及质量评价提供依据。方法按照2015版《中华人民共和国药典》方法测定水分、浸出物;采用紫外分光光度法测定百合多糖含量;采用... 目的基于水分、浸出物、多糖、Regaloside A含量进行不同来源百合药材质量评价及分析,为多基原百合药材鉴别及质量评价提供依据。方法按照2015版《中华人民共和国药典》方法测定水分、浸出物;采用紫外分光光度法测定百合多糖含量;采用高效液相色谱法测定Regaloside A含量:Supersil ODS-B(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,柱温为30℃,进样量为10μL,流速为1.0 mL/min,流动相0.1%磷酸水溶液∶乙腈=85∶15(V/V),检测波长为310 nm。结果 54批百合样品水分均≤13%;43批百合样品浸出物≥18%,11批百合样品浸出物<18%;54批百合样品多糖含量区间为9.89%～23.42%;54批百合样品Regaloside A含量区间为0.019%～0.599%。结论所有百合样品水分均符合药典要求;11批百合药材浸出物未达到药典要求,且均为龙牙百合药材;17批百合多糖含量未达湖南省地方标准;卷丹百合浸出物和Regaloside A含量均普遍高于市购龙牙百合药材。该研究为市场药用百合以卷丹百合为主提供了佐证,为不同来源百合鉴别及百合药材质量控制提供了参考依据。 展开更多
关键词 百合 水分 浸出物 多糖 Regaloside A 含量测定 质量评价
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不同产地人工栽培黄花石蒜不同器官中加兰他敏含量测定 被引量：7
7
作者 刘湘丹 王姣 +3 位作者 李凤娟 周日宝 王朝晖 刘笑蓉 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第5期31-33,72,共4页
目的探索人工栽培黄花石蒜中加兰他敏的最佳采收器官及最适产地,寻找高含量的药材原料。方法采用HPLC法测定人工栽培黄花石蒜不同器官及不同产地中加兰他敏含量。结果采用SPSS 17.0软件Corrected Model(模型检验)进行统计学分析表明:黄... 目的探索人工栽培黄花石蒜中加兰他敏的最佳采收器官及最适产地,寻找高含量的药材原料。方法采用HPLC法测定人工栽培黄花石蒜不同器官及不同产地中加兰他敏含量。结果采用SPSS 17.0软件Corrected Model(模型检验)进行统计学分析表明:黄花石蒜不同器官加兰他敏的含量差别具有显著统计学意义(P<0.001),其含量由高到低各产地均依次为:花>根>花葶>鳞茎,其3个产地加兰他敏平均含量依次为花(0.135%)>根(0.080%)>花葶(0.020%)>鳞茎(0.017%);不同产地黄花石蒜中加兰他敏含量差别无统计学意义(P>0.05)。结论黄花石蒜花中含量远远高于鳞茎中含量,每年都可采收,花可作为提取加兰他敏的药材原料,代替传统上使用的一次性采挖的鳞茎;3个产地人工栽培黄花石蒜中加兰他敏含量有细微差别,若以花作为药材原料,则大围山可作为最适种植区。 展开更多
关键词 黄花石蒜 加兰他敏 花 鳞茎 衡山 大围山
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镉低积累药用植物盆栽及大田筛选试验 被引量：6
8
作者 刘湘丹 王志辉 +3 位作者 刘笑蓉 彭美晨 王朝晖 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2017年第3期264-267,共4页
目的比较不同植物对重金属镉积累能力差异,筛选出镉低积累药用植物种类。方法以夏枯草、益母草、薄荷为供试材料,通过盆栽和大田试验,采用原子吸收光谱法测定植物中镉的含量。结果三种植物积累镉的能力存在差异,益母草>薄荷>夏枯... 目的比较不同植物对重金属镉积累能力差异,筛选出镉低积累药用植物种类。方法以夏枯草、益母草、薄荷为供试材料,通过盆栽和大田试验,采用原子吸收光谱法测定植物中镉的含量。结果三种植物积累镉的能力存在差异,益母草>薄荷>夏枯草。益母草在镉污染土壤中其地上部分镉含量随土壤镉浓度增高而增高,而生长不受影响,属于抗性植物。在镉胁迫下,薄荷、夏枯草生长受到抑制,植物中镉含量较低,且随土壤镉浓度增加植物中镉含量变化较小,属于镉低积累植物。结论益母草为镉高积累植物,且生长不受影响,可以作为富集植物治理镉污染;薄荷中镉主要积累在地下部分,而其以地上部分入药,夏枯草为镉低积累植物,两者均为可在镉污染地区种植的药用植物。 展开更多
关键词 镉 低积累 药用植物 筛选 夏枯草 益母草 薄荷
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适用于基因全长克隆的灰毡毛忍冬不同器官总RNA提取方法筛选 被引量：6
9
作者 刘湘丹 徐玉琴 +2 位作者 王珊 童巧珍 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第12期60-63,共4页
目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅... 目的获取灰毡毛忍冬不同器官总RNA的最佳提取方法。方法以灰毡毛忍冬叶、茎、花蕾为材料,分别采用SDS法、Trizol法、改良CTAB法、多糖多酚试剂盒法提取总RNA,比较分析实验结果。结果 SDS法不适用于三种器官样品总RNA的提取;Trizol法仅适用于叶总RNA的提取;改良CTAB法对茎总RNA提取效果最佳;而多糖多酚试剂盒法提取的花蕾总RNA质量高、完整性较好,且通过RT-PCR扩增能获得特异性条带。结论 Trizol法最适于灰毡毛忍冬叶总RNA提取;改良CTAB法最适于茎总RNA提取;多糖多酚试剂盒法最适于花蕾总RNA提取;3种方法提取出来的总RNA均能满足灰毡毛忍冬中相关基因全长克隆及时空表达分析的要求。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 基因全长克隆 总RNA 不同器官 提取方法
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不同来源百合HPLC指纹图谱建立 被引量：4
10
作者 刘湘丹 陈娅 +3 位作者 刘霞 周日宝 裴刚 陈乃宏 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期2195-2200,共6页
目的建立不同来源百合HPLC指纹图谱。方法百合75%甲醇提取物的分析采用Supersil ODS-B 100 A柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长310 nm。结果20批卷丹百合样品指纹图谱... 目的建立不同来源百合HPLC指纹图谱。方法百合75%甲醇提取物的分析采用Supersil ODS-B 100 A柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸水,梯度洗脱;柱温30℃;体积流量1.0 mL/min;检测波长310 nm。结果20批卷丹百合样品指纹图谱中有10个共有峰,相似度0.964~0.997;10批龙牙百合样品指纹图谱中有5个共有峰,相似度0.986~0.999之间;不同来源品种间相似度均小于0.9。结论该方法准确可靠,重复性好,可区分卷丹百合、龙牙百合、细叶百合、兰州百合及百合药材混伪品金百合。 展开更多
关键词 卷丹百合 龙牙百合 细叶百合 兰州百合 金百合 HPLC 指纹图谱
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百合鳞叶总DNA提取方法的改进 被引量：6
11
作者 刘湘丹 周日宝 +2 位作者 童巧珍 潘清平 高彦宁 《湖南中医药大学学报》 CAS 2007年第2期12-14,共3页
目的建立一种适合RAPD分析的百合鳞叶总DNA提取方法。方法在传统CTAB提取方法上,对其进行改良,进一步优化提取方法。结果用改良CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280在1.6-2.0之间,电泳条带清晰,其含量和纯度完全满足RAPD分析的要求。结论该... 目的建立一种适合RAPD分析的百合鳞叶总DNA提取方法。方法在传统CTAB提取方法上,对其进行改良,进一步优化提取方法。结果用改良CTAB法提取的总DNA的OD260/OD280在1.6-2.0之间,电泳条带清晰,其含量和纯度完全满足RAPD分析的要求。结论该方法提取百合鳞叶总DNA简便实用。 展开更多
关键词 百合鳞叶 改良CTAB DNA提取
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中药材重楼研究进展 被引量：24
12
作者 刘湘丹 王朝晖 +3 位作者 徐玉琴 周日宝 童巧珍 黄嘉琪 《中医药导报》 2015年第15期90-93,共4页
对重楼属植物资源分布、生长生态环境、化学成分、药理作用、内生菌、栽培技术和组织培养相关研究进行了综述,其中重楼的化学成分、药理作用等方面的研究已日臻成熟,结合相关组织培养研究基础可知重楼内生菌、药材毒性及组织培养等方面... 对重楼属植物资源分布、生长生态环境、化学成分、药理作用、内生菌、栽培技术和组织培养相关研究进行了综述,其中重楼的化学成分、药理作用等方面的研究已日臻成熟,结合相关组织培养研究基础可知重楼内生菌、药材毒性及组织培养等方面仍有较大的研究空间。 展开更多
关键词 重楼属 资源分布与生态环境 化学成分与药理作用 内生菌 栽培技术和组织培养
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中药资源与开发专业实践教学模式探析——以湖南中医药大学为例 被引量：5
13
作者 刘湘丹 周日宝 +3 位作者 王朝晖 童巧珍 刘笑蓉 王智 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第8期70-71,共2页
中药资源是中医治病、中药制药、中医药产业健康发展的物质基础,是国家的重要战略资源。近年来,随着人类医疗和保健产业的快速发展及世界范围内＂回归自然＂热潮的兴起,现代医药业、美容和保健品等行业对中药的需求与日俱增,过度采挖或... 中药资源是中医治病、中药制药、中医药产业健康发展的物质基础,是国家的重要战略资源。近年来,随着人类医疗和保健产业的快速发展及世界范围内＂回归自然＂热潮的兴起,现代医药业、美容和保健品等行业对中药的需求与日俱增,过度采挖或掠夺式开发导致资源逐年萎缩与资源有限性之间的矛盾日益加剧。 展开更多
关键词 中药资源与开发专业 实践教学模式 教学改革
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吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素成分含量对比分析 被引量：14
14
作者 刘湘丹 蔡嘉洛 +7 位作者 邹君华 郭婷 刘平安 张聪子 高昱 张亚利 易刚强 童巧珍 《中医药导报》 2016年第3期39-41,共3页
目的:通过建立的高效液相色谱法对吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素3个指标性成分含量进行测定,并进行对比分析。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱Agi Lent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(55:45);流速:1... 目的:通过建立的高效液相色谱法对吴茱萸及其炮制品中吴茱萸碱、吴茱萸次碱和柠檬苦素3个指标性成分含量进行测定,并进行对比分析。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱Agi Lent C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(55:45);流速:1 m L·min^(-1);检测波长:225 nm;柱温:25℃。结果:吴茱萸炮制品与生品相比较,3个指标性成分含量均下降,其中柠檬苦素含量下降较多。结论:吴茱萸炮制后对吴茱萸碱、吴茱萸次碱含量影响不大,对柠檬苦素含量影响较大。 展开更多
关键词 HPLC 吴茱萸碱 吴茱萸次碱 柠檬苦素 对比分析
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“以学生为中心”的理论维度与实践模式——以药用植物学课程的线上线下混合式金课建设为例 被引量：4
15
作者 刘湘丹 王志辉 +1 位作者 刘笑蓉 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第6期1140-1143,共4页
探索线上线下混合式教学模式,就是把“以学生为中心”的理念贯穿始终,从课程目标、教学文案设计与撰写、教学资源运用、教学过程设计、评价体系建构等方面,做到在目标设置中驱动学生、在教案撰写中理解学生、在资源共享中激发学生、在... 探索线上线下混合式教学模式,就是把“以学生为中心”的理念贯穿始终,从课程目标、教学文案设计与撰写、教学资源运用、教学过程设计、评价体系建构等方面,做到在目标设置中驱动学生、在教案撰写中理解学生、在资源共享中激发学生、在教学互动中引领学生、在评价激励中完善学生。药用植物学课程内容理论和实践兼备,线上线下融合互补,“以学生为中心”贯穿每个环节,能有效促进教学改革,提高学生自主学习能力、促进个性化学习,达到了提升教学效果、提高人才培养质量的目的。 展开更多
关键词 混合式教学 药用植物学 金课建设 学生
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补肾通络方对rIL-1β诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β_1、CTGF的影响 被引量：5
16
作者 刘湘丹 袁林祥 +2 位作者 卢岳华 周日宝 童巧珍 《中国中西医结合肾病杂志》 2014年第12期1047-1051,共5页
目的:研究补肾通络方含药血浆对重组大鼠白细胞介素-1β(r IL-1β)干预的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖与TGF-β1和CTGF表达的影响,以探讨补肾通络方抗肾脏纤维化的分子作用机制。方法:体外培养GMCs,制备补肾通络方含药血浆,用白细胞介... 目的:研究补肾通络方含药血浆对重组大鼠白细胞介素-1β(r IL-1β)干预的大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖与TGF-β1和CTGF表达的影响,以探讨补肾通络方抗肾脏纤维化的分子作用机制。方法:体外培养GMCs,制备补肾通络方含药血浆,用白细胞介素对GMCs进行干预,MTT比色法检测GMCs增殖、ELISA检测TGF-β1蛋白表达,RT-PCR检测CTGF mRNA的表达。结果:与空白对照组比较,白细胞介素能诱导GMCs的增殖、促TGF-β1生成、上调CTGF表达;补肾通络方含药血浆能下调由白细胞介素介导的GMCs增殖、TGF-β1蛋白和CTGF mRNA的表达量,与白细胞介素组比差异有统计学意义(P<0.01),且呈时间依赖性。结论:补肾通络方抗肾脏纤维化作用与抑制TGF-β1和CTGF的表达,调节GMCs的功能密切相关。 展开更多
关键词 补肾通络方 肾脏纤维化 肾小球系膜细胞 细胞增殖 TGF-β1 CTGF
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灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因的克隆及表达分析 被引量：2
17
作者 刘湘丹 陈勋 +5 位作者 龙雨青 王志辉 刘笑蓉 王朝晖 童巧珍 周日宝 《湖南中医药大学学报》 CAS 2023年第7期1215-1224,共10页
目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的... 目的分别克隆灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因全长序列,并进行生物信息学和表达量分析,以揭示HQT2在灰毡毛忍冬与忍冬绿原酸生物合成中的可能功能。方法多糖多酚试剂盒法分别提取灰毡毛忍冬与忍冬花总RNA,通过RT-PCR和RACE技术克隆HQT2基因的全长c DNA序列,运用相关软件对该基因序列进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)分别测定灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花中相关基因的相对表达量;采用HPLC测定绿原酸含量并结合表达量做相关性分析。结果克隆得到LmHQT2(MH196564)和LjHQT2(MK294639),其开放阅读框长度均为1296 bp,编码431个氨基酸,生物信息学分析预测为亲水性蛋白,可能定位于细胞质中,属于氯霉素乙酰转移酶样结构域超家族;qRT-PCR结果显示,HQT2基因具有组织特异性,在灰毡毛忍冬与忍冬茎、叶及不同花期花器官中表达存在差异;绿原酸含量与基因相对表达量之间呈现一定的相关性。结论本研究成功克隆了灰毡毛忍冬与忍冬HQT2基因并探索其在不同器官中的表达模式,推测HQT2基因在灰毡毛忍冬与忍冬的绿原酸生物合成途径中发挥不同功能,为进一步研究该基因的功能及探究灰毡毛忍冬和忍冬绿原酸生物合成调节机制提供了研究基础。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 忍冬 HQT2 基因克隆 生物信息学分析 表达分析
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灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶显微特征比较研究 被引量：1
18
作者 刘湘丹 徐玉琴 +4 位作者 冯懿卉 周日宝 王朝晖 童巧珍 石国强 《湖南中医药大学学报》 CAS 2015年第9期33-36,共4页
目的为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶... 目的为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态(叶形、叶大小)和内部构造(毛茸、气孔指数等)均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。 展开更多
关键词 灰毡毛忍冬 灰毡毛忍冬变异株 忍冬 叶 显微特征
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不同提取方法中白术挥发油成分的比较研究 被引量：32
19
作者 周日宝 吴佳 +2 位作者 童巧珍 刘叶曼 刘湘丹 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期229-232,共4页
目的:对不同提取方法所得的白术挥发油成分进行比较研究。找出一种更利于白术挥发油提取的方法。方法:采用GC-MS对水蒸气蒸馏法、超声波溶剂提取法和超临界CO2萃取法所得白术挥发油成分进行分析。结果:水蒸气蒸馏法挥发油得率为1.01%,共... 目的:对不同提取方法所得的白术挥发油成分进行比较研究。找出一种更利于白术挥发油提取的方法。方法:采用GC-MS对水蒸气蒸馏法、超声波溶剂提取法和超临界CO2萃取法所得白术挥发油成分进行分析。结果:水蒸气蒸馏法挥发油得率为1.01%,共有18个峰鉴定15个;超声波提取法得率为1.60%,分离得24个峰鉴定20个;超临界CO2萃取法挥发油得率为2.32%,共得49个峰鉴定37个。挥发油中以苍术酮(Atractylon)含量最高,3种方法所得挥发油的已鉴定峰中有12个共有成分。结论:3种不同提取方法所得的白术挥发油成分存在差异但也有共同特征,超临界CO2萃取法提取白术挥发油得率更高,成分更加全面。 展开更多
关键词 白术 挥发油 提取方法 GC-MS
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紫云英还田量对烟田土壤微生物及酶的影响 被引量：18
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作者 肖嫩群 张洪霞 +4 位作者 成壮 张杨珠 谭周进 童巧珍 刘湘丹 《中国生态农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期711-715,共5页
为在翻耕条件下合理施用紫云英,保障农业的可持续性发展,定位试验研究了15000kg·hm-2、22500kg·hm-2、30000kg·hm-2紫云英还田和22500kg·hm-2紫云英还田减施化肥(施肥时扣除紫云英中氮、磷、钾)及紫云英不还田5个... 为在翻耕条件下合理施用紫云英,保障农业的可持续性发展,定位试验研究了15000kg·hm-2、22500kg·hm-2、30000kg·hm-2紫云英还田和22500kg·hm-2紫云英还田减施化肥(施肥时扣除紫云英中氮、磷、钾)及紫云英不还田5个处理对烟田土壤微生物数量、微生物活度、酶的影响。结果表明:烟草生育期内,不同处理好气性细菌数量呈前期均迅速上升、中期均稍有上升,但后期各有升降的趋势;烟草生长早期,紫云英还田减施化肥能增加好气性细菌数量。放线菌数量烟草生育前期略有下降,中期有所回升,后期又缓慢下降;烟草生长早期,紫云英还田能增加放线菌数量;整个烟草生育期,紫云英还田减施化肥可减少放线菌数量。真菌呈现烟草生育前中期迅速上升,后期缓慢下降的趋势;相对较少的紫云英还田量对土壤真菌数量增长的刺激作用较为明显。微生物活度呈烟草生育前期下降、中期趋于平稳、后期迅速升高达到最高点的趋势;烟草成熟期,紫云英还田的微生物活度明显高于不还田处理,增加紫云英还田量,微生物活度增加,但紫云英还田减施化肥会降低微生物活度。土壤纤维素酶活性以烟草旺长期为界点,表现出前期增加、后期下降的特点;烟草生长后期,紫云英还田土壤的纤维素酶活性高于对照土壤。土壤脲酶活性呈先快速下降,再缓慢上升,最后再快速上升趋势。土壤蛋白酶活性呈烟草生育前期下降,后期缓慢上升的特点;土壤蛋白酶活性与紫云英施用量呈正相关。过氧化氢酶活性在烟草各生育期的变化不大。土壤生物学评价发现,22500kg·hm-2紫云英翻耕还田栽培烟草较佳。 展开更多
关键词 紫云英还田 减施化肥 土壤微生物 土壤酶 烟草栽培
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