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硝苯地平作用下miR-4651对牙龈间充质干细胞成骨分化功能的影响
1
作者 刁树 韩笑 尚佳健 《北京口腔医学》 CAS 2022年第3期189-194,共6页
目的研究miR-4651在硝苯地平作用下对牙龈间充质干细胞(GMSCs)成骨分化的影响。方法利用miR-4651mimics及miR-4651inhibitor在GMSCs进行丧失性及获得性功能研究。定量RT-PCR检测miR-4651表达,碱性磷酸酶活性(ALP)测定、茜素红染色、钙... 目的研究miR-4651在硝苯地平作用下对牙龈间充质干细胞(GMSCs)成骨分化的影响。方法利用miR-4651mimics及miR-4651inhibitor在GMSCs进行丧失性及获得性功能研究。定量RT-PCR检测miR-4651表达,碱性磷酸酶活性(ALP)测定、茜素红染色、钙离子定量以及定量RT-PCR检测牙龈间充质干细胞成骨/成牙本质分化相关基因的表达。结果过表达miR-4651能明显促进牙龈间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨/成牙本质分化相关基因的表达。敲减miR-4651能明显抑制牙龈间充质干细胞ALP活性、体外矿化能力及成骨/成牙本质分化相关基因的表达。在1μg/ml硝苯地平作用下,过表达miR-4651同样能促进牙龈间充质干细胞骨向分化。1μg/ml硝苯地平作用下,敲减miR-4651同样是抑制牙龈间充质干细胞的骨向分化。结论即使在一定量硝苯地平作用下,miR-4651仍可促进牙龈间充质干细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 miR-4651 DIGH 硝苯地平 牙龈间充质干细胞 成骨分化
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牙组织源性干细胞的微环境 被引量：2
2
作者 刁树 杨东梅 范志朋 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期254-256,共3页
干细胞是一类未分化的细胞,具有自我复制能力及多向分化潜能[1].依据其来源不同,大致可以分为两类：胚胎干细胞和成体干细胞.成体干细胞由于不涉及法律和道德问题,成为近期研究的热点[2].成体干细胞普遍存在于人体的各种器官[3],目前用... 干细胞是一类未分化的细胞,具有自我复制能力及多向分化潜能[1].依据其来源不同,大致可以分为两类：胚胎干细胞和成体干细胞.成体干细胞由于不涉及法律和道德问题,成为近期研究的热点[2].成体干细胞普遍存在于人体的各种器官[3],目前用于牙齿组织工程的成体干细胞主要为牙组织源性干细胞,包括成人牙髓干细胞、乳牙牙髓干细胞、牙周膜干细胞、根尖乳头干细胞及牙囊细胞[4].牙组织源性干细胞具有间充质干细胞的特点,可进行自体移植,是十分理想的种子细胞来源,在牙组织工程的应用中具有无可比拟的优势. 展开更多
关键词 成体干细胞 牙组织工程 源性 微环境 人牙髓干细胞 多向分化潜能 自我复制能力 牙齿组织工程
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GREM1对根尖牙乳头干细胞成骨/成牙分化功能的影响机制研究 被引量：5
3
作者 朱行燕 刁树 +1 位作者 杨东梅 范志朋 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期409-415,共7页
目的研究骨形态生成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)拮抗剂Gremlin1(GREM1)对根尖牙乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAPs)功能的影响,并探索其机制。方法体外分离培养SCAPs,免疫荧光染色实验检测GREM1在SCAPs的... 目的研究骨形态生成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)拮抗剂Gremlin1(GREM1)对根尖牙乳头干细胞(stem cells from the apical papilla,SCAPs)功能的影响,并探索其机制。方法体外分离培养SCAPs,免疫荧光染色实验检测GREM1在SCAPs的亚细胞定位;利用GREM1shRNA慢病毒转染,敲低GREM1;分别对GREM1敲低组和对照组SCAPs进行成骨诱导,实时荧光定量PCR(Real time-PCR)和Western blot检测转染后GREM1的敲低效果。取两组细胞,成骨诱导7 d后进行碱性磷酸酶(ALP)活性测定,成骨/成牙本质诱导3周后进行茜素红染色,并用Real time-PCR检测成骨诱导0周、1周、2周、3周后成骨/成牙相关基因骨钙素(OCN)、骨桥素(OPN)、骨涎蛋白(BSP)、牙本质基质蛋白(DMP1)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)以及成骨/成牙关键转录因子Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、同源盒基因2(DLX2)的表达。取两组细胞,CCK8和流式细胞术检测细胞增殖能力变化;Real time-PCR检测衰老相关基因p53、细胞周期调控因子1(Waf1)和干性相关基因krupple样因子4(KLF4)、性别决定区Y框蛋白2(SOX2)的表达,以及BMPs相关基因(BMP2、BMP4、BMP5、BMP6、BMP7、BMP9)的表达。结果免疫荧光实验表明GREM1在胞核内表达量比胞浆中更高;Real time-PCR和Western blot验证了GREM1敲低组的敲低效果。GREM1敲低组ALP活性高于对照组(P<0.05),茜素红染色浅于对照组;OCN、DMP1在1周、2周、3周时表达均有升高,OPN在2周时升高,BSP在3周时升高,DSPP在1周时升高,差异有统计学意义(P<0.05),成骨关键转录因子RUNX2、OSX、DLX2均在不同时段升高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法和流式细胞术显示GREM1敲低组增殖能力较对照组下降(P<0.05)。与对照组相比,GREM1敲低组BMP2、BMP6、BMP7表达升高,SOX2、KLF4表达升高(P<0.05),P53、Waf1表达下降(P<0.05)。结论GREM1敲低后,能促进SCAPs成骨/成牙分化及干性,抑制SCAPs的增殖及衰老;GREM1对SCAPs的功能作用可能是通过在mRNA水平调控BMP2、BMP6、BMP7的表达实现的。 展开更多
关键词 根尖牙乳头干细胞 GREM1 骨形态生成蛋白 成骨/成牙分化
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