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运用新的体视学方法研究老年大鼠胼胝体有髓神经纤维中的分区方式
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作者 兰欢 郭侃 +2 位作者 赵宏贤 王巧稚 徐瑲 《泸州医学院学报》 2013年第4期337-339,共3页
目的:基于新的体视学方法的基本要求,建立胼胝体有髓神经纤维定量研究的分区方法。方法:大鼠大脑连续组织切片后,基于改良Witelson分区的方法,定义胼胝体的分区。结果:研究发现老年大鼠胼胝体有髓神经纤维额区体积较年轻大鼠显著下降28.... 目的:基于新的体视学方法的基本要求,建立胼胝体有髓神经纤维定量研究的分区方法。方法:大鼠大脑连续组织切片后,基于改良Witelson分区的方法,定义胼胝体的分区。结果:研究发现老年大鼠胼胝体有髓神经纤维额区体积较年轻大鼠显著下降28.6%,有髓神经纤维总体积显著下降17.4%。结论:采用这一建立在新的体视学方法要求之上的胼胝体纤维分区方式,能准确地从微观上解释不同胼胝体区域内神经纤维的直径、数量等信息以及相关变化与功能变化之间的联系。 展开更多
关键词 胼胝体 体视学 分区 有髓神经纤维
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猪冠状动脉平滑肌细胞的自发瞬时外向电流的特性(英文) 被引量:12
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作者 蔡芳 李鹏云 +8 位作者 杨艳 刘智飞 李妙龄 周文 裴杰 程俊 兰欢 Joachim B.Grammer 曾晓荣 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期27-34,共8页
自发瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)在小动脉的肌源性调节中起着非常重要的作用。本文应用穿孔膜片钳技术记录了猪冠状动脉平滑肌细胞上的STOCs,研究了其基本特性以及调节。结果显示:STOCs有明显的电压依... 自发瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)在小动脉的肌源性调节中起着非常重要的作用。本文应用穿孔膜片钳技术记录了猪冠状动脉平滑肌细胞上的STOCs,研究了其基本特性以及调节。结果显示:STOCs有明显的电压依赖性和钙依赖性,其频率和幅度具有变异性。STOCs可以随机叠加在阶跃刺激方案和斜坡刺激方案引出的全细胞钾电流上。STOCs可被大电导钙激活钾(large-conductance Ca2+-activated potassium,BKCa)通道的特异性阻断剂ChTX、螯合胞外钙离子和50μmol/L ryanodine完全抑制。钙离子载体A23187可以明显增加STOCs的幅度和频率;而L型钙通道阻断剂verapamil和CdCl2对STOCs的影响很小。咖啡因使STOCs瞬时爆发性增加,然后抑制。钠离子载体可明显增加STOCs的频率;钠钙交换体选择性抑制剂KB-R7943可明显抑制STOCs。由此可以认为STOCs是BKCa通道介导的。STOCs的产生和激活依赖于经钠钙交换的钙内流和经肌浆网ryanodine受体介导的钙释放,钠钙交换可能决定钙库重载,而细胞膜下肌浆网的胞内钙释放(钙火花)所致的局部钙浓度瞬时增加激活与其相邻的BKCa通道,产生STOCs。 展开更多
关键词 膜片钳技术 平滑肌 钾通道 钠钙交换体 RYANODINE受体
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人PRR11启动子的结构与功能初步分析 被引量:9
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作者 艾青 卜友泉 +6 位作者 刘竹 兰欢 吉颖 杜刚 杨正梅 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期356-363,共8页
PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启... PRR11(proline-rich protein 11,PRR11)是我们最近发现的一个新的肿瘤相关基因.初步研究表明,PRR11参与细胞增殖、细胞周期和细胞癌变等多种生物学过程.为了进一步研究PRR11基因的转录调控机制并全面解析其功能,本研究对PRR11基因的启动子进行了克隆鉴定和初步分析.首先,应用5'RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了PRR11基因的转录起始位点,发现了其具有多个转录起始位点.通过PCR定向克隆和DNA blunting技术,构建了6个相互重叠并覆盖PRR11基因转录起始位点附近约2.0 kb区域的PRR 11基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,PRR 11基因启动子主要定位于转录起始位点附近-563 bp~+341 bp的区域内.采用转录因子结合位点预测分析软件分析表明,PRR 11基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒、CCAAT盒以及潜在的经典转录因子E2F1和MYB的结合位点,提示Sp1、NF-Y、E2F1和MYB等经典转录因子可能参与PRR 11基因的转录调控. 展开更多
关键词 PRR11(proline-rich PROTEIN 11) 启动子 转录调控 肿瘤相关基因
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siRNA介导的NFBD1表达沉默对HeLa细胞增殖与凋亡的影响 被引量:7
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作者 卜友泉 杨正梅 +3 位作者 兰欢 镇磊 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期943-949,共7页
NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋... NFBD1,也称MDC1,是1个参与细胞内DNA损伤后细胞应答反应的重要分子.为探讨NFBD1在细胞增殖和凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究采用siRNA技术抑制NFBD1的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞凋亡的影响.半定量RT-PCR和蛋白质印迹分析结果表明,筛选到的短链NFBD1 siRNA能有效抑制内源NFBD1的表达,抑制程度约100%.细胞生长曲线分析结果表明,siRNA介导的NFBD1表达沉默导致HeLa细胞生长增殖的显著抑制.FACS分析结果表明,NFBD1表达抑制导致sub-G1峰的出现,同时蛋白质印迹分析观察到了caspase 3和PARP(poly-ADP-ribose polymerase)的剪接激活,表明NFBD1表达抑制诱发了细胞凋亡.在该凋亡过程中,P53及其下游靶分子Bax和Puma的表达水平均没有发生明显变化,但Noxa的表达在mRNA和蛋白质水平上均显著上调,强烈提示该凋亡过程很可能是1个不依赖P53的凋亡途径,且Noxa的转录激活在该凋亡过程中可能起着重要作用.这些结果表明,NFBD1参与细胞生长增殖和凋亡的调节,是一个潜在的肿瘤治疗新靶点. 展开更多
关键词 NFBD1 SIRNA 细胞增殖 细胞凋亡
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组织学数字切片库的构建与探讨 被引量:19
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作者 徐瑲 兰欢 +2 位作者 赵宏贤 郭勇 徐富翠 《基础医学教育》 2012年第7期550-552,共3页
泸州医学院组织胚胎学教研室组织教师应用Motic数字切片扫描与应用系统,选择典型结构清楚、显示清晰的玻璃切片,全自动显微镜低倍镜下对玻璃切片进行扫描。采集完整切片图像后,再高倍镜下区域快速扫描。系统软件将扫描图像自动进行无缝... 泸州医学院组织胚胎学教研室组织教师应用Motic数字切片扫描与应用系统,选择典型结构清楚、显示清晰的玻璃切片,全自动显微镜低倍镜下对玻璃切片进行扫描。采集完整切片图像后,再高倍镜下区域快速扫描。系统软件将扫描图像自动进行无缝拼接和处理,以获得更高分辨率的清晰的数字切片。使用Motic VM V1 Viewer软件对采集好的数字切片所显示的内容进行注释,并在不同放大倍数下标注特殊结构。按照数字切片的具体内容,分章节归类并存储在计算机中。至此,组织学数字切片库构建完成。它的构建过程就像教研室集体备课一样,对教师的专业知识和专业技能提出了考验。但它不能完全代替玻璃切片,它的质量取决于一支高水平的教师队伍,这对教师队伍的建设提出了更加严格的要求。 展开更多
关键词 组织学 数字切片 教学改革
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新基因PRR11的克隆、原核表达及鉴定 被引量:5
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作者 崔涛 兰欢 +4 位作者 杜刚 刘革力 易发平 卜友泉 宋方洲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期98-101,105,共5页
克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其原核表达载体,并进行表达检测及鉴定。以Hela细胞cDNA为模板,RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入原核表达载体PET-28a中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组原核表达载体PET-28a-PRR11。然后把PET-28a... 克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其原核表达载体,并进行表达检测及鉴定。以Hela细胞cDNA为模板,RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入原核表达载体PET-28a中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组原核表达载体PET-28a-PRR11。然后把PET-28a-PRR11重组载体转化到BL21中,经IPTG诱导蛋白表达,提取细胞蛋白并采用SDS-PAGE和蛋白质免疫印迹法检测目的蛋白的表达情况。结果表明成功扩增了PRR11基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到原核表达载体PET-28a中,目的蛋白成功表达。成功构建的PRR11基因的原核表达载体,及PRR11的重组蛋白表达产物,为进一步研究PRR11的基因功能奠定了基础。 展开更多
关键词 PRR11基因 PET-28a 原核表达
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HPV 16 E6E7基因修饰树突状细胞疫苗诱导CTL致CaSki细胞凋亡体外实验研究 被引量:2
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作者 焦庆昉 易发平 +6 位作者 汪长东 袁成福 刘勒 兰欢 符少月 艾青 宋方洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期115-119,共5页
目的:采用人乳头状瘤-16(HPV-16)E6E7重组腺病毒(pAd-E6E7)转染树突状细胞(Dendritic cell,DC),观察基因修饰的DC疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)致使CaSki细胞凋亡的效果。方法:将pAd-E6E7转染体外培养的小鼠未... 目的:采用人乳头状瘤-16(HPV-16)E6E7重组腺病毒(pAd-E6E7)转染树突状细胞(Dendritic cell,DC),观察基因修饰的DC疫苗诱导细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic Tlymphocyte,CTL)致使CaSki细胞凋亡的效果。方法:将pAd-E6E7转染体外培养的小鼠未成熟树突状细胞制备DC疫苗,激光共聚焦显微镜观察转染的小鼠未成熟树突状细胞绿色荧光蛋白表达,流式细胞术检测转染前后小鼠树突状细胞表面标志物(CD40、CD86、MHCⅡ和CD11C)。DC疫苗诱导产生特异性细胞毒性T淋巴细胞,与CaSki细胞共培养后,采用DAPI、TUNEL及流式细胞术检测CaSki细胞凋亡情况。结果:pAd-E6E7成功转染体外培养的小鼠未成熟树突状细胞,体外转染效率约为40%~50%,成功制备了HPV16 E6E7基因修饰树突状细胞疫苗,诱导产生细胞毒性T淋巴细胞,经DAPI、TUNEL及流式细胞术检测证明CaSki出现凋亡。结论:以带有HPV16 E6E7基因的重组腺病毒载体转染DC制备基因修饰的DC疫苗,诱导CTL致使CaSki细胞出现凋亡。 展开更多
关键词 人乳头状瘤病毒 细胞毒性T淋巴细胞 CASKI细胞 树突状细胞
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人NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR的定点突变分析 被引量:1
8
作者 朱江 兰欢 +1 位作者 洪苏玲 卜友泉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1020-1023,共4页
目的对NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR进行定点突变分析,以分析CHR在NFBD1转录调控中的作用。方法以原有NFBD1核心启动子荧光素酶报告基因重组体NFBD1-PS1-325为模板,采用PCR介导的基因定点突变技术对NFBD1启动子区域中的CHR位点进行... 目的对NFBD1启动子区域顺式作用元件CHR进行定点突变分析,以分析CHR在NFBD1转录调控中的作用。方法以原有NFBD1核心启动子荧光素酶报告基因重组体NFBD1-PS1-325为模板,采用PCR介导的基因定点突变技术对NFBD1启动子区域中的CHR位点进行定点突变,构建相应的CHR定点突变重组体;采用荧光素酶双报告基因分析技术检测各重组体的启动子活性,分析CHR定点突变对NFBD1启动子活性的影响;结合阿霉素处理,分析CHR在DNA损伤后NFBD1转录下调中的潜在作用。结果CHR定点突变后能显著降低NFBD1的启动子活性;CHR定点突变后显著减弱了DNA损伤后NFBD1的转录下调比例。结论CHR参与NFBD1的基础转录调控及DNA损伤后的转录下调。 展开更多
关键词 NFBD1 启动子 转录调控 CHR 顺式作用元件
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老年大鼠胼胝体额区有髓神经纤维与髓鞘改变的研究 被引量:1
9
作者 徐瑲 兰欢 +1 位作者 卢伟 唐勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期440-443,共4页
目的:探讨老年大鼠胼胝体额区有髓神经纤维、髓鞘的结构变化和髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)的表达变化,以及二者间的关系。方法:运用透射电子显微镜和新的体视学方法分别对年轻组和老年组雌性Long-Evans大鼠胼胝体额区有髓... 目的:探讨老年大鼠胼胝体额区有髓神经纤维、髓鞘的结构变化和髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)的表达变化,以及二者间的关系。方法:运用透射电子显微镜和新的体视学方法分别对年轻组和老年组雌性Long-Evans大鼠胼胝体额区有髓神经纤维和髓鞘进行定量研究,运用Western blot对年轻组和老年组大鼠胼胝体额区MBP表达进行定量研究。结果:与年轻组相比,老年组胼胝体额区体积存在显著性降低,有髓神经纤维总体积显著性下降,21.5 kD MBP表达量显著性降低。21.5 kD MBP的表达降低与有髓神经纤维总体积、髓鞘总体积的降低之间呈正相关。结论:胼胝体存在显著性老年萎缩,胼胝体额区有髓神经纤维和MBP的老年改变可能与老年大脑额叶功能下降有关。 展开更多
关键词 胼胝体额区 髓鞘碱性蛋白 有髓神经纤维 体视学 老年改变
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人HAS3启动子的结构与功能初步分析 被引量:1
10
作者 镇磊 卜友泉 +5 位作者 杜刚 杨正梅 兰欢 崔涛 刘革力 宋方洲 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期534-541,共8页
透明质酸合酶3(hyaluronan synthase3,HAS3),是一个参与透明质酸合成的酶分子,在上皮形成和肿瘤转移等过程中起重要作用.为了进一步研究HAS3基因的转录调控机制,本研究克隆鉴定了HAS3基因的启动子.首先应用5′RACE(rapid amplification ... 透明质酸合酶3(hyaluronan synthase3,HAS3),是一个参与透明质酸合成的酶分子,在上皮形成和肿瘤转移等过程中起重要作用.为了进一步研究HAS3基因的转录调控机制,本研究克隆鉴定了HAS3基因的启动子.首先应用5′RACE(rapid amplification of cDNA ends,cDNA末端快速扩增)技术鉴定了HAS3基因的转录起始位点,发现了丰度和转录起始位点不同的两种新的HAS3基因剪接变异体.通过PCR定向克隆策略,构建了覆盖HAS3基因5′端侧翼区起始密码子ATG上游约4.3kb区域的一系列HAS3基因启动子荧光素酶报告基因重组体.启动子活性分析表明,HAS3基因启动子定位于转录起始位点附近约450bp的区域内.转录因子结合位点分析表明,HAS3基因启动子缺乏典型的TATA盒,但含有典型的GC盒以及C/EBP等其它潜在的转录因子结合位点.结果提示,Sp1和C/EBP等转录因子可能参与HAS3基因的转录调控. 展开更多
关键词 透明质酸合酶3 CDNA末端快速扩增 启动子 转录调控
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人β3肾上腺素受体激动剂快速筛选模型的建立 被引量:1
11
作者 刘竹 杜刚 +5 位作者 曾凡新 兰欢 艾青 刘革力 宋方洲 卜友泉 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期35-37,共3页
目的:β3肾上腺素受体(beta-3 adrenergic receptor,ADRB3)是β肾上腺素受体的一个亚型,是一个公认的减肥药和抗2型糖尿病药物研发的重要分子靶点,构建其激动剂筛选模型具有重要意义。方法:以ADRB3发挥作用的细胞内信号通路为理论依据,... 目的:β3肾上腺素受体(beta-3 adrenergic receptor,ADRB3)是β肾上腺素受体的一个亚型,是一个公认的减肥药和抗2型糖尿病药物研发的重要分子靶点,构建其激动剂筛选模型具有重要意义。方法:以ADRB3发挥作用的细胞内信号通路为理论依据,在细胞水平上构建了以荧光素酶为报告基因的人ADRB3激动剂药物筛选模型,并对部分实验条件进行了快速简易优化。结果:已知的ADRB3激动剂异丙肾上腺素和倍他福林均能够有效激活该筛选模型中pCRE-luc报告基因质粒的表达,使其表达增加3倍以上。结论:该筛选模型构建成功。目前该模型已用于以ADRB3为靶点减肥新药筛选。 展开更多
关键词 Β3肾上腺素受体 减肥药 药物筛选 荧光素酶
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基于IOT的城市道路智慧照明系统的设计 被引量:2
12
作者 兰欢 李猛 +1 位作者 李雁玲 王康民 《电子技术与软件工程》 2017年第6期101-101,共1页
针对当前城市道路照明系统所存在的效率低、照明方式单一、扩展性较差等问题,本文提出一种基于物联网(Internet Of Things,IOT)技术的城市道路智慧照明系统,将城市道路照明、环境监测纳入新型城市物联网体系,综合运用嵌入式技术、无线... 针对当前城市道路照明系统所存在的效率低、照明方式单一、扩展性较差等问题,本文提出一种基于物联网(Internet Of Things,IOT)技术的城市道路智慧照明系统,将城市道路照明、环境监测纳入新型城市物联网体系,综合运用嵌入式技术、无线传感器网络等技术,实现智能化、数字化的城市道路照明控制,同时还具有环境温湿度、PM2.5等环境参数的监测功能。 展开更多
关键词 智慧照明 环境监测 物联网 ZIGBEE 上位机
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雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道的作用 被引量:7
13
作者 程俊 杨艳 +5 位作者 曾晓荣 刘智飞 周文 李妙龄 兰欢 裴杰 《黑龙江医学》 2006年第12期884-886,共3页
目的研究雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流的影响。方法用急性酶分离法分离人肠系膜平滑肌细胞,采用单通道膜片钳技术记录该细胞上的钙激活钾通道电流。结果雌激素浓度依赖性的不可逆性的激活人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通... 目的研究雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流的影响。方法用急性酶分离法分离人肠系膜平滑肌细胞,采用单通道膜片钳技术记录该细胞上的钙激活钾通道电流。结果雌激素浓度依赖性的不可逆性的激活人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道。在细胞贴附式膜片(cell-attached patch)下,膜电位为+50 mV时,10、70、150、200、300μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0214±0.0112分别增加到0.0385±0.0146(n=8,P<0.05)、0.0425±0.0251(n=8,P<0.01)、0.0614±0.0152(n=8,P<0.01)、0.1263±0.0346(n=8,P<0.01)、0.2636±0.1046(n=8,P<0.01)。在内面向外式膜片(inside-outpatch)下,膜电位为+50 mV时,10、70、150、200、300μL/mL的雌激素,可使通道开放概率从0.0342±0.01024分别增加到0.0454±0.0231(n=8,P<0.01)、0.0617±0.0137(n=8,P<0.01)、0.0980±0.0202(n=8,P<0.01)、0.1203±0.0153(n=8,P<0.01)、0.3149±0.0851(n=8,P<0.01)。随着雌激素浓度的增加,通道活动逐步被激活,这种作用冲洗后不可逆。结论雌激素对人肠系膜平滑肌细胞钙激活钾通道电流有一定激活作用,提示雌激素对人肠系膜阻力血管有一定的舒张作用。 展开更多
关键词 雌激素 人肠系膜平滑肌细胞 钙激活钾通道 膜片钳技术
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智能手机对大学生生活方式影响的实证研究——以陕西师范大学为例 被引量:1
14
作者 刘红 李晓林 兰欢 《今传媒》 2016年第6期77-79,共3页
智能手机参与构建人们的日常生活,在大学生群体中表现的尤为突出。本研究以陕西师范大学为例,调研过程中采用抽样调查法、个案访谈、实验室控制法,搜集相关资料选取智能手机对大学生群体生活方式产生的影响为切入点,以调查数据作为支撑... 智能手机参与构建人们的日常生活,在大学生群体中表现的尤为突出。本研究以陕西师范大学为例,调研过程中采用抽样调查法、个案访谈、实验室控制法,搜集相关资料选取智能手机对大学生群体生活方式产生的影响为切入点,以调查数据作为支撑,探讨智能手机对大学生的人际交往、娱乐方式、消费方式、学习方式、运动方式五个方面的影响以及针对这一现象高校教务如何创新管理理念进行实证研究,进一步发挥智能手机正功能,削减其负功能,使其更好地为智慧传媒服务。 展开更多
关键词 智能手机 大学生 生活方式 实证研究
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新基因PRR11的克隆、真核表达载体的构建及鉴定 被引量:1
15
作者 徐瑲 卜友泉 +2 位作者 郭勇 崔涛 兰欢 《泸州医学院学报》 2011年第5期475-479,共5页
目的:克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法:以HeLa细胞cDNA为模板,半定量RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组真核表达载体pcDNA3.1-PR... 目的:克隆新基因PRR11的开放阅读框区,构建其真核表达载体,并进行表达检测及鉴定。方法:以HeLa细胞cDNA为模板,半定量RT-PCR扩增PRR11基因,克隆入真核表达载体pcDNA3.1中,酶切、测序鉴定确认获得PRR11基因的重组真核表达载体pcDNA3.1-PRR11。然后将pcDNA3.1-PRR11重组载体转染入HeLa细胞中,收集细胞,制备总RNA和细胞裂解液,采用半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法检测目的基因表达情况。结果:成功扩增了PRR11基因,双酶切、测序鉴定证实目的基因成功克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,测序结果表明序列完全正确,pcDNA3.1-PRR11真核重组表达载体构建成功。半定量RT-PCR和蛋白质免疫印迹法证实了转染入HeLa细胞中的目的基因表达成功。结论:成功构建了PRR11基因的真核表达载体,并可在HeLa细胞中成功表达,为进一步研究PRR11基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 PRR11 PCDNA3.1 真核表达
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鸭MCHR2的基因克隆及蛋白表达鉴定
16
作者 朱勇 汪长东 +11 位作者 刘革力 袁成福 卜友泉 易发平 焦庆昉 艾青 刘竹 兰欢 武向梅 宋方洲 胡平生 Tomas Hokfelt 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1520-1522,共3页
目的筛查能够稳定表达黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因的动物,为构建动物模型提供实验依据。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,从新鲜的鸭、Wista鼠、SD鼠、C3H10鼠、C57鼠、狗、羊、猪等大脑组织中提取总RNA,以此扩增MCHR2基... 目的筛查能够稳定表达黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因的动物,为构建动物模型提供实验依据。方法利用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)方法,从新鲜的鸭、Wista鼠、SD鼠、C3H10鼠、C57鼠、狗、羊、猪等大脑组织中提取总RNA,以此扩增MCHR2基因的全长cDNA编码区序列;利用Western blot检测鸭、犬和猪的大脑海马区及皮质区MCHR2蛋白的表达情况。结果通过RT-PCR获得鸭、犬、猪脑组织中的目的片段;通过Western blot验证了MCHR2蛋白在鸭脑组织中具有高表达。结论将鸭作为构建动物模型的对象,用于MCHR2基因的相关功能研究具有可行性。 展开更多
关键词 MCHR2 MCR RT-PCR WESTERN BLOT 肥胖
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siRNA介导的Plk1表达沉默对COS-7细胞影响的研究
17
作者 朱江 洪苏玲 +2 位作者 柯霞 兰欢 卜友泉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期324-327,共4页
目的:研究(Polo-like kinase1,Plk1)表达被抑制后对COS-7细胞的影响,探讨Plk1作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值。方法:化学合成法合成特异性的短链Plk1siRNA,脂质体转染法将短链siRNA分别导入COS-7细胞;采用RT-PCR和Western blot法检... 目的:研究(Polo-like kinase1,Plk1)表达被抑制后对COS-7细胞的影响,探讨Plk1作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值。方法:化学合成法合成特异性的短链Plk1siRNA,脂质体转染法将短链siRNA分别导入COS-7细胞;采用RT-PCR和Western blot法检测siRNA对Plk1表达的抑制效果;采用胎盘兰染色结合细胞计数法、FACS分析siRNA介导的Plk1表达抑制对COS-7癌细胞生长增殖、细胞周期的影响。结果:半定量RT-PCR和蛋白质印迹分析结果表明,合成的特异性短链Plk1siRNA在mRNA和蛋白质水平上均能高效、特异性地抑制COS-7细胞中Plk1的表达。细胞生长分析结果表明,siRNA介导的Plk1表达沉默导致COS-7细胞的生长增殖受到显著抑制。FACS分析结果表明,Plk1表达被抑制后,出现细胞周期停滞,大量细胞呈现sub-G1期时相。结论:siRNA介导的Plk1表达沉默显著抑制COS-7细胞生长增殖,是一个潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 PLK1 SIRNA 细胞周期 细胞生长
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资源诅咒与农村经济发展问题的实证分析 被引量:1
18
作者 周惠珺 兰欢 潘鸿 《消费导刊》 2010年第7期88-89,共2页
资源诅咒是一个经济学的理论,指丰富的自然资源可能是经济发展的诅咒而不是祝福。论文根据实地调研数据对吉林省松原市长岭县永久镇葛平村是否存在资源诅咒现象进行了判定,并认为其资源诅咒的传导机制主要是人力资本投资不足,论文就如... 资源诅咒是一个经济学的理论,指丰富的自然资源可能是经济发展的诅咒而不是祝福。论文根据实地调研数据对吉林省松原市长岭县永久镇葛平村是否存在资源诅咒现象进行了判定,并认为其资源诅咒的传导机制主要是人力资本投资不足,论文就如何解除该地区资源诅咒问题进行了思考,提出了相关的解决对策和建议。 展开更多
关键词 资源诅咒 土地资源 农村经济发展 吉林省
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FAM64A基因对宫颈癌细胞周期调控的影响
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作者 徐瑲 杜刚 +1 位作者 艾青 兰欢 《山东医药》 CAS 2013年第28期9-12,共4页
目的观察FAM64A基因对宫颈癌细胞周期调控的影响,探讨其作为分子靶点在肿瘤治疗中的潜在价值。方法阿霉素(ADR)处理HeLa细胞,半定量RT-PCR方法检测DNA损伤后FAM64A表达水平的变化;胸腺嘧啶脱氧核苷/诺考达唑阻断法将细胞阻断在M期,并依... 目的观察FAM64A基因对宫颈癌细胞周期调控的影响,探讨其作为分子靶点在肿瘤治疗中的潜在价值。方法阿霉素(ADR)处理HeLa细胞,半定量RT-PCR方法检测DNA损伤后FAM64A表达水平的变化;胸腺嘧啶脱氧核苷/诺考达唑阻断法将细胞阻断在M期,并依次释放入G1、S、G2、M期,半定量RT-PCR方法检测FAM64A在不同细胞周期中的表达情况;化学合成法合成特异性的短链siRNA,脂质体转染法将siRNA分别导入HeLa细胞,RT-PCR法检测其对FAM64A表达的抑制效果;选取特异性的FAM64A siRNA,转染入HeLa细胞,采用流式细胞仪分析FAM64A表达被抑制后对HeLa细胞周期的影响。结果 FAM64A的表达水平在ADR处理后期约24 h呈现明显下调,到48 h时表达量几乎为零。FAM64A的表达水平在G2/M期表达升高,G1、S期表达降低。半定量RT-PCR结果表明,合成的特异性短链FAM64A siRNA能高效、特异性地抑制HeLa细胞中FAM64A的表达。流式细胞分析结果表明,FAM64A表达被抑制后,细胞周期被阻滞在G1期。结论 FAM64A基因参与了宫颈癌HeLa细胞周期的表达和调控,是一个潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 子宫肿瘤 FAM64A基因 细胞周期 HELA细胞
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对吉林省农村生态社会发展的思考——以长岭县永久镇葛平村为例 被引量:1
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作者 李恩 兰欢 《内蒙古民族大学学报》 2010年第3期33-35,共3页
随着经济的高速增长,人与自然如何相处的问题已经成为各界关注的焦点问题,在我国新农村建设过程中也遇到了许多困难,是追求快速增长还是实现可持续发展已经成为专家学者研究和讨论的焦点。利用吉林大学农林经济管理专业本科生《农村社... 随着经济的高速增长,人与自然如何相处的问题已经成为各界关注的焦点问题,在我国新农村建设过程中也遇到了许多困难,是追求快速增长还是实现可持续发展已经成为专家学者研究和讨论的焦点。利用吉林大学农林经济管理专业本科生《农村社会经济调查》实践教学的机会,对农村生态社会发展相关问题进行了深入的调查。本文分析了吉林省农村生态社会发展存在的问题,并探讨了吉林省农村生态社会发展的方向。 展开更多
关键词 农村 生态社会发展 思考
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