目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞Ik B/NF-k B信号通路的影响。方法体外培养正常大鼠卵巢颗粒细胞,设对照组、不同浓度胰岛素干预组,不同浓度HMGB1干预组,胰岛素抵抗+si-HMGB1干预组等,用酶联免疫吸附法(E...目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞Ik B/NF-k B信号通路的影响。方法体外培养正常大鼠卵巢颗粒细胞,设对照组、不同浓度胰岛素干预组,不同浓度HMGB1干预组,胰岛素抵抗+si-HMGB1干预组等,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定葡萄糖、HMGB1、雄激素、TNF-α、磷酸化NF-k B p65的含量;免疫印迹检测Ik Ba、p Ik Ba、Caspase3和Cleaved Caspase3的蛋白表达。结果与对照组比较,胰岛素过高导致大鼠卵巢细胞的葡萄糖含量明显降低(P<0.05);雄激素及相关炎症因子HMGB1、TNF-α明显升高(P<0.01),并激活转录因子NF-k B p65并使其磷酸化程度明显升高(P<0.05)。随着HMGB1浓度升高,雄激素、磷酸化Ik Ba、磷酸化NF-k B p65和TNF-α的表达量较对照组均明显升高(P<0.05 or P<0.01);而当胰岛素抵抗的卵巢颗粒细胞中加入HMGB1的干扰小分子,则发现胰岛素抵抗带来的副作用得到缓解,较胰岛素抵抗对照组雄激素、Cleaved Caspase3、TNF-α、磷酸化Ik Ba和磷酸化NF-k B p65的表达量均显著性下降(P<0.05 or P<0.01)。结论 HMGB1在多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞模型中促使炎症因子升高,可能介导了NF-k B信号通路的激活,促进胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞凋亡,参与了PCOS的发病。展开更多
文摘目的探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对胰岛素抵抗的大鼠卵巢颗粒细胞Ik B/NF-k B信号通路的影响。方法体外培养正常大鼠卵巢颗粒细胞,设对照组、不同浓度胰岛素干预组,不同浓度HMGB1干预组,胰岛素抵抗+si-HMGB1干预组等,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定葡萄糖、HMGB1、雄激素、TNF-α、磷酸化NF-k B p65的含量;免疫印迹检测Ik Ba、p Ik Ba、Caspase3和Cleaved Caspase3的蛋白表达。结果与对照组比较,胰岛素过高导致大鼠卵巢细胞的葡萄糖含量明显降低(P<0.05);雄激素及相关炎症因子HMGB1、TNF-α明显升高(P<0.01),并激活转录因子NF-k B p65并使其磷酸化程度明显升高(P<0.05)。随着HMGB1浓度升高,雄激素、磷酸化Ik Ba、磷酸化NF-k B p65和TNF-α的表达量较对照组均明显升高(P<0.05 or P<0.01);而当胰岛素抵抗的卵巢颗粒细胞中加入HMGB1的干扰小分子,则发现胰岛素抵抗带来的副作用得到缓解,较胰岛素抵抗对照组雄激素、Cleaved Caspase3、TNF-α、磷酸化Ik Ba和磷酸化NF-k B p65的表达量均显著性下降(P<0.05 or P<0.01)。结论 HMGB1在多囊卵巢综合征(PCOS)胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞模型中促使炎症因子升高,可能介导了NF-k B信号通路的激活,促进胰岛素抵抗卵巢颗粒细胞凋亡,参与了PCOS的发病。
