二次打击肺损伤大鼠肺组织中LBP的表达及山莨菪碱的保护作用 被引量：16

1

作者 侯一峰 毛宝龄 +1 位作者 钱桂生 徐剑铖 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期824-826,共3页

目的　探讨机体遭受一次打击后 ,脂多糖结合蛋白 (LBP)对二次打击的增敏效应及山莨菪碱的保护机制。方法　用油酸 (OA ,0 .2ml/kg)和脂多糖 (LPS ,2mg/kg)两次致伤 ,复制大鼠急性肺损伤模型。用RT PCR检测肺组织中LBP、TNFα、IL 10mRN... 目的　探讨机体遭受一次打击后 ,脂多糖结合蛋白 (LBP)对二次打击的增敏效应及山莨菪碱的保护机制。方法　用油酸 (OA ,0 .2ml/kg)和脂多糖 (LPS ,2mg/kg)两次致伤 ,复制大鼠急性肺损伤模型。用RT PCR检测肺组织中LBP、TNFα、IL 10mRNA的表达 ,并行病理组织学观察和动脉血气分析。结果　一次打击可使肺组织中LBP的表达明显增强 ,在此基础上行二次打击后 ,肺组织中TNFα和IL 10的表达增高 ;山莨菪碱干预可抑制LBP的上调 ,减少TNFα和IL 10的表达 ,病理改变也有所减轻。结论　第一次打击后LBP的反应性上调是使机体对第二次打击敏感性增加的重要机制 ,山莨菪碱可能通过抑制LBP的过度表达 ,阻断LBP对LPS的增敏作用 ,从而发挥其对肺损伤的防治作用。 展开更多

关键词 脂多糖结合蛋白 急性肺损伤 山莨菪碱

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LBP对LPS诱导大鼠肺巨噬细胞TNFα、IL-10mRNA表达的调节作用 被引量：4

2

作者 侯一峰 毛宝龄 +1 位作者 钱桂生 徐剑铖 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期960-962,共3页

目的 探讨脂多糖结合蛋白（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＢＰ）对脂多糖（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）Ｓ倪导肺巨噬细胞中ＴＮＦα和 ＩＬ－１０表达的调节作用机制。... 目的 探讨脂多糖结合蛋白（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＬＢＰ）对脂多糖（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）Ｓ倪导肺巨噬细胞中ＴＮＦα和 ＩＬ－１０表达的调节作用机制。方法 经硫酸铵盐析、Ｂｉｏ－Ｒｅｘ７０阳离子交换层析和 ＭｏｎｏＱ阴离子交换层析，从大鼠急性反应期血清中分高纯化 ＬＢＰ。分别用 １０ ｎｇ／ｍｌ和 １０００ ｎｇ／ｍｌ的 ＬＰＳ刺激肺泡巨噬细胞，并加入不同浓度 ＬＢＰ，观察肺泡巨噬细胞中 ＴＮＦα和 ＩＬ－１０ｍＲＮＡ的表达。结果 纯化的大鼠 ＬＢＰ在 ＳＤＳ－ＰＡＧＥ的 ６０ｘ１０３处呈现单一条带，并可增强 ＬＰＳ与单核细胞的结合。当 ＬＰＳ为 １０ ｎｇ／ｍｌ时，ＬＢＰ可明显增强 ＬＰＳ诱导肺巨噬细胞中 ＴＮＦα和 ＩＬ－１０ ｍＲＮＡ的表达，但ＬＢＰ为１０ μｇ／ｍｌ时，对ＬＰＳ的增敏作用反而有所减弱。当ＬＰＳ为１０００ｎｇ／ｍｌ时，ＬＢＰ对 ＬＰＳ无调节作用。结论 ＬＢＰ对 ＬＰＳ的调节作用呈明显的剂量依赖性，而高浓度 ＬＰＳ不需要ＬＢＰ的增敏作用，可能通过ＬＢＰ非依赖途径直接激活靶细胞。 展开更多

关键词 脂多糖 脂多糖结合蛋白 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素10 肺泡巨噬细胞 动物实验

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大鼠脂多糖结合蛋白的分离纯化及对脂多糖的调节作用 被引量：3

3

作者 侯一峰 毛宝龄 +1 位作者 钱桂生 徐剑铖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期647-650,共4页

经硫酸铵沉淀、Bio Rex70树脂的阳离子交换层析和MonoQ预装柱的阴离子交换层析 ,从大鼠急性期血清中分离纯化了脂多糖结合蛋白 .SDS PAGE为单一条带 ,分子量 60kD ,所纯化的大鼠脂多糖结合蛋白可明显增强脂多糖与单核巨噬细胞的结合 .... 经硫酸铵沉淀、Bio Rex70树脂的阳离子交换层析和MonoQ预装柱的阴离子交换层析 ,从大鼠急性期血清中分离纯化了脂多糖结合蛋白 .SDS PAGE为单一条带 ,分子量 60kD ,所纯化的大鼠脂多糖结合蛋白可明显增强脂多糖与单核巨噬细胞的结合 .脂多糖结合蛋白对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞中肿瘤坏死因子α(TNF α)mRNA表达的调节作用具有明显的剂量依赖性 . 展开更多

关键词 脂多糖结合蛋白 脂多糖 分离纯化 TNF-Α 调节作用 剂量 大鼠

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PBL与能力培养 被引量：94

4

作者 侯一峰 周艳春 《医学教育探索》 2007年第2期111-112,共2页

以问题为基础的学习(Problem Based Learning,PBL)与传统教学方法的一个主要区别是PBL在学习知识的同时强调各种能力的培养和运用。如学生的自学能力、思维能力、人际交流能力等。从PBL与能力培养之间的内在联系,探讨符合我国实际情况的... 以问题为基础的学习(Problem Based Learning,PBL)与传统教学方法的一个主要区别是PBL在学习知识的同时强调各种能力的培养和运用。如学生的自学能力、思维能力、人际交流能力等。从PBL与能力培养之间的内在联系,探讨符合我国实际情况的PBL教学模式,从而更好地进行PBL教学,培养出高素质的医学人才。 展开更多

关键词 PBL 自学能力 思维能力 人际交流能力

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TLR1-TLR4在人嗜碱性粒细胞中的表达 被引量：4

5

作者 侯一峰 何韶衡 《海南医学》 CAS 2005年第7期131-133,共3页

目的分别在基因和蛋白水平上观察Toll样受体(Tolllikereceptor,TLR)家族成员中的TLR1、TLR2、TLR3和TLR4在人嗜碱性粒细胞系KU812中的表达。方法取1×106细胞,从细胞中提取总RNA后,用RT-PCR检测细胞中mRNA的表达;用抗人TLR1-TLR4单... 目的分别在基因和蛋白水平上观察Toll样受体(Tolllikereceptor,TLR)家族成员中的TLR1、TLR2、TLR3和TLR4在人嗜碱性粒细胞系KU812中的表达。方法取1×106细胞,从细胞中提取总RNA后,用RT-PCR检测细胞中mRNA的表达;用抗人TLR1-TLR4单克隆抗体和小鼠同型抗体行免疫荧光染色后,在流式细胞仪上检测TLR1-TLR4蛋白的表达。结果人嗜碱性粒细胞有TLR1-14mRNA的组成型表达。在流式细胞仪检测中,用抗人TLR1-TLR4单克隆抗体染色的细胞,其荧光强度均明显高于同型对照。结论嗜碱性粒细胞中有TLR-TLR4的组成型表达,提示嗜碱性粒细胞可作为一种免疫细胞对病原微生物进行识别。 展开更多

关键词 嗜碱性粒细胞 TLR4单克隆抗体 receptor RT-PCR检测 Toll样受体 流式细胞仪检测 组成型表达 免疫荧光染色 TLR4蛋白 病原微生物 蛋白水平 家族成员 TLR2 粒细胞系 总RNA mRNA 同型抗体 荧光强度 免疫细胞

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组胺对肺上皮细胞Toll样受体表达的上调作用 被引量：1

6

作者 侯一峰 周艳春 +4 位作者 郑晓璇 王海燕 傅意玲 方泽曼 何韶衡 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第20期1867-1870,共4页

目的：观察组胺对肺上皮细胞中Toll样受体（TLR）表达的影响．方法：体外培养人肺上皮细胞株A549，用RT-PCR和实时定量PCR检测静息状态或组胺作用下的A549细胞中TLR1～TLR10mRNA的变化，并用流式细胞术进一步确定组胺对TLR3表达的调节... 目的：观察组胺对肺上皮细胞中Toll样受体（TLR）表达的影响．方法：体外培养人肺上皮细胞株A549，用RT-PCR和实时定量PCR检测静息状态或组胺作用下的A549细胞中TLR1～TLR10mRNA的变化，并用流式细胞术进一步确定组胺对TLR3表达的调节作用．结果：A549细胞有TLR1～TLR10 mRNA的组成型表达，组胺对TLR3 mRNA和蛋白的上调作用具有时间和剂量依赖性，并且H1受体阻断剂可抑制组胺对TLR3的上调作用．结论：组胺可上调肺上皮细胞中TLR3的表达，提示当呼吸道存在变态反应性病变时，增多的组胺可能会增加肺上皮细胞对病毒感染的敏感性． 展开更多

关键词 组胺 肺/细胞学 上皮细胞 TOLL样受体

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慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达 被引量：4

7

作者 侯一峰 周艳春 《临床和实验医学杂志》 2007年第2期30-31,共2页

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的表达。方法用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的拷... 目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的表达。方法用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的拷贝数。结果COPD患者外周血单个核细胞的TLR3和TLR9mRNA表达较正常健康人明显增高(P<0.05),而TLR7和TLR8mRNA的表达在COPD患者和正常健康人之间却无显著差异(P>0.05)。在COPD患者中,急性期和稳定期患者的TLR3、TLR7、TLR8和TLR9无显著差异(P>0.05)。结论TLR3和TLR9的升高可能是COPD患者对病毒敏感性增高的一个重要机制。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺疾病患 外周血单个核细胞 TOLL样受体

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一种新高频通气方法对实验性急性呼吸窘迫综合征的疗效观察 被引量：2

8

作者 侯一峰 沈丽英 《中国危重病急救医学》 CAS CSCD 1996年第4期207-209,共3页

在高频喷射通气（ＨＦＪＶ）治疗犬实验性急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）时，采用连续ＨＦＪＶ基础上间歇叠加深吸气（ＨＦＪＶ＋ＤＩ）的新通气方法，以期为ＡＲＤＳ的治疗寻找一种新途径。用油酸复制犬ＡＲＤＳ模型，并随机分为３组... 在高频喷射通气（ＨＦＪＶ）治疗犬实验性急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）时，采用连续ＨＦＪＶ基础上间歇叠加深吸气（ＨＦＪＶ＋ＤＩ）的新通气方法，以期为ＡＲＤＳ的治疗寻找一种新途径。用油酸复制犬ＡＲＤＳ模型，并随机分为３组。ＨＦＪＶ＋ＤＩ组（ｎ＝１０）：在连续ＨＦＪＶ基础上每隔１０分钟加入１次深吸气；常规机械通气组（ＣＭＶ，ｎ＝１０），给予０．７８５ｋＰａ（１ｋＰａ＝１０．２０ｃｍＨ２Ｏ）呼气末正压（ＰＥＥＰ）治疗；对照组（ｎ＝１０），未予通气治疗。每隔１小时测定１次氧合及血流动力学指标，共观察５小时。注射油酸后，动脉氧分压（ＰａＯ２）由１２．４００ｋＰａ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）降至６．５６０ｋＰａ（Ｐ＜０．０１），动脉二氧化碳分压（Ｐａ－ＣＯ２）未见明显变化。通气治疗后，ＣＭＶ和ＨＦＪＶ＋ＤＩ均使ＰａＯ２明显升高，ＰａＣＯ２无明显变化（Ｐ＞０．０５），ＨＦＪＶ＋ＤＩ的氧释放指数（ＤＯ２Ｉ）明显高于ＣＭＶ组（Ｐ＞０．０５），心脏指数（ＣＩ）在ＣＭＶ组及ＨＦＪＶ＋ＤＩ组均明显减低（Ｐ＜０．０５）。提示：ＨＦＪＶ＋ＤＩ时ＰａＯ２的提高大于ＣＩ下降所致的不利影响。 展开更多

关键词 呼吸窘迫综合征 高频喷射通气 呼气末正压

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革兰阳性菌肽聚糖对人嗜碱性粒细胞中TLR_3、TLR_9 mRNA的上调作用 被引量：3

9

作者 侯一峰 何韶衡 《汕头大学医学院学报》 2005年第2期74-76,共3页

目的:探讨Toll样受体(TLR)的配体肽聚糖(PGN)、聚肌苷酸_聚胞苷酸(PolyI_C)、脂多糖(LPS)和含有去甲基化的寡核苷酸序列(CpGDNA)对嗜碱性粒细胞中TLR2～4和TLR9mRNA表达的调节作用。方法:用实时定量_逆转录聚合酶链反应检测PGN、PolyI_C... 目的:探讨Toll样受体(TLR)的配体肽聚糖(PGN)、聚肌苷酸_聚胞苷酸(PolyI_C)、脂多糖(LPS)和含有去甲基化的寡核苷酸序列(CpGDNA)对嗜碱性粒细胞中TLR2～4和TLR9mRNA表达的调节作用。方法:用实时定量_逆转录聚合酶链反应检测PGN、PolyI_C、LPS和CpGDNA刺激人嗜碱性粒细胞系(KU812)后,TLR2～4和TLR9mRNA表达的变化。结果:PGN刺激KU812细胞后,TLR3和TLR9mRNA的表达与未刺激组比有统计学意义(P<0.05);而PolyI_C、LPS和CpGDNA刺激KU812细胞后,细胞中TLR2～4和TLR9的mRNA与未刺激组比无统计学意义(P>0.05)。结论:革兰阳性菌的感染可能增加人嗜碱性粒细胞对病毒或其它细菌感染的敏感性。 展开更多

关键词 嗜碱性粒细胞 TLR9 革兰阳性菌 肽聚糖 上调作用 聚肌苷酸-聚胞苷酸 脂多糖(LPS) 聚合酶链反应检测 mRNA表达 Toll样受体 核苷酸序列 去甲基化 调节作用 实时定量 粒细胞系 细菌感染 PGN CpG DNA 统计学 逆转录 IPS 敏感性

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STAT家族与细胞因子的信号转导 被引量：3

10

作者 侯一峰 毛宝龄 《国外医学（生理病理科学与临床分册）》 2000年第5期351-353,共3页

信号转导子和转录激活子 (signaltransducerandactivatoroftranscription ,STAT)家族成员参与了许多细胞因子的信号转导 ,从而对免疫反应、炎症反应和细胞的生长、分化等进行调节。本文简要介绍STAT家族的功能结构域、STAT蛋白在介导细... 信号转导子和转录激活子 (signaltransducerandactivatoroftranscription ,STAT)家族成员参与了许多细胞因子的信号转导 ,从而对免疫反应、炎症反应和细胞的生长、分化等进行调节。本文简要介绍STAT家族的功能结构域、STAT蛋白在介导细胞因子信号时的抑制性调节及在细胞因子信号转导中的作用。 展开更多

关键词 细胞因子 信号转递 信号传导子 转录激活子

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内毒素信号传导机制 被引量：3

11

作者 侯一峰 《国外医学（呼吸系统分册）》 2001年第2期94-96,共3页

内毒素是引起全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、急性肺损伤(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合症(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的重要原因。近年来,对内毒素的细胞外、跨膜及... 内毒素是引起全身炎性反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)、急性肺损伤(acute lung injury,ALI)和急性呼吸窘迫综合症(acute respiratory distress syndrome,ARDS)的重要原因。近年来,对内毒素的细胞外、跨膜及细胞内信号传导机制进行了大量研究,并取得了重大进展。这不仅对进一步阐明内毒素的致病机制具有重要意义,也为内毒素导致的SIRS、AIL和ARDS的治疗开辟了新途径。 展开更多

关键词 内毒素 信号传号 TOLL样受体 全身炎性反应综合征 急性肺损伤

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肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ对人嗜碱性粒细胞中Toll样受体基因表达的调节作用

12

作者 侯一峰 何韶衡 《汕头大学医学院学报》 2005年第2期77-80,共4页

目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)对人嗜碱性粒细胞中Toll样受体(TLR)基因表达的调节作用。方法:用逆转录聚合酶链反应检测人嗜碱性粒细胞系(KU812)中,TLR1～10mRNA的组成型表达;用实时定量聚合酶链反应检测TNFα或IFN... 目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)和干扰素γ(IFNγ)对人嗜碱性粒细胞中Toll样受体(TLR)基因表达的调节作用。方法:用逆转录聚合酶链反应检测人嗜碱性粒细胞系(KU812)中,TLR1～10mRNA的组成型表达;用实时定量聚合酶链反应检测TNFα或IFNγ刺激KU812细胞后,TLR1～10mRNA表达的变化。结果:人嗜碱性粒细胞有TLR1～10mRNA的组成型表达,其中TLR1～6和TLR9的mRNA表达量较高,而TLR7,8和TLR10mRNA的表达量相对较少。TNFα可明显上调TLR2～4mRNA的表达,而IFNγ对TLR2和TLR9的mRNA表达有明显的上调作用。结论:人嗜碱性粒细胞不仅参与了天然免疫,而且其免疫功能还受到细胞因子的调节。 展开更多

关键词 嗜碱性粒细胞 TOLL样受体 干扰素-Γ 调节作用 基因表达 肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 聚合酶链反应检测 mRNA表达量 组成型表达 IFN-γ TLR9 TLR2 粒细胞系 实时定量 上调作用 天然免疫 细胞因子 免疫功能 逆转录

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亚麻籽蛋白酶解肽的降胆固醇作用研究

13

作者 侯一峰 李雪馨 包小兰 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期28-35,共8页

旨在为亚麻籽蛋白的深加工利用提供参考,以低温压榨亚麻籽饼为原料,采用碱溶酸沉法制备亚麻籽蛋白,再采用酶解法制备亚麻籽蛋白酶解肽。采用超滤分离降胆固醇活性最高的亚麻籽蛋白酶解肽,并以其为原料进行动物实验探究其降胆固醇作用。... 旨在为亚麻籽蛋白的深加工利用提供参考,以低温压榨亚麻籽饼为原料,采用碱溶酸沉法制备亚麻籽蛋白,再采用酶解法制备亚麻籽蛋白酶解肽。采用超滤分离降胆固醇活性最高的亚麻籽蛋白酶解肽,并以其为原料进行动物实验探究其降胆固醇作用。结果表明:在酶解时间为4 h时,亚麻籽蛋白酶解肽的胆固醇胶束溶解度抑制率最高,为47.57%;分子质量不大于3 kDa的超滤组分的胆固醇胶束溶解度抑制率最高,为70.96%;与高胆固醇饮食组相比,亚麻籽蛋白酶解肽不大于3 kDa的超滤组分能够增加小鼠的摄食量和体质量,降低血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,提高血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,降低肝脏指数和肝脏中TC、TG水平,改善肝脏脂肪变性程度,增加粪便总胆汁酸(TBA)的排泄量,并且可以通过降低丙二醛(MDA)水平,提高超氧化物歧化酶(SOD)活力来减轻高胆固醇饮食导致的氧化应激反应。综上,亚麻籽蛋白酶解肽不大于3 kDa的超滤组分具有一定的降胆固醇作用,有望成为新型的降胆固醇功能性成分。 展开更多

关键词 亚麻籽蛋白 酶解肽 小鼠 降胆固醇作用

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脂多糖结合蛋白的分离、纯化及其多抗的制备 被引量：5

14

作者 李永旺 张德明 +4 位作者 麻莉 毛宝龄 钱桂生 徐剑铖 侯一峰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期608-610,共3页

目的　分离纯化大鼠脂多糖结合蛋白 (LBP) ,并制备兔抗大鼠LBP多抗。方法　大鼠血清先通过硫酸铵盐析 ,再依次以Bio Rex70阳离子交换层析和MonoQ阴离子交换层析进行纯化 ,纯化产物采用SDS PAGE鉴定。用提纯的LBP免疫制备兔抗大鼠LBP的... 目的　分离纯化大鼠脂多糖结合蛋白 (LBP) ,并制备兔抗大鼠LBP多抗。方法　大鼠血清先通过硫酸铵盐析 ,再依次以Bio Rex70阳离子交换层析和MonoQ阴离子交换层析进行纯化 ,纯化产物采用SDS PAGE鉴定。用提纯的LBP免疫制备兔抗大鼠LBP的抗血清。用饱和硫酸铵盐析纯化后 ,经Westernblot鉴定其纯度。结果　分离纯化到较高纯度的LBP。用纯化的LBP免疫制备的兔抗LBP多抗与LBP具有良好的结合活性。 展开更多

关键词 脂多糖结合蛋白 分离 纯化 内毒素 抗体 盐析 层析

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重组LBP真核表达载体免疫制备兔抗人LBP抗体的研究 被引量：5

15

作者 李永旺 麻莉 +4 位作者 张德明 毛宝龄 钱桂生 徐剑铖 侯一峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1307-1309,共3页

目的　制备兔抗人脂多糖结合蛋白 (LBP)多抗 ,并研究其生物学特性。方法　用LBP基因的真核表达载体pEFBOS LBP作为抗原免疫制备兔抗人LBP的抗血清。用饱和硫酸铵盐析纯化后 ,通过ELISA检测抗体的效价 ;Westernblot鉴定其特异性 ;流式细... 目的　制备兔抗人脂多糖结合蛋白 (LBP)多抗 ,并研究其生物学特性。方法　用LBP基因的真核表达载体pEFBOS LBP作为抗原免疫制备兔抗人LBP的抗血清。用饱和硫酸铵盐析纯化后 ,通过ELISA检测抗体的效价 ;Westernblot鉴定其特异性 ;流式细胞术观察LBP及其抗体对荧光标记脂多糖 (LPS)与单核细胞结合的影响 ;ELISA检测LBP及其抗体对LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的影响。结果　用LBP基因免疫制备的兔抗LBP多抗与LBP具有良好的结合活性 ;有较高的效价 ;LBP增强LPS与单核细胞结合的作用能被该抗体阻断 ;LBP增强LPS诱导肺泡巨噬细胞分泌TNFα的作用也能被该抗体阻断。 展开更多

关键词 重组LBP 真核表达载体 免疫制备 脂多糖结合蛋白 抗体 脂多糖

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脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的人单核巨噬细胞株表达CD14的影响 被引量：6

16

作者 吴学玲 钱桂生 +1 位作者 徐德斌 侯一峰 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2005年第3期230-232,共3页

目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞表达CD14的影响。方法佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为5组:正常对照组、LPS组(100ng/mLLPS+100ng/mLrhLBP)、低剂量抑制肽组、中剂量抑制肽组及高剂量抑... 目的研究脂多糖结合蛋白(LBP)抑制肽对内毒素(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞表达CD14的影响。方法佛波脂(PMA)诱导U937成熟后分为5组:正常对照组、LPS组(100ng/mLLPS+100ng/mLrhLBP)、低剂量抑制肽组、中剂量抑制肽组及高剂量抑制肽组,后3组分别给予10、100和1000ng/mL抑制肽。用RTPCR和蛋白定量方法(Westernblot)测定CD14mRNA和蛋白的表达,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量。结果LBP抑制肽显著抑制LPS刺激后U937细胞CD14的mRNA与蛋白表达,同时也抑制了TNFα的分泌,较LPS组有显著差异。结论LBP抑制肽通过抑制由CD14介导的LPS信号跨膜转导和TNFα的分泌,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用。 展开更多

关键词 脂多糖结合蛋白抑制肽 内毒素 诱导作用 单核巨噬细胞株 基因表达 CD14 LPS 肿瘤坏死因子-Α

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噬菌体展示短肽模拟脂多糖结合蛋白抗炎功能位点的研究 被引量：6

17

作者 徐德斌 钱桂生 +3 位作者 侯一峰 赵晓利 陈维中 李淑萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期573-575,共3页

目的　应用噬菌体随机 12肽库筛选脂多糖结合蛋白 (lipopolysaccharidebindingprotein ,LBP)具有抗炎作用的肽序列。方法　以LPS为目标分子 ,对噬菌体十二肽库进行亲合筛选 ,4轮筛选后 ,检测随机挑取的噬菌体克隆的结合活性和抑制活性 ... 目的　应用噬菌体随机 12肽库筛选脂多糖结合蛋白 (lipopolysaccharidebindingprotein ,LBP)具有抗炎作用的肽序列。方法　以LPS为目标分子 ,对噬菌体十二肽库进行亲合筛选 ,4轮筛选后 ,检测随机挑取的噬菌体克隆的结合活性和抑制活性 ,对可与LBP竞争性结合LPS的噬菌体克隆行细胞因子生成抑制实验和LPS内化抑制实验 ,对获得的阳性克隆进行DNA序列测定 ,推导外源肽氨基酸序列 ,并与LBP序列比较 ,确定LBP的抗炎功能位点。结果　随机挑取的 10 0个噬菌体克隆中 16个可与LBP竞争性结合LPS ,其中 7个噬菌体克隆对LBP的增敏LPS刺激PBMC分泌TNF α功能无作用 ,对这 7个克隆进行LPS内化抑制实验 ,其中 3个克隆可以抑制LBP增强LPS内化作用。测序发现这 3个阳性克隆融合多肽的序列均为FHTRWNYWPYLH ,与LBP一级结构氨基酸序列同源性低。结论　该 展开更多

关键词 噬菌体随机肽库 脂多糖结合蛋白 功能位点

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脂多糖结合蛋白功能位点分析 被引量：4

18

作者 徐德斌 钱桂生 +3 位作者 侯一峰 赵晓莉 陈维中 李淑萍 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期85-85,共1页

关键词 噬菌体 脂多糖结合蛋白 功能位点

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外源性一氧化氮对LPS诱导的人单核巨噬细胞株NFκB活性的影响 被引量：3

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作者 吴学玲 钱桂生 +2 位作者 徐德斌 侯一峰 陈维中 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期935-937,共3页

目的　研究NO供体硝普钠(sodiumnitroprusside ,SNP)对脂多糖(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U93 7核转录因子κB(NFκB)活性的影响。方法　佛波脂(PMA)诱导U93 7成熟后分为4组,分别为正常对照组(不给任何药物)、LPS组(10ng/mlLPS + 10 0ng... 目的　研究NO供体硝普钠(sodiumnitroprusside ,SNP)对脂多糖(LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U93 7核转录因子κB(NFκB)活性的影响。方法　佛波脂(PMA)诱导U93 7成熟后分为4组,分别为正常对照组(不给任何药物)、LPS组(10ng/mlLPS + 10 0ng/mlrhLBP)、低剂量SNP组(LPS +rhLBP + 5 0mol/LSNP)、高剂量SNP组(LPS +rhLBP + 5 0 0mol/LSNP)。用免疫细胞化学染色图像分析法和蛋白质定量分析法(Westernblotting)测定U93 7细胞中NFκB的活性;ELISA测定U93 7细胞培养上清液中TNF α的含量。结果　LPS刺激后NFκBP65进入核内,而LBP抑制肽组核易位明显减少。低、高剂量SNP组P65胞浆灰度比较LPS组明显减小(P <0 0 1,P <0 0 5 )。各SNP组细胞核P65的D(4 5 0 )较LPS组降低;各抑制肽组细胞浆P65的D(4 5 0 )较LPS组升高。低、高剂量SNP组TNF α较LPS组显著降低(均P <0 0 5 )。结论　SNP能显著抑制LPS诱导的U93 7细胞NFκB的活化,并降低其TNF α的释放。表明SNP对急性肺损伤或脓毒血征可能具有潜在的预防和早期治疗作用。 展开更多

关键词 一氧化氮 脂多糖类 核转录因子ΚB 肿瘤坏死因子Α

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脂多糖结合蛋白抑制肽对内毒素诱导的U937细胞TLR4的影响 被引量：4

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作者 吴学玲 钱桂生 +1 位作者 徐德斌 侯一峰 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期46-48,共3页

目的　研究脂多糖结合蛋白 (LBP)抑制肽对内毒素 (LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞TLR4的影响。方法　佛波脂 (PMA)诱导U937成熟后分为 5组 ,即正常对照组 ;LPS组 ;低剂量抑制肽组 ;中剂量抑制肽组 ;高剂量抑制肽组。用RT-PCR和蛋... 目的　研究脂多糖结合蛋白 (LBP)抑制肽对内毒素 (LPS)诱导的人单核巨噬细胞株U937细胞TLR4的影响。方法　佛波脂 (PMA)诱导U937成熟后分为 5组 ,即正常对照组 ;LPS组 ;低剂量抑制肽组 ;中剂量抑制肽组 ;高剂量抑制肽组。用RT-PCR和蛋白定量方法 (Westernblot)测定TLR4mRNA和蛋白的表达 ,ELISA测定培养上清液中肿瘤坏死因子 -α(TNF -α)的含量。结果　LBP抑制肽组TLR4的mRNA ,蛋白的OD值 ,TNF -α的浓度均较LPS组低 ,较正常组高。结论　LBP抑制肽通过抑制由TLR4介导的LPS信号跨膜转导和TNF -α的分泌 ,对LPS所致疾病如脓毒血症、急性肺损伤可能有潜在的治疗作用。 展开更多

关键词 脂多糖结合蛋白抑制肽 脂多糖 CD14 肿瘤坏死因子-Α

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