渴络欣联合坎地沙坦酯治疗糖尿病肾病的疗效观察 被引量：11

1

作者 何先红 刘雷 +1 位作者 林波 刘春秋 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第28期2983-2985,共3页

目的观察渴络欣联合坎地沙坦酯治疗糖尿病肾病(DN)的临床疗效。方法早期糖尿病肾病(DNⅢ期)患者45例和临床糖尿病肾病(DNⅣ期)41例分别随机分为坎地沙坦酯对照组和渴络欣联合坎地沙坦酯治疗组,疗程均为2个月。结果 (1)与治疗前比较,治... 目的观察渴络欣联合坎地沙坦酯治疗糖尿病肾病(DN)的临床疗效。方法早期糖尿病肾病(DNⅢ期)患者45例和临床糖尿病肾病(DNⅣ期)41例分别随机分为坎地沙坦酯对照组和渴络欣联合坎地沙坦酯治疗组,疗程均为2个月。结果 (1)与治疗前比较,治疗组治疗后血清总胆固醇(TC)、血清三酰甘油(TG)、血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)明显下降(P<0.05),血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显上升(P<0.05),对照组上述指标变化比较差异无统计学意义(P>0.05)。(2)治疗后治疗组和对照组早期DN患者尿清蛋白排泄率(UAER)、尿α1微球蛋白(α1-MG)、尿β2微球蛋白(β2-MG)均明显减少(P<0.05),而治疗组较对照组疗效更为显著(P<0.05)。(3)对临床DN患者的尿蛋白定量、尿α1-MG、尿β2-MG、血清蛋白(ALB),治疗组和对照组均改善显著(P<0.05),但治疗组优于对照组(P<0.05);对临床DN患者的血肌酐(Scr),对照组无明显改善(P>0.05),但治疗组却改善显著(P<0.05)。结论渴络欣联合坎地沙坦酯治疗DN疗效肯定,在减少尿蛋白、改善肾功能方面明显优于单用坎地沙坦酯。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 渴络欣 坎地沙坦酯

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渴络欣胶囊对早期糖尿病肾脏疾病肾小管的保护作用 被引量：5

2

作者 何先红 刘雷 +1 位作者 陈晓燕 黄阳 《临床肾脏病杂志》 2014年第2期101-103,共3页

目的 探究渴络欣胶囊对早期糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）肾小管的保护作用.方法 将符合纳入标准的45例早期DKD患者随机分为2组,渴络欣胶囊联合坎地沙坦酯为治疗组22例和坎地沙坦酯为对照组23例,疗程为2个月.比较2组... 目的 探究渴络欣胶囊对早期糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）肾小管的保护作用.方法 将符合纳入标准的45例早期DKD患者随机分为2组,渴络欣胶囊联合坎地沙坦酯为治疗组22例和坎地沙坦酯为对照组23例,疗程为2个月.比较2组治疗前、后尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、尿β2微球蛋白（β2-MG）、尿白蛋白排泄率（UAER）、血肌酐（SCr）、空腹血糖（FBG）等指标变化.结果 治疗后2组尿NGAL、尿β2-MG、UAER较治疗前均有明显减少,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）;治疗后尿NGAL、尿β2-MG减少,治疗组优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）,但UAER减少,2组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;2组FBG、SCr治疗前、后比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 渴络欣胶囊能明显减少早期糖尿病肾脏疾病患者NGAL、尿β2-MG水平,对早期DKD的肾小管功能有保护作用. 展开更多

关键词 渴络欣胶囊 糖尿病肾脏疾病 肾小管

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56例颈内静脉置管相关性感染的分析及对策 被引量：5

3

作者 何先红 《海南医学》 CAS 2005年第5期76-76,共1页

关键词 颈内静脉置管 分析及对策 临时性血管通路 导管相关性感染 血液透析患者 中心静脉置管 回顾性分析 经皮穿刺 透析效果 血管道路 直接穿刺 留置时间 血流量 感染率 并发症 发病率

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低分子肝素治疗原发性肾病综合症的疗效观察 被引量：10

4

作者 何先红 李良志 黄世丽 《泸州医学院学报》 2005年第2期150-152,共3页

目的:观察低分子肝素治疗原发性肾病综合症的疗效及安全性。方法:对照组常规应用强的松及其它药物,治疗组在对照组用药的基础上加用低分子肝素(5 0 0 0IU)皮下注射。两组治疗前后分别检测2 4小时尿蛋白、血浆白蛋白、总胆固醇、甘油三... 目的:观察低分子肝素治疗原发性肾病综合症的疗效及安全性。方法:对照组常规应用强的松及其它药物,治疗组在对照组用药的基础上加用低分子肝素(5 0 0 0IU)皮下注射。两组治疗前后分别检测2 4小时尿蛋白、血浆白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、血液流变学、凝血酶原时间(PT)、部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、血小板计数,并观察临床症状改善情况及有无出血倾向。结果:经4周治疗,两组患者临床症状减轻或消失,治疗组总有效率(96 .2 % ) ,高于对照组(88.0 % )。治疗后两组患者尿蛋白减少,血浆白蛋白升高,血液粘度降低(P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,治疗组优于对照组(P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ;治疗后两组患者的APTT延长、血小板数量下降,但治疗前后比较无差异(P >0 .0 5 ) ,两组患者中无1例有出血倾向。结论:低分子肝素治疗原发性肾病综合症可以更好地改善患者的高凝状态,降低血液粘度,减轻蛋白尿,提高血浆白蛋白,明显地增加疗效,并有很好的安全性。 展开更多

关键词 原发性肾病综合证 低分子肝素 疗效

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个案管理对糖尿病患者的影响 被引量：5

5

作者 何先红 刘萍 张晓旭 《基层医学论坛》 2014年第3期279-281,共3页

目的探讨个案管理对糖尿病患者治疗效果的影响。方法对92例糖尿病患者实施个案管理,分析管理前后患者的血糖及相关代谢疾病情况。结果个案管理1年后,患者血糖得到有效控制,患者治疗依从性明显提高,体重及相关并发症得到良好控制,管理前... 目的探讨个案管理对糖尿病患者治疗效果的影响。方法对92例糖尿病患者实施个案管理,分析管理前后患者的血糖及相关代谢疾病情况。结果个案管理1年后,患者血糖得到有效控制,患者治疗依从性明显提高,体重及相关并发症得到良好控制,管理前后比较差异明显(P<0.01或P<0.05)。结论个案管理能有效提高糖尿病患者的自我管理能力,控制血糖及并发症的发生。 展开更多

关键词 糖尿病 个案管理 血糖 并发症

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来氟米特与霉酚酸酯联合激素治疗重症紫癜性肾炎的临床观察 被引量：3

6

作者 何先红 胡江华 《临床内科杂志》 CAS 2015年第9期548-549,共2页

既往研究认为，对于病理改变Ⅲ级及以上、临床表现为肾病综合征的重型过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患者，采用糖皮质激素联合细胞毒药物如环磷酰胺（CTX）治疗均有确切疗效，并且激素联合 CTX 治疗重症 HSPN 比单用糖皮质激素疗效好［1-2... 既往研究认为，对于病理改变Ⅲ级及以上、临床表现为肾病综合征的重型过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患者，采用糖皮质激素联合细胞毒药物如环磷酰胺（CTX）治疗均有确切疗效，并且激素联合 CTX 治疗重症 HSPN 比单用糖皮质激素疗效好［1-2］。但长期应用 CTX 易产生严重的药物不良反应，患者耐受性差，部分重症 HSPN 患者应用激素联合 CTX 治疗疗效欠佳且复发率较高［3］。霉酚酸酯（MMF）、来氟米特（LEF）作为新型免疫抑制剂，在联合糖皮质激素治疗 HSPN 中已显示出一定的治疗效果，且具有不良反应少和复发率低的优点。我们应用激素分别联合 LEF 和 MMF 治疗以肾病综合征为表现的成人重症HSPN，均取得较好治疗效果，报道如下。 展开更多

关键词 来氟米特 霉酚酸酯 紫癜性肾炎 治疗

原文传递

塞克硝唑片治疗细菌性阴道病的临床分析 被引量：4

7

作者 何先红 《中国实用医药》 2009年第8期25-26,共2页

目的评价塞克硝唑片治疗细菌性阴道病的有效性和安全性。方法256例细菌性阴道病患者随机分成对照组126例和试验组130例,分别给予甲硝唑片和塞克硝唑片口服;停药后3～5d及停药后下次月经来潮干净后3～7d比较两组的临床疗效,比较两组3个... 目的评价塞克硝唑片治疗细菌性阴道病的有效性和安全性。方法256例细菌性阴道病患者随机分成对照组126例和试验组130例,分别给予甲硝唑片和塞克硝唑片口服;停药后3～5d及停药后下次月经来潮干净后3～7d比较两组的临床疗效,比较两组3个月内的复发率;并观察两组的不良反应的发生情况。结果停药后3～5d,对照组的治愈率和有效率分别为64.3%和82.5%,试验组的治愈率和有效率分别为76.2%和91.5%;停药后下次月经来潮干净后3～7d对照组的治愈率和有效率分别为65.9%和83.3%,试验组的治愈率和有效率分别为78.5%和92.3%;两组比较有显著性差异(P<0.05)。对照组和试验组的复发率分别为12.0%和14.7%(P>0.05)。两组间的不良反应发生率无显著性差异。结论塞克硝唑片治疗细菌性阴道病安全有效。 展开更多

关键词 塞克硝唑 甲硝唑 细菌性阴道病

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DNA免疫吸附柱治疗狼疮性肾炎的临床应用 被引量：3

8

作者 何先红 林波 +1 位作者 李明清 李香宜 《中国伤残医学》 2012年第1期19-20,共2页

目的:观察DNA免疫吸附柱对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法:选择16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附柱进行32例次血液吸附。观察相关症状及蛋白尿改善情况:ANA、ds-DNA清除效果;血常规、肝、肾功能、电解质、免疫球蛋白等影响程... 目的:观察DNA免疫吸附柱对狼疮性肾炎患者的临床疗效。方法:选择16例活动性狼疮性肾炎患者,采用DNA免疫吸附柱进行32例次血液吸附。观察相关症状及蛋白尿改善情况:ANA、ds-DNA清除效果;血常规、肝、肾功能、电解质、免疫球蛋白等影响程度。结果:吸附后症状明显改善,尿蛋白减轻;ANA水平显著下降(P=0.0001),ds-DNA抗体完全清除;血中有形成份、肝、肾功能、电解质等无明显影响。结论:DNA免疫吸附的净化疗法是治疗狼疮性肾炎特异性相对较强、疗效好、无明显毒副反应的一种新疗法。 展开更多

关键词 狼疮性.肾炎 免疫吸附

原文传递

鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备方法的比较

9

作者 何先红 倪黎纲 +1 位作者 余飞 李碧春 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期35-38,共4页

提取鸡X期胚盘细胞,体外培养传至第3代,采用口吸管法、细胞稀释法及克隆环法将细胞集落分离成单个细胞,并将其接种至96孔板上,每孔1个细胞,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物,探讨鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备的实际操作的... 提取鸡X期胚盘细胞,体外培养传至第3代,采用口吸管法、细胞稀释法及克隆环法将细胞集落分离成单个细胞,并将其接种至96孔板上,每孔1个细胞,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物,探讨鸡胚胎干细胞单细胞克隆制备的实际操作的可行性,并对其生物学特性进行鉴定。结果表明:口吸管法、克隆环法、细胞稀释法克隆率分别为0、1.0%、4.2%。3种方法相比较,细胞稀释法具有操作简单易行、实验时间短、对细胞伤害小等优点,经碱性磷酸酶活性和阶段特异性表面抗原1免疫荧光鉴定均呈阳性,扩增出的克隆能稳定增殖且不分化。 展开更多

关键词 鸡 胚胎干细胞 单细胞克隆

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用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术56例分析

10

作者 何先红 李良志 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第28期6967-6968,共2页

目的:总结并分析56例患者用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术之效果。方法:回顾性分析56例终末期尿毒症患者用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术的临床资料。结果:56例用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术,一次手术成功55例,成功率为98.2%。结论:用钛轮丁行动... 目的:总结并分析56例患者用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术之效果。方法:回顾性分析56例终末期尿毒症患者用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术的临床资料。结果:56例用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术,一次手术成功55例,成功率为98.2%。结论:用钛轮丁行动静脉内瘘吻合术,手术方式实用易行,成功率高。 展开更多

关键词 动静脉瘘/外科学 吻合术 外科

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两种方法治疗未破裂型异位妊娠疗效观察分析

11

作者 何先红 《中国实用医药》 2009年第22期113-114,共2页

目的寻找一种简便、高效、创伤小、不良反应小又不影响生育功能的异位妊娠的保守治疗方法。方法将78例未破裂异位妊娠患者,按治疗方法不同随机分为两组。A组,超声引导下局部注射无水乙醇38例;B组,超声引导下局部注射无水乙醇联合口服米... 目的寻找一种简便、高效、创伤小、不良反应小又不影响生育功能的异位妊娠的保守治疗方法。方法将78例未破裂异位妊娠患者,按治疗方法不同随机分为两组。A组,超声引导下局部注射无水乙醇38例;B组,超声引导下局部注射无水乙醇联合口服米非司酮50 mg1次/12 h,3 d40例。监测患者的血β-HCG水平、临床症状、不良反应,B超监测包块吸收及腹腔内出血等情况,3个月后行输卵管通畅试验。结果血绒毛膜促性腺激素(β-HCG)下降及病灶包块缩小或消失A组与B组有显著性差异(P<0.01);在治愈率和术后输卵管畅通率比较,B组明显高于A组,差异有显著性(P<0.05),不良反应发生率两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论超声引导下局部注射无水乙醇联合口服米非司酮治疗未破裂性异位妊娠方法简便,成功率高、创伤小、不良反应少及输卵管通畅率高等优点,可以作为异位妊娠的保守治疗方法之一,值得临床推广。 展开更多

关键词 异位妊娠 超声 无水乙醇 保守治疗

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不同剂量糖皮质激素联合血液净化治疗蜂蜇伤所致多器官功能障碍综合征的疗效研究 被引量：20

12

作者 刘雷 李良志 +5 位作者 何先红 汤跃武 史继红 吴泽成 刘春秋 佘青 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1205-1207,1210,共4页

目的比较不同剂量的糖皮质激素联合血液净化治疗蜂蜇伤所致多器官功能障碍综合征(MODS)的临床疗效。方法回顾性分析我院2004年1月—2010年2月收治的81例蜂蜇伤患者,其中57例(70.37%)发生MODS。57例MODS患者均采用血液净化(血液灌流/血... 目的比较不同剂量的糖皮质激素联合血液净化治疗蜂蜇伤所致多器官功能障碍综合征(MODS)的临床疗效。方法回顾性分析我院2004年1月—2010年2月收治的81例蜂蜇伤患者,其中57例(70.37%)发生MODS。57例MODS患者均采用血液净化(血液灌流/血液透析,HP/HD)治疗及激素治疗,共分为以下两组:(1)HP/HD+甲泼尼龙冲击治疗组(HMP组),共26例;(2)HP/HD+常规大剂量甲泼尼龙组(HMC组),共31例。HMP组采用甲泼尼龙0.5 g或1.0 g,1次/d,连续3 d冲击治疗后改为甲泼尼龙40～80 mg/d;HMC组常规应用大剂量激素,甲泼尼龙80～160 mg/d。两组均采用HP/HD,1次/d,连续3次后改为HD,每周3次治疗。结果 HMP组26例患者中21例(80.77%)好转出院,4例死亡,1例患者24 h后自动出院后死亡。HMC组31例患者中22例(70.97%)好转出院,7例死亡,2例患者入院后48 h内自动出院后死亡;两组患者的生存率间差异无统计学意义(χ2=0.733,P>0.05)。入院第1天两组患者的血肌酐(SCr)、总胆红素(TB iL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、白细胞计数(WBC)及血红蛋白(Hb)间差异均无统计学意义(P>0.05)。入院第7天两组患者的TB iL、ALT、AST、LDH、CK、CK-MB、WBC及Hb间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论甲泼尼龙冲击治疗与常规大剂量激素相比,可能有利于加快患者受损器官功能的恢复,缩短住院时间,但能否提高患者的生存率还有待进一步临床研究证实。 展开更多

关键词 蜂蜇伤 多器官功能障碍综合征 血液灌流 血液透析 糖皮质激素

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骨化三醇对维持性血液透析患者微炎症及氧化性应激状态的影响研究 被引量：24

13

作者 刘春秋 刘雷 +5 位作者 李良志 何先红 汤跃武 史继红 王军 吴泽成 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期516-519,共4页

目的观察骨化三醇对维持性血液透析(MHD)患者微炎症及氧化性应激状态的影响。方法选择我院行MHD的患者60例,按随机数字表法随机分为治疗组及对照组各30例,对照组给予常规药物治疗;治疗组在常规药物治疗的基础上加用骨化三醇胶丸,0.50μ... 目的观察骨化三醇对维持性血液透析(MHD)患者微炎症及氧化性应激状态的影响。方法选择我院行MHD的患者60例,按随机数字表法随机分为治疗组及对照组各30例,对照组给予常规药物治疗;治疗组在常规药物治疗的基础上加用骨化三醇胶丸,0.50μg/d口服治疗。均治疗12周,均不使用血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂以及他汀类药物。另选择30例健康者作为正常组。观察治疗前后患者血清高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及血浆丙二醛(MDA)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)水平变化,并与正常组进行比较。结果治疗前,3组受检者的血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平及血浆MDA、GSH-PX水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05),与正常组比较,治疗组和对照组患者的血清hs-CRP、IL-6、TNF-α及血浆MDA水平均升高,血浆GSH-PX水平均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。骨化三醇治疗12周后,3组受检者的血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平及血浆MDA、GSH-PX水平比较差异仍均有统计学意义(P<0.05),与治疗前及对照组治疗后比较,治疗组患者的血清hs-CRP、IL-6、TNF-α及血浆MDA水平均降低,血浆GSH-PX水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05);而对照组治疗12周后,血清hs-CRP、IL-6、TNF-α水平及血浆MDA、GSH-PX水平与治疗前比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MHD患者存在微炎症及氧化性应激状态,骨化三醇治疗可以显著改善MHD患者微炎症状态及氧化性应激水平。 展开更多

关键词 维持性血液透析 微炎症状态 氧化性应激 骨化三醇

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血液净化治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者的疗效 被引量：22

14

作者 吴泽成 汤跃武 +3 位作者 李良志 史继红 何先红 刘雷 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期402-404,共3页

目的:探讨不同血液净化方式治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者的疗效及安全性。方法:选取诊断明确的原发性肾病综合征伴有利尿剂抵抗患者40例,采用完全随机化分为普通血液透析(HD)组和连续性血液净化(CVVH)组,每组20例。均给予调脂、抗... 目的:探讨不同血液净化方式治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者的疗效及安全性。方法:选取诊断明确的原发性肾病综合征伴有利尿剂抵抗患者40例,采用完全随机化分为普通血液透析(HD)组和连续性血液净化(CVVH)组,每组20例。均给予调脂、抗凝及糖皮质激素等基础治疗,观察时间为4周。观察两组患者治疗前后生化指标(24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白、血清尿素氮和血清肌酐)的变化及水肿的缓解情况。结果:血液净化治疗后,患者尿量均明显增加,24 h尿蛋白定量下降的同时血浆白蛋白均显著提升,血尿素氮及肌酐水平均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与HD组比较,治疗2周后CVVH组患者尿量增加更明显(P<0.05),24 h尿蛋白定量下降及血浆白蛋白提升更显著(P<0.05),血尿素氮及肌酐水平两组之间无差异(P>0.05)。治疗4周后两组患者尿量及肾功能差异无统计学意义(P>0.05),CVVH组24 h尿蛋白定量下降及血浆白蛋白提升比HD组更显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者均无严重并发症发生。结论:血液净化治疗利尿剂抵抗肾病综合征水肿患者是安全、有效的,连续性血液净化治疗能更有效缓解利尿剂抵抗肾病综合征患者的严重顽固性水肿,促进肾功能恢复,改善肾病预后。 展开更多

关键词 肾病综合征 利尿剂抵抗 水肿 血液净化

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鸡胚胎干细胞的分离和培养 被引量：9

15

作者 戴建明 何先红 +2 位作者 赵文明 吴信生 李碧春 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2007年第19期15-19,共5页

实验从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸以及含1000IU/mL白血病抑制因子(LIF)、10ng/mL... 实验从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸以及含1000IU/mL白血病抑制因子(LIF)、10ng/mL碱性成纤维生长因子(bFGF)和5ng/mL干细胞生长因子(SCF)的高糖DMEM对细胞进行培养和传代,可以获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞(ES)。通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征。同时通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8min的ES细胞适合于传代培养。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 培养 传代 鉴定 鸡

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鸡抗病毒Mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建 被引量：8

16

作者 倪黎纲 何先红 +5 位作者 余飞 李碧春 高波 谢飞 程旭梅 吴晓伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期891-894,共4页

利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长MxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表... 利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长MxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的Mx基因插入真核表达载体,通过PCR、酶切鉴定插入片段正确,提取质粒转染COS-Ⅰ细胞进行RT-PCR鉴定。结果表明:正确克隆了鸡Mx基因,并成功对该基因进行PCR诱变修饰,构建了能够表达鸡Mx基因的重组真核表达载体,为Mx基因体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 MX蛋白 PCR突变 真核表达载体

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鸡胚胎干细胞分离培养和单细胞克隆的制备 被引量：7

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作者 吴信生 何先红 +4 位作者 戴建明 田智泉 杨海燕 徐琪 李碧春 《中国家禽》 北大核心 2008年第22期30-34,共5页

从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mmol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸、以及含1000U/mLLIF、10ng/mLbFGF和5ng/mLSCF的高... 从鸡第X期胚胎中分离胚盘,以鸡成纤维细胞为饲养层,用添加了10%的胎牛血清、2%的鸡血清、2mmol/LL-谷氨酰胺、1mmol/L丙酮酸钠、5.5×10-5mmol/Lβ-巯基乙醇、10μL/mL非必需氨基酸、以及含1000U/mLLIF、10ng/mLbFGF和5ng/mLSCF的高糖DMEM对细胞进行培养和传代。利用鸡第Ⅹ期的胚胎干细胞,采用口吸管法、细胞稀释法和克隆环法3种方法,制备单细胞克隆,采用细胞化学法和免疫荧光法检测细胞表面标志物。结果显示,可获得传至5～6代的鸡胚胎干细胞。通过对传代培养后的鸡ES细胞进行AKP染色鉴定和SSEA-1的鉴定,证实细胞未发生分化,具有胚胎干细胞的特征。通过不同分离胚盘方法和不同消化时间的比较得出药勺法提取胚盘简单易行,原代消化5～8min的ES细胞适合于传代培养。口吸管法、细胞稀释法和克隆环法单细胞克隆形成率分别为0、4.2%和1.0%。经AKP活性和SSEA-1免疫荧光鉴定均呈阳性,扩增出的克隆能稳定增殖不分化。结果表明,细胞稀释法操作简单易行,试验时间短,对细胞伤害小,为鸡ES单细胞克隆进一步建系提供了可行的方法。 展开更多

关键词 鸡 胚胎干细胞 分离 培养 单细胞克隆

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渴络欣联合依那普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制的研究 被引量：16

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作者 刘雷 李良志 +4 位作者 何先红 王辉 佘青 吴泽成 刘春秋 《中国中西医结合肾病杂志》 2011年第3期254-256,I0004,共4页

目的:探讨渴络欣胶囊联合依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠43只,随机分为5组:正常对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)、渴络欣组(DM+K)、依那普利组(DM+E)及渴络欣与依那普利联合给药组(DM+K+E)。8周后,观... 目的:探讨渴络欣胶囊联合依那普利对糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及其机制。方法:雄性SD大鼠43只,随机分为5组:正常对照组(NC)、糖尿病模型组(DM)、渴络欣组(DM+K)、依那普利组(DM+E)及渴络欣与依那普利联合给药组(DM+K+E)。8周后,观测肾组织形态学和肾功能变化,尿白蛋白排泄率等指标的变化,肾组织丙二醛(MDA)含量与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-PX)以及细胞膜、细胞质蛋白激酶C(PKC)活性变化;免疫组化法检测肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)、PKC表达水平的变化,RT-PCR方法检测肾组织TGF-β1表达水平的变化。结果:(1)各给药组均可降低糖尿病大鼠肾脏肥大指数(肾重/体重,KW/BW)、平均肾小球体积(MGV)、系膜面积比(FMA)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)(P<0.01),联合组优于单药组(P<0.05,P<0.01)。(2)对糖尿病肾组织MDA含量增加及SOD、CAT与GSH-PX活性降低的改善作用,联合组优于单给药组(P<0.05,P<0.01);对糖尿病肾组织细胞膜PKC活性增加及细胞质PKC活性降低的改善作用,联合组优于单给药组(P<0.05)。(3)糖尿病模型组肾组织TGF-β1、PKC蛋白及TGF-β1mRNA表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01),各给药组上述指标与DM组比较,则有明显的降低(P<0.01),联合组优于单药组(P<0.05,P<0.01)。结论:渴络欣与依那普利联合给药对糖尿病肾脏保护作用优于单种药物治疗,其机制可能与其对肾组织氧化应激增加及PKC、TGF-β1表达的协同抑制作用有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 渴络欣 依那普利 氧化应激 转化生长因子-Β1 蛋白激酶C

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咪唑立宾治疗重症过敏性紫癜性肾炎21例疗效观察 被引量：12

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作者 李良志 刘雷 +1 位作者 何先红 汤跃武 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1904-1906,共3页

目的观察咪唑立宾对重症过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患者的疗效及安全性。方法将21例重症HSPN患者,随机分为咪唑立宾（MZR）治疗（MZR组,n=10）组和环磷酰胺（CTX）间断静脉冲击治疗（CTX组,n=11）组。MZR剂量150 mg/d,CTX剂量为0.6~0.75 ... 目的观察咪唑立宾对重症过敏性紫癜性肾炎（HSPN）患者的疗效及安全性。方法将21例重症HSPN患者,随机分为咪唑立宾（MZR）治疗（MZR组,n=10）组和环磷酰胺（CTX）间断静脉冲击治疗（CTX组,n=11）组。MZR剂量150 mg/d,CTX剂量为0.6~0.75 g/m2体表面积,每月静脉滴注1次。2组均同时联合小剂量激素治疗（泼尼松0.6~0.8 mg.kg-1.d-1）。治疗6个月后比较各组完全缓解率、部分缓解率、蛋白尿、血尿、肾功能变化情况及不良反应。结果治疗6个月后,MZR组临床缓解率显著高于CTX组,MZR组尿蛋白水平、血肌酐（SCr）水平显著低于CTX组,而血清清蛋白（Alb）水平显著高于CTX组。MZR组1例出现高尿酸血症。CTX组8例出现胃肠道反应,4例出现肝转氨酶增高。两组患者均未因不良反应中断治疗。结论激素联合MZR治疗重症HSPN缓解率高于CTX静脉冲击疗法,且不良反应更小。 展开更多

关键词 咪唑立宾 过敏性紫癜性肾炎

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鸡精原干细胞定向诱导分化特性的研究 被引量：3

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作者 李碧春 魏彩霞 +7 位作者 余飞 何先红 倪黎纲 陈强 王宵燕 肖小君 徐琪 刘铁铮 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1336-1342,共7页

取孵化18～20d的鸡胚睾丸，分离精原干细胞（SSCs），培养传代3次后，用特异性化学物质定向诱导分化，以研究鸡培养传代后SSCs保持多向分化的潜能。①用特异的化学物质地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C诱导鸡SSCs向成骨细胞分化，用Von... 取孵化18～20d的鸡胚睾丸，分离精原干细胞（SSCs），培养传代3次后，用特异性化学物质定向诱导分化，以研究鸡培养传代后SSCs保持多向分化的潜能。①用特异的化学物质地塞米松、β-磷酸甘油钠、维生素C诱导鸡SSCs向成骨细胞分化，用Von Kossa＇s法、改良的钙钴法及免疫组化法进行成骨细胞鉴定；②用维甲酸（RA）、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）诱导SSCs向神经元样细胞分化，甲苯胺蓝特异染色和组织化学鉴定。③用地塞米松、胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤（IBMX）诱导SSCs向脂肪细胞分化，特异性的油红O染色和脂肪细胞标志基因PPAR7检测。结果显示，SSCs被诱导15～21d后分化为成骨细胞，诱导形成率为80％；Von Kossa＇s染色细胞间布满黑色颗粒，具有矿化基质沉积；改良钙钴法碱性磷酸酶染色胞浆呈深棕色或深黑色，免疫组化染色细胞呈阳性。SSCs被诱导3～7d后分化为神经元样细胞，甲苯胺蓝染色阳性率为85％。SSCs被诱导7～21d后，分化成脂肪细胞，分化率为85％。诱导的脂肪细胞经特异性的油红O染色为阳性，并高表达脂肪细胞标志基因PPARγ。结论：在不同的诱导条件下，SSCs可被定向诱导分化为3种成体细胞，证明其培养传代后仍具有多向分化能力。 展开更多

关键词 精原干细胞 成骨细胞 神经元样细胞 脂肪细胞 诱导 分化

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