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一株鸽副黏病毒Ⅰ型分离鉴定及致病性分析
1
作者 张姗 刘大虎 +7 位作者 刘宝京 梁琳 梁瑞英 汤新明 仇旭升 丁铲 丁家波 侯绍华 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期4051-4060,共10页
在天津的病死鸽病料中分离鉴定鸽副黏病毒Ⅰ型(pigeon paramyxovirus-1,PPMV-1),并对其进行遗传演化、生物学特性、致病性分析,为鸽副黏病毒Ⅰ型疫苗的研发提供科学依据。采用RT-PCR方法进行病原检测,在SPF鸡胚上分离纯化病毒;经遗传演... 在天津的病死鸽病料中分离鉴定鸽副黏病毒Ⅰ型(pigeon paramyxovirus-1,PPMV-1),并对其进行遗传演化、生物学特性、致病性分析,为鸽副黏病毒Ⅰ型疫苗的研发提供科学依据。采用RT-PCR方法进行病原检测,在SPF鸡胚上分离纯化病毒;经遗传演化分析、致病性分析及动物回归试验对病毒分离株进行全面分析。结果显示:病死鸽的脏器样品经RT-PCR鉴定为NDV核酸阳性;鸡胚分离纯化后得到1株鸽副黏病毒Ⅰ型毒株,命名为Pigeon/TJ/CH/020/2020(TJ20)。通过对病毒F基因测序及进化树分析,确定该分离毒株属于ClassⅡ类Ⅵ.2.1.1.2.2(原Ⅵk)基因亚型,裂解位点的氨基酸残基为112 R-R-Q-K-R-F^(117),符合NDV强毒株的分子特征。交叉血凝抑制试验显示TJ20株与LaSota疫苗株存在明显的抗原性差异。TJ20株的鸡胚半数感染量(EID_(50))为10^(-8.38)·0.1 mL^(-1)、细胞半数感染量(TCID_(50))为10^(-8.64)·0.1 mL^(-1)、鸡胚平均致死时间(MDT)为62 h、1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为1.19。动物感染试验结果表明,1月龄鸽人工感染TJ20株后第4天开始出现嗜睡、垂翅、腹泻、瘫痪、斜颈扭头等新城疫典型临床症状,发病率和死亡率均为100%。本研究从病死鸽组织中成功分离出一株具有高致病性的Ⅵ.2.1.1.2.2(原Ⅵk)基因亚型的TJ20毒株,为后续鸽副黏病毒Ⅰ型疫苗研发提供了重要的生物学材料。 展开更多
关键词 鸽副黏病毒Ⅰ型 分离鉴定 Ⅵ.2.1.1.2.2(原Ⅵk)基因亚型 致病性
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PTEN基因稳定敲除DF-1细胞系的构建及验证
2
作者 郭佩东 宁红涯 +6 位作者 谭磊 刘炜玮 孙英杰 仇旭升 廖瑛 丁铲 宋翠萍 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期185-190,共6页
10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)功能丧失导致AKT的活化与积累,在肿瘤发生过程中起着关键作用。为了研究PTEN在禽肿瘤及病毒感染中的作用,构建PTEN基因稳定敲除的细胞株。测定PTEN基因稳定敲除细胞系的增殖能力,细胞周... 10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)功能丧失导致AKT的活化与积累,在肿瘤发生过程中起着关键作用。为了研究PTEN在禽肿瘤及病毒感染中的作用,构建PTEN基因稳定敲除的细胞株。测定PTEN基因稳定敲除细胞系的增殖能力,细胞周期,氧化应激和对细胞凋亡及其对H9N2及NDV病毒复制的影响。结果表明PTEN基因稳定敲除后促进细胞的增殖和细胞ROS上升以及抑制细胞凋亡,并且敲除PTEN促进了NDV与H9N2病毒的复制,这为后续研究PTEN功能奠定了基础。 展开更多
关键词 PTEN 细胞增殖 细胞周期 氧化应激 病毒复制
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整合REV-LTR基因的MDV活疫苗与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力比较
3
作者 张秀梅 宋翠萍 +6 位作者 谭磊 孙英杰 刘炜玮 廖瑛 丁铲 仇旭升 罗廷荣 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第1期73-81,共9页
利用同源重组技术将禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的长末端重复序列(LTR)整合进CVI988/Rispens疫苗株基因组中所构建成的重组马立克氏病病毒株(r MDV-LTR株),具有较高的增殖效率。为比较r MDV-LTR株与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力差... 利用同源重组技术将禽网状内皮组织增生症病毒(REV)的长末端重复序列(LTR)整合进CVI988/Rispens疫苗株基因组中所构建成的重组马立克氏病病毒株(r MDV-LTR株),具有较高的增殖效率。为比较r MDV-LTR株与亲本CVI988/Rispens株的免疫效力差异,开展了对这两种疫苗的比较试验。试验将这两种疫苗分别按照三个不同剂量经颈背部皮下接种1日龄SPF鸡。接种后第7 d,攻毒马立克氏病强毒株rMd5,连续观察60 d后进行剖检。临床病理观察结果发现,以不低于250 PFU/羽剂量的rMDV-LTR株或CVI988/Rispens株免疫SPF雏鸡都可以提供大于80%的免疫保护效率;以125 PFU/羽剂量的两种疫苗虽均不能提供大于80%的免疫保护效力,但rMDV-LTR株免疫组试验鸡未出现死亡,仅有2只鸡出现消瘦,剖解脏器无肿瘤,而CVI988/Rispens株免疫组鸡出现2只死亡,其中1只剖解后检出肿瘤。rMDV-LTR株和CVI988/Rispens株免疫组的免疫保护指数分别为77.78%和66.67%。由实验结果可见,在较小免疫剂量下,rMDV-LTR株免疫保护率高于亲本CVI988/Rispens疫苗株。说明重组毒rMDV-LTR疫苗株可以作为一种安全的、有效的新型MDV疫苗。 展开更多
关键词 马立克氏病 重组病毒 禽网状内皮组织增生症病毒的长末端重复序列 攻毒保护 免疫效力
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新城疫病毒Mukteswar株感染鸡巨噬细胞入胞及胞内转运途径研究
4
作者 黄新月 谭磊 +6 位作者 宋翠萍 仇旭升 孙英杰 刘炜玮 廖瑛 丁铲 吴艳涛 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期1-10,共10页
新城疫病毒(NDV)可以通过多种内吞途径入侵不同宿主细胞并在内体中逃逸从而避免被宿主天然免疫系统“追踪”。为探究NDV中等毒力疫苗株Mukteswar感染鸡巨噬细胞(HD11)的入胞和胞内转运途径,本研究利用Dynasore、CPZ、MβCD、Baf A1预处... 新城疫病毒(NDV)可以通过多种内吞途径入侵不同宿主细胞并在内体中逃逸从而避免被宿主天然免疫系统“追踪”。为探究NDV中等毒力疫苗株Mukteswar感染鸡巨噬细胞(HD11)的入胞和胞内转运途径,本研究利用Dynasore、CPZ、MβCD、Baf A1预处理细胞,然后感染NDV Mukteswar株,通过Westem blot和IFA检测NDV NP蛋白的表达变化。结果显示Dynasore、MβCD和Baf A1处理后NP的表达水平降低,表明NDV入侵HD11细胞是利用小窝蛋白介导的内吞途径,且依赖动力蛋白、胆固醇和pH。通过过表达和干扰试验检测调节不同内体囊泡类型运输的Rab蛋白(Rab5、Rab7、Rab11)对NDV感染HD11细胞的影响,结果发现Rab7的表达对NDV感染无影响,而过表达Rab5和Rab11促进NDV感染,表明是由Rab5、Rab11而不是Rab7调节NDV的转运。本研究丰富了NDV入侵宿主免疫细胞的途径及胞内转运的研究,并为全面阐明NDV感染机制提供了理论基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 HD11细胞 小窝蛋白介导的内吞 RAB蛋白
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新城疫病毒P/V/W基因编码产物功能结构域的分析及定位 被引量：4
5
作者 仇旭升 孟春春 +3 位作者 于洋 陈鸿军 于圣青 丁铲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期191-196,207,共7页
NDV的P基因能够通过RNA编辑机制编码3种病毒蛋白P、V和W。为了初步确定新城疫病毒P、V和W的功能结构域及其在P基因中位置,对这3种具有相同N端不同C端的病毒蛋白进行生物信息学分析。分别设计针对基因Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅶ型以及class Ⅰ NDV毒... NDV的P基因能够通过RNA编辑机制编码3种病毒蛋白P、V和W。为了初步确定新城疫病毒P、V和W的功能结构域及其在P基因中位置,对这3种具有相同N端不同C端的病毒蛋白进行生物信息学分析。分别设计针对基因Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅶ型以及class Ⅰ NDV毒株P基因的引物。RT-PCR获得5种基因型NDV P基因的正确序列。通过核苷酸序列预测P基因表达产物的氨基酸序列,并进行二级结构预测和三级结构模拟。将SV5 V蛋白空间结构作为模板,从而分析获得了NDVP/V/W基因编码产物的二级结构以及部分空间结构。综合各种分析数据,预测P蛋白辅助N蛋白折叠的结构域位于N端前50 aa内;介导P蛋白四聚体形成的coiled-coil结构位于221-290 aa范围内;介导P蛋白与基因组的作用的X结构域位于291-392 aa范围内。V蛋白的C端结构域的编码区域位于P蛋白132-239 aa编码区域内。 展开更多
关键词 新城疫病毒 P蛋白 V蛋白 生物信息学 功能结构域
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免疫程序与母源抗体对H5禽流感疫苗免疫鸭和鹅HI抗体水平的影响 被引量：21
6
作者 张评浒 任涛 +6 位作者 唐应华 薛峰 仇旭升 曹永忠 刘晓文 辛朝安 刘秀梵 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期638-642,共5页
对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗... 对不同日龄与母源抗体水平的鸭和鹅,用H5亚型禽流感疫苗免疫后,其HI抗体消长情况进行了比较和观察,结果,初生水禽3日龄首免即可对禽流感疫苗(H5亚型)产生良好的免疫应答;雏鹅母源抗体几乎以每4d下降1个HI抗体效价单位的速度消退;母源抗体对H5禽流感疫苗免疫后的HI抗体水平存在一定的干扰作用;加强免疫鸭和鹅所产生的H5 HI抗体水平及其维持时间与仅免疫一次的鸭和鹅所产生的抗体水平之间存在显著差异;鸭和鹅免疫H5禽流感疫苗后第25～30d H5 HI抗体水平达到高峰. 展开更多
关键词 禽流感 H5亚型 灭活疫苗 免疫 母源抗体
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不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响 被引量：19
7
作者 张评浒 唐应华 +4 位作者 仇旭升 薛峰 曹永忠 高崧 刘秀梵 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第4期267-271,共5页
为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因... 为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响,对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后,做了一系列对比试验。结果发现,经受体破坏酶(RDE)处理后,虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响,但因处理复杂,费用高,不宜推广应用;经鸡红细胞吸附处理,可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用,但处理费时;而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体,可以有效去除血清非特异性凝集的影响,且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而,应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。 展开更多
关键词 血清抗体检测 红细胞悬液 禽流感 家禽 非特异性 凝集作用 阳性血清 对比试验 推广应用 吸附处理 鸡红细胞 细胞检测 抗体水平 疫苗免疫 水禽 异种 宿主
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H5N2与H5N1禽流感油乳灭活疫苗免疫鹅群对H5N1流行株攻毒的保护效力及母源抗体对免疫效力的干扰 被引量：9
8
作者 张评浒 唐应华 +6 位作者 薛峰 曹永忠 仇旭升 孙学辉 刘小文 高崧 刘秀梵 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期268-270,274,共4页
应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致... 应用H5N2和H5N12种类型禽流感油乳灭活疫苗分别免疫鹅群,观察比较了二者对H5N1型高致病性禽流感病毒的攻毒保护效力。结果表明,在同等剂量免疫条件下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律3项指标综合评价来看,H5N1灭活苗水禽免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2灭活苗理想,且水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。 展开更多
关键词 禽流感 H5亚型油乳灭活疫苗 鹅 免疫 攻毒
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新城疫分离毒HN蛋白的抗原性初步分析及分子特性研究 被引量：10
9
作者 姚春峰 仇旭升 +4 位作者 刘文博 顾敏 吴双 曹永忠 刘秀梵 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期87-93,共7页
运用针对NDV囊膜糖蛋白(HN)的单克隆抗体(MAbs),对2005～2006年间自我国江苏和广西部分地区的20株NDV分离株进行排谱试验,初步分析了不同毒株之间HN蛋白的抗原表位差异;并应用RT-PCR技术成功扩增了其HN基因整个编码区,经克隆、测序最终... 运用针对NDV囊膜糖蛋白(HN)的单克隆抗体(MAbs),对2005～2006年间自我国江苏和广西部分地区的20株NDV分离株进行排谱试验,初步分析了不同毒株之间HN蛋白的抗原表位差异;并应用RT-PCR技术成功扩增了其HN基因整个编码区,经克隆、测序最终获得13株鸡源NDV与7株鹅源NDV HN基因的编码区序列,分析测定核苷酸序列及推导的氨基酸序列,并将鹅源NDV与鸡源NDV相应序列进行了比较。结果单抗排谱试验表明,20株NDV分离株之间HN蛋白的抗原表位存在差异;测序结果表明,测定的HN基因的编码区长度皆为1716nt编码571个氨基酸;分离株中18株基因VⅡ型NDV分离株之间HN基因编码区核苷酸序列具有较高的同源性,达94.8%～100%;与近几年国内流行的其它基因VⅡ型NDV之间的核苷酸序列同源性为92.1%～99.6%。对其推导的HN蛋白一级结构中潜在的糖基化位点及HN蛋白细胞受体结合相关区域的氨基酸序列等进行了比较分析。结果显示,单抗排谱差异显著株在部分氨基酸位点发生了突变;同时揭示我国部分地区同期流行的鹅源NDV与鸡源NDV HN基因之间具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 新城疫病毒 单克隆抗体 HN基因 序列分析
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新城疫病毒毒力分子机制研究进展 被引量：8
10
作者 于洋 封振 +2 位作者 何孔旺 仇旭升 丁铲 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期435-439,共5页
新城疫是由新城疫病毒引起的一种能够感染多种鸟类的烈性传染病,尤其对鸡、鹅等常见家禽具有高度的传染性和致死性。NDV属于副黏病毒科副黏病毒亚科禽腮腺炎病毒属,为囊膜包裹的、不分节段的、单股负链RNA病毒。NDV只有一个血清型,根据... 新城疫是由新城疫病毒引起的一种能够感染多种鸟类的烈性传染病,尤其对鸡、鹅等常见家禽具有高度的传染性和致死性。NDV属于副黏病毒科副黏病毒亚科禽腮腺炎病毒属,为囊膜包裹的、不分节段的、单股负链RNA病毒。NDV只有一个血清型,根据其长度分为Class I和ClassⅡ2大系谱。NDV基因组含有6个开放式阅读框,分别编码核衣壳蛋白、磷蛋白、基质蛋白、融合蛋白、血凝素-神经氨酸蛋白和大蛋白。此外,在P基因转录过程中,NDV通过RNA编辑机制编码额外的2种非结构蛋白质,即V和W。鉴于新城疫病毒的广泛传播性和高度的致死性,本文着重从NDV毒力的评价指标、NDV的侵入机制与毒力、NDV的复制与毒力、NDV免疫逃避机制与毒力、NDV非编码区基序与毒力5个方面来阐述,以期为深入研究不同毒株间的致病性差异以及进一步防控新城疫病毒奠定基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 毒力 侵入 复制 免疫逃避 非编码区
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两株不同宿主来源的基因VII型新城疫病毒的生物学特性比较及全基因组序列分析 被引量：8
11
作者 刘开春 孟春春 +7 位作者 陈素娟 仇旭升 李仕超 孙英杰 谭磊 宋翠萍 彭大新 丁铲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期89-92,共4页
为研究不同宿主来源的新城疫病毒(NDV)的生物特性及分子特征,本研究比较了两株(Ch/CH/SD/2008/128和Du/CH/SD/2009/134)同属ClassⅡ基因VII型的NDV分离株的生物学特性,并采用RT-PCR方法扩增及测定两株病毒的全基因组序列。结果显示,两... 为研究不同宿主来源的新城疫病毒(NDV)的生物特性及分子特征,本研究比较了两株(Ch/CH/SD/2008/128和Du/CH/SD/2009/134)同属ClassⅡ基因VII型的NDV分离株的生物学特性,并采用RT-PCR方法扩增及测定两株病毒的全基因组序列。结果显示,两株病毒对雏鸡具有相同的高致病性,但鸡源分离株Ch/CH/SD/2008/128对雏鸭致死率高达70%,而鸭源分离株Du/CH/SD/2009/134对雏鸭致死率仅为20%。全基因组序列比较分析显示:两株病毒的基因组长度均为15 192 nt,裂解位点为112RRQKQF117,属于典型的强毒特征,并且两者之间同源性超过96%。Ch/CH/SD/2008/128的F和HN蛋白中某些氨基酸位点与其他VII型病毒存在差异,这可能是导致该病毒对鸭具有高致病性的原因。结果表明两株不同宿主来源的ClassⅡ基因VII型NDV在遗传信息方面差异不大,但对鸭的致病力具有明显差异。 展开更多
关键词 新城疫病毒 全基因组序列 宿主 致病性
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不同NA亚型H5禽流感疫苗在鸭群的免疫效力及母源抗体对免疫效力的影响 被引量：7
12
作者 张评浒 唐应华 +6 位作者 刘晓文 薛锋 仇旭升 曹永忠 高崧 吴艳涛 刘秀梵 《中国家禽》 北大核心 2005年第20期8-11,共4页
研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等免疫剂量下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保... 研究以H5N2和H5N1两种油乳灭活疫苗免疫鸭群对高致病性禽流感H5N1AIV的攻毒保护效力进行了比较。结果表明,在同等免疫剂量下,从发病率、死亡率和泄殖腔排毒规律三项指标综合评价来看,H5N1疫苗免疫组对高致病性禽流感H5N1流行株攻毒的保护效率较H5N2免疫组理想,故针对高致病性禽流感H5N1流行的情况,宜采用H5N1禽流感疫苗。水禽禽流感母源抗体对灭活苗免疫具有一定的干扰作用。 展开更多
关键词 NA亚型H5禽流感 疫苗 鸭群 免疫效力 母源抗体 发病率 死亡率 泄殖腔排毒规律
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细胞自噬与病毒感染关系的研究进展 被引量：4
13
作者 孟春春 仇旭升 +2 位作者 张向乐 孙英杰 丁铲 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期950-954,共5页
细胞自噬（Autophagy）最早由Ashford和PoSen于1962年用电子显微镜在人的肝细胞中观察到并命名的一种自食（self-eating）现象，后续研究表明它是初级溶酶体处理内源性底物的重要过程，同时参与维持蛋白代谢平衡及细胞内环境的稳定，在... 细胞自噬（Autophagy）最早由Ashford和PoSen于1962年用电子显微镜在人的肝细胞中观察到并命名的一种自食（self-eating）现象，后续研究表明它是初级溶酶体处理内源性底物的重要过程，同时参与维持蛋白代谢平衡及细胞内环境的稳定，在清除细胞废物、能量再利用、 展开更多
关键词 肝细胞 病毒感染 自噬 电子显微镜 代谢平衡 内源性 溶酶体 细胞内
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新城疫病毒ClassⅠ强毒株HN单克隆抗体的研制及免疫学反应 被引量：5
14
作者 孙英杰 陈鸿军 +4 位作者 宋翠萍 于洋 仇旭升 于圣青 丁铲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期464-466,共3页
目的:制备抗新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒分离株9a5b的单克隆抗体。方法:以9a5b尿囊液为免疫原,接种6周龄BALB/c小鼠,以血凝抑制(HI)和间接免疫荧光(IFA)检测所获得的mAb。结果:成功制备获得NDV血凝素(HN)特异性mAb4株。免疫特性鉴定表明... 目的:制备抗新城疫病毒(NDV)ClassⅠ强毒分离株9a5b的单克隆抗体。方法:以9a5b尿囊液为免疫原,接种6周龄BALB/c小鼠,以血凝抑制(HI)和间接免疫荧光(IFA)检测所获得的mAb。结果:成功制备获得NDV血凝素(HN)特异性mAb4株。免疫特性鉴定表明:在这4株mAb中,3H7和3H9株仅具有IFA和HI效价,且呈现ClassI毒株特异性。结论:该抗体材料为NDVClassⅠ和Ⅱ毒株的血清学鉴定提供极大的便利工具,并为NDVHN功能及受体学研究奠定了基础。 展开更多
关键词 新城疫病毒 ClassⅠ 强毒株 HN 单克隆抗体
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滑液支原体灭活疫苗体外诱导T淋巴细胞增殖及免疫保护研究 被引量：7
15
作者 陆凤 谭磊 +9 位作者 王欣 包世俊 任峰 张凡庆 刘芳 仇旭升 宋翠萍 孙英杰 伏小平 丁铲 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期944-949,共6页
滑液支原体感染是由滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的鸡和火鸡的一种急性或慢性传染病。为控制滑液支原体感染,本研究利用MS WVU1853株辅以Montanide ISA 206 VG佐剂制备了灭活疫苗,研究发现MS灭活疫苗在体外能够激活鸡骨髓来... 滑液支原体感染是由滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)引起的鸡和火鸡的一种急性或慢性传染病。为控制滑液支原体感染,本研究利用MS WVU1853株辅以Montanide ISA 206 VG佐剂制备了灭活疫苗,研究发现MS灭活疫苗在体外能够激活鸡骨髓来源的树突状细胞(dendritic cell,DCs),DCs能够摄取MS灭活疫苗抗原提呈给T淋巴细胞并刺激T细胞增殖,利用流式细胞术方法检测增殖的T淋巴细胞亚群,CD4+T细胞增殖比率高于CD8+T细胞。SPF鸡免疫高剂量(1010cfu·m L-1)MS灭活疫苗后IFN-γ表达量显著高于对照组(P<0.05),CD4+T细胞主要向Th1类细胞分化并分泌IFN-γ促进CTL细胞发挥杀伤作用,证明灭活MS疫苗能够有效激发免疫鸡群的细胞免疫反应。利用MS灭活疫苗免疫7日龄SPF鸡,单次免疫可以对MS攻毒产生完全保护,另外对疫苗安全性进行检验显示疫苗安全性良好,对鸡安全有效。 展开更多
关键词 滑液支原体 灭活疫苗 树突状细胞 细胞免疫 免疫保护
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三种重组鸡痘病毒联合与单独免疫效力比较 被引量：5
16
作者 刘武杰 仇旭升 +4 位作者 马怀良 孙蕾 陈素娟 彭大新 刘秀梵 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期538-541,共4页
目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免... 目的:利用针对不同病原的重组鸡痘病毒(rFPV)在鸡群进行间隔性的多次免疫时,后期免疫会受到前期免疫所诱生的载体特异性免疫反应的干扰,并导致其免疫效力下降。将这些rFPVs进行联合免疫或许是解决此问题的一种策略。为验证rFPVs联合免疫的可行性,研究中将三种针对不同病原的rFPVs以联合或单独的方式分别进行免疫,并对它们的免疫效力进行比较。方法:rFPV-12LSH9A、rFPV-12LSH5NA及rFPV-12LSHN为分别表达H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、H5亚型AIV的HA和NA基因及新城疫病毒(NDV)HN基因的三种rFPVs。将这三种rFPVs分别在SPF鸡和带有针对H9、H5亚型AIV及NDV三种病原母源抗体的商品鸡上进行联合或单独免疫。结果:这三株rFPVs在SPF鸡上进行联合免疫时,所诱生的体液免疫应答受到了一定程度的抑制;个别成员株的排毒及死亡保护也受到了显著的干扰。结论:在进行rFPVs联合免疫时,有必要对各成员株rFPV的免疫效力进行比较分析,以确定其可行性。 展开更多
关键词 重组鸡痘病毒 联合免疫 H5亚型禽流感病毒 H9亚型禽流感病毒 新城疫病毒
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六株鸽源新城疫病毒的分离、鉴定及生物信息学分析 被引量：12
17
作者 李仕超 仇旭升 +8 位作者 刘开春 周锦萍 刘健 鞠厚斌 谭磊 孙英杰 宋翠萍 刘佩红 丁铲 《中国动物传染病学报》 CAS 2014年第5期1-9,共9页
新城疫是严重危害世界养禽业的一种禽类传染病。近年来,鸽新城疫的流行越来越严重,引起了养殖户和兽医工作者的广泛关注。本研究在4批发病鸽组织病料中分离到了4株鸽源新城疫强毒株和2株鸽源弱毒株。病毒分离株经鸡胚有限稀释法纯化5次... 新城疫是严重危害世界养禽业的一种禽类传染病。近年来,鸽新城疫的流行越来越严重,引起了养殖户和兽医工作者的广泛关注。本研究在4批发病鸽组织病料中分离到了4株鸽源新城疫强毒株和2株鸽源弱毒株。病毒分离株经鸡胚有限稀释法纯化5次后,新鲜尿囊液用于提取病毒RNA。经RT-PCR扩增、测序得到分离株的F基因和HN基因序列。通过对F基因的遗传进化分析发现,4株鸽源强毒株属于ClassⅡ基因Ⅵb亚型,2株鸽源弱毒株与Class II基因II型疫苗株La Sota高度同源。进一步遗传进化分析结果显示,4株鸽源新城疫病毒强毒株与目前国内流行株属于同一遗传分支,这些毒株与欧洲流行株亲缘关系十分相近,而与中国20世纪90年代鸽源分离株遗传距离稍远,因此推测当前鸽源流行强毒株可能源自欧洲。生物信息学分析显示鸽源毒株HN蛋白345~353位的一个线性抗原表位发生了改变,而血清学实验显示La Sota疫苗株和鸽源毒株的交叉血凝抑制存在明显差异,暗示鸽源毒株已经发生了抗原性变异。因此,使用鸡疫苗株La Sota免疫鸽存在免疫失败的风险,需要研发鸽专用新城疫病毒疫苗用于鸽新城疫的防疫工作。 展开更多
关键词 新城疫病毒 鸽源 基因型Ⅵb亚型 F基因 HN基因
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原子力显微镜在PLD法制备ZnO薄膜表征中的应用 被引量：4
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作者 李丽丽 梁齐 +3 位作者 仇旭升 汪壮兵 宣晓峰 于永强 《发光学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期63-68,共6页
利用脉冲激光沉积(PLD)法在氧压为16Pa、衬底温度为400～700℃时,在单晶Si(100)衬底上制备ZnO薄膜,并通过原子力显微镜(AFM)、X射线衍射(XRD)谱和光致发光谱对制得的薄膜样品进行表面形貌、结构特性和发光性质研究。其中通过原子力显微... 利用脉冲激光沉积(PLD)法在氧压为16Pa、衬底温度为400～700℃时,在单晶Si(100)衬底上制备ZnO薄膜,并通过原子力显微镜(AFM)、X射线衍射(XRD)谱和光致发光谱对制得的薄膜样品进行表面形貌、结构特性和发光性质研究。其中通过原子力显微镜对样品的二维、三维以及剖面线图进行了分析。结果表明衬底温度700℃时得到的薄膜样品表面较均匀致密,晶粒生长较充分,结晶质量较高,相对发光强度高。控制氧压为5.7Pa,在衬底温度为600℃,沉积时间分别为10,20,45min制备ZnO薄膜样品;利用原子力显微镜对样品进行表面形貌观察,得知只有沉积时间足够长才能使薄膜表面晶粒充分生长。 展开更多
关键词 ZNO薄膜 脉冲激光沉积 原子力显微镜 X射线衍射 光致发光
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ClassⅠ新城疫病毒概述 被引量：8
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作者 金仕强 孟春春 +3 位作者 仇旭升 于圣青 丁铲 左之才 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2012年第4期102-106,共5页
新城疫病毒是影响养禽业健康发展的主要病原之一。新城疫病毒只有一个血清型,但根据亲源关系可以划分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类。ClassⅠ新城疫病毒于2006年被证实存在,当前可被细分为9个基因型(1～9)。ClassⅠ所有自然分离株均为无毒... 新城疫病毒是影响养禽业健康发展的主要病原之一。新城疫病毒只有一个血清型,但根据亲源关系可以划分为ClassⅠ和ClassⅡ两大类。ClassⅠ新城疫病毒于2006年被证实存在,当前可被细分为9个基因型(1～9)。ClassⅠ所有自然分离株均为无毒株或弱毒株,但有经人工传代返强的报道,由于其分布广泛,数量庞大,对养禽业有巨大的潜在威胁。为了更好的了解ClassⅠ新城疫毒株的生物学特性,为研究ClassⅠ新城疫病毒提供参考,现将其基因组结构、分子流行病学及检测方法等综述如下。 展开更多
关键词 ClassⅠ新城疫病毒 基因型 分子流行病学
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新城疫病毒M蛋白通过自身核定位信号介导进入宿主细胞核 被引量：4
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作者 段云兵 汪军卿 +3 位作者 仇旭升 谭磊 丁铲 张源淑 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期105-110,共6页
通过生物信息学方法预测了新城疫病毒(NDV)基质蛋白(M)的细胞核定位信号(NLS),用Overlap-PCR方法缺失NLS基因,分别构建M和M-ΔNLS EGFP重组质粒,转染单层鸡胚成纤维细胞(DF-1),激光共聚焦观察了M蛋白亚细胞定位。结果表明:M蛋白能进入... 通过生物信息学方法预测了新城疫病毒(NDV)基质蛋白(M)的细胞核定位信号(NLS),用Overlap-PCR方法缺失NLS基因,分别构建M和M-ΔNLS EGFP重组质粒,转染单层鸡胚成纤维细胞(DF-1),激光共聚焦观察了M蛋白亚细胞定位。结果表明:M蛋白能进入宿主细胞核中,缺失NLS基因序列之后M蛋白只分布于细胞质中。结论:新城疫病毒M蛋白可以通过其核定位信号进入宿主细胞核。 展开更多
关键词 新城疫病毒 M蛋白 亚细胞定位 核定位信号
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