山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究 被引量：1

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作者 姜蕾蕾 冯佳宝 +5 位作者 刘颖 金辰蓉 刘美辰 王思明 赵大庆 于士婷 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第11期307-315,共9页

探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机... 探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P<0.01),改善细胞凋亡形态,并显著升高SOD和CAT的活力(P<0.05或P<0.01)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax)的比值、血管形成能力、NO分泌量。此外,山药总蛋白还显著降低了HUVECs的ROS、MDA、8-OHdG、IL-1β和IL-6的水平(P<0.05或P<0.01)及炎症相关蛋白(Txnip、NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β)的表达水平(P<0.05或P<0.01),并且上述指标的变化均呈现明显的浓度依赖性。本研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。 展开更多

关键词 山药总蛋白 人脐静脉内皮细胞 氧化应激 炎症反应 Txnip/NLRP3 信号通路

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五仁丸加减方对高脂饲料诱导小鼠肥胖的预防作用

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作者 王继岚 倪伟锋 +3 位作者 白竹林 尹翌秋 王思明 于士婷 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1343-1346,共4页

目的 探讨五仁丸加减方对高脂饲料诱导小鼠肥胖的预防作用。方法 将60只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阳性组(27.3 mg/kg奥利司他)和五仁丸加减方低、中、高剂量组(0.75、1.50、2.25 g/kg),每组10只,给予60%纯化的高脂饲料造模,同... 目的 探讨五仁丸加减方对高脂饲料诱导小鼠肥胖的预防作用。方法 将60只昆明小鼠随机分为对照组、模型组、阳性组(27.3 mg/kg奥利司他)和五仁丸加减方低、中、高剂量组(0.75、1.50、2.25 g/kg),每组10只,给予60%纯化的高脂饲料造模,同时分别灌胃给予相应药物,连续60 d。记录小鼠体质量、腰围和进食量,CT扫描内脏脂肪和总脂肪蓄积程度,记录肾周脂肪和附睾脂肪含量,检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,观察肾周脂肪和附睾脂肪病理学变化。结果 与模型组比较,五仁丸加减方组小鼠体质量和腰围降低(P<0.01),但不影响进食量(P>0.05);内脏脂肪、总脂肪蓄积程度及肾周脂肪、附睾脂肪含量降低(P<0.05,P<0.01);血清TC、TG、LDL-C水平降低(P<0.05,P<0.01),HDL-C水平升高(P<0.05,P<0.01);脂肪细胞体积和形态得到改善。结论 五仁丸加减方可通过促进肥胖小鼠脂肪消耗来发挥对肥胖的预防作用。 展开更多

关键词 五仁丸加减方 肥胖 脂肪蓄积 脂肪消耗

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响应面法优化枸杞水溶性蛋白提取工艺 被引量：11

3

作者 于士婷 尹翌秋 +4 位作者 孙天霞 张丽轩 王敏 赵大庆 王思明 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2017年第9期-,共6页

通过响应面法(RSM)确定枸杞水溶性蛋白最佳提取工艺。以枸杞蛋白提取率为指标,通过单因素试验考察各个影响因素对枸杞蛋白提取率的影响程度。在此基础上,应用响应面分析法(RSM)优化提取供工艺条件,确定最佳提取工艺。依据design expert8... 通过响应面法(RSM)确定枸杞水溶性蛋白最佳提取工艺。以枸杞蛋白提取率为指标,通过单因素试验考察各个影响因素对枸杞蛋白提取率的影响程度。在此基础上,应用响应面分析法(RSM)优化提取供工艺条件,确定最佳提取工艺。依据design expert8.0.6试验软件回归分析确定提取时间对枸杞水溶性蛋白提取率影响较大,分析得出枸杞水溶性蛋白提取的最佳工艺参数为p H8.60,液料比18.83∶1(m L/g),提取时间9.79 h。此条件下枸杞水溶性蛋白理论提取率7.82%。但考虑到此参数给实际操作带来了诸多不便,故把枸杞水溶性蛋白的提取最佳工艺条件修正为p H9.0,提取时间10 h,液料比20∶1(m L/g)。对修正参数进行3次重复验证试验得枸杞水溶性蛋白的实际提取率为7.69%,与预测值接近。 展开更多

关键词 枸杞 枸杞水溶性蛋白 提取 响应面法

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HPLC法同时测定脑塞通蜜丸中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量 被引量：2

4

作者 白雪媛 边帅 +3 位作者 于士婷 张巍 赵大庆 赵雨 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期555-557,共3页

目的建立脑塞通蜜丸含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定。色谱柱:Zorbax ODX(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脱;检测波长:280 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min^(-1)。结果黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素... 目的建立脑塞通蜜丸含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法测定。色谱柱:Zorbax ODX(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%磷酸,梯度洗脱;检测波长:280 nm;柱温:30℃;流速:1.0 m L·min^(-1)。结果黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的线性范围分别是0.201~1.206μg(r=0.9997)、0.045~0.27μg(r=0.9995)、0.03~0.18μg(r=0.9993)。黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的平均加样回收率分别是97.85%(RSD=1.94%)、98.78%(RSD=2.09%)、98.63%(RSD=1.97%)。结论该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于脑塞通蜜丸的质量控制。 展开更多

关键词 脑塞通蜜丸 高效液相色谱法 黄芩苷 黄芩素 汉黄芩素

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HPLC法测定利心丸中毛蕊花糖苷的含量 被引量：4

5

作者 于士婷 赵大庆 +2 位作者 李修刚 白雪媛 赵雨 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第33期4728-4732,共5页

目的：建立测定利心丸中毛蕊花糖苷含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX SB-Aq,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：毛蕊花糖苷检测进样... 目的：建立测定利心丸中毛蕊花糖苷含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX SB-Aq,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：毛蕊花糖苷检测进样量线性范围为0.254 4-1.526 4μg（r=0.999 7）;定量限为1.358 6μg/ml,检测限为0.407 6μg/ml;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2%;加样回收率为95.06%-97.31%（RSD=1.05%,n=6）。结论：该方法操作简便、结果准确,适用于测定利心丸中毛蕊花糖苷的含量。 展开更多

关键词 利心丸 毛蕊花糖苷 高效液相色谱法 含量测定

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脑塞通丸中黄芩苷高效液相色谱检测方法的建立及其评价 被引量：2

6

作者 边帅 于士婷 +2 位作者 白雪媛 赵大庆 赵雨 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1891-1893,共3页

目的 建立脑塞通丸含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定。色谱柱：SHIMADZU-GL Wonda Cract ODS-2,5μm,4.6mm×250mm,流动相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）,检测波长：280nm,柱温：30℃,流速：1.0ml·min-1。结果 黄芩... 目的 建立脑塞通丸含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定。色谱柱：SHIMADZU-GL Wonda Cract ODS-2,5μm,4.6mm×250mm,流动相：甲醇-水-磷酸（47∶53∶0.2）,检测波长：280nm,柱温：30℃,流速：1.0ml·min-1。结果 黄芩苷的线性范围是0.200~1.000μg（r=0.9998）,平均加样回收率是97.44%（RSD=1.57%）。结论 该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于脑塞通丸的质量控制。 展开更多

关键词 脑塞通丸 高效液相色谱 黄芩苷

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HPLC法测定脑塞通蜜丸中毛蕊花糖苷的含量 被引量：1

7

作者 边帅 于士婷 +3 位作者 白雪媛 赵大庆 赵雨 王丽丽 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第21期2993-2995,共3页

目的：建立脑塞通蜜丸中毛蕊花糖苷含量测定的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorbax ODX,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：毛蕊花糖苷检测进... 目的：建立脑塞通蜜丸中毛蕊花糖苷含量测定的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorbax ODX,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（16∶84,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为334 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果：毛蕊花糖苷检测进样量线性范围为0.200～1.000μg（r=0.999 8）;精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈1%;加样回收率为95.16%～99.78%,RSD=1.80（n=6）。结论：该方法操作简便、结果准确,适用于脑塞通蜜丸中毛蕊花糖苷的含量测定。 展开更多

关键词 脑塞通蜜丸 毛蕊花糖苷 高效液相色谱法

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利心丸中粉防己碱HPLC检测方法的建立及其评价 被引量：5

8

作者 于士婷 赵大庆 +1 位作者 尹翌秋 白雪媛 《长春中医药大学学报》 2017年第4期538-540,共3页

目的建立利心丸中粉防己碱含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定。色谱柱:安捷伦,ZORBAX SB-Aq(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相:甲醇-乙腈-水-二乙胺(60:20:20:0.08),检测波长:282 nm,柱温:25℃,流速:1.0 m L/min。结果粉防己碱... 目的建立利心丸中粉防己碱含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定。色谱柱:安捷伦,ZORBAX SB-Aq(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相:甲醇-乙腈-水-二乙胺(60:20:20:0.08),检测波长:282 nm,柱温:25℃,流速:1.0 m L/min。结果粉防己碱的线性范围为0.309 6~1.857 6μg(r=0.999 8),平均加样回收率为98.3%(RSD=1.42%)。结论该方法操作简便易行,专属性强,准确可靠,可用于利心丸的质量控制。 展开更多

关键词 利心丸 粉防己碱 反相高效液相色谱法

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基于转录组测序技术分析山药蛋白防治糖尿病性勃起功能障碍的作用机制 被引量：6

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作者 邢欣 赵大庆 +3 位作者 王思明 于士婷 李懿轩 刘美辰 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第23期2859-2868,共10页

目的:研究山药蛋白(DOT)防治糖尿病性勃起功能障碍(DIED)的潜在作用机制。方法:采用高糖高脂饲料+腹腔注射链脲佐菌素(40 mg/kg)的方法复制DIED大鼠模型。实验设置正常对照组(生理盐水),模型组(生理盐水),DOT低、中、高剂量组(0.3、0.6... 目的:研究山药蛋白(DOT)防治糖尿病性勃起功能障碍(DIED)的潜在作用机制。方法:采用高糖高脂饲料+腹腔注射链脲佐菌素(40 mg/kg)的方法复制DIED大鼠模型。实验设置正常对照组(生理盐水),模型组(生理盐水),DOT低、中、高剂量组(0.3、0.6、0.9 mg/kg)和西地那非组(阳性对照,4.4 mg/kg),每组9只大鼠。在糖尿病模型已建立成功、开始诱导DIED发生的阶段,各组大鼠开始灌胃相应溶液,每天1次,连续11周。测定大鼠体质量、空腹血糖(FPG)值、勃起次数、勃起率、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IR)以及阴茎海绵体组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、环磷酸鸟苷(cGMP)含量,以评价DOT对DIED模型大鼠的干预作用。选择30 mmol/L葡萄糖诱导48 h建立高糖损伤小鼠海绵体内皮细胞(MCECs)模型,并给予125、250、500μg/mL DOT进行干预,然后检测细胞活力,以评价DOT对高糖损伤MCECs的影响。继而采用转录组测序技术分别筛选正常MCECs与高糖损伤MCECs、高糖损伤MCECs与250μg/mL DOT处理的MCECs中的差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;分析两组细胞间共同的差异表达基因,并选择6个关键基因在mRNA水平上进行验证。结果:不同剂量DOT对DIED模型大鼠体质量降低、FINS和IR升高、勃起次数减少、勃起率降低以及阴茎海绵体组织中eNOS、cGMP含量降低均有不同程度的逆转作用,其中高剂量DOT作用后DIED模型大鼠的上述指标变化均被显著逆转(P<0.05或P<0.01)。125、250、500μg/mL DOT均可显著提高高糖损伤MCECs的活力(P<0.05或P<0.01)。转录组测序结果表明,与正常MCECs比较,高糖损伤MCECs中共有48个差异表达基因;与高糖损伤MCECs比较,DOT处理的MCECs中共有779个差异表达基因;两组差异表达基因在生物学过程注释中均以细胞过程为主、在细胞组分注释中均以细胞部分为主、在分子功能注释中均以绑定分子功能为主,并主要富集在细胞外基质受体相互作用通路、错配修复通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路等。在两组差异表达基因中,共得到Aldh1a1、Abcc5、Tac1等13个共同的差异表达基因,DOT均可显著回调高糖损伤MCECs中上述共同差异表达基因的表达。经验证,DOT可以显著逆转高糖损伤MCECs中关键基因TGF-β3、Txnip、Aldh1a1、Loxl1、Mt1、Mt2的mRNA表达。结论:DOT对DIED模型大鼠的症状具有改善作用;其作用机制可能与抑制纤维化、降低氧化应激等生物学途径,从而改善海绵体内皮功能有关。 展开更多

关键词 山药蛋白 糖尿病性勃起功能障碍 转录组测序技术 纤维化 氧化应激 差异表达基因

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基于转录组测序分析人参皂苷Rh2抗宫颈癌的潜在作用机制 被引量：2

10

作者 井月 刘颖 +3 位作者 于士婷 王思明 刘美辰 谢占玲 《现代中药研究与实践》 CAS 2023年第1期44-48,共5页

目的研究人参皂苷Rh2抗宫颈癌潜在作用机制。方法采用CCK-8法检测人参皂苷Rh2处理后的细胞活力。采用转录组测序技术检测对照组及人参皂苷Rh2处理组样本生物学重复的有效性、筛选差异表达基因、探寻人参皂苷Rh2抗宫颈癌相关的靶基因和... 目的研究人参皂苷Rh2抗宫颈癌潜在作用机制。方法采用CCK-8法检测人参皂苷Rh2处理后的细胞活力。采用转录组测序技术检测对照组及人参皂苷Rh2处理组样本生物学重复的有效性、筛选差异表达基因、探寻人参皂苷Rh2抗宫颈癌相关的靶基因和信号通路。qPCR验证转录组数据可靠性。采用分光光度法检测Caspase 1/4酶活性。通过TUNEL染色检测人参皂苷Rh2诱导宫颈癌细胞死亡的形式。结果人参皂苷Rh2的IC_(50)值为45μmol/L。各组测序样本生物学重复相似度高。GO和KEGG分析结果揭示人参皂苷Rh2主要参与免疫系统进程、细胞增殖、转录调节活性等功能以及细胞焦亡相关NOD样受体信号通路。qPCR验证显示细胞焦亡相关差异表达基因的表达趋势与转录组数据一致。人参皂苷Rh2干预后HeLa细胞的Caspase 1/4酶活性增加,细胞焦亡水平明显升高。结论人参皂苷Rh2可能通过激活NOD样受体信号通路中的GSDMD、Caspase 1、Caspase 4、NLRP3、IL-1β基因表达诱导细胞焦亡发挥抗宫颈癌作用。 展开更多

关键词 宫颈癌 人参皂苷RH2 转录组测序 细胞焦亡

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三七蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞黑色素的抑制作用及机制研究

11

作者 刘那 王思明 +1 位作者 白雪媛 于士婷 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2024年第19期2236-2242,共7页

目的:探讨三七蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞黑色素的抑制作用及机制。方法:采用硫酸铵沉淀法提取三七蛋白,氨基酸自动分析仪测定三七蛋白氨基酸组成。采用NaOH裂解法测定三七蛋白不同质量浓度(0.125、0.25、0.5 mg·mL–1)作用下B16... 目的:探讨三七蛋白对小鼠黑色素瘤B16细胞黑色素的抑制作用及机制。方法:采用硫酸铵沉淀法提取三七蛋白,氨基酸自动分析仪测定三七蛋白氨基酸组成。采用NaOH裂解法测定三七蛋白不同质量浓度(0.125、0.25、0.5 mg·mL–1)作用下B16细胞内黑色素含量,CCK8法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测线粒体膜电位及细胞凋亡,多巴氧化法测定细胞内酪氨酸酶(tyrosinase,Tyr)活性,同时采用体外抑制Tyr活性试验观察对Tyr活性的影响,Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、Tyr以及Tyr相关蛋白1(Tyr-related protein 1,TRP-1)表达变化。结果:与对照组相比,三七蛋白显著降低B16细胞内黑色素含量,抑制细胞增殖,提高细胞凋亡率,降低线粒体膜电位,上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达及Bcl-2/Bax表达比值;此外,三七蛋白显著抑制B16细胞内及体外Tyr活性,显著下调p-MIFP/MITF、Tyr及TRP-1蛋白表达。结论:三七蛋白对B16细胞黑色素生成具有抑制作用,且可能与诱导细胞凋亡、降低Tyr活性相关。 展开更多

关键词 三七蛋白 B16细胞 黑色素 细胞凋亡 酪氨酸酶

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PI3K/Akt/eNOS通路介导山药蛋白对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍的改善作用 被引量：5

12

作者 李懿轩 赵大庆 +2 位作者 王思明 刘美辰 于士婷 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2022年第24期2607-2611,共5页

目的:探讨山药蛋白(DP1)对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的改善作用及机制。方法:建立氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠模型,分成对照组、模型组、DP1低剂量组(0.6 mg·kg-1)、DP1高剂量组(0.9 mg·kg-1)。... 目的:探讨山药蛋白(DP1)对肾阳虚大鼠阴茎勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)的改善作用及机制。方法:建立氢化可的松诱导的肾阳虚大鼠模型,分成对照组、模型组、DP1低剂量组(0.6 mg·kg-1)、DP1高剂量组(0.9 mg·kg-1)。检测大鼠体质量变化;采用ELISA法检测促性腺激素释放激素(GnRH)、促黄体生成素(LH)和睾酮(T)含量;通过皮下注射阿扑吗啡测定大鼠阴茎勃起次数和勃起率;以苏木素-伊红染色观察阴茎海绵体组织形态;采用Western blot检测勃起关键信号通路蛋白表达水平、ELISA测定一氧化氮(NO)和环磷酸鸟苷(cGMP)含量,探索DP1改善肾阳虚大鼠ED的机制。结果:与模型组相比,DP1组大鼠体质量显著增加;GnRH、LH和T含量升高;阴茎勃起次数及勃起率显著提高;海绵体组织形态完整性恢复。DP1的干预能够增加磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)以及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白磷酸化水平,显著提高NO和cGMP含量。结论:DP1能够改善肾阳虚大鼠ED,且与激活PI3K/Akt/eNOS信号通路相关。 展开更多

关键词 肾阳虚 勃起功能障碍 山药蛋白 PI3K/Akt/eNOS

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