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LC-MS/MS测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体浓度及其药代动力学研究 被引量:3
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作者 丁士雯 马红霞 +5 位作者 李娴 刘运龙 陈知航 单成启 程远国 陈俐娟 《生物技术通讯》 CAS 2015年第6期809-814,共6页
目的:建立测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体的高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法,并进行荷瘤裸鼠体内药代动力学研究。方法:采用YMC C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相B为0.025%氨水乙腈,A为0.025%氨水,在线脱气,流... 目的:建立测定荷瘤裸鼠血浆中和厚朴酚脂质体的高效液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法,并进行荷瘤裸鼠体内药代动力学研究。方法:采用YMC C18(100 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,流动相B为0.025%氨水乙腈,A为0.025%氨水,在线脱气,流速0.8 m L/min。梯度洗脱:0~2 min,B相85%~85%;2~4 min,B相85%~10%;4~6 min,B相10%~85%;6~8 min,B相85%~85%,柱温40℃。进样量10μL。质谱条件:离子源电喷雾电离源(ESI),负离子电离模式,扫描方式多级反应监测(MRM),监测离子对m/z和厚朴酚(265.0→223.0)和内标(253.0→225.0)。结果:血浆中无干扰测定的内源性物质,每个样品的分析时间为8 min;和厚朴酚在0.500~1000 ng/m L呈良好的线性关系,定量下限为0.500 ng/m L,日内、日间精密度RSD均小于15%,低、中、高3种浓度的提取回收率〉64.71%。稳定性实验中,在各种贮存条件下血浆中和厚朴酚均较稳定。结论:本方法操作简便,特异性强,灵敏度高,可用于和厚朴酚脂质体的药代动力学研究,以期为临床应用提供参考。 展开更多
关键词 和厚朴酚脂质体 液质联用 梯度洗脱 药代动力学
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家蝇幼虫抗菌蛋白基因AS566在毕赤酵母中的表达及产物抑菌活性检测
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作者 闫恕 李文婷 +6 位作者 丁士雯 袁野 唐艳 孔令聪 裴志花 刘树明 马红霞 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期344-347,共4页
为采用巴斯德毕赤酵母系统表达家蝇幼虫抗菌蛋白AS566基因,并对其抑菌活性进行初步确证。以分子克隆法构建重组表达质粒pGAPZαA-AS566,将其线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,在GAP启动子调控下,于30℃诱导表达,SDS-PAGE检测... 为采用巴斯德毕赤酵母系统表达家蝇幼虫抗菌蛋白AS566基因,并对其抑菌活性进行初步确证。以分子克隆法构建重组表达质粒pGAPZαA-AS566,将其线性化后电击转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,在GAP启动子调控下,于30℃诱导表达,SDS-PAGE检测结果显示表达产物的分子质量约为43.5 ku,与预期结果一致。采用管碟法对表达产物的抑菌活性进行检测,结果显示该表达产物对鸡源沙门菌和猪源金黄色葡萄球菌的生长具有抑制作用。本研究为进一步研究家蝇幼虫抗菌蛋白的抑菌机制奠定了基础。 展开更多
关键词 家蝇抗菌蛋白(AS566) 毕赤酵母 真核表达 抑菌活性
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